Val-cit-PAB-OH_HNMR_18846_MedChemExpress

17-丙烯胺基-17-去甲氧基格尔德霉素对鼻咽癌细胞VEGF和Survivin表达的影响刘涛【摘要】目的探讨17-丙烯胺基-17-去甲氧基格尔德霉素(17-AAG)对人鼻咽癌细胞(HNE1)的影响.方法采用流式细胞技术检测不同浓度(17-AAG)、不同时间处理后HNE1细胞凋亡情况,组织免疫细胞技术检测药物处理后对VEGF、Survivin蛋白表达的影响.结果 17-AAG可以诱导人鼻咽癌细胞的凋亡,且这种作用具有时间和计量依赖性,且可抑制细胞中VEGF、Survivin蛋白的表达.结论热休克蛋白抑制剂17-AAG 具有诱导鼻咽癌细胞凋亡的作用,对鼻咽癌的临床治疗具有一定的指导意义.【期刊名称】《延安大学学报（医学科学版）》【年(卷),期】2011(009)001【总页数】3页(P1-2,18)【关键词】17-丙烯胺基-17-去甲氧基格尔德霉素(17-AAG);鼻咽癌细胞;VEGF;Survivin【作者】刘涛【作者单位】延安大学附属医院耳鼻咽喉科,陕西,延安,716000【正文语种】中文【中图分类】R739.6热休克蛋白（Heat shock protein，HSP）是在热诱导下合成的具有高度保守性质的一组蛋白质，其中HSP90β是热休克蛋白家族中的重要成员，具有重要的生理功能［1］。

研究表明HSP90β作为抗原肽的载体参与了MHCI类抗原的递呈，在肿瘤免疫中具有重要作用［2］，且与肿瘤的分化程度有关，已成为抗肿瘤治疗研究的靶点。

我们前期的研究发现鼻咽癌组织中HSP90β阳性率高于鼻咽部正常组织，而且其表达强度与肿瘤分化程度相关，分化程度越低，HSP90β表达越强；HSP90β阴性表达者其5年生存率明显高于阳性者。

目前对于热休克蛋白抑制剂在抗肿瘤研究方面已有不少的报道［3－4］，17－丙烯胺基－17－去甲氧基格尔德霉素（17－allylamino－17－demethoxygeldanamyein，17－AAG）是目前进入临床前研究的热休克蛋白抑制剂，具有较好的应用前景，本研究探讨其对人鼻咽癌细胞株影响，以探讨17－AAG在鼻咽癌治疗中的应用。

24.755 23.917 23.654 23.565 23.333 23.194 22.929 22.864 22.864 22.864 22.490 22.345 22.333 21.757 21.543 21.543 20.833 20.761 20.614 19.966 19.795 19.547 19.352 18.571 18.571 18.038 17.983 17.983 17.949 17.689 17.689 17.689 17.436 17.313 17.215 16.417 16.238 16.179 16.008 16.008 15.766 15.575 15.518 15.389 15.389 15.389 15.333 15.333 15.280 15.280 15.265 15.253 15.251 15.202
ONCOLOGY CLINICAL NEUROLOGY PLANT SCIENCES BIOCHEMICAL RESEARCH METHODS ASTRONOMY & ASTROPHYSICS MATERIALS SCIENCE, MULTIDISCIPLINARY PHYSICS, MULTIDISCIPLINARY BIOCHEMISTRY & MOLECULAR BIOLOGY CELL BIOLOGY MEDICINE, RESEARCH & EXPERIMENTAL MICROBIOLOGY PHARMACOLOGY & PHARMACY PHYSICS, PARTICLES & FIELDS CHEMISTRY, MULTIDISCIPLINARY PHARMACOLOGY & PHARMACY TOXICOLOGY CHEMISTRY, MULTIDISCIPLINARY CELL BIOLOGY NEUROSCIENCES INFECTIOUS DISEASES IMMUNOLOGY PHYSIOLOGY PHYSICS, MULTIDISCIPLINARY BEHAVIORAL SCIENCES NEUROSCIENCES ONCOLOGY CELL BIOLOGY DEVELOPMENTAL BIOLOGY ECOLOGY CHEMISTRY, MULTIDISCIPLINARY MAபைடு நூலகம்ERIALS SCIENCE, MULTIDISCIPLINARY NANOSCIENCE & NANOTECHNOLOGY GENETICS & HEREDITY MICROBIOLOGY MEDICINE, GENERAL & INTERNAL MICROBIOLOGY ASTRONOMY & ASTROPHYSICS MATERIALS SCIENCE, MULTIDISCIPLINARY BEHAVIORAL SCIENCES NEUROSCIENCES NEUROSCIENCES PSYCHOLOGY CLINICAL NEUROLOGY ECOLOGY EVOLUTIONARY BIOLOGY GENETICS & HEREDITY CHEMISTRY, PHYSICAL PHYSICS, CONDENSED MATTER BIOCHEMISTRY & MOLECULAR BIOLOGY CELL BIOLOGY PSYCHOLOGY MEDICINE, GENERAL & INTERNAL NEUROSCIENCES CARDIAC & CARDIOVASCULAR SYSTEMS

January 2021Vol.41 No.12021 年 1 月 第 41 卷 第 1 期基础医学与临床Basic & Clinical Medicine文章编号：1001-6325 ( 2021 ) 01-0087-06研究论文大动脉炎患者外周血单个核细胞RT-qPCR 内参基因的选择田苡箫，李菁*收稿日期：2019-11-18 修回日期：2020-04-30*通信作者(corresponding author ) ：lijing6515@ （中国医学科学院北京协和医学院北京协和医院风湿免疫科风湿免疫病学教育部重点实验室国家皮肤与免疫疾病临床医学研究中心，北京100032）扌摘要：目的筛选适于在大动脉炎（TAK ）患者和健康人群（HC ）之间比较外周血单个核细胞（PBMC ）中mRNA 表达水平的内参基因。

方法提取PBMC 中的总RNA,应用RT-qPCR ，分别采用geNorm 、NormFinder 、BestKeeper 3种软 件程序，分析 3-glucuronidase ,GAPDH ,ACTB ,SDHA ,HPRT1,RPL13A ,B2M , YWHAZ 和 PKG1 9 个基因的 mRNA 表达稳定性。

以T-bet 、GATA3和RORC 作为目的基因，比较不同稳定性的内参基因对mRNA 相对丰度的影响。

结果geNorm 筛选得到的基因组合为B 2M-SDHA , Nor^nFinder 和BestKeeper 筛选出最稳定的内参基因均为HPRT1 ； 3种方法均显示GAPDH 的稳定性较差。

结论自身免疫病患者在接受免疫抑制药物治疗时,原本稳定表达的基因可能会 上调或下调;在样本量较小时，稳定性更好的内参基因可能更有助于检测组间差异。

关键词：大动脉炎;实时定量聚合酶链式反应;RNA 稳定性；内参基因选择中图分类号:R593.2 文献标志码:AValidation of reference genes for the normalization of the RT-qPCRin peripheral blood mononuclear cells of patients with Takayasu arteritisTIAN Yi-xiao ， LI Jing *(Department of Rheumatology and Immunology , Key Laboratory of Rheumatology and Clinical Immunology , Ministry of Education ,National Clinical Research Center for Dermatologic and Immunologic Diseases ( NCRC-DID ),Peking Union Medical College Hospital , CAMS & PUMC , Beijing 100032, China)Abstract ： Objective To validate proper reference genes for quantitative real-time polymerase chain reaction ( RT-qPCR) used for comparing mRNA expression levels in Takayasu arteritis" (TAK) and healthy controls' ( HC ) pe ­ripheral blood mononuclear cells ( PBMC ). Methods Total RNA in PBMCs was extracted and used RT-qPCR to determine the profiles of 9 candidate genes , including 0-glucuronidase, GAPDH , ACTB , SDHA , HPRT1, RPL13A , B2M , YWHAZ and PKG1. Then compared their transcription stability by geNorm , NormFinder , and Best ­Keeper. Afterwards , with T-bet , GATA3 and RORC as the targeted genes , explored the influence of reference genes with different stability on mRNA relative abundance. Results The gene combination of B2M-SDHA was selected bygeNorm , and HPRT1 was the most stable one in analysis results of NormFinder and BestKeeper , while GAPDH was less stable. Conclusions Genes that have been expressed stably may be upregulated or downregulated whenpatients with autoimmune diseases received immunosuppressive drugs. When the sample size is small ， the more sta ­ble internal reference may facilitate the identification of inter-groups difference.Key words : Takayasu arteritis ； real-time polymerase chain reaction ； RNA stability ； selection of reference gene88基础医学与临床Basic&Clinical Medicine2021.41(1)反转录实时荧光定量聚合酶链式反应（reverse quantitative real-time polymerase chain reaction,RT-qPCR）是目前分析基因表达水平的黄金标准，却经常表现出重复性欠佳的问题，选取合适的内参基因有助于改善这一情况［1］。

王震 １ａ 李建 军 ， 董化 江 单 云官 王永 阔 ，， ２ ， ， ， 李伯 森
（． １天津医科大学研究生院，天津 ３０７ ；２武警后勤学院附属医院 ⑧医疗科 ， ０ ０１ ． ⑥脑系科中心，天津 ３０６ ； ０ １２
３ 武警 后勤学院解剖学教研室及 民政部 遗体 防腐与整形整容重点实验室 ，天津 ３ ０ ６ ． ０ １２）
Ｗ ｉｔ ｒｒ ｔ ｗｅ ｅ ｒ ｎ ｏ ｙ ｄ ｖ ｄ ｄ ｉ ｔ ｈ ｍ ｐ ｒ ｔ ｎ ｇ ｏ ｐ，ｍｏ ｅ ｒ ｕ ｎ ａ ｈ ｇ － ｏ ｅ ｇ ｏ ｐ ｓａ ａ ｓ ｒ ａ ｄ ｍｌ ｉｉ ｅ ｎ ｏ ｓ ａ ｏ ｅ ａ ｉ ｒ ｕ ｏ ｄ ｌｇ ｏ ｐ ａ ｄ Ｐ ｉ ｈ ｄ ｓ ｒ ｕ ，ｍｉ ｄ ｅ ｄ ｓ ｄ ｌ－ ｏｅ ｇ ｏ ｐ ａ ｄ ｌｗ— ｏ ｅ ｇ ｏ ｐ Ｒｉ ｈ ｔｉ ｌｂ ｏ ｄ ｗａ ｏ ｌｃ ｅ ｏ ｄ ｔ ｃ ｈ ｅ ｕ ＴＮＦ ｔ ｃ ｎ ｅ ｔ ｙ ｅ ｚ ｍｅ ｌｎ ｅ ｒ ｕ ｎ ｏ ｄ ｓ ｒ ｕ ． ｇ ｔａ ｒａ ｌ ｏ ｓ ｃ ｌ ｔ ｄ ｔ ｅ ｅ ｔ ｅ ｓ ｒ ｍ ｅ ｔ －ｏ ｏ ｔｎ ｎ ｙ — ｉ ｋ ｄ ｂ
Ｌｇｓ ｃＣｌ ｇ Ｃ ｉｅｅ ｅｐｅｓ ｒ ｄ ｏ ｃ Ｆｒｅ ． ｉ ｊ ｏ １２． ｈｎ ｏｉｉ ｏ ｅｅ ｆ ｈｎ ｓ Ｐ ｏｌｔＡ ｍｅ Ｐ ｌ ｅ ｏｃｓ Ｔａ ｉ ３ ｏ ６ Ｃ ｉａ ｔ ｌ ｏ ｉ ｎｎ
Ｃ ｒｅ ｐ ｎ ｉｇａ ｔｏ Ｌ Ｊａ —ｕ Ｅ ｉ ： ｉａ ｊ ｎ ９７ １ ｎ ６ ．ｏ ｏｒ ｓ ｏ ｄｎ ｕｈ Ｆ： Ｉ ｉｎ ｉｎ． ｍａｌ ｌ ｉｎ ｕ １ ５ ｉ ＠１ ３ｃ ｍ ｊ ｏ
中图分 类 号 ： ２ ５５； ２ ６２ Ｒ ８． Ｒ ５ ． 文献 标 识 码 ： Ａ ＤＯＩ １ ．９ ９ｊｉ ｎ １ ０ — ６ １２ １ ． ３０ ４ ： ０ ３ ６ ／．ｓ ． ０ ８ ９ ９ ． ０ ２ ０ ． ０ ｓ