Tk1简介

上限：1010 mol-1·dm3·s-1
2. 过渡状态理论的应用
A+B
(A:B)≠→P
非电解质溶液：
(G ) GS G0
k
k0
exp
(G RT
)
GS ：溶剂S中的标准活化自由能
G0 ： 基准溶剂中的标准活化自由能
电解质溶液：
ln A B Le2 (AB) RT
(1
k
k0
A B
(AB)
0. 35
900 3.9×10-4
▲ H +CCl4→HCl+CCl3 16
7
1400 5×10-3
▲ COCl +Cl→Cl2+CO 3.5 400
65 6.15
并不是在任何方位上的碰撞都会引起反应：
方位因素 NO2-C6H4-Br+OH- NO2-C6H4-OH+Br-
OH－必须与Br原子端碰撞→可能发生反应。 复杂分子传递能量需要时间：
A
RTe
exp(
r
S
)
hL
R
的振动频率
◆ A与活化熵变有关，与碰撞理论的结果相
比较得：P与活化熵有关；
◆ 若知道过渡状态的构型，就可计算k值。
——绝对速率理论
§5 液相反应和多相反应动力学分析
一、液相反应
多相反应
化学反应
气相反应
均相反应
液相反应
气态：分子间作用力可忽略→分子运动理论描述
晶态：质点排列有序
阿氏公式得：lnk~ (1/T)呈线性关系； 硬球碰撞理论得： ln(k/T1/2)~ (1/T)呈线性关系；
Ec —— 发生化学反应的最小临界能， Ec= Lε0

TK1-胸苷激酶1-检测项目指导手册第一部分项目运行意义概述胸苷激酶1简称TK1，是一种国际公认的细胞增殖特异性标志物；它参与DNA补救合成途径,是DNA合成的特殊标志酶。

临床上,可用于监测和评估体内细胞的异常增殖速度。

健康人细胞多处于静止状态（非增殖细胞），血清中的TK1酶含量极微，而随着增殖类疾病的发生，尤其是肿瘤、组织异常增生类疾病，细胞发生过度增殖，血清中TK1酶的含量出现显著升高，超过健康人平均水平2倍甚至100倍以上。

所以，通过检测血清中TK1浓度水平的变化，能够敏感地发现细胞增殖异常，动态评估细胞增殖发展趋势，为提前干预治疗高风险癌前病变，遏制肿瘤进程提供重要信息。

在瑞典卡罗琳斯卡大学(诺贝尔医学和生理学奖评审机构)二十多年的研发基础上,华瑞同康生物技术（深圳）有限公司与瑞典Karolinska大学TK1研究团队共同研制出高灵敏度的胸苷激酶1（TK1）细胞周期分析试剂盒及CIS系列化学发光数字成像仪，该系统是世界上唯一用于临床检验血清中TK1浓度的产品，其特异性高于95%,对各类增殖性疾病的综合检测灵敏度高于70%。

该系统已在多临床领域得到较为广泛地应用：1、独立的肿瘤预后因子：多国家，多机构的研究表明，TK1是优选的预后评估指标，可作为独立的肿瘤预后因子；2、动态评估手术、放化疗效果：能够对各种实体肿瘤（例如：肺癌，胃癌，结肠癌，直肠癌，食道癌，乳腺癌，宫颈癌，前列腺癌等）以及白血病和淋巴癌患者的治疗效果进行评估，为治疗方案的改善提供参考；3、更早评估肿瘤复发风险：对肿瘤康复期患者进行动态跟踪，较影像学更早提示肿瘤复发或转移风险信号；4、评估各类增殖类疾病恶变风险：处于过度增殖的增殖类疾病是肿瘤形成的第一步。

基于TK1与细胞增殖的密切关系，能够灵敏地通过TK1的浓度变化，发现恶性增殖风险，为肿瘤的癌前干预提供了更有效率，更有价值的信息，适用于无疾病人群的恶性增殖风险筛查。

第二部分项目运行准备一.项目环境1、环境参数温度： 24-25℃；湿度：小于65%；实验用水：（1）双蒸水；（2）去离子水；2、实验室设置要求：（1）项目最小占地约8-9平方米；（2）工作区域可放置两张1.5m×0.8m或一张3m×1m工作台；（3）控温设备：30立方米左右的独立空间，可选用2匹的挂式空调进行控温,或选用恒温摇床，如下图：二、项目所需设备1、实验用设备（1）实验用工具：（3）实验耗材三、实验样本处理要求及保存样本种类：血清采集要求：1、必须使用无任何添加剂的真空采血管；2、取静脉血2ml（室温）；3、建议空腹采血；4、脂血、溶血样本可能造成实验结果的偏差，不建议使用；样本处理：1、采血完成后，室温下静置或37℃水浴至凝固后离心使用；2、离心转速：4000r/min，离心时间：5min；注：室温放置时间不宜超过3h；样本保存：1、离心后的血清如非即时使用，应立即分装，推荐血清分装量100-200μl/管，放置于-20℃保存；2、-20℃保存时间以不超过7天为佳；3、如需长时间保存，建议提高分装量（1.5ml），并放置于-80℃（可保存3年左右）；样本运输：1、样本如需外送检验（本市范围内或行程小于3小时），建议采血后先放置于2-8℃静置，到检验点后取出离心，处理要求同上；2、样本如需外送检验（外省市），建议离心后分装至分装管中，血清分装量 1.5ml/管，运输介质建议使用保温箱+化学冰+干冰，干冰用量 2公斤/24小时（根据路程耗费时间增量）；样本复融：1、血清使用前需充分振荡混匀；2、冷冻保存的血清样本，需放置于室温完全解冻后使用；3、反复冻融的血清样本严禁使用。

过去十年，许多酪氨酸激酶抑制剂（TKI）药物已经在肿瘤领域应用，根据一篇最近的综述，看看截止到2013年8月份，由FDA 和EMA批准的所有TKI药物都有那些。

1、阿西替尼(axitinib,Inlyta)在2012年1月27日获FDA批准治疗对其它药物没有应答的晚期肾癌（肾细胞癌），由辉瑞（Pfizer）公司开发。

阿西替尼是多靶点酪氨酸激酶抑制剂，具体用法为5mg 空腹口服 2/日。

2、克唑替尼（crizotinib，XALKORI）用于治疗ALK阳性的局部晚期或转移的非小细胞肺癌，推荐剂量和方案是250 mg口服每天2次。

3、达沙替尼（Dasatinib,施达赛Sprycel）治疗对包括甲磺酸伊马替尼在内的治疗方案耐药或不能耐受的慢性髓细胞样白血病。

FDA也经正常程序批准达沙替尼治疗对其他疗法耐药或不能耐受的费城染色体阳性的急性淋巴细胞性白血病成人患者。

4、厄洛替尼（Erlotinib，特罗凯Tarceva）既往接受过至少一个化疗方案失败后的局部晚期或转移的非小细胞肺癌。

厄洛替尼单药用于非小细胞肺癌的推荐剂量为150mg/日，至少在进食前1小时或进食后2小时服用。

5、吉非替尼（Gefitinib，易瑞沙Iressa）适用于治疗既往接受过化学治疗或不适于化疗的局部晚期或转移性非小细胞肺癌。

推荐剂量为250mg(1片)每日1次，空腹或与食物同服。

6、伊马替尼（Imatinib，格列卫)用于治疗慢性粒细胞性白血病（CML），胃肠道间质瘤（胃肠道间质瘤）和其他一些疾病。

到2011年，该药已被FDA批准用于治疗10个不同的癌症。

7、拉帕替尼（Lapatinib；泰立沙Tykerb）联合卡培他滨治疗ErbB-2过度表达的,既往接受过包括蒽环类,紫杉醇,曲妥珠单抗(赫赛汀)治疗的晚期或转移性乳腺癌。

推荐剂量为1250mg，每日1次，第1～21天服用，与卡培他宾2000mg/d，第1～14天分2次服联用。

8、尼洛替尼(Nilotinib,达希纳Tasigna)适应症为对既往治疗（包括伊马替尼）耐药或不耐受的费城染色体阳性的慢性髓性白血病（Ph+ CML）慢性期或加速期成人患者。

文章编号：１６７３ ８６４０（２０１２）１２ １０８０ ０２ 中图分类号：Ｒ４４６．１ 文献标志码：Ａ血清胸苷激酶检测在结直肠癌患者中的临床应用李青峰（成都市公共卫生临床医疗中心，四川成都６１００６６） 摘要：目的　探讨血清胸苷激酶（ＴＫ１）检测在结直肠癌患者中的临床价值。

方法　采用增强化学发光法（ＥＣＬＡ）检测１２０例结直肠癌患者、１００例结直肠良性疾病患者及１２０名健康体检者（正常对照组）血清ＴＫ１水平；采用化学发光法分别测定癌胚抗原（ＣＥＡ）、糖类抗原１９９（ＣＡ１９９）。

结果　结直肠癌组术前血清ＴＫ１水平为２．４９（１．３６～３．８９）ｐｍｏｌ／Ｌ，明显高于结直肠良性疾病组［１．１９（０．７３～２．０８）ｐｍｏｌ／Ｌ］和正常对照组［１．０９（０．６９～２．０１）ｐｍｏｌ／Ｌ，Ｐ均＜０．０１］，结直肠癌患者术后１个月血清ＴＫ１水平明显下降，为１．６１（１．２２～２．５３）ｐｍｏｌ／Ｌ。

结直肠良性疾病组与正常对照组之间差异无统计学意义（Ｐ＞０．０５）。

结直肠癌组血清ＴＫ１阳性检出率为５８．３％，明显高于结直肠良性疾病组（１３．０％）和正常对照组（１４．１％）以及其他消化道肿瘤标志物（ＣＥＡ１８．３％、ＣＡ１９９１５．０％，Ｐ均＜０．０１）。

结论　血清ＴＫ１水平对早期结直肠癌筛查及辅助诊断具有一定的临床应用价值。

关键词：胸苷激酶；结直肠癌；结直肠良性疾病作者简介：李青峰，男，１９６７年生，学士，副主任技师，主要从事临床检验工作。

结直肠癌是消化道最为常见的恶性肿瘤之一，其发病率有逐年增高的趋势，但早期诊断率低。

目前临床上结直肠癌的诊断主要依赖内窥镜活检，但由于该技术难度、操作复杂性及患者痛苦性相对较大，因此难以进行定期的、大规模的筛查检测。

为此，肿瘤标志物的研究近年来一直是肿瘤研究的热点之一。

胸苷激酶（ＴＫ１）是嘧啶合成的补救酶，是催化胸腺嘧啶核苷转为单磷酸胸腺嘧啶的关键酶［１］，为ＤＮＡ的合成提供原料，是衡量细胞增殖活性的重要指标［２］。