微生物学实验思考题

微生物思考题1微生物学思考题介绍1、微生物包括哪些类群？微生物有哪五大共性？2、试述微生物与当代人类实践的重要关系。

3、什么是微生物？原核微生物菌落、芽孢、phb、鞭毛伴孢晶体菌毛、lps、基内菌丝、气生菌丝、孢子丝、糖被、异形胞、磁小体、原生质体、l型细菌、性菌毛。

－1、g+、g细菌的细胞壁化学成分、结构及相关的特点有何区别？2、依据鞭毛的数目和着生位置不同,可将鞭毛菌分为哪几种类型?6、试用渗透调节皮层膨胀学说解释芽孢耐热机制。

9、细菌主要贮藏物的特点及生理功能是什么？10.细菌的基本形式是什么？根据分离后的不同排列，将球菌分为哪些种类？12.典型细菌的大小和重量是多少？14.蓝藻及其特征？15、简述革兰氏染色机理、染色方法、步骤、结果是什么?16.比较了链霉菌和大肠杆菌的形态、结构、功能和化学成分。

18.细菌糖原的化学成分是什么？它对细菌本身有什么影响？与人类的关系是什么？细菌糖可以根据其现有特性分为几种类型？简要描述了它们的特点。

19、细菌芽孢的作用是什么？是什么样的结构和化学组成使之具有这种作用？真核微生物假根、子实体、吸器菌丝、菌丝体、真菌丝、假菌丝1.霉菌营养菌丝和气生菌丝的特征是什么？它们能区分哪些特殊结构？2.尝试比较各种真菌孢子的特征。

3、细菌、放线菌、酵母菌、霉菌四大类微生物的菌落有何不同？4、试比较细菌、放线菌、酵母菌、霉菌细胞壁成分的异同。

5、比较真核与原核生物的异同。

7、真菌及其特点？病毒斑块、病毒、轻度噬菌体、强效噬菌体、溶原细菌、类病毒、类病毒、朊病毒、亚病毒、包涵体、包膜、原噬菌体、噬菌体滴度、一步生长曲线1、病毒颗粒和核壳之间的关系？2、病毒的一般大小？病毒粒子的典型构造？病毒粒子有哪几种对称形式？试各举一例。

3、简述烈性噬菌体的生活史？4.噬菌体的一步生长曲线能反映噬菌体的哪些特征参数？这是什么意思？一步生长曲线分几期？各期有何特点？5.以大肠杆菌偶噬菌体为例，简要描述了其生活史（增殖过程）。

微生物实验思考题微生物学实验是生物学实验中较为复杂和繁琐的一类实验，它涉及到的实验类型和实验方法较多，而且每一种实验类型和实验方法都有其自身的特点和操作要求。

本文将从以下几个方面对微生物学实验中的一些常见问题进行思考和探讨。

一、实验前的准备工作在进行微生物学实验之前，我们需要做好充分的准备工作。

要了解实验的目的、要求和原理，确定所需的实验器材和试剂，并准备好相应的实验用品。

要对实验场所进行清洁和消毒处理，确保实验环境的无菌性。

要根据实验要求选择合适的菌种和培养基，并进行必要的预处理。

二、实验过程中的注意事项1、菌种保藏：在进行微生物学实验之前，需要对菌种进行保藏。

保藏方法应根据菌种的性质和实验要求进行选择。

常用的保藏方法有甘油管藏法、沙土管藏法、液体石蜡法等。

保藏过程中需要注意防止杂菌污染和防止菌种变异。

2、培养基的制备：制备培养基是微生物学实验中的一项基本操作技能。

在制备培养基时，需要注意根据菌种的营养需求和实验要求选择合适的配方和配制方法。

同时，要注意对培养基进行灭菌处理，确保无菌性。

3、接种与培养：在接种和培养过程中，需要注意无菌操作和防止杂菌污染。

接种时需要根据实验要求选择合适的接种方法和接种量，并注意对菌种进行纯化处理。

培养过程中需要注意控制温度、湿度、光照等环境因素，以保证微生物的正常生长和繁殖。

4、观察与记录：在观察和记录过程中，需要注意对微生物的生长情况、形态特征、生化反应等进行仔细观察和记录。

这些信息对于后续的数据分析和实验结果解释非常重要。

5、数据分析与总结：在完成实验后，需要对实验数据进行统计和分析，并将分析结果进行总结。

数据分析可以借助专业的统计软件进行，如SPSS、Excel等。

总结时需要注意对实验结果进行客观评价，并提出改进意见和建议。

三、实验后的整理与思考完成微生物学实验后，需要对实验场所进行清洁和消毒处理，并对实验器材和试剂进行整理和存放。

需要对实验数据进行整理和分析，并将分析结果进行总结和评价。

实验一显微镜的使用及微生物大小测定的方法二、基本原理现代普通光学显微镜利用目镜和物镜两组透镜系统来放大成像，它们由机械装置和光学系统两大部分组成。

物镜的性能最为关键，它直接影响着显微镜的分辨率。

其中油镜的放大倍数最大，对微生物学最为重要。

微生物细胞的大小是微生物基本的形态特征，也是分类鉴定的依据之一。

微生物大小的测定，需要在显微镜下，借助于特殊的测量工具—测微尺，包括目镜测微尺和镜台测微尺。

其中镜台测微尺并不直接用来测量细胞大小，而是用于校正目镜测微尺每格的相对长度。

目镜测微尺每小格所代表的实际长度因显微镜的不同放大倍数而异，因此用目镜测微尺测量微生物大小时，必须先用镜台测微尺进行校正，以求出该显微镜在一定放大倍数下，目镜测微尺每小格所代表的相对长度，然后根据微生物细胞相当于目镜测微格数，即可计算出细胞的实际大小.两重合线间镜台测微尺格数×10目镜测微尺每格长度=两重合线间目镜测微尺格数思考题1、用油镜观察时应注意哪些问题？在载玻片和镜头之间加滴什么油？起什么作用？答（1）应先用摖镜纸将镜头摖干净，以防止实验的污染。

使用油镜时，应先用低倍镜再用高倍镜，然后再是油镜，用完之后也要用摖镜纸将油镜摖掉。

（2）滴加香柏油（3）作用是增加折射率，即增加了显微镜的分辨率，油的折射率和分辨率成反比，同时与波长成正比。

2、影响显微镜分辨率的因素有哪些？答：显微镜的分辨率指显微镜能辨别两点之间的最小距离的能力，最小分辨距离越小，分辨率越高，最小可分辨率距离=λ／2NA且NA=n.sin,所以，分辨率由物镜的NA值与照明光源的波长两个因素决定，当然还有介质的折射率。

3、为什么要换不同放大倍数的目镜或物镜时，必须用镜台测微尺重新对目镜测微尺进行校正？答：不同放大倍数，目镜测微尺每小隔所代表实际长度不一样，必须用镜台测微尺进行重新校正，这样目镜测微尺测量的长度才是目前状态的准备长度。

4、在不改变目镜和目镜测微尺，而改用不同放大倍数的物镜来测定同一微生物的大小时，其测定的结果是否相同？为什么？答：相同的，不同的放大倍数，目镜测微尺每小格所代表实际长度不一样，必须重新校正，才能得到目前状态的准确长度。

●从细菌生长繁殖的条件入手，如何进行细菌的人工培养？充足的营养成分、适合的酸碱度、合适的酸碱度、适宜的温度、一定的气体环境、渗透压等、及时高压灭菌、适宜的培养基●什么是生长曲线？简述其分期及各期意义。

迟缓期：细菌被接种培养基的最初一段时间，主要是适应新环境，同时为分裂繁殖作物质准备，此时细菌体积比较大，含有丰富的酶和中间代谢产物。

对数期：细菌分裂繁殖最快的时期，菌数以几何级数增长，研究细菌的最佳时期。

稳定期：由于营养物质的消耗，代谢产物的堆积，繁殖数与死亡数几乎相等。

活菌数保持稳定。

一些细菌的芽胞、外毒素和抗生素等代谢产物大多在稳定期产生。

衰退期：繁殖变慢，死菌数超过活菌数。

细菌形态发生改变，生理活动趋于停滞。

●如何利用细菌分解代谢产物鉴别细菌？糖发酵试验：葡萄糖、乳糖、麦芽糖、甘露醇、蔗糖IMViC 试验常用于肠道杆菌的鉴定：吲哚（I）、甲基红（M）、VP（Vi）、枸橼酸盐利用（C）实验。

结果：大肠埃希菌：++-- 产气杆菌--++●简述细菌合成代谢产物在医药学上的意义。

1、热原质（致热源）：是细菌合成的一种注入人体或动物体内能引起发热反应的物质。

产生热致源的细菌大都为格兰阴性菌，热致源即其细胞壁的脂多糖。

2、毒素及侵袭性酶：①外毒素：多数G+菌和少数G-菌在生长繁殖过程中释放菌体外的蛋白质；②内毒素：G-菌细胞壁的脂多糖；外毒素毒性强于内毒素。

③侵袭性酶：某些细菌产生的，能损伤机体组织，促使菌体的侵袭和扩散，是细菌重要的致病物质。

3、色素：①水溶性；②脂溶性。

4、抗生素：某些微生物代谢过程中产生的一类能抑制或杀死某些其他微生物或肿瘤细胞的物质。

抗生素大多由放线菌和真菌产生。

5、细菌素：某些菌株产生的一类具有抗菌作用的蛋白质。

细菌素仅对与产生菌有亲缘关系的细菌有杀伤作用。

6、维生素●简述微生物的分类及各类微生物的特点 P4●比较G+菌与G-菌细胞壁结构的异同，并简述细胞壁的功能细胞壁结构革兰阳性菌G+革兰阴性菌G-肽聚糖组成由聚糖骨架、四肽侧链、五肽交联桥构成坚韧三维立体结构由聚糖骨架、四肽侧链构成疏松二维平面网络结构肽聚糖厚度20～80nm 10～15nm肽聚糖层数可达50层仅1～2层肽聚糖含量占胞壁干重50～80% 仅占胞壁干重5～20%磷壁酸有无外膜无有细胞壁的功能：维持菌体固有的形态，并保护细菌抵抗低渗环境。

微生物学实验思考题实验1 培养基的配置1、简述配置培养基的基本步骤及注意事项。

步骤：配料-溶解-调PH-加入琼脂-融化-分装-封口（棉花纱布或封口膜）-灭菌注意事项①加热溶化过程中，要不断的搅拌，防止琼脂糊底。

最后，补足所失水分。

② pH值要按照各种不同培养基的要求调整。

③分装时注意不要使培养基沾染在管口或者瓶口上，以免沾污棉塞引起杂菌污染。

④培养基的灭菌时间和温度需要按照各种培养基的规定进行，培养基灭菌后，须放在37℃温箱培养24-48h，以检查灭菌是否彻底。

2、为什么微生物实验室所用的三角瓶口或试管口要塞上棉塞才能使用？为了防止外界微生物进入三角瓶或试管，保持三角瓶或试管内部无菌状态或微生物的纯培养状态。

同时又允许空气进入，给内部菌种提供适宜生存环境。

3、培养基配好后，为什么必须立即灭菌？如何检查灭菌后的培养基是无菌的？如果不进行灭菌培养料内的微生物就会发酵生长，从而破坏培养基内的营养成分，并且由于这些微生物的生长过程中分分泌一种或多种毒素从而抑制目的菌的生长。

检查无菌的方法：将灭菌的培养基放入37℃温室中培养24~48小时，若无杂菌生长，即可证明为无菌的。

4、配置培养基为什么要调节pH？因为不同微生物所需环境的PH不同,同时在微生物的生长过程中由于营养物质的分解、代谢产物的积累,培养基的PH也会发生改变,故培养基在配置时以及在微生物培养过程中都需要调节PH。

5、什么是选择培养基？它在微生物工作中有何重要性？选择性培养基是指根据某种微生物的特殊要求或其对某化学、物理因素的抗性而设计的培养基。

利用这种培养基可以将所需要的微生物从混杂的微生物中分离出来。

实验2 高压蒸汽灭菌1、如何检查培养基灭菌是否彻底？将取出的灭菌培养基放入37℃温箱培养24h，若无杂菌生长即已彻底。

2、高压蒸汽灭菌开始之前为什么要将锅内冷空气排尽？灭菌完毕后，为什么要待压力降到0是才能打开排气阀？灭菌主要因素是温度而非压力，排出冷空气后关上排气阀，维持所需压力。

微生物学课程思考题《微生物学》课程复习思考题绪论1.什么是微生物？它包括哪些类群？2.人类迟至19世纪才真正认识微生物其中主要克服了哪些重大障碍？3.微生物有哪五大共性？其中最基本的是哪一个？为什么？4.什么是微生物学？学习微生物学的任务是什么？5. 用一个具体事例说明人类与微生物的关系，为什么说微生物是人类的敌人，更是我们的朋友？（建议将一些具体事例延伸成为展板制作的题目）6. 为什么微生物能成为生命科学研究的“明星”?7. 为什么说巴斯德和柯赫是微生物学的奠基人?（请不要简单罗列二个人的工作，而应该对他们的工作及意义进行评论）第一章1.试图示G+和G-细菌细胞壁的主要构造井简要说明其异同。

2.试图示肽聚糖的模式构造，并指出G+和G-细茵肽聚糖结构的差别。

3.试述革兰氏染色法的机制并说明此法的重要性。

4.渗透调节皮层膨胀学说是如间解释芽袍耐热机制的？5.裂异形胞原体与始体．类支原体，浚酶体袍囊，磁小体。

第二章1.试解释菌物、真菌、酵母茵、霉菌和章菌。

2.试简介菌丝、茵丝体、菌丝球、真酵母、假酵母、芽痕、蒂痕、真菌丝、假菌丝等名词。

3.霉菌的营养菌丝恻气生菌丝各有何特点？它们分别可分化出哪些特化构造？4.试列表比较各种真菌胞子的特点。

5.细菌、放线菌、酵母菌和霉菌四大类微生物的菌落有何不同？为什么？第三章1.什么是真病毒？什么是亚病毒？2.病毒的一般太小如何？试图示病毒的典型构造。

3.病毒粒有哪几种对称形式？每种对称又有几类特殊外形？试各举一例。

4.什么叫烈性噬菌体？简述其裂解性生活史。

5.什么是一步生长曲线？它可分几期？各期有何特点？6.试解释溶源性、溶源菌、温和噬菌体。

第四章1.什么叫能源？试以能源为主、碳源为辅对微生物的营养类型进行分类。

2.什么叫生长因子？它包括哪几类化合物？微生物与生长因子的关系有哪几类？试举例加以说明。

3.什么叫水活度（a）？它对微生物的生命活动有间影响？对人类的生产实践w和日常生活有何意义？4.什么是选择性培养基？试举一例并分析其中的原理。

微生物学思考题1.用一个具体事例说明人类与微生物的关系，为什么说微生物是人类的敌人，更是人类的朋友?答：因为微生物既可以促进人类社会的发展，也可以破坏生态环境，影响身体健康。

比如，很多菌种的次级代谢产物是对人类疾病非常有用的抗生素，如绿色丝状菌产生的青霉素，一些微生物被广泛应用于工业发酵，生产乙醇、食品及各种酶制剂等，一部分微生物能够降解塑料、处理废水废气等等，并且可再生资源的潜力极大，称为环保微生物。

由于微生物生长周期短，繁殖迅速等特点，被用于遗传育种上，具有重要意义。

但是，生物对人类最重要的影响之一是导致传染病的流行。

在人类疾病中有50％是由病毒引起，有些微生物是腐败性的，即引起食品气味和组织结构发生不良变化，微生物能够致病，能够造成食品、布匹、皮革等发霉腐烂。

在疾病的预防和治疗方面，人类取得了长足的进展，但是新现和再现的微生物感染还是不断发生，像大量的病毒性疾病一直缺乏有效的治疗药物。

一些疾病的致病机制并不清楚。

大量的广谱抗生素的滥用造成了强大的选择压力，使许多菌株发生变异，导致耐药性的产生，人类健康受到新的威胁。

一些分节段的病毒之间可以通过重组或重配发生变异，最典型的例子就是流行性感冒病毒。

所以，微生物是人类的敌人，更是人类的朋友。

2.为什么微生物能成为生命科学研究的“明星”？答：因为微生物的个体较小，体内结构单一，易于筛选，可以轻松滴完成对它的功能和结构的改造，生命活动的规律，大都是在研究微生物的过程中首先被阐明的，微生物学为分子遗传学和分子生物学的创立、发展提供了基础和依据，而且是它们进一步发展的必要工具，微生物的多样性为人类了解生命起源和生物进化提供了依据，微生物学是基因工程乃至生物工程的主角。

所以，它必然成为生命科学研究的明星。

3.为什么说巴斯德和柯赫是微生物学的奠基人？答：巴斯德：（1）彻底否定了“自生说”。

从此建立了病原学说，推动了微生物学的发展。

（2）免疫学——预防接种。

为人类防病，治病做出了巨大贡献。

食品微生物学技术思考题答案1.如何区别高倍镜和油镜？答：（1）油镜更接近标本片（2）油镜与标本间的介质是香柏油（3）油镜刻有“oil”或“Hi”字样，也刻有一圈红线或黑线为标记。

2．为什么在使用高倍镜及油镜是应特别注意避免粗调节器的错误操作？答：使用高倍镜及油镜时镜头距离标片很近，而粗调节器的调节幅度较大，粗调节器的错误操作会使镜头大幅度向标本移动，很容易损坏标本和镜头。

一般先用低倍镜找到物象后换到高倍镜，就只需要用细调节器了。

3.用油镜观察时应注意哪些问题？在载破片和镜头之间加滴什么油？起什么作用？答：（1）应该先用擦镜纸将镜头擦干净，以防止上次实验的污染，操作时，先低倍再高倍，用完要擦掉油。

（2）在转换油镜时，从侧面水平注视镜头注视镜头与玻片的距离。

使镜头浸入油中而不以压破载玻片为宜。

（3）从目镜内观察，把孔径光阑开到最大，使其明亮。

然后用微调将镜台下降，直至视野内物象清晰。

如油镜已离开油面仍未见物象，需重复操作。

加的是香柏油。

作用是增加折光率，增加显微镜的分辨率。

4.在调节焦距时，往往出现一些疑似观察标本的物象点，物象点可能是目镜或物镜上的杂质，也可能是标本片上的观察对象，如何通过操作判断这些物象点是否在标片上？答：移动标本片，看物象点是否移动，如果不移动，则不在标本片上。

5．如果涂片未经热固定或固定温度过高、时间过长，会出现什么现象？答：固定时间是杀死菌体，使菌体蛋白质凝固黏附于载玻片上，增加菌体对染色剂的结合力，易于着色。

但是如果没固定，不容易着色，且容易被清水冲走。

温度过高会使细胞收缩变形，时间过长会导致菌体变形或形态破坏，难以着色，从而导致难以着色。

6.为什么要培养18-24h的细菌菌体进行革兰氏染色？答:此时菌体进入比较活泼的繁殖生长期，细胞壁比较好着色。

若菌龄太老，由于菌体死亡或自溶常使革兰氏阳性菌转呈阴性反应，关键在于细胞壁的通透性的改变。

如果菌龄过老，不便于显微镜下观察时阴性还是阳性菌。

1培养基配好后，为什么必须立即灭菌？灭菌是杀灭培养基中本身的原著菌或在空气中附着的杂菌,更好的让目标菌生长，如果存放时间长不进行灭菌培养基内的微生物就会在基内发酵生长，从而破坏培养基内的营养成分，并且由于这些微生物的生长过程中分分泌一种或多种毒素从而抑制好菌的生长。

2为什么高氏一号培养基和土豆蔗糖固体培养基中要分别加入酚和乳酸？高氏一号加的酚是显色用的，不是抑制剂，目的是区分目标菌。

土豆蔗糖固体培养基加乳酸是抑制剂，抑制非目标菌的生长的，使得目标菌(真菌)得到选择性生长。

3在恒温箱中培养微生物时为何培养基均需倒置？培养时培养基会有水分蒸发,当水蒸气会聚成水滴，倒流到培养中的细菌中时,会冲散菌体，污染菌落，不利于培养观察，倒置可以避免此现象的发生。

4涂片后为什么要进行固定？固定时应注意什么？如果不进行固定，冲洗时就会把玻片上的细菌冲走；固定时应注意温度不能过高，以热而不烫为宜，否则会杀死细菌。

5用革兰氏染色法染色过程中应注意什么？选用活跃生长期菌种染色，老龄的革兰氏阳性细菌会被染成红色而造成假阴性；涂片不宜过厚，以免脱色不完全造成假阳性。

；色是革兰氏染色是否成功的关键，脱色不够造成假阳性，脱色过度造成假阴性。

6为什么芽孢染色要加热？为什么芽孢及营养体能染成不同的颜色？芽孢壁厚，透性低，不易着色，加热条件下染色，染料可以进入菌体内，也可以进入芽孢。

进入菌体的染料，经水洗后被脱色，而芽一经着色难以被水洗脱，则可以使用复染剂将菌体着色，而芽孢是初染剂的颜色。

名词解释菌苔：细菌在固体培养基接种线上由母细胞繁殖长成的一片密集的、具有一定形态结构特征的细菌群落，一般为大批菌落聚集而成。

菌落：由单个细菌（或其他微生物）细胞或一堆同种细胞接种到固体培养基表面，当它占有一定的发展空间并处于适宜的培养条件下迅速生长繁殖并形成的细胞堆。

芽孢：某些细菌在其生长发育后期，在细胞内形成的一个圆形或椭圆形、厚壁、含水量低、抗逆性强的休眠构造。

微⽣物思考题第⼀章1.设计⼀张表格，⽐较⼀下6个⼤类原核⽣物的主要特性。

2．试图⽰G+和G-细菌细胞壁的主要构造，并简要说明其异同。

3．试述染⾊法的机制并说明此法的重要性。

⾰兰⽒染⾊的机制为：过结晶紫液初染和碘液媒染后，形成不溶于⽔的结晶紫与碘的复合物。

G+细菌由于细胞壁较厚、肽聚糖⽹层次多和不含脂类，故经过⼄醇脱⾊后仍保持紫⾊；G-细菌则因其细胞壁薄、外膜层类脂含量⾼、肽聚糖层薄，遇到⼄醇脱⾊后细胞褪⾊；再经红⾊染料复染后，G-细菌呈红⾊，⽽G+细菌则仍保留最初的紫⾊。

重要性：此法证明了G+和G-主要由于起细胞壁化学成分的差异⽽引起了物理特性的不同⽽使染⾊反应不同，是⼀种积极重要的鉴别染⾊法，不仅可以⽤与鉴别真细菌，也可鉴别古⽣菌。

把原核⽣物分为G+和G-两⼤类，并揭⽰其在结构、功能、⽣理、遗传、⽣态等特性上的不同，故具有重要的理论和实践意义。

4．试讨论细菌的细胞形态与菌落形态间的相关性。

相关性：因不同形态、⽣理类型的细菌，在其菌落形态、构造等特征上也有许多明显的反映，故细菌的细胞形态与菌落形态间存在明显的相关性现象，如，⽆鞭⽑、不能运动的细菌尤其是球菌通常都形成较⼩、较厚、边缘圆整的半球状菌落；长有鞭⽑、运动能⼒强的细菌⼀般形成⽽平坦、边缘多缺刻、不规则的菌落；有糖被的细菌，会长出⼤型、透明、蛋清状的菌落；有芽孢的细菌往往长出外观粗糙、“⼲燥”、不透明且表⾯多褶的菌落等等。

名词解释菌落：菌落即单个（或聚集在⼀起的⼀团）微⽣物在适宜的固体培养基表⾯或内部⽣长、繁殖到⼀定程度可以形成⾁眼可见的、有⼀定形态结构的⼦细胞⽣长群体。

菌苔：如果把⼤量分散的纯种细菌密集的接种在固体培养基的较⼤⾯积上，结果长出的⼤量“菌落”已相互连成⼀⽚即称菌苔。

伴孢晶体：是少数芽孢杆菌在形成芽孢的同时，会在芽孢旁形成⼀颗菱形、⽅形或不规则形的碱溶性蛋⽩质晶体。

基内菌丝：是孢⼦落在固体基质表⾯并发芽后，不断伸长、分枝并以放射壮向基质表⾯和内层扩展，形成⼤量⾊浅、较细的具有吸收营养和排泄代谢废物功能的菌丝。

绪论1、你如何使你的朋友相信微生物不仅仅是一种病原？尽管目前微生物仍在严重威胁人类的生存，但另一方面，我们必须强调，大多数微生物对人类是无害的。

事实上，大多数微生物对人类社会还有巨大的价值。

整个农业系统在许多方面都依赖微生物的活动。

许多主要的农作物属于豆科植物，它们的生长同专一性细菌紧密相连，这些细菌可在植物的根部形成根瘤结构。

根瘤结构中，大气中的氮转变成可用于生长的氮化物。

根瘤细菌的固氮活动，减少了昂贵肥料的需要。

微生物在农业上的另一个重要性在于，某些动物是反刍动物，这些主要的农业动物具有瘤胃，微生物在瘤胃中进行消化。

没有这些微生物牛羊的饲养是不可能的。

植物营养方面，微生物在碳、氮、硫这些重要营养成分的循环起着关键作用。

土壤和水中的微生物可见这些元素转化成植物容易利用的形式。

微生物与食品的关系，不仅仅是产生腐败变质等不利影响。

奶制品的制造至少部分是借助微生物的活动，包括乳酪、酸乳酪和黄油，都是主要的具有经济价值的产品。

泡菜、腌制食品和一些腊肠也归功于微生物的活动。

可烘焙的食品及乙醇的制造也基于酵母菌的发酵。

微生物在能源生产方面也起着重要作用。

天然气是细菌作用的产物，由甲烷细菌代谢产生。

光营养的微生物能够收集太阳能生产生命有机体中的储存物——生物量。

废物如生活垃圾、剩余谷物、动物废料等通过微生物转化微生物燃料——甲醇和乙醇。

利用微生物清理被人类活动污染的大气——生物整治。

利用微生物降解油污、溶剂、杀虫剂和其他环境污染物。

通过基因操纵技术，能在微生物种生产出人类胰岛素。

利用基因组学方法搜索带几百个目的蛋白的基因蓝图，然后将它们转入到合适的受体中由于生产重要的、有商业价值的蛋白质。

在自然界中，它无限小，但作用无限大。

2、胡克和列文虎克对微生物学的贡献有那些？科恩对微生物学的贡献有那些？1665年，罗伯特.胡克描述了霉菌的子实体结构，因此他是第一个描述微生物的人。

1676年，列文虎克在研究辣椒水渗出的过程中发现了细菌，因此他是首次描述细菌的人。

微生物实验思考题参考答案及知识要点------------------------------------------ 二.细菌的简单染色和革兰氏染色1.革兰氏染色中那一步是关键？为什么？你是如何操作的？革兰氏染色的关键步骤是：乙醇脱色（是脱色时间）。

如果脱色过度，革兰氏阳性菌也可被脱色而被误认为是革兰氏阴性菌；如脱色时间过短，革兰氏阴性菌也可被脱色而被误认为是革兰氏阳性菌。

脱色时间的长短还受涂片的厚薄，脱色是玻片晃动的快慢及乙醇用量的多少等因素的影响，难以严格规定（脱色是应当控制速度，脱色时间一般为20—30s ）。

2.固定的目的之一是杀死菌体，这与自然死亡的菌体有何不同？自然死亡的菌体本身已经部分自溶，结构已经改变。

固定杀死细菌时细菌结构是保持死亡时的状态的。

3.不经复染这一步能否区分革兰氏阳性菌和阴性菌？能。

在酒精脱色后，不被酒精脱色而保留紫色者为革兰氏阳性菌（W）,被酒精脱色为革兰氏阴性菌。

最后一步用番红染液复染，是为了让结果更清楚。

4.涂片为什么要固定，固定适应注意什么问题？a杀死细菌并使菌体黏附与玻片上；b增加其对染料的亲和力。

固定时应注意：手持玻片，菌膜朝上，在微火过3次（手指触摸玻片反面，不烫手为宜），固定时应尽可能维持细胞原有形态，防止细胞膨胀或收缩。

三.霉菌、放线菌的形态观察1.镜检时，如何区分基内菌丝与气生菌丝？一般气生菌丝颜色较深，直生或分枝丝状，比基内菌丝粗；而基内菌丝色浅、发亮，可看到横隔膜，继而断裂成球状或杆状小体。

2.显微镜下细菌放线菌酵母菌和霉菌的主要区别是什么？放线菌与细菌需要在油镜下才能观察清楚，而霉菌和酵母菌在低倍镜下即可看到。

细菌：为细而短的单细胞微生物（个体微小），主要形态有：球、杆、螺旋状等。

（部分杆菌还可形成芽抱）放线菌：存在分枝丝状体和菌丝体，革兰氏阳性菌，有抱子丝和抱子（球形、椭圆形、杆状、柱状）。

酵母菌：单细胞，菌体呈圆球、卵形或椭圆形，少数呈柠檬形、尖形等。

第一章一、选择题：1．属于细菌细胞基本结构的为A、荚膜B、细胞壁C、芽胞D、鞭毛2．生鞭毛最多的菌属于A、螺旋菌B、杆菌C、球菌D、假菌丝3．在放线菌发育过程中,吸收水分和营养的器官为A、基质菌丝B、气生菌丝C、孢子丝D、孢子4．放线菌属于A、病毒界B、原核原生生物界C、真菌界D、真核原生生物界5．菌苔是微生物培养特征。

A、固体平板B、固体斜面C、液体表面D、明胶穿刺6．放线菌的形态是A、单细胞B、多细胞C、单或多细胞D、非细胞7．用来测量细菌大小的单位是A、cmB、mmC、umD、nm8．细菌缺乏下列哪一种结构仍可存活A、细胞壁B、细胞膜C、细胞质D、核质9．下列结构中并非细菌生活的必须结构的为A、细胞壁B、细胞膜C、核D、核糖体10．下列微生物器官耐温顺序为A、营养体＞孢子＞芽孢B、芽孢＞孢子＞营养体C、孢子＞营养体＞芽孢D、芽孢＞营养体＞孢子11．放线菌适宜生长的pH范围为A、＜4.0B、4.0～6.0C、6.5～8.0D、7.5～8.512．革兰氏染色结果中，革兰氏阳性菌应为A、无色B、红色C、紫色D、黄色13．细菌主要繁殖方式为A、增殖B、芽殖C、裂殖D、孢子生殖14．大肠杆菌经革兰氏染色后,菌体应呈A、无色B、红色C、黑色D、紫色15．下列耐热能力最强的是A、营养细胞B、菌丝C、孢子D、芽孢16．细菌生长的最适PH为A、6.5～7.5B、7.0～8.0C、7.5～8.5D、3.8～6.017．属于细菌细胞的特殊结构部分为A、细胞壁B、芽孢C、细胞膜D、原生质18．革兰氏染色的关键步骤是A、结晶紫(初染)B、碘液(媒染)C、酒精(脱色)D、蕃红(复染) 19．细菌形态通常有球状、杆状、螺丝状三类。

自然界中最常见的是A、螺旋菌B、杆菌C、球菌D、弧菌20．自然界长期进化形成的缺壁细菌是A、支原体B、L型细菌C、原生质体D、原生质球21．革兰氏阳性菌细胞壁特有的成分是A、肽聚糖B、几丁质C、脂多糖D、磷壁酸22．革兰氏阴性菌细胞壁特有的成分是A、肽聚糖B、几丁质C、脂多糖D、磷壁酸23．原核细胞细胞壁上特有的成分是A、肽聚糖B、几丁质C、脂多糖D、磷壁酸24．放线菌具吸收营养和排泄代谢产物功能的菌丝是A、基内菌丝B、气生菌丝C、孢子丝D、孢子25．蓝细菌的光合作用部位是A、静息孢子B、类囊体C、异形胞D、链丝段26．产甲烷菌属于A、古细菌B、真细菌C、放线菌D、蓝细菌27．在革兰氏染色中一般使用的染料是A、美蓝和刚果红B、苯胺黑和碳酸品红C、结晶紫和番红D、刚果红和番红28．下列微生物中，哪种属于革兰氏阴性菌A、大肠杆菌B、金黄葡萄球菌C、巨大芽孢杆菌D、肺炎双球菌29．G＋菌由溶菌酶处理后所得到的缺壁细胞是A、支原体B、L型细菌C、原生质体D、原生质球30．G－菌由溶菌酶处理后所得到的缺壁细胞是A、支原体B、L型细菌C、原生质体D、原生质球31．实验室中自发突变形成的缺壁细菌称作A、支原体B、L型细菌C、原生质体D、原生质球32．工业发酵生产抗主素时，放线菌主要借助哪种方式以产生新的菌丝体。

G—菌:细胞壁中含有较多类脂质，肽聚糖层较薄、交联度低，故用乙醇或丙酮脱色时溶解了类脂质，增加了细胞壁的通透性，使初染的结晶紫和碘的复合物易于渗出，结果细菌就被脱色，再经复红复染后就成红色。
G+菌:细胞壁中肽聚糖层厚且交联度高，类脂质含量少，经脱色剂处理后使肽聚糖层的孔径缩小，通透性降低，故细菌仍保留初染时的颜色。
11.固体培养基:在一般培养温度下呈固体状态的培养基都称固体培养基。
二．问答题
1.制备培养基的一般过程是什么？
一般培养基的程序主要可分为：配料、溶化、矫正pH、澄清过滤、分装、灭菌及检定等8个步骤。
2.在制备培养基时要注意些什么问题？
①灭菌器内必需有定量水位。②待灭菌的物品不宜太拥挤，否则会影响蒸气流通和灭菌效果。③当压力上升至5-8磅时应放出压力器内的冷空气。确保15磅30min。④灭菌结束时，关闭电源，待压力降至“0”时，先打开排气孔后再开盖取出物品。
2.使用油镜时应注意哪些问题？加香柏油前载片上可否有水，为什么？
应该先用擦镜纸将镜头擦干净，以防上次实验的污染，操作时先低倍后高倍，用完要擦掉油。
加香柏油的作用:是增加折光率也就是增加了显微镜的分辨率，油的折光率和分辨率成反比，同时和波长成正比，
3.细菌有哪些基本形态，各有哪些特征？
（1）球菌：大都呈现有规则球形，有的略呈矛头状，肾状或扁豆状。按其排列方式又可分为单球菌、双球菌、四联球菌、八叠球菌,葡萄球菌链球菌.（2）杆菌：杆菌一般呈正圆株形，也有近似卵原性的，菌体多数平直，亦有少数弯曲的，大小依种类不同，差别也很大。细胞形态较复杂,有短杆状、棒杆状、梭状、月亮状、分枝状.（3）螺旋状：菌体弯曲或呈螺旋状。可分为弧菌（螺旋不满一环）和螺菌（螺旋满2~6环,小的坚硬的螺旋状细菌）.此外,人们还发现星状和方形细菌.

微生物实验思考题1、用油镜观察时应该注意哪些问题？在载破片和镜头之间加滴什么油？起什么作用？答：应该先用擦镜纸将镜头擦干净，以防上次实验的污染。

操作时,先低倍再高倍。

用完要擦掉油。

加滴香柏油。

作用:增加折光率，也就是增加了显微镜的分辨率.2、根据实验体会，谈谈应如何根据所观察微生物的大小，选择不同的物镜进行有效的观察.答：细菌用油镜，真菌用高倍镜.都是先用低倍镜找到目标后，再用高倍镜调到合适的视野和合适的清晰度.放线菌、酵母菌、多细胞真菌相对较大，用放大 40 倍的物镜就可以看了,细菌小，要用放大 1000 倍的物镜看，感觉还很小。

病毒那就要用电子显微镜看了。

3、哪些环节会影响革兰氏染色结果的正确性?其中最关键的环节是什么？答:涂片环节、加热固定环节、脱色环节;其中最关键的环节是脱色环节。

4、进行革兰氏染色时，为什么特别强调菌龄不能太老，用老龄细菌染色会出现什么问题？答：着色不均，染色效果不好。

阴性阳性不明显分不太清楚，问题是：不便于显微镜下观察是阳性菌还是阴性菌。

5、革兰氏染色时，初染前能加碘液吗?乙醇脱色后复染之前，革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌应分别是什么颜色？答:不可以.因为碘与染料会结合成大分子，使得染料分子不能穿过细胞的细胞壁,对实验结果造成影响。

脱色后复染前，革兰氏阳性菌呈紫色,阴性菌无色.6、不经过复染这一步,能否区别革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌？答：不行。

在复染之前,革兰氏阴性菌是无色透明的,在显微镜下很难观察到；或者脱色过度，也会造成阳性菌脱色，不经过复染，无法进一步区别。

7、你认为制备细菌染色标本时，应该注意哪些环节?答：1制备适宜的培养基2在超净工作台上进行,保持无菌环境3对培养基，接种环等物品的高温高压灭菌。

4倒置培养基,防止冷凝水内流8. 为什么要求制片完全干燥后才能用油镜观察?答:1、若未完全干燥，载玻片上的液体会污染油镜镜头。

镜头非常精密,被污染后不利于下次观察；2、若未完全干燥，水滴会影响油与玻璃之间折光率，造成视野不够清晰。

绪论复习题1、什么是微生物？包括哪些类群？2、人类迟至19世纪中叶才真正认识微生物世界，其中的障碍有哪些？它们是如何被克服的？3、试举五例说明人类历史上致病微生物导致的传染病大流行。

4、微生物学史可分哪五期？各期的时间、实质、创始人和特点。

我国在微生物学发展史上有什么值得反思？5、说明微生物在推动生命科学基础研究中的贡献。

6、什么是微生物的五大共性？其中最关键的是什么？7、你对微生物学的发展前景有何观点？原核微生物思考题1、细菌的一般构造和特殊构造有哪些？2、比较革兰氏阳性菌与革兰氏阴性菌细胞壁的结构。

3、比较革兰氏阳性菌与革兰氏阴性菌肽聚糖单体。

4、细菌革兰氏染色过程的基本步骤及基本原理。

5、比较4类缺壁细菌。

6、液态镶嵌模型。

7、比较真细菌与古生菌细胞膜。

8、说明细菌芽孢的结构和各部分成分。

9、研究芽孢的意义。

10、渗透调节皮层膨胀学说。

11、什么叫“拴菌”试验？分析该试验在思维方式和试验方法上的创新。

12、比较细菌鞭毛、菌毛和性毛。

13、放线菌形态、繁殖方式、菌落形态。

14、为什么蓝细菌会成为“先锋生物”？其细胞有几种特化形式？功能怎样？15、比较衣原体、立克次氏体和支原体。

真核微生物思考题1、在形态、构造和生理功能上比较真细菌、古生菌和真核微生物。

2、比较线粒体和叶绿体在形态、构造、成分和功能等方面的差别。

3、比较细菌鞭毛与真核微生物鞭毛在结构及运动方式上的差别。

4、总结酵母菌的五个特点，并列出各个特点的例外。

5、简要说明酵母菌生活史类型，并说明各阶段的特点。

6、真核生物细胞的细胞之内细胞骨架结构怎样？功能如何？7、以粗糙脉孢菌为例简述霉菌菌丝延伸过程中细胞壁成分的变化。

8、比较细菌、酵母菌和霉菌的细胞壁和细胞膜成分的差异。

9、比较细菌、放线菌、酵母菌和霉菌的菌落。

10、比较细菌、放线菌和霉菌的个体及菌落的形态特征。

11、介绍霉菌的营养菌丝和气生菌丝的特化构造并说明它们的功能。

12、比较细菌、放线菌、酵母菌和霉菌细胞壁成分，说明各自原生质体的制备方法。

七。酵母菌形态观察及死活细胞的鉴别
原理：酵母菌是多行的，不运动的单细胞微生物，细胞核与细胞质已有明显分化，菌体比细菌大。美蓝是一种无毒性染料，他的氧化型呈蓝色，还原型无色。用美蓝对酵母的活细胞进行染色时，由于活细胞的新陈代谢作用，细胞内具有较强的还原能力，能是美蓝由蓝色的氧化型变成无色的还原型。因此，具有还原能力的酵母细胞是无色的，而死细胞或代谢作用微弱的衰老细胞则呈蓝色或淡蓝色。
当你对一株未知菌进行革兰氏染色时，怎样才能保证你的操作正确，结果可靠？
找事先已知的且和未知菌形态明显不同的G+和G-分别做混合涂片，当和G+做时G+正确显紫色和当和G-做时G-正确显红色，看这个未知菌分别显什么色，若一致，则可确定此菌为G+或G-。再回过头单做此未知菌的革兰氏染色，显现正确那就证明此染色技术操作正确。
制片为什么要完全干燥后才能用油镜观察？
油和水之间会分层，油就不能与标本接触还有光会发生折射等等原因，这样不利于油镜观察
三。细菌的革兰氏染色法
原理：细菌先经碱性染料结晶紫染色，而经碘液媒染后用酒精脱色，在一定条件下有的细菌紫色不被脱去，为G+，有的可被脱去，为G-.
1.革兰氏染色成败的关键是乙醇脱色。脱色过度，阳性细菌被染成阴性细菌，脱色不足，阴性细菌被染成阳性细菌
染色用玻片干净无油污是鞭毛染色成功的先决条件。
哪些因素能影响鞭毛染色结果？如何控制？
选取的细菌菌种及菌龄要适宜；镀银法染色液必须现配先用；
操作要小心，防止鞭毛脱落；染色用玻片干净无油污
鞭毛染色的菌种为什么要连续传种几代，并且要采用幼龄菌种？
因为菌龄较老的细菌容易失落鞭毛。
五。细菌数量的测定
用油镜观察时在油镜与载玻片之间加入了和玻璃折射率相近的香柏油，使进入透镜的光线增多，视野亮度增强，使物象明亮清晰。