禽流感灭活疫苗_H5N1亚型_Re1株_研究及应用
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目前,用于禽流感强制免疫的疫苗主要有三种：禽流感-新城疫重组二联活疫苗(rl-H5)、重组禽流感病毒H5亚型二
目前，用于禽流感强制免疫的疫苗主要有三种：禽流感-新城疫重组二联活疫苗(rl-H5)、重组禽流感病毒H5亚型二价灭活疫苗(H5N1，Re-5+Re-4株)、禽流感H5-H9二价灭活疫苗。
不论是活疫苗还是灭活苗，影响禽流感免疫效果的因素很多，实践中应对疫苗种类的选择、防疫程序的制订、接种途径、操作方法给予充分的重视，才能尽量减少免疫失败或不良反应。
1、禽流感疫苗使用前的准备工作1.1制定合理的免疫程序一般在制订禽流感免疫程序时应考虑以下几方面的因素：①当地禽流感疫病的流行情况；②雏鸡的母源抗体水平；③免疫间隔时间；④鸡的免疫应答能力；疫苗的种类；免疫接种的方法；⑤免疫对鸡健康及生产性能的影响等。
鸡禽流感疫苗首免日龄在12~15d，如果日龄太小，鸡免疫系统尚未完全建立，会造成免疫系统损伤，影响免疫效果。
另一方面，母源抗体高滴度时，免疫不仅不能刺激机体产生应有的免疫应答，抗体反而会被中和，结果免疫失败。
最好通过实验室检测禽流感母源抗体水平来确定首免日龄。
说明书中禽流感油乳剂灭活苗免疫保护期为4个月，这是在实验室条件下采用SPF鸡检测得出的数据，而实际生产中影响禽流感疫苗免疫效果的因素很多，如饲养管理、营养水平、日龄大小、健康状况等，导致疫苗的保护期长短不一。
所以，不能机械地照搬说明书中的保护期来推测免疫时间，有条件的，应根据HI抗体检测结果来指导何时免疫。
1.2了解禽流感疫苗要选择合适的疫苗对鸡群免疫接种，由于禽流感病毒血清型众多，不同亚型之间不能完全保护。
在生产实践中应针对当前和本地流行的疫情来选择血清型、病毒株相同的疫苗。
如果疫苗毒株的抗原性与感染病原的差异较大，很难取得良好的防疫效果。
疫苗要妥善保存，禽流感疫苗是生物制品，对温度要求很严格，切忌随便存放，否则对疫苗有直接影响。
灭活疫苗要保存在低温、干燥、阴暗的地方，适宜温度为2~8℃，活疫苗为冻干苗，则在冰箱冷冻室-15℃以下保存，切忌反复冻融。
重组禽流感病毒灭活疫苗(H5N1亚型,Re1株)有效期的探讨
府采取 了积极有效 的防疫措施 ， 禽流感没有给我国养 殖业造 成较大 的损失 。而在这些积极有效 的防治措施里面 ， 高覆 盖
情紧张的时候市场供应经常 出现断货现象 ， 各地 的兽 医防疫 部门为了防止疫情 出现 时没有足够 的疫苗 ， 也都 留有一定量 的储 备。由于 目前禽流感疫苗绝大多数为油乳剂灭活疫苗 ， 标注的有 效期 为一年 ， 在疫苗需求不紧张时期所 生产的禽 流 感疫苗经过各个 阶段 的储备之 后 ，往往就 到了一年 的有 效
ＤＯＩ ０．９ ９ ＪＩ ： ３ ６ ／． １ ＳＳＮ．６ － ０ ７２ ２．６０１ １ ７１ ６ ２ ．０１ ０ ． ８
禽 流感 是一种严 重危害养殖业 发展并对人类 健康存在 巨大威胁 的传染病。 近几年在世界范围内发生 了多起禽流感 疫情 ， 在国内也 有部 分省 市发生过禽流感疫情 。由于我国政
８ ０ 。将所 得到的尿囊液取样稀释 ， ４０枚 涂平板菌 落计数 ， 分
析鸡胚 中的细菌含量与外表面的消毒方式之间的关系 ， 得到
如下曲线（ 纵轴单位 ： 万细菌 ／ Ｌ尿囊液 ）见图 ３ ｍ ， 。
收获到的尿囊液细菌浓度 与经 蛋壳 外表 面消毒后 的 Ｋ、 Ｌ组
细菌浓度差异在 １ 倍 以上 ，分析原因可能是由于接种后的 ０
组。同 ， 组和 Ｅ组的整体效果类似 ， 理 Ｄ 而使用的消毒剂新洁尔
灭较拜洁成本高很多， 不适用于规模化生产 ， 故选用 Ｅ组。 （ ）Ｇ、 ＩＮ四组 中， ２ Ｈ、、 Ｇ和 Ｈ组使 用后 的鸡胚孵 化效 果不 及不消毒 ， 分析其原 因应该是 由于喷雾后 到接种前 的时间仅 几分钟 ， Ｇ和 Ｈ组所用 的消毒剂碘伏与苯扎氯铵溶液 ，残 留
试 验 研 究
重组禽流感病毒灭活疫苗 （ Ｎ１ Ｈ５ 亚型， １ ） Ｒｅ 株 有效期的探讨
情紧张的时候市场供应经常 出现断货现象 ， 各地 的兽 医防疫 部门为了防止疫情 出现 时没有足够 的疫苗 ， 也都 留有一定量 的储 备。由于 目前禽流感疫苗绝大多数为油乳剂灭活疫苗 ， 标注的有 效期 为一年 ， 在疫苗需求不紧张时期所 生产的禽 流 感疫苗经过各个 阶段 的储备之 后 ，往往就 到了一年 的有 效
ＤＯＩ ０．９ ９ ＪＩ ： ３ ６ ／． １ ＳＳＮ．６ － ０ ７２ ２．６０１ １ ７１ ６ ２ ．０１ ０ ． ８
禽 流感 是一种严 重危害养殖业 发展并对人类 健康存在 巨大威胁 的传染病。 近几年在世界范围内发生 了多起禽流感 疫情 ， 在国内也 有部 分省 市发生过禽流感疫情 。由于我国政
８ ０ 。将所 得到的尿囊液取样稀释 ， ４０枚 涂平板菌 落计数 ， 分
析鸡胚 中的细菌含量与外表面的消毒方式之间的关系 ， 得到
如下曲线（ 纵轴单位 ： 万细菌 ／ Ｌ尿囊液 ）见图 ３ ｍ ， 。
收获到的尿囊液细菌浓度 与经 蛋壳 外表 面消毒后 的 Ｋ、 Ｌ组
细菌浓度差异在 １ 倍 以上 ，分析原因可能是由于接种后的 ０
组。同 ， 组和 Ｅ组的整体效果类似 ， 理 Ｄ 而使用的消毒剂新洁尔
灭较拜洁成本高很多， 不适用于规模化生产 ， 故选用 Ｅ组。 （ ）Ｇ、 ＩＮ四组 中， ２ Ｈ、、 Ｇ和 Ｈ组使 用后 的鸡胚孵 化效 果不 及不消毒 ， 分析其原 因应该是 由于喷雾后 到接种前 的时间仅 几分钟 ， Ｇ和 Ｈ组所用 的消毒剂碘伏与苯扎氯铵溶液 ，残 留
试 验 研 究
重组禽流感病毒灭活疫苗 （ Ｎ１ Ｈ５ 亚型， １ ） Ｒｅ 株 有效期的探讨
对重组禽流感病毒灭活疫苗(H5N1亚型,Re-1株)在家禽免疫效果方面的调研
Ｌ Ｕ Ｈｕ ，Ｗ ＡＮＧ ｅ ，ＷＡＮＧ ｕ Ｉ ａ Ｆｉ Ｊ ｎ，Ｃ ＡＯ ｉ Ｊｎ—ｒ ｎ ，ＨＯＮＧ Ｇｏ ｇ—ｆｉ ｏｇ ｎ ｅ ，ＹＵ ＡＮ ｏ ｇ Ｓｎ
（ ｎｕ ｎｍａ ｓａｅＣｎｒｌ ｅ ｅ，Ｈｆｉ ３０ ２；Ｃ ｉ Ａ ｈ ｉ ｉ ｌ ｅｓ ｏｔ ｎ ｒ ｅ ０ ２ Ａ Ｄｉ ｏ Ｃｔ ｅ２ ｈｎ ａ）
（ 安徽省动物疫病预防与控制 中心 ， 合肥 ２０ ２ ） ３ ０ ２ ［ 收稿 日期 】２０ ０ ０ ［ ０ ８— ４— ２ 文献标 识码】Ａ ［ 文章编号 】１０ ０ ２—１８ （０ ８ ０ ０ ３ ０ 中圈分类号 】￥ ５ ．９ ２ ０ ２ ０ ） ７— ０ ０～ ３［ ８ ９７ ７
［ 摘 要】 ２０ ２０ ０６— ０７年 ， 通过检测免疫注射 Ｈ Ｎ 重组禽流感病毒灭活疫苗（ ｅ １ 后３～ ５１ Ｒ 一 株） ４周的４ ４ ４ 个鸡场、６ ６ 个鸭场和 ２ ８个鹅场共计 １ ４ ６１０份血清 中 Ｈ ５亚型禽流感血凝抑制抗体水 平， 比较 Ａ Ｂ ｃ Ｄ Ｅ５个不同厂家的疫苗对鸡、 鹅 免疫效果。结果 显示： 、 、 、 、 鸭、 重组禽流感灭活疫 苗 （ ５ １亚 型 ， ｅ一 ＨＮ Ｒ １株 ） 对鸡 的免疫 效 果 明显好 于 鸭 和 鹅 ； 同厂 家疫 苗 质 量和 免疫 效 果 有 差 不 异 ， 中 Ａ 厂疫 苗质 量和 免疫 效果 最好 。 其
［ 键词 ］ Ｈ Ｎ１重组 禽流感 病 毒灭 活疫 苗（ ｅ 关 ５ Ｒ 一１株 ） 免疫 效果调 研 ；
Ｉ ｖ ｓｉａ ｉｎ ｏ ｈ ｍ ｍｕ ｉｙ Ｅｆ ｃ ｃ ｆＲｅ ｏ ｂ ｎ ｎ ａ ｔ ａ ｅ ｎ ｅ ｔｇ ｔｏ ｆｔ ｅ Ｉ ｎ ｔ ｆ ａ ｙ ｏ ｃ ｍ ｉ ａ ｔＩ ｃ ｉ ｔ ｄ ｉ ｎ ｖ
重组H5N1亚型禽流感灭活苗对鸽免疫程序的初步研究
收 稿 日期 ： ０ ６ １ — ３ ２ ０ — １１
基 金 项 目 ： 海 市 科 技 兴 农 攻 关 项 目 ［ 农 科 攻 字 （ ０ ４ 第 上 泸 ２０ ） １— ］ ２１号
控 制禽流 感非 常有 效 的措施 之 一 。国 内对鸡 、 、 鸭 鹅 及部 分特 种 禽 对 Ｈ５ Ｎ１亚 型 高 致 病 性 禽 流 感 疫 苗 的免疫效 果 均有 一定 的研究 ＿ ］ 但对 鸽 的研究 报 道 ３ ， 很 少 ， 内至今 无 专 门用 于鸽 免 疫 的疫 苗 。为 了有 国 效 预 防 和 控 制 鸽 禽 流 感 的 发 生 ， 试 验 采 用 重 组 本 Ｈ５ Ｎ１亚型 高致 病性 禽 流感 疫 苗 ， 究 其 对 鸽 子 的 研 免 疫效 力 ， 并对 免疫 程序 进行 探讨 ， 有效 预 防和控 为 制鸽禽 流感 传播 和发 生 提供技 术 依据 。 １ 材 料 与 方 法 １ １ 材 料 重组 Ｈ５ ＡＩ 活 疫 苗 由 中 国农 ． Ｎ１ＨＰ 灭 ２ １ ２ 血 清 型 鉴 定 结果 对 ９ ． ． ６株 大 肠 杆 菌 中 的 １ ２株 血清 型鉴定 结果 ， 主要 为 Ｏ 、 和 Ｏ川 。 Ｏ。 。 ２ ２ 生 化鉴 定结果 １ ． ２株 大肠 埃 希 氏 菌均 发 酵 葡
一
萄糖、 糖、 乳 木糖 、 阿拉 伯糖 和麦 芽糖 ， 发酵 纤维 二 不 糖 。吲哚试 验 、 甲基 红 试 验 、 萄 糖产 气 试 验 、 力 葡 动
试 验 、 酶 试 验 、 氨 酸 脱 羧 酶 试 验 和 赖 氨 酸 脱 羧 酶 尿 鸟 试 验 阳 性 ， Ｐ试 验 、 橼 酸 盐 利 用 试 验 和 Ｈ Ｓ试 Ｖ— 枸
典型 临床 症状 ， 眼睑 、 猪 头面 部 、 股前 皮下 高度水 肿 ； 剖检 ， 肉眼观 病变 典 型 ， 下 出血 及 充 血 ， 巴结 肿 皮 淋 大， 剖开 可见 充血 、 坏死 及水 肿 ， 胸腔 、 腔 和皮下有 腹 积液 、 不 等 ， 包 积 液呈 黄 色 、 较 多 ； 脾 肿大 ， 量 心 量 肝 肝脏 可 见胶胨 样 物 、 多 ， 量 胃肿 大 ， 胃大 弯 部 黏 膜 下 胶胨 样 物更加 黏 稠 ， 较 多 ， 变延 伸到 胃底 部 的黏 量 病 膜 下层 。以上各 脏器均 可 见多少 不 一 的纤维 素性 渗 出液 。小肠 黏膜 轻度水 肿 ， 并有 散在 出血点 ， 系膜 肠 呈胶 冻 样水 肿 。各 病 变脏 器均 分 离 到 大 肠 杆 菌 ， 各 方 面特 性均 与所 攻毒菌 株 一致 。 ２ ４ 药敏试 验结 果 该 菌 对 恩 诺 沙 星 、 孢 氨 苄 、 ． 头 阿米 卡星 和壮 观霉素 高度 敏感 ； 培氟 沙 星 、 对 左旋 氧 氟 沙 星 中度 敏感 ； 其他 药 物不 敏 感 。所 以在 使 用 对 药 物治 疗该 病 时 ， 根 据 药 敏 试 验 结果 选择 敏 感 药 应 物， 且应 注 意交 替用 药 ， 疗 程投 药 ， 能 收 到较 好 按 才 的治疗 效果 。研 制 有 效 的 疫 苗 ， 对 大 肠 杆菌 病 的 会 防治工 作带 来新 的前 景 ， 是 防治 菌 圈 的测定 用无 菌棉 拭子 蘸取 菌液 ， ．． 在 ＭＨ 培养基 上均 匀涂 布 ， 无菌 镊子 将 １ 用 ５种药 敏纸 片贴 于 ＭＨ 培养基 上 ，７ 培养 ２ 质 控 菌株 的 ３℃ ４ｈ 抑 菌 圈在质 控范 围 内 ， 验 有 效 。用 游 标 卡 尺测 量 试 各抗 生素对 每株 细菌抑 菌 圈 的大 小 。 １ ６ ３ 判定 标 准 结 果 按 美 国 临床 检 验 标 准 委员 ．． 会 （ Ｃ Ｓ ０ ０ 的标 准判 断 。 ＮＣ Ｌ ２ ０ ）
基 金 项 目 ： 海 市 科 技 兴 农 攻 关 项 目 ［ 农 科 攻 字 （ ０ ４ 第 上 泸 ２０ ） １— ］ ２１号
控 制禽流 感非 常有 效 的措施 之 一 。国 内对鸡 、 、 鸭 鹅 及部 分特 种 禽 对 Ｈ５ Ｎ１亚 型 高 致 病 性 禽 流 感 疫 苗 的免疫效 果 均有 一定 的研究 ＿ ］ 但对 鸽 的研究 报 道 ３ ， 很 少 ， 内至今 无 专 门用 于鸽 免 疫 的疫 苗 。为 了有 国 效 预 防 和 控 制 鸽 禽 流 感 的 发 生 ， 试 验 采 用 重 组 本 Ｈ５ Ｎ１亚型 高致 病性 禽 流感 疫 苗 ， 究 其 对 鸽 子 的 研 免 疫效 力 ， 并对 免疫 程序 进行 探讨 ， 有效 预 防和控 为 制鸽禽 流感 传播 和发 生 提供技 术 依据 。 １ 材 料 与 方 法 １ １ 材 料 重组 Ｈ５ ＡＩ 活 疫 苗 由 中 国农 ． Ｎ１ＨＰ 灭 ２ １ ２ 血 清 型 鉴 定 结果 对 ９ ． ． ６株 大 肠 杆 菌 中 的 １ ２株 血清 型鉴定 结果 ， 主要 为 Ｏ 、 和 Ｏ川 。 Ｏ。 。 ２ ２ 生 化鉴 定结果 １ ． ２株 大肠 埃 希 氏 菌均 发 酵 葡
一
萄糖、 糖、 乳 木糖 、 阿拉 伯糖 和麦 芽糖 ， 发酵 纤维 二 不 糖 。吲哚试 验 、 甲基 红 试 验 、 萄 糖产 气 试 验 、 力 葡 动
试 验 、 酶 试 验 、 氨 酸 脱 羧 酶 试 验 和 赖 氨 酸 脱 羧 酶 尿 鸟 试 验 阳 性 ， Ｐ试 验 、 橼 酸 盐 利 用 试 验 和 Ｈ Ｓ试 Ｖ— 枸
典型 临床 症状 ， 眼睑 、 猪 头面 部 、 股前 皮下 高度水 肿 ； 剖检 ， 肉眼观 病变 典 型 ， 下 出血 及 充 血 ， 巴结 肿 皮 淋 大， 剖开 可见 充血 、 坏死 及水 肿 ， 胸腔 、 腔 和皮下有 腹 积液 、 不 等 ， 包 积 液呈 黄 色 、 较 多 ； 脾 肿大 ， 量 心 量 肝 肝脏 可 见胶胨 样 物 、 多 ， 量 胃肿 大 ， 胃大 弯 部 黏 膜 下 胶胨 样 物更加 黏 稠 ， 较 多 ， 变延 伸到 胃底 部 的黏 量 病 膜 下层 。以上各 脏器均 可 见多少 不 一 的纤维 素性 渗 出液 。小肠 黏膜 轻度水 肿 ， 并有 散在 出血点 ， 系膜 肠 呈胶 冻 样水 肿 。各 病 变脏 器均 分 离 到 大 肠 杆 菌 ， 各 方 面特 性均 与所 攻毒菌 株 一致 。 ２ ４ 药敏试 验结 果 该 菌 对 恩 诺 沙 星 、 孢 氨 苄 、 ． 头 阿米 卡星 和壮 观霉素 高度 敏感 ； 培氟 沙 星 、 对 左旋 氧 氟 沙 星 中度 敏感 ； 其他 药 物不 敏 感 。所 以在 使 用 对 药 物治 疗该 病 时 ， 根 据 药 敏 试 验 结果 选择 敏 感 药 应 物， 且应 注 意交 替用 药 ， 疗 程投 药 ， 能 收 到较 好 按 才 的治疗 效果 。研 制 有 效 的 疫 苗 ， 对 大 肠 杆菌 病 的 会 防治工 作带 来新 的前 景 ， 是 防治 菌 圈 的测定 用无 菌棉 拭子 蘸取 菌液 ， ．． 在 ＭＨ 培养基 上均 匀涂 布 ， 无菌 镊子 将 １ 用 ５种药 敏纸 片贴 于 ＭＨ 培养基 上 ，７ 培养 ２ 质 控 菌株 的 ３℃ ４ｈ 抑 菌 圈在质 控范 围 内 ， 验 有 效 。用 游 标 卡 尺测 量 试 各抗 生素对 每株 细菌抑 菌 圈 的大 小 。 １ ６ ３ 判定 标 准 结 果 按 美 国 临床 检 验 标 准 委员 ．． 会 （ Ｃ Ｓ ０ ０ 的标 准判 断 。 ＮＣ Ｌ ２ ０ ）
H5N1禽流感疫苗研究及应用
化分析
１９ 年 ．在我国广东省佛 山市 １ ９６ 株鹅 源禽流感病毒分离株进行全基 因组 免 疫的 自由放养 的水禽 ；辽 宁黑 山由于
的发病鹅 中首次分离到一株Ｈ Ｎ 亚型高 序列测定和遗传演化分析 ． ５１ 发现流行于我 使 用非法禽流感 疫苗 ．从而 延误 了疫情
致病 力禽流感病 毒 ．为我 国高 致病 力禽 国鸭源的禽流感病毒是 由 １９ ６年分离 的 的及 时报告 、诊断和控制 ．导致 ２ ０ ９ ０ ０万
６０ ０ ０多只野鸟。流行病学数据表 明，该 是一个未 解之谜 。我们 以遗传背景 高度 苗 。 该疫苗 于２ ０ 年底获得 新兽药证 书 ， ０３ 病首先 发生于斑 头雁 ～１ 天后传入与 接近但对 哺乳 动物感染和 致病 力截 然不 ２ ０ ８ ０ ０ ３年 ８ 开始 用于我 国出 口香港和澳 月 斑 头雁 同居一 岛的棕头鸥和 鱼鸥 ．又经 同的两株 鸭源 禽流感病毒 为模型 ．对禽 门活 鸡免疫 。２ ０ ０ ４年广东 省有 ９起疫情 过 ８ 天后传入鸬鹚和赤麻鸭 。 ～１ ０ 我们对 流感病毒跨越种 问屏障 的分 子机制进 行 暴发 而该地 区的所 有供 港和供 澳鸡场 该 次暴 发 中分离 自不同时 间点 和禽种 的 了探索 ． 发现 Ｐ ２ Ｂ 基因 ７ １ 点的单个 氨 均未发 生禽流感疫情 。第二 种是 Ｈ Ｎ 基 ０位 Ｂ１ 高 致病 力禽流感 病毒进行 了全 基 因组序 基酸改变 （ ｓ Ａ ｎ Ａ ｐ到 ｓ ）可使 不能感 染哺 因重 组病 毒灭活疫苗 。 Ｂ ２ 与Ｈ Ｎ 疫苗 相比 ． 列分析 ．发现这 些病 毒可分 为 ４个基 因 乳动物 的Ｈ Ｎ 亚型禽流感病毒获得感染 该疫 苗对鸡 的免疫保 护期 延长 ４个 月 以 Ｂ１
２ ０ 年 ５ 月份 ．我国青海湖的野 ０ ５ ～６
抗病毒药物体外抗H5N1亚型禽流感病毒作用的研究的开题报告
抗病毒药物体外抗H5N1亚型禽流感病毒作用的研
究的开题报告
一、研究背景
H5N1亚型禽流感病毒是一种高致病性病毒，能够引起禽类和人类的严重病症甚至死亡。
随着全球流感病毒变异的持续发展，H5N1亚型禽流感病毒的传播已经成为全球关注的焦点。
目前，预防和控制H5N1亚型禽流感病毒的传播主要依赖于疫苗和药物。
二、研究目的
本研究旨在探究抗病毒药物体外抗H5N1亚型禽流感病毒作用的机制和效果，为H5N1亚型禽流感病毒的防控提供实验依据。
三、研究内容
1.收集研究材料：H5N1亚型禽流感病毒、抗病毒药物等；
2.建立H5N1亚型禽流感病毒体外感染模型；
3.分别添加不同浓度的抗病毒药物，观察药物对病毒感染和复制的影响；
4.通过药效学实验分析药物的最佳用药方式和剂量；
5.探究抗病毒药物对H5N1亚型禽流感病毒感染细胞的影响及其作用机制；
6.分析H5N1亚型禽流感病毒和抗病毒药物之间的结合情况；
7.总结实验结果，提出应用建议。
四、研究意义
本研究将为H5N1亚型禽流感病毒的防控提供理论和实验基础，能够为相关的药物研发和病毒感染机制的探究提供一定的参考价值。
五、研究方法
本研究采用体外实验的方法，主要包括建立H5N1亚型禽流感病毒体外感染模型、添加不同浓度的抗病毒药物和分析药物的最佳用药方式和剂量、探究抗病毒药物对H5N1亚型禽流感病毒感染细胞的影响及其作用机制等。
六、研究预期结果
通过本研究，可以明确抗病毒药物对H5N1亚型禽流感病毒的抑制效果，阐明药物的作用机制，为H5N1亚型禽流感病毒的预防和治疗提供理论基础。
流感灭活效果验证方法的研究
流感灭活效果验证方法的研究【摘要】灭活是指用物理或化学手段杀死病毒、细菌等，但是不损害它们体内有用抗原的方法。
灭活病毒，会使病毒蛋白的高级结构受到破坏，蛋白不再有生理活性，所以失去感染，致病和繁殖能力，但是常规的灭活不影响病毒蛋白的一级结构，意思就是病毒蛋白的序列没有变化。
流感灭活是通过科技研究的方法，把致病微生物的致病能力去除，而保留其抗原特性，就是灭活。
致病微生物没有活性，也就是没有致病性，对人体才是安全的，才能给人接种。
而其保留了抗原特性，在进入人体后，人的免疫系统才能识别反应，从而产生对改病原微生物的保护性抗体，使人不再患病。
【关键词】H7N9禽流感流感灭活流行性感冒（Influenza）简称流感,是由流感病毒引起的一种急性呼吸道传染病。
流感病毒是引起流感的病原体，属正粘病毒科，系RNA病毒，直径80～120nm，呈球形或丝状。
流感病毒可分为甲（A）、乙（B）、丙（C）三型。
其特点是容易发生变异，其中甲型流感病毒最容易发生变异，可感染人和多种动物，为人类流感的主要病原，常引起大流行和中小流行。
乙型流感病毒变异较少，可感染人类，引起爆发或小流行。
丙型较稳定，可感染人类，多为散发病例，目前发现猪也可被感染。
[1]同样高致病性禽流感的大范围流行，不仅给养禽业造成了巨大的经济损失，而且由于禽流感可直接感染人并导致死亡，故对人类健康也带来严重的威胁。
我国为了有效的防控禽流感采取了多种有效的措施，对流感灭活效果进行研究。
1近年我国自主研制的重组禽流[CM19－22]感灭活苗(H5N1，Re-1株)在预防控制高致病性禽流感方面发挥了重要的作用通过对重组禽流感灭活苗和禽流感灭活苗对鸡免疫效果的对比研究观察用重组禽流感灭活苗接种10日龄、14日龄和21日龄的SPF鸡，接种后HI抗体效价无显著差异。
1.1将H5N1和H5N2疫苗分别接种21日龄SPF鸡，结果表明，H5N1和H5N2均能刺激SPF鸡产生较高的HI抗体；1.2分别接种三黄鸡，接种后21 d，H5N1能刺激三黄鸡产生较高的HI抗体；而H5N2不能刺激三黄鸡产生合格的HI抗体，与SPF鸡免疫组相比差异显著。
动物防疫技术
动物防疫技术
庄浪县畜牧兽医局 孙容非
首先祝贺大家在高手如云、竞争激烈的 选拔考试中脱颖而出，成为基层畜牧兽医推 广服务大家庭的一员。 我们的事业关乎骏马嘶鸣、爱犬依恋;我 们的事业关乎动物健康、食品安全;我们的事 业关乎动物繁衍、人类发展;我们的事业高尚 而平凡，使命和责任要牢记心间。
主讲内容
一.动物防疫工作的重要性。 二.目前我县动物防疫的两种模式。 三.目前我县主要防制的几种重大动物疫病。 四.动物防疫关键技术。 （一）.免疫技术。 （二）.消毒技术。 （三）.病死畜禽的无害化处理技术。 五.免疫抗体监测。 六.采血和血清分离。
四.动物防疫技术。
第一节：免疫技术 一：疫苗的贮藏与运输 （一）疫苗的贮藏 1、阅读疫苗的使用说明书 掌握疫苗的贮藏要求，严格按照疫苗说明书规定的要求贮藏。 2、选择贮藏条件 （1）选择贮藏设备 根据不同疫苗品种的储藏要求，设臵相应的贮藏设备，如低温冰柜、 电冰箱、冷藏柜等。 2）设臵贮藏温度 不同的疫苗要求不同的贮藏温度。 ①冻干活疫苗 一般要求在-15℃条件下贮藏，温度越低，保存时间越长。 如猪瘟活疫苗、鸡新城疫活疫苗等。
（4）注意事项 ①禽流感病毒感染的鸡或健康状况异常的鸡，禁止注射本 疫苗。 ②使用前应先使疫苗达到室温并充分摇匀。 ③疫苗开启后，限24小时内用完。 ④屠宰前28日内禁止使用。 ⑤用过的空疫苗瓶或开启后未用完的疫苗等，均应经消毒 后废弃，不可乱扔。 2、重组禽流感二价灭活疫苗（H5N1亚型，Re-1、Re-4株） （1）主要成分与含量 本疫苗中含有灭活的重组禽流感病 毒H5N1亚型Re-1、 Re-4株株。灭活前鸡胚液血凝（HA） 效价≥8log2。为乳白色乳状液。在2～8℃，有效期为 12个月。
②灭活疫苗 一般要求在2～8℃条件下贮藏，不能低于0℃，更不能冻结， 如口蹄疫灭活疫苗、禽流感灭活疫苗等； （3）避光，防止潮湿 所有疫苗都应贮藏于冷暗、干燥处，避免光照直射和防止受潮。 3、分类存放 按疫苗的品种和有效期分类存放，并标以明显标志，以免混乱而造成差 错。超过有效期的疫苗，必须及时清除并销毁。 4、建立疫苗管理台帐 详细记录出入疫苗品种、批准文号、生产批号、规格、生产厂家、有效 日期、数量等。应根据说明书要求存放在相应的设备中。 （二）疫苗的运输 1、包装 运输疫苗时，要妥善包装，防止运输过程中发生损坏。 2、保温 （1）冻干活疫苗 应冷藏运输。如果量小，可将疫苗装入保温瓶或保温箱 内，再放入适量冰块进行包装运输；如果量大，应用冷藏运输车运输。 （2）灭活疫苗 宜在2～8℃的温度下运输。夏季运输要采取降温措施，冬 季运输 采取防冻措施，避免冻结。
庄浪县畜牧兽医局 孙容非
首先祝贺大家在高手如云、竞争激烈的 选拔考试中脱颖而出，成为基层畜牧兽医推 广服务大家庭的一员。 我们的事业关乎骏马嘶鸣、爱犬依恋;我 们的事业关乎动物健康、食品安全;我们的事 业关乎动物繁衍、人类发展;我们的事业高尚 而平凡，使命和责任要牢记心间。
主讲内容
一.动物防疫工作的重要性。 二.目前我县动物防疫的两种模式。 三.目前我县主要防制的几种重大动物疫病。 四.动物防疫关键技术。 （一）.免疫技术。 （二）.消毒技术。 （三）.病死畜禽的无害化处理技术。 五.免疫抗体监测。 六.采血和血清分离。
四.动物防疫技术。
第一节：免疫技术 一：疫苗的贮藏与运输 （一）疫苗的贮藏 1、阅读疫苗的使用说明书 掌握疫苗的贮藏要求，严格按照疫苗说明书规定的要求贮藏。 2、选择贮藏条件 （1）选择贮藏设备 根据不同疫苗品种的储藏要求，设臵相应的贮藏设备，如低温冰柜、 电冰箱、冷藏柜等。 2）设臵贮藏温度 不同的疫苗要求不同的贮藏温度。 ①冻干活疫苗 一般要求在-15℃条件下贮藏，温度越低，保存时间越长。 如猪瘟活疫苗、鸡新城疫活疫苗等。
（4）注意事项 ①禽流感病毒感染的鸡或健康状况异常的鸡，禁止注射本 疫苗。 ②使用前应先使疫苗达到室温并充分摇匀。 ③疫苗开启后，限24小时内用完。 ④屠宰前28日内禁止使用。 ⑤用过的空疫苗瓶或开启后未用完的疫苗等，均应经消毒 后废弃，不可乱扔。 2、重组禽流感二价灭活疫苗（H5N1亚型，Re-1、Re-4株） （1）主要成分与含量 本疫苗中含有灭活的重组禽流感病 毒H5N1亚型Re-1、 Re-4株株。灭活前鸡胚液血凝（HA） 效价≥8log2。为乳白色乳状液。在2～8℃，有效期为 12个月。
②灭活疫苗 一般要求在2～8℃条件下贮藏，不能低于0℃，更不能冻结， 如口蹄疫灭活疫苗、禽流感灭活疫苗等； （3）避光，防止潮湿 所有疫苗都应贮藏于冷暗、干燥处，避免光照直射和防止受潮。 3、分类存放 按疫苗的品种和有效期分类存放，并标以明显标志，以免混乱而造成差 错。超过有效期的疫苗，必须及时清除并销毁。 4、建立疫苗管理台帐 详细记录出入疫苗品种、批准文号、生产批号、规格、生产厂家、有效 日期、数量等。应根据说明书要求存放在相应的设备中。 （二）疫苗的运输 1、包装 运输疫苗时，要妥善包装，防止运输过程中发生损坏。 2、保温 （1）冻干活疫苗 应冷藏运输。如果量小，可将疫苗装入保温瓶或保温箱 内，再放入适量冰块进行包装运输；如果量大，应用冷藏运输车运输。 （2）灭活疫苗 宜在2～8℃的温度下运输。夏季运输要采取降温措施，冬 季运输 采取防冻措施，避免冻结。
用于检测禽流感H5N1亚型Re-4、Re-5株免疫抗体血凝抑制试验试剂的分析
一
生 一 系列 突 变 而 转 变 为 具 有 严 重 致 死 性 的 高 致 病 性 禽 流 感 病 毒 。该 病 的毒 型 众 多 、 异 性 极 强 、 致 病 性 毒 株 能 在 短 变 低 期 内变 成 高 致 病 性 毒 株 （ Ｐ Ｖ） ， 而 给 养 禽 业 带 来 毁 灭 Ｈ ＡＩ 从 性 打 击 Ｌ 。 许多 研 究 表 明 ， 种亚 型 的 抗 体 只能 中 和 同 亚 型 ２ ］ 一
无 法 达 到 理想 的效 果 。
种类
鸭 １ 鸭 ２
鸭 ３
平 均 效价 Ｒ １ Ｒ －４ Ｒ 一５ ｅ ｅ ｅ
一
１ ０ ９
８
３ ３
２
１ ０ ８
８
９ ５
２
２ Ｏ
０
７ ２
０
２０ ０ ８年 １ ２月 ， 苏 省 兽 医 部 门 在 对 家 禽 实 行 例 行 监 测 江 时 ， 东 台市 、 安 县 个 别 农 户 饲 养 的 蛋 鸡 中 监 测 到 Ｈ Ｎ１ 在 海 ５ 禽 流 感 病 原学 阳性 样 品 。 据 秋 季 集 中免 疫 大 检 查 结 果 显 示 ， 江 苏 省 兽 医部 门组 织 对 全 省 家 禽 实 施 禽 流感 免 疫 ， 抗体 合 格 率 在 ８ ％ 以上 ， 于 国 家 规 定 ７ ％ 的 标 准 。在 这 么 高 的 保 ９ 高 ０ 护 力 下 仍 然 暴 发 Ｈ Ｎ１禽 流 感 ， 可 能 是 病 毒 发 生 了变 异 。 ５ 有 国家 禽 流 感 参考 实 验 室 对 阳性 样 品 开展 的 进 一 步 检 测 表 明 ，
的 病 毒抗 原 ， 同 亚型 的抗 体 无 交 叉保 护 性 。在 众 多 防 控 不 禽 流 感暴 发 的措 施 中 ， 苗 免 疫 仍 占 重 要 的 地 位 。ｗ Ｈ 已 疫 ０
生 一 系列 突 变 而 转 变 为 具 有 严 重 致 死 性 的 高 致 病 性 禽 流 感 病 毒 。该 病 的毒 型 众 多 、 异 性 极 强 、 致 病 性 毒 株 能 在 短 变 低 期 内变 成 高 致 病 性 毒 株 （ Ｐ Ｖ） ， 而 给 养 禽 业 带 来 毁 灭 Ｈ ＡＩ 从 性 打 击 Ｌ 。 许多 研 究 表 明 ， 种亚 型 的 抗 体 只能 中 和 同 亚 型 ２ ］ 一
无 法 达 到 理想 的效 果 。
种类
鸭 １ 鸭 ２
鸭 ３
平 均 效价 Ｒ １ Ｒ －４ Ｒ 一５ ｅ ｅ ｅ
一
１ ０ ９
８
３ ３
２
１ ０ ８
８
９ ５
２
２ Ｏ
０
７ ２
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２０ ０ ８年 １ ２月 ， 苏 省 兽 医 部 门 在 对 家 禽 实 行 例 行 监 测 江 时 ， 东 台市 、 安 县 个 别 农 户 饲 养 的 蛋 鸡 中 监 测 到 Ｈ Ｎ１ 在 海 ５ 禽 流 感 病 原学 阳性 样 品 。 据 秋 季 集 中免 疫 大 检 查 结 果 显 示 ， 江 苏 省 兽 医部 门组 织 对 全 省 家 禽 实 施 禽 流感 免 疫 ， 抗体 合 格 率 在 ８ ％ 以上 ， 于 国 家 规 定 ７ ％ 的 标 准 。在 这 么 高 的 保 ９ 高 ０ 护 力 下 仍 然 暴 发 Ｈ Ｎ１禽 流 感 ， 可 能 是 病 毒 发 生 了变 异 。 ５ 有 国家 禽 流 感 参考 实 验 室 对 阳性 样 品 开展 的 进 一 步 检 测 表 明 ，
的 病 毒抗 原 ， 同 亚型 的抗 体 无 交 叉保 护 性 。在 众 多 防 控 不 禽 流 感暴 发 的措 施 中 ， 苗 免 疫 仍 占 重 要 的 地 位 。ｗ Ｈ 已 疫 ０
禽流感H5N1新灭活苗在生产应用中免疫抗体变化规律的初步调查
表 ２ 不 同鹅 群 免疫后 抗体 效 价
国 内某 厂 家 生 产 的 重 组 禽 流 感 Ｈ ５ 亚型（ Ｒ ｅ 一 ４ 株＋
Ｒ ｅ 一 ６ 株） 二价灭活疫苗 ， 禽流感 Ｈ ５ 亚型 Ｒ ｅ 一 ４ 株、 Ｒ ｅ 一 ６ 株
抗 原 及标 准 阳性 血 清 。
１ ． ２ 试 验动 物及 分组
不能完全满足 实际生产需求 。此外 ， 固始县地处 中原 ， 为南北交叉地 带 ， 流行毒株甚为 复杂 ， 因此 只有通过优化免疫程序来迅速提升和维 持禽群 的 抗体水平 ， 以期达到理想 的保护线 ， 其具体解决途 径还需要进一步的研究探索 。
（ 收稿 日期 ： ２ ０ １ ３ — ０ ４ — ２ ２ ）
亚型不 同 ， 各亚型 之间的交叉保护存 在一定 的差 异 ， 而 当前所使用的流感病毒疫苗 的亚型相对 固定 ， 因此 只有 提 高当前所用疫苗 免疫抗体 的水 平才能对 流行毒株 产 生较好 的交叉保 护和抑制作用 。在实际生产当中 ， 要求 免疫后抗体水平达到 ８ １ ｏ ｇ ２ 以上 ， 才能在疫病流行季节更 好地实现鸡群的安全生产 。按照 当前 免疫程 序 ， 从使用 疫苗后检测 的效果上来看 ， 各鸡群之间及各鹅群之间抗 体检测结果差异不大。鸡群在首免后两种抗体均达合格 线（ ４ １ ｏ ｇ ２ ） 以上 ， 而Ｒ ｅ 一 ６ 抗体产生较慢 ， 经过 ３ 次免疫后
免疫程序 ： １ ４日 龄首免， ３ ５日 龄２ 免， １ ２ ０日龄 ３ 免， 对 照组每次注射 ０ ． ５ ｍ ｌ 生理盐水。
试验禽群按首免 ０ ． ３ ｍ ｌ ／ 羽， ２ 免和 ３ 免０ ． ５ ｍ ｌ ／ 羽 的剂
表２ 结果表明 ， 鹅群免疫后 Ｒ ｅ 一 ６ 抗体产生较慢 ， ２ 免 后才能达到４ １ ｏ ｇ ２ 的合格水平 ， ３ 免后抗体水平才与鸡群 ２ 免的结果相当， 且抗体的离散度相对较大整齐度差。
国 内某 厂 家 生 产 的 重 组 禽 流 感 Ｈ ５ 亚型（ Ｒ ｅ 一 ４ 株＋
Ｒ ｅ 一 ６ 株） 二价灭活疫苗 ， 禽流感 Ｈ ５ 亚型 Ｒ ｅ 一 ４ 株、 Ｒ ｅ 一 ６ 株
抗 原 及标 准 阳性 血 清 。
１ ． ２ 试 验动 物及 分组
不能完全满足 实际生产需求 。此外 ， 固始县地处 中原 ， 为南北交叉地 带 ， 流行毒株甚为 复杂 ， 因此 只有通过优化免疫程序来迅速提升和维 持禽群 的 抗体水平 ， 以期达到理想 的保护线 ， 其具体解决途 径还需要进一步的研究探索 。
（ 收稿 日期 ： ２ ０ １ ３ — ０ ４ — ２ ２ ）
亚型不 同 ， 各亚型 之间的交叉保护存 在一定 的差 异 ， 而 当前所使用的流感病毒疫苗 的亚型相对 固定 ， 因此 只有 提 高当前所用疫苗 免疫抗体 的水 平才能对 流行毒株 产 生较好 的交叉保 护和抑制作用 。在实际生产当中 ， 要求 免疫后抗体水平达到 ８ １ ｏ ｇ ２ 以上 ， 才能在疫病流行季节更 好地实现鸡群的安全生产 。按照 当前 免疫程 序 ， 从使用 疫苗后检测 的效果上来看 ， 各鸡群之间及各鹅群之间抗 体检测结果差异不大。鸡群在首免后两种抗体均达合格 线（ ４ １ ｏ ｇ ２ ） 以上 ， 而Ｒ ｅ 一 ６ 抗体产生较慢 ， 经过 ３ 次免疫后
免疫程序 ： １ ４日 龄首免， ３ ５日 龄２ 免， １ ２ ０日龄 ３ 免， 对 照组每次注射 ０ ． ５ ｍ ｌ 生理盐水。
试验禽群按首免 ０ ． ３ ｍ ｌ ／ 羽， ２ 免和 ３ 免０ ． ５ ｍ ｌ ／ 羽 的剂
表２ 结果表明 ， 鹅群免疫后 Ｒ ｅ 一 ６ 抗体产生较慢 ， ２ 免 后才能达到４ １ ｏ ｇ ２ 的合格水平 ， ３ 免后抗体水平才与鸡群 ２ 免的结果相当， 且抗体的离散度相对较大整齐度差。