国产微柱凝胶免疫检测试剂卡检测孕妇 IgG血型抗体效价的

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血型不完全抗体检测卡—母体IgG抗体效价检测

血型抗体）或在所有孔中分别加入50 l标准O型0.5-0.8%工细胞悬液（测定孕妇ABO血型系统以外IgG血型抗体）；
5）37°C孵育15分钟；
6 ）离心5分钟（9rpm2分钟，15rpm3分钟）；
7）肉眼观察结果。
结果判定：
阳性结果：红细胞抗原与相应抗体在微柱凝胶中形成的特异性抗原抗体复合物浮在凝胶表面或胶中，为阳性反应。
5、试剂卡应放在18-25C储存，如若长期放在4C冰箱，建议每1-2个月取出，用专用离心机离心一次，以防止干胶或产生气泡。
6、每日试验前，先取出微柱凝胶卡放置至室温。
7、红细胞悬液的浓度控制在0.5% - 0.8%之间。
**医院文件编号:
**
输全抗体检测卡一母体IgG抗体效价检测=r八 =n =—
页码：第1页，共1页
反应原理
微柱凝胶免疫反应的本质是红细胞凝集试验，也可称之微柱凝胶血凝试验（MicrocolumnGel Heamagglutination As，aMGHA ）。
试剂材料：
1、DTT （或2-Me）应用液2、妻子血清3、效价检测卡4、丈夫0.5-0.8%工细胞悬液
阴性结果：红细胞抗原无相应的抗体结合，不出现特异性抗原抗体复合物，红细胞沉于微柱凝胶的尖底部，为阴性反应。
反应强度：特异性红细胞抗原抗体复合物位于胶表面，为强阳性反应；复合物在胶中，为弱阳性反映；愈靠近胶底部颗粒愈小，反应愈弱。
完全溶血凝胶和液体无凝集或未凝集的红细胞，液体出现透明清澈红色
不完全溶血残留红细胞在胶表面、胶中或胶底部，液体出现透明清澈红色
混合凝集红细胞复合物位于凝胶表面和凝胶底部
注意事项
1、血清标本：血清标本必须充分去除纤维蛋白，否则标本中纤维蛋白在微柱凝胶中析出，阻碍红细胞沉淀，呈假阳性反应。

微柱凝胶检测母体IGG意义方法学

探讨微柱凝胶检测母体IGG的意义及方法学的研究【摘要】目的：探讨微柱凝胶法在新生儿溶血病实验诊断中测定孕妇血清中igg抗体效价的可行性及方法学。

方法：孕妇血清用2-me处理做倍量稀释后，采用微柱凝胶法测定igg抗体效价。

同时与试管法进行对照比较。

结果：用微柱凝胶法和试管法同时检测孕妇血清中的igg抗体效价，其结果符合率为84.5%（93／110），其中igg抗体效价0.05）。

结论：应用微柱凝胶法测定孕妇血清igg 抗体效价，能够使实验方法简单化、自动化，使实验操作标准化，判读结果直观、与试管法相比减少了肉眼判读结果时的人为误差。

方法灵敏度高，结果准确可靠。

【关键词】微柱凝胶法；igg抗体效价；方法学【中图分类号】r392.5【文献标识码】a【文章编号】1008-6455（2011）04-0063-01explore micro-column gel detection maternal igg the significance and the methodological researchli jiuwen chen changda lin jie et al.【abstract】objective:to study the micro-column sol-gel in the neonatal hemolysis disease experimental determination and diagnosis of pregnant women serum igg antibody titer feasibility and methodology. methods: pregnant with 2-serum me processing do times diluted quantity, applyingmicro-column gel method.weakness igg antibody titer. at the same time and the test tube method were compared for comparison. results: use micro-column sol-gel and test tube method while pregnant women in the serum igg detection antibody titer, its result accuracy of 84.5% （93/110）, including igg antibody titer 0.05）. conclusion: the application of sol-gel micro-column determination of pregnant women’s serum igg antibody titer, can make the experiment method over-simplication, automation, making the experiment operation standardization, interpretation results with test tube method compared intuitive and reduce the naked eye centrifuged results of human error. methods high sensitivity, results are correct and reliable.【key words】micro-column sol-gel;antibody titerigg;methodology1 材料与方法1.1 检测对象:2009年9月至2010年12月在本院门诊围产保健及住院待产的孕妇110例，年龄在23周岁～35周岁，孕妇abo血型均为o型，且丈夫血型为a型、b型或ab型。

微柱凝胶法检测ABO母婴血型不合孕妇血清抗-A(B)IgG效价1154例的结果分析

ｉｃｍｐｔｌｐｅｎｎｏｎｂｃｏｏｕｅｔｃｎｌｇｎｏａｉｅｒｇａｔｗｍｅｙｍｉｒｃｌｍｎｇｌｅｈｏｏｙｂ
ＤＳ— ｏｇＯｏｇＵ，ＱＮｉｈｎ，ＺＵＹｎ，ＹＡＱＮＩ
ＸｅｌｇＬＵＷｅ－￣ＴｅＴｉｆｌｔｄＨｏｐｔｆｕａ－ｅｎｖｒｉ，ｕｎｚｏ１６０Ｃｉａｕ — ｉ，ＩｎｄｈｒＡｉａｅｓｉｌＳｎＹｔ３ｎＵｉｓｙＧａｇｈｕ５Ｏ３，ｈｎｎｈｄｉａｏｅｔ【ｓｒｃ】ｏｂｅｔｅＴｎｅｔａｅｔｅｃｉｉｌｉｎｃｎｅｏｅｅｔｎｔｉｒｏｅｕｎｉＡ（）ＩＧｉＡｂｔａｔｊｃｉｏｉｖｓｇｔｈｌｃｇｉａｃｆｔｃｏｅｔｅｆｒｍａｔｖｉｎａｓｆｉｄｉｈｔｓ — Ｂｇｎ１１４ＡＯｂｏｄｇｕｃｍｐｔｌｐｅｎｎｏｎｂｉｏｏｕｅｔｃｎｌｇ（Ｔ）ＭｅｈｄＤｔｔｈｔｒ５ＢｌｒｐｉｏａｉｅｒｇａｔｍｅｙｍｃｃｌｍｎｇｌｅｈｏｙＭＧ．ｔｏｓｅｃｔｅｔｅｏｏｎｂｗｒｏｅｉ
实用医技杂志２１年８０１月第ｌ卷第８８期
ＪｕａｏＰａｔａＭｅｉｌｅｎｕｓＡｓ２１，ｏ１，０８ｏｒｌｆｒｉｌｄａＴｃｉｅ，ｕｔ０１Ｖ１８Ｎ．ｎｃｃｃｈ Ⅱ ．
・
８５・０
左右对１１４孕妇中的３０例进行抗一Ｂｇ５４Ａ（）ＩＧ效价的二次随机测定，发现５．％（１１１孕妇抗体效价从阴性转０５５／０）０

母体IgG抗体效价检测卡操作规程

孕妇血清IgG抗体效价检测操作规程[样本要求]：血样标本最好采用EDTA抗凝（也可以用枸橼酸钠等抗凝），用血清代替血浆进行检测时，用前离心，2000g×10min，防止纤维蛋白干扰反应结果。

[样品准备]：试剂配制：用985ulPH7.4的PBS(或者生理盐水)溶解15ul二巯基乙醇（2-Me）,即为0.2M(2-Me)应用液,密封，避光，置2---6℃保存.红细胞标本的制备：用生理盐水配置红细胞悬液，红细胞最终浓度为1%左右.血清标本的制备：将被检者静脉血采入含兔脑粉或其它促凝剂的试管中,10分钟后离心取上清;或者将被检者静脉血采入无抗凝剂试管中,4℃放置12小时,或37℃放置2小时后离心,2000Rpm,10分钟,取上清.该上清不得有絮状物或沉淀；[配套试剂]：孕妇IgG抗体效价卡，标准A、B、O红细胞（取决于父亲血型），0.2M(2-Me)应用液[实验步骤]1、试剂卡室温平衡，离心一次，标记编号；2、配制中和血浆：先取待检者血浆200微升与生理盐水600微升做4倍稀释，然后取稀释后的标本和0.2M巯基乙醇(2-Me)应用液各200ul，混匀，37℃孵育30---60分钟，（充分破坏标本中IgM类抗体）既得到孕妇的中和血浆。

34、在所有孔中加入50ul健康人O型1%红细胞悬液(测定孕妇ABO血型系统以外IgG血型抗体)或所有孔中加入50ul健康人A型或B型1%红细胞悬液(测定孕妇ABO血型系统IgG血型抗体)，然后加入上述表格中稀释的中和血浆各50ul5、把加有血浆和红细胞的微柱卡置37 ℃专用孵育器孵育15分钟；6、用专用离心机离心5分钟（900r/min2分钟1500r/min3分钟）。

判定结果。

[结果判定]效价值：产生3+凝集的最高稀释度，其倒数即为效价。

[参考值]1、RH系统抗体效价16有临床意义2、ABO系统抗体效价64有临床意义[注意事项]1.据文献报道微柱凝胶法检测出的母体效价值比常规聚凝胺和抗人球蛋白试管法高出1-2个滴度（根据P.L.Mollison所著教材《临床医学中的输血（Blood Transfusion in Clinical Medicine）》）2. 红细胞标本一定不能被细菌污染，否则出现假阳性反应。

微柱凝胶技术测定孕妇IgG抗A(B)效价分析

10no效价大于或等于164者28例1273ob效价大于或等于164者39例1773oab型夫妇iggb效价均大于或等于164者10例454见表型孕妇igg抗体效价结果血型妻夫igg抗体164oa88ob110oab22合计220新生儿溶血病是由于母亲与胎儿血型不合引起母亲因妊娠而被免疫时体内的iggab经胎盘侵入胎儿血循环这类igg抗体通过胎盘作用于胎儿红细胞发生同种免疫反应使之产生不同程度的溶血严重者可造成胎儿死亡
检验医学与临床２０１３年４月第１Ｏ卷第８期
ＬａｂＭｅｄＣｌｉｎ，Ａｐｒｉｌ２０１３，Ｖｏ１．１０，Ｎｏ．８
・９９３・
表１不同年龄段寄生虫感染情况［（）］．
年龄（岁） ” 蛔虫钩虫鞭虫华支睾吸虫合计
例，Ｏ — Ｂ型夫妇ＩｇＧ抗Ｂ效价大于或等于ｌ：６４者３９例，Ｏ－ＡＢ型夫妇ＩｇＧ抗Ａ（Ｂ）效价均大于或等于１：６４者１Ｏ
例。结论微柱凝胶法检测Ｏ型孕妇血清ＩｇＧ抗Ａ（Ｂ）效价可有效地预防因母婴ＡＢＯ血型不舍引起的新生儿溶
［２］中华人民共和国卫生部疾病控制司．肠道寄生虫病防治
手册［Ｍ］．福州：福建教育出版社，１９９６．
应是注意饮食卫生和个人卫生，进食之前洗手，不吃不干净的瓜果。６岁以上人群的感染率上升到０．３２％，感染的虫种开始增多，以华支睾吸虫为首，其次为钩虫，这可能是由于随着年龄的增长，活动范围的扩大和饮食的多样化造成的。华支睾吸虫

3种微柱凝胶抗人球蛋白卡在检测孕妇IgG血型抗体效价中的应用比较

８２７
ＪＢｎｂｄＣｌ，ｕｕｔ０１，１３Ｎ．ｅｇｕＭｅｏｌＡｇｓ１Ｖｏ．６，ｏ８２
［文章编号］００２０（０１０－７－１０－０２１）８８２４２００
・
检验医学・
３种微柱凝胶抗人球蛋白卡
ＧＵＡＮＺｅｇＺＨＡＮＪｎ，ＨＥＮＬ，Ｏｈｎ，ＧｕＣ பைடு நூலகம்ｉＧＵＢｏ
（ｅａｔｅｔｆＴａｓｓｎＴｅＤｐｒｎｏｒｎｕｉ，ｈｍｆｏ
ｔｆｌｔｏｉｌｆＢｎｂｄｃｌｏｅｅＢｎｂｎｕ２３０，ｈｎ）ｆｉｅＨｓｔｅｇｕＭｅｉｌｇ，ｅｇｕｈｉ３０４ＣｉＡａｄｐａｏｉａＣｌＡａ
在检测孕妇ＩｇＧ血型抗体效价中的应用比较
管政，张军，丽，陈郭博
［要］目的：摘比较Ｂｏｕ、ｉｄ和ＢｏｕｉｎＤａＸＭｅｉｅ３种抗人球蛋白检测卡在检测孕妇ＩＧ血型抗体效价中的差异，Ｖｇ并分别计算它们的医学决定值。方法：３种检测卡和试管法平行检测１７例与丈夫ＡＯ血型不合的Ｏ型孕妇血清ＩＧ抗．Ｂ效价水平。用３ＢｇＡ（）结果：ｉｕ、ｉｄ和ＢｏｕＢｏｎＤａＸＭｅｉｅ卡测得的ＩＧ抗＿（）ＶｇＡＢ的平均效价分别为５．６３．６、１．４５．２、０．７５．８，６３（０７）１１９（９０）１４４（８０）试管法为２．１１．１，８３（６４）它们与试管法的差异均有统计学意义（Ｐ＜００）并均呈正相关关系（．１，ｒ＝０９００９８，：０９３．５，．３；．１，０９１ｒ０８３０８３。Ｄａｄ卡与Ｂｏｕ．０；：．７，．８）ｉＭｅｉｅ卡测得的结果差异无统计学意义（ＶＰ＞００）ｉｕ．５。Ｂｏｎ卡与Ｄａｄ卡或与ＸｉＭｅＢｏｕｉｅ卡之间差异均有统计学意义（００）但其结果与Ｄａｄ卡和Ｂｏｕ的结果均呈高度正相关关系（＝０９０ＶＰ＜．１，ｉＭｅｉｅ卡Ｖｒ．６，０９７ｒ０９８０９０。通过回归方程计算Ｂｏｕ、ｉＭｅ．１；＝．４，．４）ｉｎＤａｄ和Ｂｏｕ卡检测孕妇ＩＧ抗一Ｂ）ＸｉＶｅｇＡ（效价时的医学决定值分别为１２１２、６（２）２５２９。结论：２（２）２７２８、１（２）３种抗人球蛋白检测卡较之试管法具有高灵敏度，都需重新界定医学决定值。国产Ｂｏｕ的灵敏度低于进口Ｄａｄ和Ｂｏｕｉｎ卡ＸｉＭｅｉｅ卡，其试验结果与进口检测卡试验结果呈高度正相关。进口Ｄａｄ和Ｖ但ｉＭｅＢｏｕ抗人球蛋白检测卡具有相同程度的灵敏度。ｉｅＶ

微柱凝胶法在检测孕妇IgG抗体中的应用研究

差异有显著性（１．５１．１Ｐ＜Ｏ０１。微柱凝胶法阳性率明显高于经典法（一２．６８一１．８８８１，５８；．０）１５８，３７９；
Ｐ＜００）．１。微柱凝胶法和经典抗人球蛋白法高度相关，关系数ｒ别为０８８、．４９结论相分．４５０８９．敏度明显高于经典法，重新设定临床意义决定值。需【键词】ＩＧ抗体；柱凝胶法；典抗人球蛋白法；妇关ｇ微经孕【图分类号】Ｒ４．中４６６【献标识码】Ａ文【文章编号１１７—２７２１）２１９０６ｔｃ］ＯｂｅｔｅＴｏａｅｔｅｇｌｃｏｏｕｓａｎｈｏｖｎｉａｔｂｅｔｏＧａｔＢ）ＡｓａｔｒｊｃｉｏｃｍｐｒｅｍｉｃｌｖｈｒｍｎａｓｙａｄｔｅｃｎｅｔｎｌｕｅｔｓｆｒｇｎｉｏＩＡ（
Ｊｎｏ医ｎｇｅｃ学ｌ报ｏｏＡｐ，（成ｒａｌｆＣｈｅｄｕＭｅｄａＣｏｌｅｅ２１ｒ５）邓学院ｃｌｇｉ … ２ｏｕｄａｉ
ｄｉ１．９９ｊｉｒ１７ — ２７２１．２０６ｏ：０３６／ｓＬ６４２５．０００．１．ｓ
（ｐｒｎｒｎｆｓｎ，ｅｔｓｉｌｆＰｎｈｈａ，ａｚｉｕＳｃｕｎ６６，ｈｎ）ＤｅａｔｔｆＴａｓｕｉＣｎｅＨｏｐｔａｚｉｕＰｎｈｈａ，ｉａ０７Ｃｉａｍｅｏｏｒａｏｈ１７

微柱凝胶法在孕妇IgG抗体效价检测中的临床应用

用价值。
微柱凝胶法检测灵敏度高，对检测孕妇产前ＩＧ抗体效价具有重要的临床应ｇ
【关键词】微柱凝胶；孕妇；ＩＧ抗体效价；检测ｇ
新生儿溶血病（Ｄ）由母体内存在的与其胎儿红细胞不ＨＮ是
合的ＩｇＧ血型抗体而引起的同种被动免疫疾病。最常见的是ＡＯ血型系统，次为ＲＢ其ｈ血型系统。所以产前检查孕妇ＩＧ抗ｇ体效价对预防新生儿溶ｍ病Ｈｍｌｉｄｓａｅｏｅｎｗｏｅｏｔｉｓｆｔｅｂｒｙｃｅｈｎ
（Ｄ）ＨＮ以及为其提供早期辅助诊断和产前治疗起积极作用，笔者所在医院以前使用经典抗球蛋白法检测孕妇ＩＧ抗体效价，ｇ此方法操作繁琐，时间长，大批量标本检测困难，微柱凝胶是一种新型的血型血清技术，笔者使用微柱凝集法检测孕妇ＩＧ抗Ａ（）ｇＢ
一
孕妇血清ＩＧ抗ＡＢ）价。结果ｇ（效
微柱凝胶法检测抗体效价 ≥６时，４才使新生儿患新生儿溶血病Ｈｍｌｉｄｓａｅｏｅｎｗｏｎｅｏｔｉｓｆｈｅｂｒｙｃｅｔ
（Ｄ，ＨＮ）当效价达到１２０４时，发病率可达１０。结论０％
［］钦辉．床输血学．海：海科学技术出版社，００１张临上上２０：
９７ — １００．
统后遗症。通常临床以１６：４为临界值，实验结果表明当ＩＢ）ｇＡ（
≤３２无一例发病，ＩＡ（）６当ｇＢ为４时有一例，果母亲血清中如ＩＧ抗ＩＡＢ效价／６提示婴儿有受害的机会，密切观察，ｇｇ（）＞４，需如果母亲血清中ＩＧ抗ＩＡ（效价 ≥ １８时，示婴儿很可能受ｇｇＢ）２提

微柱凝胶法抗人球蛋白试验检测孕妇IgG抗体效价诊断新生儿溶血病的应用研究

微柱凝胶抗人球蛋白试验试管法抗人
球蛋白试验
和ＦＹＱ型免疫微柱孵育器（春博研科学仪器有长
限责任公司生产）。光学显微镜（日本ＯｙｕＸｌｍｐｓ－Ｃ
３）１。
Hale Waihona Puke ３６１２１８
２５
和发病机制探讨口］中国介入影像与治疗学，０４１１：．．２０，（）３［］５尚建敏，进东，寅学，．６层螺旋Ｃ血管成像技术在主动夏徐等１Ｔ脉夹层中的临床价值口］放射学实践，０８２（１：２４．２０，３１）１１．［］ｔｎｏ６ＳａｓｎＡＷ，ｚｅＪＨｏｔｅａ．ｅｅｒｔｇａｈｒｓｌ— ＫａｍｉＦ，ｌｅＲ，ｔ１Ｐｎｔａｉｔｅｏｃｅｒｉｎ
纵向发展形成不同程度的夹层动脉瘤或由于壁内血肿压迫造成邻近主动脉薄弱而形成真性动脉瘤ｌ。＿７］
这三种病变在某些患者表现为２或３个病变个
［］４刘玉清．主动脉夹层、壁问血肿和穿透性粥样硬化性溃疡：影像学
微柱凝胶法免疫检测技术是２０世纪９Ｏ年代进入我国并逐步广泛应用于临床的实验室项目检测。
抗人球蛋白试验是目前对ＩＧ抗体检测国际公认ｇ
试验与试管法抗人球蛋白分别对２５怀孕３个月２例

两种方法测定孕妇 IgG 型抗-A(B)效价的比较

细胞术检测相关系数ｒｓ一０．６９４。微柱凝胶技术检测的变异系数小于流式细胞检测变异系数（Ｐ＜０．０５）。结论ＡＢ０血型不合
多见于０型孕妇，流式细胞检测与微柱凝胶技术具有很好的相关性，流式细胞术重复性好于微柱凝胶技术。
ｔｉ — ＡＢＯＩｇＧａｎｔｉｂｏｄｙｉｎｔｈｅＯｂｌｏｏｄｔｙｐｅｐｒｅｇｎａｎｔｗｏｍｅｎ（ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌｇｒｏｕｐ）ａｎｄｔｈｅＡ／Ｂｂｌｏｏｄｔｙｐｅｐｒｅｇｎａｎｔｗｏｍｅｎ（ｃｏｎｔｒｏｌ
国际检验医学杂志２０１４年７月第３５卷第１４期
ＩｎｔＪＬａｂＭｅｄ，Ｊｕｌｙ２０１４，Ｖｏ１．３５。Ｎｏ．１４
・
检验技术与方法・
两种方法测定孕妇ＩｇＧ型抗一Ａ（Ｂ）效价的比较
杨树法，李洋远，翟燕红，王文娟，赵娟
（首都医科大学附属北京妇产医院北京妇幼保健院，北京１０００２６）
摘要：目的对微枉凝胶技术和流式细胞术两种检测ＩｇＧ型抗ＡＢ０抗体的方法进行比较。方法以０型孕妇为实验组，Ａ／Ｂ型孕妇作为对照组，分别用微柱凝胶技术和流式细胞术检测ＩｇＧ型抗ＡＢＯ抗体，分析实验组和对照间阳性率的差别以及两

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作者简介 :李凌波 (1976 年 - ) ,男 ,硕士 ,助理研究员 ,主要从事血液免疫学研究 ,E2mail :lilingbo @bioxun. com。
生的重要依据[1] 。常用方法是传统的试管抗人球蛋白试验 ( Test tube Coombs test ,TT2Coombs’T) 。微柱凝胶抗人球蛋白试验 (Microcolumn gel Coombs test ,MG2 Coombs’T) 因快速、敏感、简便、结果直观 ,应用日益广泛。本研究分别采用试管抗人球蛋白试验法和国产微柱凝胶免疫检测试剂卡检测孕妇血型 IgG 抗体
1∶8 、1∶16 、1∶32 、1∶64 、1∶128 、1∶256 、1∶512 、1∶1 024 、 1∶2 048的血清 50 μl ,置专用孵育器内 37 ℃孵育 15 分钟 ,再放入专用离心机内离心 5 分钟 (900 r/ min ,2 分钟 ,1 500 r/ min ,3 分钟) 。结果以出现 1 + 凝集的最高稀释度的倒数为抗体效价。 1. 3. 3 TT2Coombs’T 取经 22ME 处理的 1∶2 、1∶4 、 1∶8 、1∶16 、1∶32 、1∶64 、1∶128 、1∶256 、1∶512 、1∶1 024 、 1∶2 048 ,11 个稀释度的血清各 100μl ,用 4 %A 型、B 型标准红细胞悬液 ,抗人球蛋白试剂做 IgG 抗2A 、抗 2B 效价的测定[2] 。结果以肉眼观察产生 1 + 凝集的最高稀释度的倒数为抗体效价。 1. 4 统计学处理采用 Excel 统计软件进行数据处理分析 ,抗体效价先做对数转换 ,MG2Coombs’T 与 TT2Coombs’T 效价比较采用配对 t 检验 ,并进行直线相关性分析。阳性检出率比较采用四格表配对资料 χ2 检验验证。
李凌波等国产微柱凝胶免疫检测试剂卡检测孕妇 IgG血型抗体效价的实验研究第12 期
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水平 ,比较两法测孕妇 IgG效价的差异 ,为试剂卡的应用提供有意义的测母体 IgG 抗体效价的检验标准。
1 材料与方法
111 研究对象来自杭州艾迪康医学检验中心 ,妊娠 12～40 周 ,血型为 O 型 RhD 阳性孕妇血清 524 例 ,配偶均为非 O 型 RhD 阳性者 ,其中丈夫血型为 A 型、B 型各 262 例。 1. 2 试剂及仪器 MG2Coombs’试剂卡、抗人球蛋白试剂 (羊免疫血清) 、ABO 血型反定型用红细胞试剂盒 (4 %标准红细胞) 、ABO 血型反定型用红细胞试剂盒 (0. 8 %标准红细胞) 、0. 2 mol/ L 巯基乙醇 (22ME) 实验用试剂 ,以上均由长春博迅生物技术有限责任公司生产 ;微柱凝胶免疫分析技术专用离心机和孵育器由长春博研医学生物仪器公司生产 ;DK2600 型电热恒温水槽由上海申贤恒温设备厂生产。 1. 3 方法 1. 3. 1 标本预处理 400μl 血清标本和 400μl 0. 2 mol/ L 22ME 应用液 (22ME 用前摇匀) 充分混匀 ,试管口以石蜡封口膜封紧 ,置 37 ℃水浴 60 分钟 ,充分裂解血清中 IgM 类抗体 ,并采用单克隆抗2A 、抗2B 做灭活对照。吸经 22ME 处理的血清用 pH 7. 0～7. 4 生理盐水做倍比稀释 ,稀释度分别为 1∶2 、1∶4 、1∶8 、 1∶16 、1∶32 、1∶64 、1∶128 、1∶256 、1∶512 、1∶1 024 、1∶2 048 。用盐水法确定 1∶2 稀释度管 IgM 抗体已被破坏 ,分别测 IgG 抗2A 、抗2B 效价 ,且均取双管做平行试验。 1. 3. 2 MG2Coombs’T 取 MG2Coombs’试剂卡做好标记 , 在微管内各加入 50 μl 与孕妇丈夫同型的 018 %标准红细胞悬液 (测定孕妇 ABO 系统 IgG血型抗体) ,再依次加入上述处理的稀释度为 1∶2 、1∶4 、
[ Key words] Microcolumn gel Coombs test ;test tube Coombs test ; IgG antibody titre
胎儿及新生儿溶血病 ( Haemolytic disease of the fetus and the newborn ,HDN) 包括 Rh 血型及 ABO 血型等溶血病 ,后者在我国较为常见。测定孕妇血清中 IgG类抗2A 和抗2B 效价是预测和判断 ABO2HDN 发
LI Ling2Bo , WANG Dong2Qian , CHEN Yun2Sheng , LI Ning , CHEN Wei2Jia. Changchun Bioxun Biotechnology Limited Company , Changchun 130012 , China
[ Abstract] Objective :To compare microcolumn gel Coombs test and test tube Coombs test for IgG anti2A and anti2B titre in serum of pregnant women with blood type O. The critical titre for IgG anti2A and anti2B should be established in domestic microcolumn gel Coombs’test. Methods :524 blood samples of pregnant women with blood type O ,whose husbands were of blood type A or B ,were detected simultaneously by domestic microcolumn gel Coombs’test and test tube Coombs test. The results were analyzed using paired“t ”test “, χ2”test and regression analysis. Results :IgG anti2A mean titres determined by the two methods separately were 249. 98 and 120. 85 ,and IgG anti2B mean titre were 156. 98 and 76. 38. IgG anti2A and anti2B titration in domestic microcolumn gel Coombs’test showed significantly higher titres (mean 2. 07 fold and mean 2. 06 fold) than in test tube Coombs test in all samples studied ( t = 19. 64 , P < 01001 and t = 15. 39 , P < 01001) . The two methods had a high correlation ,and the coefficient of correlation between the two methods for IgG anti2A and anti2B separately were 0. 885 7 ( P < 01001) and 0. 899 6 ( P < 01001) . Based on regression equation ,the critical titre for IgG anti2A and anti2B in domestic microcolumn gel Coombs’test separately were 128 and 116. IgG anti2A and anti2B antibody titre exceeding 64 was designed as positive. The positive rates of IgG anti2A determined by the two methods were 73. 66 %、47. 33 % separately ,and those of IgG anti2B were 52. 29 %、34. 35 % separately ,where significantly statistical difference was found between the two methods (χ2 = 69. 00 , P < 0101 ;χ2 = 47. 00 , P < 0101) . Conclusion :Domestic microcolumn gel Coombs’test is superior to test tube Coombs test. It has the further advantage of rapid ,simple and sensitive for determination of IgG level of specific antibodies in serum of the pregnants. The critical titre should be established in view of the high sensitivity of domestic mi2 crocolumn gel Coombs’test ,which provides a reliable parameter for clinical diagnosis.
的差异 ,对国产微柱凝胶试剂卡检测孕妇 IgG效价的决定值进行界定。方法 :用国产微柱凝胶试剂卡和传统试管法平行检测 524 例丈夫为 A 型或 B 型的 O 型孕妇血清 IgG抗2A 和抗2B 水平 ,经配对 t 检验、χ2 检验和回归分析 ,比较两种方法检测结果的差异并界定前者的决定值。结果 : 国产微柱凝胶试剂卡和传统试管法检测抗2A 平均效价分别为 249. 98 和 120. 85 ,抗2B 为 156. 98 和 76. 38 ,前一方法分别是后者 2. 07 、2. 06 倍 ,差异均有显著性意义 ( t = 19. 64 , P < 01001 ; t = 15. 39 , P < 01001) ;相关性分析得出两种方法测抗2A、抗2B 效价均有高度的相关性 ,相关系数 r 分别是 0. 885 7 ( t = 30. 76 , P < 01001) 、0. 899 6 ( t = 33. 22 , P < 01001) ,通过回归方程得出国产微柱凝胶试剂卡检测抗2A、抗2B 效价的决定值分别为 128 、116 ;以 IgG 抗体效价 ≥64 判为阳性 ,国产微柱凝胶试剂卡测抗2A、抗2B 阳性率分别为 73. 66 %、52. 29 % ,明显高于传统试管法的 47133 %、34135 % ,均具有统计学意义 (χ2 = 69. 00 , P < 0101 ;χ2 = 47. 00 , P < 0101) 。结论 :国产微柱凝胶试剂卡比传统试管法操作更简便、快捷 ,应用于孕妇产前 IgG抗2A、抗2B 效价检测比后者具有更高的灵敏度 ,对其决定值的界定 ,将为临床提供更可靠的诊断依据。