血细胞形态与-瑞氏染色

继续教育试题描述瑞氏染色外周血涂片正常白细胞类型及形态
瑞氏染色是一种用于外周血涂片染色的染色方法，它能够使不同类型的白细胞显色成不同的颜色，从而便于对它们进行分类和鉴定。

正常的外周血涂片中，包含有五种不同类型的白细胞，它们分别是：
1. 嗜中性粒细胞（Neutrophil）：是最常见的一种白细胞，它
的细胞核呈弓形或多叶形，显示出深紫色的颜色，胞浆呈淡紫色或粉红色，并具有颗粒形态。

2. 淋巴细胞（Lymphocyte）：是另一种常见的白细胞，它的
细胞核呈圆形或半月形，显示出深紫色的颜色，胞浆较少或不含颗粒。

3. 单核细胞（Monocyte）：是一种大型的白细胞，它的细胞
核呈半月形或豆状，显示出深紫色的颜色，胞浆较宽，具有充满颗粒的表面。

4. 嗜酸性粒细胞（Eosinophil）：是一种具有特殊功能的白细胞，它的细胞核呈两个叶状，显示出深紫色的颜色，胞浆呈橙色或粉红色，并具有颗粒形态。

5. 嗜碱性粒细胞（Basophil）：是一种少见的白细胞，它的细
胞核通常难以辨认，胞浆呈深紫色或黑色，并具有颗粒形态。

在瑞氏染色下，不同类型的白细胞会呈现出不同的颜色和形态，从而可以根据其特征进行鉴定和分类。

血细胞形态检测检测标准操作程序1. 检验目的与原理1.1检验目的：白细胞、血小板有无数量及质量异常；红细胞形态异常改变。

1.2 检验原理：瑞氏染色原理：瑞氏染料中含有美蓝和伊红两种染料，前者为碱性，后者为酸性，它们与细胞内的各种物质具有不同的亲和力，使其显现出不同的色调，以便于辨认。

细胞核染色质的核酸与强碱性的组蛋白、精蛋白等，形成核蛋白，这种强碱性物质与瑞氏染料中的酸性染料伊红有亲和力，故染成红色；但核蛋白中还有少量的弱酸性蛋白及其氨基，它又与瑞氏染料中的美蓝起作用，只因其量太少，而不显蓝色，故细胞核呈紫红色。

较幼稚细胞之胞浆和细胞核之核仁含有酸性物质，与瑞氏染料中的碱性染料美蓝有亲和力，故染成蓝色；当酸性物质各半时，则染成红蓝色或灰红色，即所谓多嗜性。

2. 样本收集和贮存2.1原始样本系统：全血。

2.2标本类型：EDTA抗凝血2ml,标本的采集应使用标准一次性采血管，充分混匀，勿震荡。

2.2保存条件：EDTA抗凝血在室温可稳定24小时；收集后的标本应该尽快检测,4小时检测完毕。

3．试剂3.1瑞氏染液：3.1.1试剂成分：瑞氏染料 1.0g无水甲醇500ml甘油10ml3.1.2瑞氏染液配制方法：将瑞氏染料称量好后，放在乳钵中加少量无水甲醇匀速研磨至溶解，将研磨好的染液倾倒入试剂储存瓶中，倒入无水乙醇继续研磨，反复多次，直至乳钵中无瑞氏染料沉淀为止，染液试剂瓶存满为止。

将配制好的染液放在36℃24小时后方可使用，放在阴凉干燥处，避光保存。

3.2磷酸盐缓冲液PH6.43.2.1 脱水Na2HPO4 1份: 处理方法将Na2HPO4于蒸发皿上干燥(火燃烘烤）成粉末称量。

3.2.2无水KH2PO4 2.6份：将脱水Na2HPO4 1份和水KH2PO4 2.6份充分混合，边研磨边混匀。

3.2.3将上述粉末1g加溶解于500ml去离子水中，混合均匀，方可使用。

3.3 器材：载玻片、加样枪、吸头、推片器4. 仪器显微镜 OLYMPUS 型号：CX21。

实验一血涂片制备及血细胞形态观察一、目的原理掌握血涂片的制备方法。

观察血细胞的形态。

二、材料及用具（每组）牛(羊)或鸡的新鲜血液、载玻片、显微镜、瑞氏染液、胶头滴管、染色缸。

三、方法步骤1.血涂片制备取两张洁净的载玻片A、B，用B蘸取少许血液与A的1/3处。

用B 末干净的一端成45度角紧贴与在载玻片A上，并使A的血液顺着B均匀的散开，然后使A、B成45度角往前平行的推B至末端1cm处。

2.血涂片染色将血涂片在室温下放置2-3分钟使血涂片完全干燥。

然后用胶头滴管吸1滴瑞氏染液与血涂片上，使染液要完全漫过血液。

静置5分钟左右，然后倾去染液，用很小的流水紧贴载玻片的一端轻轻的冲洗染液直至染液完全被冲洗干净。

3.血细胞观察用吸水纸将血涂片上的水吸干后放显微镜的高倍镜下观察血细胞的形态。

四、血细胞形态1．血涂片观察哺乳动物红细胞为无核、红色扁圆形小体。

由于它是双凹盘形，所以中央染成较边缘为淡。

鸡的红细胞呈卵圆形，内有一个卵圆形的细胞核。

2.嗜中性粒细胞细胞质内含有淡红色微细颗粒，胞核有3—5个分叶。

3.嗜酸性粒细胞细胞质内含有深红色大而圆的颗粒，核通常有2—3个分叶。

4.嗜碱性粒细胞细胞质内含有粗细不等的紫蓝色颗粒，核分叶不明显。

5.小淋巴细胞：细胞形态小，核椭圆形或豆形，染成蓝色，细胞质很小，染成浅蓝色。

6.中或大淋巴细胞：细胞较大，细胞较多，核的周围有亮晕。

7.单核细胞较淋巴细胞大，细胞质亦较多，细胞核是肾形或马蹄形。

8.血小板体形甚小，形态不规则，内含紫色颗粒，无核，常聚集成团。

五、要求与思考题5种白细胞的形态和数量有何差异？六、注意事项1.推开的血涂片要均匀，血液不能太多太厚，要尽可能的薄。

2.应严格控制染色的时间，并适当的做出调整。

3.观察细胞形态应耐心细致观察，如嗜碱性粒细胞应仔细寻找。

临床检验——外周血细胞形态学基础（二）一、中性粒细胞浆上颗粒增粗/中毒颗粒1、瑞氏染色/油镜①中性粒细胞浆中出现粗大、分布不均的蓝黑色颗粒称中毒颗粒。

②粒细胞浆上颗粒增多增粗见于细菌感染，中毒颗粒见于严重感染、败血症等。

二、中性粒细胞浆空泡变性/Dohel小体1、瑞氏染色/油镜①Dohel小体为中性粒细胞浆内出现的嗜碱性区域，多呈斑块状、梨形或云雾状等。

②中性粒细胞浆上或核上出现空泡及Dohel小体，见于严重细菌感染、败血症等。

三、各阶段中性粒细胞1、瑞氏染色/油镜四、各阶段淋巴细胞1、瑞氏染色/油镜五、各种形状淋巴细胞1、瑞氏染色/油镜六、各种形状异型淋巴细胞1、瑞氏染色/油镜①异型淋巴细胞体积大，15-25um，胞浆丰富，深灰蓝色，靠核处染色浅，细胞边缘着色较深。

②见于病毒感染，尤其是EB病毒感染。

七、各阶段单核细胞1、瑞氏染色/油镜①原始单核细胞核呈类圆形或不规则，核染色质呈细网状，疏松交织，核仁1-3个大而明显，浆呈蓝色或灰蓝色。

②幼稚单核细胞核不规则，有凹陷或折叠，染色质疏松网状或条索状，浆呈灰蓝色有细小嗜苯胺蓝颗粒。

八、各种形状单核细胞1、瑞氏染色/油镜①单核细胞形态变化较大，呈圆形或不规则，可见伪足或边缘呈毛刺状，胞浆丰富，呈灰蓝色、半透明的毛玻璃状，可见许多细小且分布均匀的淡红色嗜苯胺蓝颗粒，部分浆上可见空泡，核较大呈肾型、U形、马蹄形或分叶形，有折叠、凹陷、扭曲等。

九、粒细胞浆上可见到的颗粒1、瑞氏染色/油镜十、各种形状嗜酸性粒细胞1、瑞氏染色①嗜酸性粒细胞呈圆形或椭圆形，胞浆充满橘红色颗粒，圆形立体感和折光性强，似鲤鱼卵，核分两叶，呈眼镜形，颗粒与核之间界限明显。

十一、各种形状嗜碱性粒细胞1、瑞氏染色/油镜①嗜碱性粒细胞浆上含有大小不一，数量不等，分布不均的深紫色颗粒，常盖在核上轮廓不清，嗜碱性颗粒与胞核之间似有相连，核分叶模糊。

十二、中性粒细胞分叶过多1、瑞氏染色/油镜①核右移指中性粒细胞的细胞核出现4、5叶或更多，其比例超过3%。

瑞氏染色的原理及临床意义
瑞氏染色的原理和临床意义可以概括为:
一、瑞氏染色的原理
1. 词汇酸可与细胞内碱性成分结合,生成不溶性盐类颗粒。

2. 这些盐类颗粒可在细胞内沉淀,使组织产生不同颜色和阴影变化。

3. 不同类型细胞因内部结构和成分不同,词汇酸盐的沉淀方式也不相同。

4. 通过差异化的着色效果,可以区分不同类型的细胞。

二、瑞氏染色的临床意义
1. 可以显示细胞形态,判断细胞的病理改变。

2. 可以判断细胞分化程度,识别癌变细胞。

3. 可以观察病原体在组织细胞内的情况。

4. 可以确定细胞来源和细胞类型。

5. 可提示染色体状态,判断是否存在排列异常。

6. 可用于血液制品中白细胞分类计数。

7. 用于脑脊液中细胞观察,判断是否suffer炎症。

8. 对判断病变性质、诊断及治疗方案选择具有重要意义。

综上,瑞氏染色通过不同细胞、组织结合词汇酸产生特异着色,是一种重要的临床辅助诊断手段。

血细胞形态学检测标准操作程序1.检验目的对在自动化检测中由于各种原因可能出现的结果偏差进行核查和纠正，确保血液自动化检测结果的准确性，确保为临床提供准确可靠的检测结果。

2.检测原理与方法将一小滴血液均匀的涂在玻片上，呈单层紧密分布，制成血膜片，用瑞氏-姬姆萨染液染色，在显微镜下观察其血细胞数量和形态的改变。

3.标本ETDA-K2抗凝血或新鲜外周血。

4.试剂4.1瑞氏-姬姆萨染液A液，瑞氏-姬姆萨染液B液。

4.2储存条件：5~30℃室温环境，相对湿度不大于80%，避光保存。

有效期24个月。

4.3以上所有试剂每瓶试剂开封后应注明启用日期、失效期（开瓶后6个月，或有效期内使用完）并附签名。

5.环境和安全5.1实验室及工作人员一般安全防护措施见《安全手册》5.2血液样本溢出后，由工作人员立即用0.2%过氧乙酸溶液或75%酒精溶液对污染环境进行消毒。

5.3如操作人员的皮肤或衣物上沾到了血液及废液。

应立即用0.2%过氧乙酸溶液或75%酒精溶液消毒处理，再用肥皂水、清水进行冲洗。

如果眼睛中溅入血液及废液，用大量清水冲洗并采取必要的医疗措施。

5.4在仪器转动过程中，勿触及样本针、移动的传输装置等，避免造成人身伤害。

禁止触摸血液细胞分析仪密封面板内的电路。

5.5如血液样本采用开盖程序测试，开盖时应防止气雾胶污染环境。

5.6与血液样本接触的一切器皿、仪器组装/拆卸组合零件都应视为污染源，因此操作人员应采取必要的保护性措施如穿戴保护性外套、手套等。

不小心接触了这种污染源时，应立即用清水冲洗被污染区域并用0.2%过氧乙酸溶液或75%酒精溶液进行消毒处理。

5.7对突发传染性疾病的血液样本的防护应启动特殊的安全防护程序。

6.操作步骤6.1血涂片制备本室采用人工推片染色。

如特殊情况采用楔形技术制备血涂片。

在玻片近一端1/3处，加一滴（约0.05ml）充分混匀的血液，握住另一张较狭窄的、边缘光滑的推片，以30º～45º角使血滴沿推片迅速散开，快速、平稳地推动推片至玻片的另一端（见图2）。

红细胞形态特征分类红细胞是血液中数量最多的细胞，主要负责输送氧气和营养物质到身体各个组织和器官。

红细胞的形态特征分类对于了解和诊断各种血液疾病具有重要意义。

以下是红细胞形态特征分类的详细介绍：正常红细胞：正常红细胞呈两面微凸的圆饼状，直径约7～8μm，具有特定的染色性质，可以通过瑞氏染色等方法进行观察。

正常红细胞呈现淡红色，富含血红蛋白，能够有效地携带和运输氧气。

小红细胞：小红细胞直径小于正常红细胞，通常小于6μm。

小红细胞常见于缺铁性贫血、慢性病性贫血和MDS等疾病。

大红细胞：大红细胞直径大于正常红细胞，通常大于10μm。

大红细胞富含血红蛋白，通常见于溶血性贫血和巨幼细胞贫血等。

椭圆形红细胞：椭圆形红细胞呈椭圆形或扁平状，横径变短，与正常红细胞相比较扁。

椭圆形红细胞的出现提示可能存在遗传性椭圆形红细胞增多症、巨幼细胞贫血等疾病。

靶形红细胞：靶形红细胞呈靶形或椭圆形，中心较深而两端逐渐变细。

靶形红细胞的出现提示可能存在珠蛋白生成障碍性贫血、缺铁性贫血和血红蛋白病等。

口形红细胞：口形红细胞呈口形或椭圆形，中心有一条细长的缝隙，形似口形。

口形红细胞的出现提示可能存在遗传性口形红细胞增多症、酒精性肝病和阵发性睡眠性血红蛋白尿症等疾病。

碎片红细胞：碎片红细胞呈不规则形状，大小不一，染色深浅不一。

碎片红细胞的出现提示可能存在溶血性贫血、弥漫性血管内凝血和阵发性睡眠性血红蛋白尿症等疾病。

球形红细胞：球形红细胞呈球形或近似球形，直径小于正常红细胞。

球形红细胞的出现提示可能存在遗传性球形红细胞增多症、自身免疫性溶血性贫血等疾病。

镰状红细胞：镰状红细胞呈镰刀状或新月状，中央部分较厚，周边较薄。

镰状红细胞的出现提示可能存在镰状细胞贫血、骨髓增生异常综合征等疾病。

通过观察红细胞的形态特征，可以辅助诊断多种血液疾病，对治疗和预防具有重要的意义。

如有相关症状或疑虑，建议及时就医并接受专业医生的诊断和治疗。