生化实验知识点汇总整理
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生化知识点重点总结1. 生物大分子:生体内的大分子主要包括蛋白质、核酸、多糖和脂质等。
蛋白质是生物体内最重要的大分子之一,它具有结构和功能多样性;核酸是DNA和RNA的总称,它携带了生物体的遗传信息;多糖是由许多单糖分子聚合而成,主要包括淀粉、糖原和纤维素等;脂质是生物体内比较复杂的一类大分子,包括脂肪、磷脂和皂质等。
2. 蛋白质的结构和功能:蛋白质是生物体内最重要的大分子之一。
它的结构可以分为一级结构、二级结构、三级结构和四级结构。
蛋白质的功能包括酶作用、结构作用、传递作用和免疫作用等。
3. 核酸的结构和功能:核酸是DNA和RNA的总称,它携带了生物体的遗传信息。
DNA是双链结构,RNA是单链结构。
核酸的功能主要包括遗传信息的传递和蛋白质合成等。
4. 多糖的结构和功能:多糖是由许多单糖分子聚合而成。
它主要包括淀粉、糖原和纤维素。
多糖的功能包括能量储备和结构支持等。
5. 脂质的结构和功能:脂质是生物体内比较复杂的一类大分子,包括脂肪、磷脂和皂质等。
脂质的功能包括能量储备、结构支持和传递信号等。
6. 细胞膜的结构和功能:细胞膜是细胞的外层膜。
它主要由脂质分子和蛋白质分子构成。
细胞膜的功能包括细胞的结构支持、物质的进出和信号的传递等。
7. 酶的性质和作用:酶是生物体内的一类特殊蛋白质,它在生物体内具有催化作用。
酶的作用包括降低反应活化能、增加反应速率和特异性催化等。
8. 代谢途径:代谢是生物体内的一系列化学反应过程。
代谢途径主要包括糖代谢、脂质代谢、核酸代谢和蛋白质代谢等。
9. 能量的利用和储存:能量是维持生命活动的重要物质基础。
生物体内的能量主要通过ATP和NADH等化合物来储存和利用。
10. 酶的调控:酶的活性受到多种因素的调控,包括底物浓度、温度、pH值和酶的抑制剂等。
11. 免疫系统:免疫系统是生物体内的一套防御系统,它包括天然免疫和获得性免疫两个部分。
12. 体内环境平衡:体内的环境平衡主要包括细胞内外离子平衡、酸碱平衡和渗透压平衡等。
生化检验知识点归纳总结一、生化检验的基本原理1. 生化检验的定义:生化检验是通过对人体的生化物质进行定量或定性的分析,以达到对体内生化状态和功能的了解的一种检验方法。
2. 生化检验的基本原理:生化检验是通过测定人体内的生化物质,如葡萄糖、蛋白质、脂类、酶等物质的含量和活性,以及相关代谢产物的浓度来反映体内生化过程的变化,为疾病的诊断、鉴别诊断和疗效监测提供重要的实验依据。
二、常用指标及其临床意义1. 血糖:血糖是人体内最主要的能量来源,其测定对糖尿病、甲状腺功能异常、妊娠、垂体功能异常等有重要的临床意义。
2. 肝功能指标:包括谷丙转氨酶、谷草转氨酶、总胆红素、直接胆红素、白蛋白、球蛋白、谷氨酰转肽酶等指标,可以反映肝功能的变化,对肝炎、肝硬化、药物中毒等疾病的诊断和鉴别诊断有重要意义。
3. 肾功能指标:包括肌酐、尿素氮、尿酸、血尿酸、尿蛋白、尿微量白蛋白等指标,可以反映肾脏的排泄功能和肾小球滤过功能的变化,对肾炎、肾结石、肾功能衰竭等疾病的诊断和鉴别诊断具有重要意义。
4. 血脂指标:包括总胆固醇、甘油三酯、高密度脂蛋白、低密度脂蛋白等指标,可以反映血脂代谢的变化,对高血脂症、动脉粥样硬化等疾病的诊断和鉴别诊断有重要意义。
三、常见的生化检验项目1. 血清蛋白电泳:通过电泳分离血清蛋白,以及对蛋白的定量和鉴定,可以对免疫性疾病、肝病、肾病、恶性肿瘤等疾病进行诊断和鉴别诊断。
2. 血清肝功能指标:主要包括谷丙转氨酶、谷草转氨酶、碱性磷酸酶、总胆红素、直接胆红素、间接胆红素、白蛋白、球蛋白等指标的测定,用于评价肝细胞功能和肝细胞损伤的程度。
3. 血清肾功能指标:主要包括肌酐、尿素氮、尿酸、尿微量白蛋白等指标的测定,用于评价肾小球滤过功能和肾小管功能的变化。
4. 血清电解质及酸碱平衡指标:包括钠、钾、氯、钙、镁、磷酸盐、二氧化碳结合力等指标的测定,用于评价电解质的平衡和酸碱的调节功能。
四、生化检验的标本采集与储存1. 血液标本采集:在采集静脉血时一定要选择适当的静脉针头,遵循正确的穿刺技术和取血流程,尽量避免静脉内血栓的形成,尽量避免血细胞破裂。
生化知识点总结大全生物化学是研究生物分子、细胞和组织等生物学基本单位在化学层面上的结构、功能和相互关系的一门学科。
生物化学知识的掌握对于理解生物体内各种生理过程以及疾病的发生、发展和治疗都具有重要意义。
下面将对生化知识点进行总结,包括生物大分子、酶和代谢、细胞信号传导、遗传信息的传递和表达等内容。
一、生物大分子1. 蛋白质蛋白质是由氨基酸组成的大分子,是生物体内最重要的大分子之一。
蛋白质的结构包括一级结构、二级结构、三级结构和四级结构,分别代表了氨基酸序列、局部结构、全局结构和蛋白质的组装形式。
蛋白质在生物体内担任着结构、酶、携氧等多种重要功能。
2. 核酸核酸是构成生物体遗传信息的重要大分子。
核酸包括DNA和RNA两类,其中DNA是生物体内遗传信息的主要携带者,而RNA则参与了蛋白质的合成过程。
核酸的结构包括磷酸、核糖和碱基,它们通过磷酸二酯键相连而形成长链状结构。
3. 脂类脂类是一类绝缘性物质,其分子结构包含甘油酯和磷脂,具有水、油双亲性,是细胞膜的主要构成成分。
脂类还包括胆固醇和脂蛋白,它们在人体内参与了能量储存、细胞膜形成、传递体内信息等多种生理活动。
二、酶和代谢1. 酶的分类和特性酶是一类生物催化剂,可以加速生物体内的化学反应。
酶根据其作用的基质可以分为氧化还原酶、水解酶、转移酶等多种类型;根据作用反应的特点还可以分为氧化酶、脱氢酶、水合酶等。
酶的活性受到PH值、温度、离子浓度等因素的影响。
2. 代谢途径代谢是生物体维持生命活动所必需的化学反应过程,包括物质的合成、降解和转化等步骤。
常见的代谢途径包括糖酵解、三羧酸循环、氧化磷酸化等。
这些代谢途径通过调控酶的活性来维持生物体内各种代谢物质的平衡。
三、细胞信号传导1. 受体的结构和功能受体是细胞膜上的一类蛋白质,可以感知外界信号并将其转化为细胞内信号传导的起始物质。
受体的结构包括外部配体结合区、跨膜区和细胞内信号传递区,它可以通过配体结合激活下游信号分子,从而引发细胞内的生理反应。
1.生物化学,是研究生物体内化学分子和化学反应的科学,从分子水平探讨生命现象的本质。
2.分子生物学,是研究核酸、蛋白质等所有生物大分子的结构、功能及基因结构、表达与调控的科学。
7.primary structure of protein—一级结构,是蛋白质分子中,从N-端到C-端的氨基酸排列顺序。
8.chromatography—层析,是蛋白质分离纯化的重要手段之一,待分离蛋白溶液(流动相)经过一种固态物质时,根据溶液中待分离的蛋白质颗粒大小、电荷多少及亲和力等,将待分离的蛋白质组分在两相中反复分配,并以不同的速度流经固定相而达到分离蛋白质的目的。
1.peptide unit—肽单元,是指一个氨基酸的α-羧基与另一个氨基酸的α-氨基脱水生成的酰胺键称为肽键。
参与肽键形成的6个原子(Cα1、C、O、N、H、Cα2)位于同一平面,Cα1和Cα2在平面上所处的位置为反式构型,此同一平面上的6个原子构成所谓的肽单元。
2.motif—模体,是具有特殊功能的超二级结构,由两个或三个具有二级结构的肽段,在空间上相互接近,形成一个特殊的空间构象。
一个模体总有其特征性的氨基酸序列,并发挥特殊的功能。
4.electrophoresis—电泳,指带电粒子在电场中向带相反电荷一极泳动的现象。
5.salt precipitation—盐析,指将中性盐加入蛋白质溶液中,使蛋白质水化膜脱去,电荷被中和,导致蛋白质在水溶液中的稳定因素去除而沉淀。
11.protein denaturation—蛋白质变性,指在某些物理和化学因素作用下,其特定的空间构象被破坏,也即有序的空间结构变成无序的空间结构,从而导致其理化性质的改变和生物活性的丧失,称为蛋白质的变性。
一般认为蛋白质的变性主要发生二硫键和非共价键的破坏,不涉及一级结构中氨基酸序列的改变。
13.domain—结构域,是三级结构层次上的局部折叠区,指分子量大的蛋白质常可折叠成多个结构较为紧密的区域,并各行其功能,称为结构域举例说明蛋白质一级结构、空间结构与功能之间的关系。
生化知识点总结一、蛋白质结构与功能。
1. 氨基酸。
- 结构特点:氨基酸是蛋白质的基本组成单位,具有共同的结构通式,即中心碳原子连接一个氨基、一个羧基、一个氢原子和一个侧链基团(R基)。
不同的氨基酸R 基不同,这决定了氨基酸的性质差异。
- 分类:根据R基的化学结构可分为脂肪族氨基酸、芳香族氨基酸、杂环族氨基酸等;根据R基的极性可分为非极性氨基酸、极性中性氨基酸、酸性氨基酸和碱性氨基酸。
- 理化性质:- 两性解离:氨基酸分子中既含有酸性的羧基,又含有碱性的氨基,在不同的pH 溶液中可发生两性解离,当溶液pH等于其等电点(pI)时,氨基酸呈电中性。
- 紫外吸收:色氨酸、酪氨酸在280nm波长附近有最大紫外吸收峰,可用于蛋白质的定量分析。
2. 蛋白质的一级结构。
- 定义:蛋白质的一级结构是指多肽链中氨基酸的排列顺序。
主要化学键为肽键,有些蛋白质还包括二硫键。
- 意义:一级结构是蛋白质空间构象和特异生物学功能的基础。
例如,镰刀型红细胞贫血病就是由于β - 球蛋白N端第6个氨基酸残基由正常的谷氨酸被缬氨酸取代,导致蛋白质的一级结构改变,进而引起其空间结构和功能的异常。
3. 蛋白质的二级结构。
- 定义:蛋白质分子中某一段肽链的局部空间结构,也就是该段肽链主链骨架原子的相对空间位置,不涉及氨基酸残基侧链的构象。
- 主要形式:- α - 螺旋:多肽链主链围绕中心轴呈有规律的螺旋式上升,每3.6个氨基酸残基螺旋上升一圈,螺距为0.54nm。
其稳定因素是每个肽键的N - H和第四个肽键的C=O形成的氢键。
- β - 折叠:多肽链充分伸展,相邻肽段之间折叠成锯齿状结构,靠链间氢键维系。
可分为平行式和反平行式β - 折叠。
- β - 转角:常发生于肽链进行180°回折的转角处,由4个氨基酸残基组成,第二个残基常为脯氨酸。
- 无规卷曲:没有确定规律性的肽链结构。
4. 蛋白质的三级结构。
- 定义:整条多肽链中全部氨基酸残基的相对空间位置,也就是整条肽链所有原子在三维空间的排布位置。
第一章、蛋白质的结构与功能1、主要元素:C、H、O、N、S(P7)2、定氮法:样品中含蛋白质克数=样品的含氮克数×6.253、肽键:肽键是由一个氨基酸α-羟基与另一个氨基酸的α-氨基脱水缩全面行成的化学键,是蛋白质分子中的主要共价键,性质比较稳定。
(P11)4、肽:肽是氨基酸通过肽键相连的化合物,蛋白质不完全水解的产物也是肽。
10个以下氨基酸组成成寡肽,10个以上氨基酸组成称多肽。
(P11)5、多肽和蛋白质分子中的氨基酸均称为氨基酸残基。
具有特殊的生理功能的肽称为活性肽。
(P11)6、蛋白质一级结构:指多肽链中氨基酸(残基)从N端到C端的排列顺序,即氨基酸序列。
主要化学键为肽键。
(P12)7、蛋白质二级结构:指多肽链中相邻氨基酸残基的局部肽链空间结构,是其主链原子的局部空间排布。
主要化学键为氢键。
(P13)8、蛋白质三级结构:指整条多肽链中所有氨基酸残基,包括主链和侧链在内所形成的空间结构。
主要化学键为疏水键。
(P15)9、结构域:分子量大的蛋白质分子由于多肽链上相邻的超二级结构紧密联系,形成多个相对独特并承担不同生物学功能的超三级结构。
(P16)10、蛋白质四级结构:指各具独立三级结构多肽链以各种特定形式接触排布后,结集在此蛋白质最高层次空间结构。
在此空间结构中,各具独立三级结构的多肽链称亚基。
主要化学键为疏水键,氢键,离子键。
(P16)第三章、酶1、同工酶:指催化的化学反应相同,但酶蛋白的分子结构、理化性质及免疫化学特性不同的一组酶。
亚基:骨骼肌形和心肌形。
组成的五种同工酶:LDH1(H4)、LDH2(H3M)、LDH3(H2M4)、LDH4(HM3)、LDH5(M5)。
(P40)2、酶促反应的特点:催化性、特异性、不稳定性、调节性。
(P41)第五章、糖代谢1、糖酵解反应的特点:在无氧条件下发生的不完全的氧化分解反应,整个过程均在胞质中完成,无需氧的参与,终产物是乳酸;反应中适放能量较少,一分子葡萄糖可净生成二分子ATP。
生化知识点总结归纳一、生物大分子结构与功能1. 蛋白质蛋白质是生物体内最丰富的大分子,具有多种功能。
蛋白质的结构包括一级、二级、三级和四级结构,通过氨基酸的序列和侧链相互作用构成。
蛋白质的功能涉及到酶的催化作用、携氧作用、运输作用、膜通道作用等多个方面。
2.核酸核酸是生物体内携带遗传信息的分子,包括DNA和RNA两种。
DNA通过碱基配对形成双螺旋结构,携带了生物体的遗传信息。
RNA参与到蛋白质的合成、修复和调控等多个生物学过程中。
3.多糖多糖是由许多单糖分子通过糖苷键连接而成的高分子化合物。
在生物界中,多糖的重要功能包括能量储存(如糖原)、结构支持(如纤维素)、细胞间质物质(如透明质酸)、免疫相关(如多糖抗原)等。
4.脂质脂质是多种异质的大分子化合物,包括脂肪酸、甘油和其他非蛋白质成分。
脂质在生物体内具有能量储存、结构支持、细胞膜结构和调节等多种重要功能。
5.酶酶是生物体内催化生物化学反应的特殊蛋白质,具有高度的专一性和高效的催化作用。
酶在生物体内参与到代谢、合成、降解、信号传导等多个生物过程中。
6.细胞膜细胞膜是细胞的外部大分子结构,具有选择性通透、信号传递和细胞识别等重要功能。
细胞膜主要由脂质双层和膜蛋白构成,参与到细胞内外物质的交换和信息传导。
二、生物代谢1. 糖代谢糖是生物体内最主要的来源能,糖代谢涉及到醣和糖原的合成、分解、糖酵解、糖异生、葡萄糖酸环等多个反应途径。
2. 脂肪代谢脂肪是生物体内的主要能量储存分子,脂肪代谢包括脂质的合成、降解和调控等多个反应。
β-氧化、脂肪酸合成、胆固醇合成等是脂肪代谢中的重要反应过程。
3. 蛋白质代谢蛋白质是生物体内最丰富的大分子结构,蛋白质代谢包括蛋白质的合成、修复、降解、调控等多个反应过程。
翻译、蛋白质合成、蛋白质降解和泛素化等是蛋白质代谢中的重要反应过程。
4. 核酸代谢核酸是生物体内携带遗传信息的大分子,核酸代谢包括核苷酸的合成、分解、修复和调控等多个反应过程。
生化检验知识点总结一、生化检验概述生化检验是临床医学中一项重要的检验手段,通过对患者血液、尿液、体液等样本进行化学成分和功能状态的检测,可以帮助医生判断疾病的诊断、疾病的发展和治疗效果,为临床诊断和治疗提供重要的参考依据。
二、生化检验的临床意义1. 疾病的诊断:生化检验可以帮助医生确定患者是否患有某些疾病,如心脏病、糖尿病、肝病、肾病等。
2. 疾病的分析:通过生化检验可以分析患者的病情,了解疾病的类型、程度以及影响范围,有助于医生制定治疗方案。
3. 治疗效果的评估:生化检验可以评估治疗效果,了解患者是否已经康复,是否需要调整治疗方案。
4. 预防和健康体检:生化检验可以帮助人们及早发现潜在的健康问题,预防疾病的发生。
三、生化检验的常见项目生化检验的常见项目包括血液生化指标、尿液生化指标、体液生化指标等。
1. 血液生化指标(1)血糖:血糖是人体能量的重要来源,血糖的检测可以帮助医生诊断糖尿病、低血糖等疾病。
(2)肝功能:肝功能指标包括谷草转氨酶、谷丙转氨酶、总胆红素、直接胆红素等,可以反映肝脏的功能状态。
(3)肾功能:肾功能指标包括肌酐、尿素氮、尿酸等,可以反映肾脏的排泄功能和肾小球滤过功能。
(4)血脂:血脂指标包括总胆固醇、甘油三酯、高密度脂蛋白胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇等,可以反映血液中脂质的代谢状况。
2. 尿液生化指标(1)尿酸:尿酸是人体代谢产生的一种废物,尿酸过高可以导致痛风等疾病。
(2)尿蛋白:尿蛋白可以反映肾小球滤过功能和肾小管重吸收功能的异常。
3. 体液生化指标(1)血清蛋白:血清蛋白是人体液体中的一种重要成分,可以反映患者的蛋白质代谢状态。
(2)电解质:电解质包括钠、钾、氯等,可以反映患者的酸碱平衡和水盐代谢状态。
四、生化检验的常见异常及意义1. 血糖异常:血糖异常可以导致糖尿病、低血糖等疾病,严重影响患者的生活质量和健康状况。
2. 肝功能异常:肝功能异常可以导致肝炎、肝硬化、肝癌等疾病,严重影响患者的生活质量和寿命。
生化知识点总结生化学是研究生物体在生命活动中的化学成分、结构和相互作用的学科。
下面是一些常见的生化知识点总结。
1. 生物大分子:生物大分子包括蛋白质、核酸、多糖和脂质。
蛋白质是由氨基酸组成的,它们在细胞中扮演着结构、运输和催化反应的角色。
核酸是遗传信息的携带者,包括DNA和RNA。
多糖是由单糖分子连接而成的,它们在能量储存和结构支持中起着重要作用。
脂质是一类不溶于水的有机分子,包括脂肪酸、甘油和磷脂,它们在细胞膜的结构和功能中起着重要作用。
2. 酶和酶促反应:酶是一类能够催化生物化学反应的蛋白质。
酶能够加速反应速率,而不改变反应的方向。
酶和底物之间通过互相适应的结合方式进行交互作用,形成酶底物复合物。
酶活性受到温度、pH和底物浓度等因素的影响。
3. 代谢:代谢是生物体内发生的一系列化学反应,包括合成和分解反应。
有两种类型的代谢路径:异养代谢和自养代谢。
异养代谢指的是通过从环境中摄取有机物来获取能量;而自养代谢指的是通过合成有机物来获取能量。
4. 基因表达:基因表达是指遗传信息从DNA转录为RNA,并翻译为蛋白质的过程。
在转录过程中,DNA的双链被解开,RNA聚合酶与DNA模板链相互作用,合成mRNA。
随后,mRNA通过核糖体和tRNA的帮助,将氨基酸按照特定的顺序连接成蛋白质。
5. 酸碱平衡:细胞内部和体液中的酸碱平衡对维持身体正常功能非常重要。
体液中的氢离子浓度由酸碱平衡系统控制,其中包括呼吸系统、肾脏和缓冲系统的协同作用。
6. 遗传学:遗传学是研究遗传信息的传递和变化的学科。
遗传信息是存储在DNA中的,可以被传递给下一代。
遗传学研究如何基因通过基因座位的相互作用来影响特征的表达。
7. 能量转化:生物体内的能量转化包括能量的捕获、储存和释放。
在化学反应中,能量通过酶催化的过程转化为化学能。
细胞内的线粒体是能量转化的主要场所,其中发生的反应包括细胞呼吸和产生ATP分子。
总结起来,生化学所研究的生物分子、酶促反应、代谢、基因表达、酸碱平衡、遗传学和能量转化等知识点,为我们了解生物体内化学反应和生命过程的机制提供了重要的基础。
一、生物分子的结构和功能1. 蛋白质蛋白质是生物体内最重要的组成分子之一,它们参与了几乎所有生物体内的反应和过程。
蛋白质的结构包括一级结构、二级结构、三级结构和四级结构。
一级结构是指氨基酸的线性排列,二级结构是指氨基酸的空间排列方式,通常分为α-螺旋和β-折叠两种。
三级结构是指蛋白质的整体立体构象,四级结构是指不同的多肽链之间的空间排列方式。
蛋白质的功能取决于其结构,因此研究蛋白质的结构和功能对于了解生物体内的生化反应和生物过程非常重要。
2. 核酸核酸是生物体内的遗传物质,包括DNA和RNA两种。
它们的结构包括磷酸骨架、含氮碱基和核苷酸。
DNA的含氮碱基包括腺嘌呤、鸟嘌呤、胸腺嘧啶和鸟嘌呤四种,RNA的含氮碱基包括腺嘌呤、鸟嘌呤、尿嘧啶和胸腺嘧啶四种。
DNA和RNA的功能是遗传信息的储存和传递,因此研究核酸的结构和功能对于了解生物体的遗传机制和基因表达非常重要。
3. 多糖多糖是一类碳水化合物,包括淀粉、糖原、纤维素和珍珠质等。
多糖的结构包括单糖的聚合物,其功能包括能量储存、结构支持和细胞信号传导等。
研究多糖的结构和功能对于了解生物体内的能量代谢和细胞信号传导等方面非常重要。
二、化学与生物学的交叉学科知识1. 酶学酶是生物体内催化化学反应的蛋白质,其作用是降低化学反应的活化能,从而加速反应的进行。
酶的活性和稳定性受到多种因素的影响,包括温度、pH、离子强度和底物浓度等。
研究酶的结构和功能对于了解生物体内的代谢反应和细胞信号传导等方面非常重要。
2. 脂质学脂质是生物体内的重要组成分子,包括脂类、磷脂、甘油三酯和胆固醇等。
脂质在生物体内具有能量储存、细胞膜构成和信号传导等多种功能。
脂质的结构、代谢和功能对于了解生物体内的脂质代谢和细胞膜传导等方面非常重要。
3. 生物大分子的生物合成和降解生物大分子包括蛋白质、核酸、多糖和脂质等,它们的生物合成和降解过程受到多种调控因素的影响,包括基因表达、酶活性和底物浓度等。
1、糖酵解:指从葡萄糖至乳糖的无氧分解过程,可生成2分子ATP。
是体内糖代谢最主要途径。
最终产物:乳酸。
依赖糖酵解获得能量:红细胞。
2、糖氧化——乙酰CoA。
有氧氧化是糖氧化供能的主要方式。
1分子葡萄糖彻底氧化为CO2和H2O,可生成36或38个分子的ATP。
3、糖异生:非糖物质转为葡萄糖。
是体内单糖生物合成的唯一途径。
肝脏是糖异生的主要器官。
防止乳酸中毒。
4、血糖受神经,激素,器官调节。
5、升高血糖激素:胰高血糖素(A细胞分泌),糖皮质激素和生长激素(糖异生),肾上腺素(促进糖原分解)。
降低血糖激素:胰岛素(B细胞分泌)(唯一)6、糖尿病分型:Ⅰ型:内生胰岛素或C肽缺,易出酮症酸中毒,高钾血症,多发于青年人。
Ⅱ型:多肥胖,具有较大遗传性,病因有胰岛素生物活性低,胰岛素抵抗,胰岛素分泌功能异常。
特殊型及妊娠期糖尿病。
7、糖尿病的诊断标准:有糖尿病症状加随意血糖≥11.1 mmol/L;空腹血糖(FVPG)≥7.0 mmol/L;(OGTT)2h血糖≥11.1 mmol/L。
初诊需复查后确证。
8、慢性糖尿病人可有:白内障(晶体混浊变形),并发血管病变以心脑肾最重。
9、糖尿病急性代谢并发症有:酮症酸中毒(DKA,高血糖,尿糖强阳性,尿酮体阳性,高酮血症,代谢性酸中毒,多<40岁,年轻人),高渗性糖尿病昏迷(NHHDC,血糖极高,>33.6mmol/L,肾功能损害,脑血组织供血不足,多>40岁,老年人),乳酸酸中毒(LA)。
10、血糖测定:葡萄糖氧化酶-过氧化物酶偶联法(GOD-POD法)。
己糖激酶法(HK):参考方法(>7.0mmol/L称为高血糖症。
<2.8mmol/L称为低血糖症。
)11、空腹低血糖反复出现,最常见的原因是胰岛β细胞瘤(胰岛素瘤)。
胰岛B细胞瘤临床特点:空腹或餐后4—5h发作,脑缺糖比交感神经兴奋明显,有嗜睡或昏迷,30%自身进食可缓解故多肥胖。
12、血浆渗透压=2(Na+K)+血糖浓度。
生化检验基础知识100条1.18世纪后期提出了第一个肿瘤标志物是:β2-微球蛋白。
2.盛血试管是测定电解质的最佳选择:肝素抗凝管。
3.推荐血糖测定的抗凝管:草酸钾/氟化钠抗凝管。
4.17-羟皮质类固醇测定的尿液防腐剂:浓盐酸。
5.用于尿钾、钠、钙、糖、氨基酸等测定的尿液防腐剂:麝香草酚。
6.血清生化结果是随年龄增加而升高:甘油三脂和总胆固醇。
7.实验室常用制备纯水的方法:蒸馏法。
8.可享二级甚至一级纯水的制取方法:混合提纯系统。
9.临床实验室用水,通常采用:ⅱ级水。
10.ⅲ级水用于:仪器、器皿的自来水清洁后冲洗。
11.关于清洁液的采用叙述错误的就是:如果清洁液变为黑色,再加入适量的重铬酸钾和浓硫酸,还可以稳步采用。
12.电解质测定的决定性方法:同位素稀释――质谱分析法。
13.血清总蛋白测定的参考方法:凯氏定氮法。
14.已连续5次结果在均数线的同一侧,-s图失控的整体表现为:“飘移”。
15.血清葡萄糖测量的参照方法:己糖激酶法。
16.作为常规方法的工作标准及为控制物定值的标准试剂为:二级标准品。
17.系统误差错误的是:误差没有一定的大小和方向。
18.关于随机误差的叙述恰当的:误差没一定的大小和方向。
可正可负。
19.则表示精密度较好的指标就是:标准差20.用以表示测定结果中随机误差大小程度的指标:精密度21.用的是检测候选方法的比例系统误差的试验:回收试验22.用于检验候选方法的恒定系统误差的试验:干扰试验23.关于废旧试验的注意事项叙述错误的就是:废旧试验的目的就是为了增加随机误差24.指常规测量中发生日间变异很大的情况,--s图失控的整体表现为:精密度的变化25.火焰光度法就是属:发射光谱26.底物或产物的变化量与时间成正比的酶促反应时期称为:线性期27.下列属于ldh2的四聚体是:h3m28.被指出就是确诊肝细胞受损最脆弱的指标之一的就是:alt29.常用于肝硬化程度确诊的酶就是:mao30.急性胰腺炎时,下列哪一种酶在血浆中酶活性明显增高:淀粉酶31诊断急性心肌梗死最为敏感的指标是:ck―mb32.急性心肌梗死时,以下哪一种ldh同工酶增高:ldh333.对于前列腺癌的诊断具有重要价值的是:酸性磷酸酶(acp)34.溃疡性结肠炎时,血浆下列哪种蛋白质升高:α1―酸性糖蛋白35.具有蛋白酶抑制作用的急性时相反应蛋白是:α1―抗胰蛋白酶36.可以帮助推论肝癌分化程度及肝癌患者病情和预后的血浆蛋白就是:甲胎蛋白37.帮助肝豆状核变性确诊最存有意义的血浆蛋白质就是:铜绿蛋白38.可防止血红蛋白从肾丢失而为机体有效地保留铁的血浆蛋白质是:结合珠蛋白39.缺铁性低色素贫血时,下列哪一种血浆蛋白质增高:转铁蛋白40.血浆结合珠蛋白降低见于:血管内溶血41.能够转化成补体,引起调理作用,进一步增强细胞的毁灭功能的血浆蛋白质就是:c―反应蛋白42.可以做为肝功能受损的脆弱指标的血浆蛋白质就是:前白蛋白alt43.以下哪一种疾病时,整体表现为血浆白蛋白含量显著低落:肝脏疾病44.测定蛋白质的参考方法是:凯氏定氮法45.存有一个血清白蛋白(pⅰ=4.8)和血红蛋白(pⅰ=6.8)的混合物,在哪种ph条件下电泳,拆分效果最出色:ph8.646.bcg法测定血清白蛋白首先的缓冲液配方是:琥珀酸缓冲液47.血浆纤维蛋白含量减少,常见于:弥散性血管内凝血(dic)48.既能使血糖升高,又能使血糖降低的激素是:甲状腺素49.糖尿病的诊断标准错误的是:连续三次作口服糖耐量试验50.目前已被推荐为血糖测定首选方法是:葡萄糖氧化酶法51.病理情况下,患者血浆中可出现下列哪种脂蛋白:cm52.不仅能够辨识apob100,也可以辨识apoe的受体就是:残粒受体53.沉淀法测定hdl―c,已不中华医学会检验分会推荐作为常规测定方法的是:磷钨酸--镁发54.低胆固醇血症相等于who哪一种表型:ⅱa型55.血清(浆)脂蛋白载脂蛋白的测定,其结果与冠心病发病呈负相关的是:hdl―c56.以下测量血清甘油三酯的方法中,目前为中华医学会检验分会所推荐方法的就是:磷酸甘油氧化酶两步法(双试剂法)57.有一个血清白蛋白(pⅰ=4.8)和血红蛋白(pⅰ=6.8)的混合物,在哪种ph条件下电泳,分离效果最好:ph8.658.挑选酶的拉沙泰格赖厄县底物,高文瑞用以下哪一种km值的底物:0.05mol/l59.用比色法测量血清总钙时,重新加入以下哪种化合物以消解标本中镁离子的阻碍:8―羟基喹啉60.被国家卫生部临床检验中心推荐为测定镁常规方法的是:甲基百里香酚蓝(mtb)比色法61.火焰光度计的使用是在什么时期:19世纪50年代62.分析测定中不属于系统误差的是:天平砝码读错63.以下哪一种方法不可以避免血液标本的甲状腺:用抗凝管搞容器时,应用领域力震荡,并使血液与抗凝试剂充份搅匀64.关于km值的描述,不正确的是:km值越大,酶与底物亲和力越大65.血糖一般是指:血液中存在的葡萄糖66.正常人口服75克葡萄糖后,通常血糖何时恢复正常:2小时67.当给病人注射葡萄糖以后,体内的钾代谢有什么变化:细胞外液钾进入细胞内68.严重腹泻,呕吐的患者很易引起水盐代谢障碍,常见的为:低血钾,失水69.血中哪一种胆红素增加会在尿中出现:结合胆红素70.以下不在肝脏合成的血浆蛋白质是:免疫球蛋白71.同位素稀释-质谱分析法应该属于:参考方法72.之下列入双试剂的优点,除外:有助于提升检测速度73.下列哪项血清生化结果是随年龄增加而升高的:甘油三酯和总胆固醇74.下列哪项不符合质控品应具有的特征:瓶间变异小于5%75.型糖尿病的特点不符合的是:与hla有关76.饭后血糖先增高然后恢复正常,就是由于:胰岛素排泄减少77.低脂蛋白血症ⅱa 患者血中:ldl和胆固醇升高78.血浆中[h+]、[hco3-]、[ca2+]三者的关系是:[h+]↑、[hco3-]↓、[ca2+]↑79.血气分析标本如不能及时测定应保存于冰浴,其理由为:防止co2气体丧失80.目前测定cl-最好的方法是:离子选择电极法81.急性胰腺炎血淀粉酶开始升高时间:6~12h82.血淀粉酶达至峰值时间:12~24h83.血淀粉酶持续增高时间:2~5d84.脂肪酶已经开始增高时间:4~8h85.脂肪酶持续增高时间:8~14d86.ck-mb在什么时候达到峰值:16~24h87.总ck在什么时候达峰值:20~30h88.ldh 在什么时候达峰值:30~60h89.cta在什么时候达峰值:12~24h90.mb在什么时候达峰值:6~9h91.由肾脏排泄的物质存有:肾素;血管紧绷素;醛固酮;前列腺素92不连续聚丙烯酰胺凝胶电泳的物理效应有:浓缩效应;电荷效应;分子筛效应93影响心肌酶释放出来速度的数量的因素,恰当的就是:心肌细胞内外酶浓度的差异;酶在心肌细胞内定位与存有形式;酶蛋白分子量的大小;心肌酶的释放出来速度与酶的分子量成反比94.肌红蛋白(mb):就是横纹肌非政府特有的色素蛋白;由一条多肽链和1个血红素分子形成;在肌细胞内储藏和运输氧的能力95.细胞外液以哪些阴离子为主:hco3-;cl-96.以下哪些就是血浆蛋白质的功能:营养促进作用;保持血浆胶压;运输载体;新陈代谢调控;免疫系统防卫97.有关糖化血红蛋白的叙述正确的是:包括hba1和hba0;反映过去6~8周平均血糖水平;用胰岛素治疗的糖尿病人,应将糖化血红蛋白作为常规检测指标;是最长期的糖尿病控制指标98.酸碱平衡与血钾与血钾浓度的相互关系就是:代谢性碱中毒时可以引发低血钙;代谢性酸中毒时可以引发低血钾;代谢性酸中毒时可以引发低血钙99.血气分析仪可直接测定如下哪些指标,其他是通过此计算出来的:ph;paco2;pao2;100.肝脏在脂肪代谢中的作用:生成酮体;合成脂蛋白与磷脂;合成胆固醇酯。
检验师生化知识点总结一. 生物化学的基本概念1. 生物化学的定义:生物化学是研究生命现象中的物质合成、降解、能量转化与调节等的化学规律的学科。
2. 生物化学的特点:生命现象具有高度组织和调节性,其物质在组织与器官中有高度的组织特异性,具有高度的生物学活性,异常状态对生物体来说极为有害。
3. 生物体内的化学成分:生物体内的化学成分有机物和无机物两大类。
有机物如蛋白、糖、脂肪等,无机物如水、无机盐、杂质等。
4. 生物化学的研究内容:生物化学研究的范围非常广泛,包括细胞的成分、结构与功能,生物大分子以及其转化与调节、生物体内各种物质代谢途径、生长与发育等。
二. 生物体内物质的组成1. 水的生物学意义:水是生命的物质载体,是体内各种物质反应的场所和媒介。
水的化学性质是极其特殊的,它的极性和氢键的存在使得水具有极强的溶解能力,能够使细胞内的各种物质得以分子扩散。
生命的起源与活性与水分子结构直接有关。
2. 有机物的生物学意义:如糖、脂肪、蛋白质和核酸等都是生物体内的重要有机物,它们构成了细胞和生物体的重要组成部分,并且参与细胞代谢各种生理过程。
三. 生化反应与酶学1. 生物体内代谢反应的类型:生物体内代谢反应包括合成反应和降解反应两种,生物体内的各种代谢过程都是由一系列生物催化剂—酶来调节和加速的。
2. 酶的特性:酶是生物体内催化作用的生物大分子催化剂,能够促进特定的生化反应的进行,具有高度的催化效率,并能够选择性地催化特定的反应。
3. 酶的作用机制:酶催化反应的速度是受到多种因素的影响,如底物与酶的结合、底物的浓度、温度和pH等因素。
四. 生物体内能量与ATP1. 生物体内能量的来源:生物体内的能量来自于食物的氧化分解,通过呼吸链从食物中提取出来。
2. ATP的合成和分解过程: ATP是生物体内的能量储备物质,对细胞新陈代谢过程有着极为重要的影响。
五. 糖的代谢1. 糖的生成:生物体内的大部分糖都来自于光合作用从二氧化碳和水生成的葡萄糖。
百分吸光系数:指在一定波长下,吸光物质的溶液浓度为1g/100ml,光程为1cm 时的吸光度,单位是ml/(g·cm)。
标准曲线:指通过测定一系列已知组分的标准物质的某理化性质,而得到的性质的数值曲线。
层析:指利用各组分物理性质的不同,随流动相通过固定相时分离速度不同将多组分混合物进行分离及测定的方法。
层析法:混合物中各种色素以不同的速率通过柱子,从而彼此分开。
分离开的色素形成不同的色带而易于区分,由此得名为色谱法(Chromatography),又称层析法。
重组子:两个突变位点之间可发生交换产生野生型的最小单位,即不能由重组分开的基本单位。
重组子另一定义是指,含有重组DNA分子的转化细胞电泳:带电粒子在直流电场中向着所带电性相反的电极移动的现象。
电渗:电动现象之一,指在电场作用下液体(通常是水)相对于和它接触的固定的固体相作相对运动的现象。
等电点:当蛋白质溶液处于某一pH时,蛋白质解离成正、负离子的趋势相等,即成为兼性离子,净电荷为零,此时溶液的pH称为蛋白质的等电点。
(pH大于等电点时蛋白质带正电,小于带负电)分配系数(Kd):物质在两种不相混的溶剂中平衡时的浓度比。
反映了溶质在两相中的迁移能力及分离效能是衡量溶质分子被阻滞程度的一个特征性常数分光光度法:根据物质对光的吸收特性和吸收强度,对物质进行定性和定量的分析方法。
是利用物质对某种波长的光具有选择性吸收的建立起来的鉴别物质或测定其含量的一项技术。
分子筛:狭义上讲分子筛是结晶太的硅酸盐或硅铝酸盐,由硅氧四面体通过氧桥键相连而成,广义上讲,结构中有规整而均匀的孔道,孔径为分子大小的数量级,它只允许直径比孔径小的分子进入,因此能将混合物中的分子按大小加以筛分GOD法测定血糖:葡萄糖氧化酶(GOD)利用空气和水催化葡萄糖分子中的醛基氧化,生成葡萄糖糖酸和过氧化氢;过氧化氢经过氧化物氧化酶(POD)氧化成水和氧;氧将4-氨基安替吡啉和酚氧化成红色的醌化合物,醌和葡萄糖成正比。
检验师知识点总结生化一、基本概念1. 生物分子的结构和功能:生物分子是构成细胞的基本物质,包括蛋白质、核酸、脂质和碳水化合物等。
它们在细胞内发挥着重要的生物功能,如酶促反应、信号传导等。
2. 酶的性质和功能:酶是生物催化剂,能够加速生物反应的速率。
了解酶的性质和功能对于理解生物代谢和疾病机制至关重要。
3. 代谢途径和调控:代谢是细胞内物质转化的过程,包括能量代谢和物质代谢。
了解代谢途径和调控机制有助于理解疾病的发生和发展。
4. 细胞信号传导:细胞通过信号分子进行相互通讯,调控细胞的生理和病理过程。
理解细胞信号传导对于探索疾病的分子机制具有重要意义。
5. 细胞器的结构和功能:细胞内的各种器官协同合作,完成细胞的生命活动。
了解细胞器的结构和功能可以帮助理解各种细胞生理和病理过程。
二、生物分子检测与分析1. 蛋白质测定:蛋白质是生命活动的重要组成部分,对蛋白质的定量和质量分析有助于研究生物学问题和诊断疾病。
2. 核酸检测:核酸是遗传信息的载体,对DNA和RNA的检测可以帮助诊断遗传性疾病和研究基因表达调控机制。
3. 碳水化合物测定:碳水化合物是细胞的能量来源,对碳水化合物的测定可以帮助了解细胞的能量代谢情况。
4. 脂质分析:脂质在细胞膜的结构和功能中起着重要作用,对脂质的分析可以帮助理解细胞膜的生物学功能和疾病发生的机制。
5. 生物分子相互作用:生物分子之间存在着复杂的相互作用关系,了解生物分子的相互作用对于研究细胞生物学和疾病的发生有重要意义。
三、免疫学基础1. 免疫系统的结构和功能:免疫系统是人体抵抗病原体的重要防线,了解免疫系统的结构和功能对于疾病的治疗和预防具有重要意义。
2. 抗体的结构和功能:抗体是免疫系统产生的特异性蛋白质,具有特异的识别和结合能力,对于抗体的结构和功能进行深入了解可以帮助理解免疫应答的机制。
3. 免疫细胞的类型和功能:免疫系统中存在多种免疫细胞,如T细胞、B细胞、巨噬细胞等,它们在免疫应答和细胞免疫中发挥着重要作用。
生化部分:第一章糖类1.糖类是多羟醛、多羟酮或其衍生物,或水解时能产生这些化合物的物质。
2.糖类根据碳原子数分为丙糖、丁糖、戊糖、己糖;又根据聚合度可以分为单糖、寡糖、多糖。
3.糖类生物学作用:作为生物体的结构成分;作为生物体内的主要能源物质;在生物体内转变为其他物质;作为细胞识别的信息分子。
4.旋光异构:一种异构体使平面偏振光沿顺时针方向偏转,称为右旋型异构体,或D型异构体。
反之,L型异构体。
5.如果在投影式中(离羰基最远的手型C*)碳原子上-OH具有与D(+)-甘油醛C2-OH相同的取向,称为D型糖,反之则为L型糖。
羟甲基在环面上为D,下为L型。
6.许多单糖在水溶液中有变旋现象,原因是单糖分子内醇基与醛基或酮基发生可逆亲核加成,形成环状半缩醛或半缩酮。
经常发生在C5羟基和C1醛基形成六元环吡喃糖,或C5羟基和C2酮基之间形成五元环呋喃糖。
7.在标准定位的Haworth式中D-单糖异头碳的羟基在氧环面下方为alpha-异头物,上方为beta-异头物。
8.几乎所有的单糖及其衍生物都有旋光性;除了甘油醛微溶于水,其他单糖易溶于水。
9.蔗糖,无异构体,无变旋现象,无还原性,不能成脎。
10.乳糖,两种异构体,有变旋现象,具有还原性,能成脎。
11.麦芽糖,变旋现象在水溶解中形成alpha、beta 和开链混合物,具有还原性,能成脎。
12.多糖,非还原糖,无变旋现象,无甜味,一般不能结晶。
13.糖蛋白及其糖链:糖链的生物学功能——糖链在糖蛋白新生肽链折叠和缔合中的作用,糖链影响糖蛋白的分泌和稳定性,糖链参与分子识别和细胞识别(糖链与血浆中老蛋白的清除,糖链与精卵识别,糖链与细胞黏着);糖链与糖蛋白的生物活性——糖链在酶的新生肽链折叠、转运和保护等方面普遍起作用,但糖链与成熟酶活性的关系因酶而异。
糖蛋白激素主要有腺垂体促激素类(FSH、LH、TSH和EPO等)。
每分子lgG平均含糖链三条,其中两条存在于Fc 段每条重链,其余位于Fab 段的高变异区。
生化所有知识点总结一、生物大分子1. 蛋白质蛋白质是生物体内最重要的有机分子之一,它们是构成生命的重要组成部分,广泛参与生物体的生理生化过程。
蛋白质的标准结构由氨基酸线性排列组成,其氨基酸残基之间通过肽键相连。
蛋白质的功能包括酶、激素、抗体等。
2. 核酸核酸是生物体内最重要的化学物质之一,包括DNA和RNA。
DNA携带生物体的遗传信息,RNA在蛋白质合成中起着重要的作用。
3. 多糖多糖是由许多单糖分子通过糖苷键连接而成,包括淀粉、糖原、纤维素等。
4. 生物膜生物膜是由脂质和蛋白质组成的薄膜,它存在于细胞表面,构成细胞膜和细胞器膜,起着保护细胞、控制物质进出的作用。
二、生物大分子的结构和功能1. 蛋白质的结构蛋白质的结构包括一级结构、二级结构、三级结构和四级结构。
一级结构是蛋白质的氨基酸序列,二级结构是由氢键形成的α-螺旋和β-折叠,三级结构是由蛋白质的各个区域所形成的空间结构,四级结构是由多个蛋白质相互组合形成的功能性结构。
2. 蛋白质的功能蛋白质的功能包括酶、激素、抗体、结构蛋白等。
酶是生物体内的催化剂,参与生物体内的代谢过程;激素是生物体内的调节剂,参与生物体内的内分泌系统;抗体是生物体内的免疫物质,参与生物体内的免疫反应;结构蛋白主要构成生物体内各种组织和器官。
3. 核酸的结构DNA是由脱氧核糖核酸分子组成,是生物体内传递遗传信息的重要分子;RNA是由核糖核酸分子组成,是生物体内蛋白质合成的重要分子。
4. 核酸的功能DNA的功能是存储和传递遗传信息,参与生物体内的遗传过程;RNA的功能是带有遗传信息的DNA按照一定规律转录成RNA,再依据RNA的信息合成蛋白质。
5. 多糖的结构和功能多糖是由许多单糖分子通过糖苷键连接而成的大分子,包括淀粉、糖原、纤维素等。
它们是生物体内的能量来源和结构组分。
6. 生物膜的结构和功能生物膜是由脂质和蛋白质组成的薄膜,其构成了细胞膜和细胞器膜。
生物膜的功能包括保护细胞,控制物质进出,参与细胞信号传导等。
临床生化室知识点总结一、临床生化常用检测项目1. 肝功能检测:包括血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)、总胆红素、直接胆红素、碱性磷酸酶、白蛋白等指标。
肝功能检测是评估肝脏功能的重要手段,可以用于肝炎、肝硬化、脂肪肝等疾病的诊断和治疗监测。
2. 肾功能检测:包括血清肌酐、尿素氮、尿酸、尿素清除率等指标。
肾功能检测可以评估肾脏的滤过、排泄和调节功能,可用于肾炎、肾结石、肾衰竭等疾病的诊断和治疗监测。
3. 血液学检测:包括血红蛋白、红细胞计数、白细胞计数、血小板计数、红细胞沉降率、白细胞分类计数等指标。
血液学检测可以评估贫血、白细胞增高或减低、血小板减少等病变,对于贫血、白血病、感染等疾病的诊断和治疗监测具有重要意义。
4. 血脂检测:包括总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)等指标。
血脂检测可以评估血液中脂质的水平,是动脉粥样硬化、高血压、冠心病等心血管疾病的重要筛查和诊断指标。
5. 血糖检测:包括空腹血糖、餐后血糖、糖化血红蛋白等指标。
血糖检测可以评估血液中葡萄糖的水平,是糖尿病、低血糖等疾病的重要筛查和诊断指标。
6. 电解质检测:包括血钠、血钾、血氯、血钙等指标。
电解质检测可以评估血液中电解质的平衡状态,对于低钠血症、高钾血症、低钙血症等疾病的诊断和治疗监测具有重要意义。
7. 免疫学检测:包括C反应蛋白(CRP)、风湿因子(RF)、抗核抗体(ANA)、甲状腺球蛋白(TG)、甲状腺过氧化物酶抗体(TPOAb)等指标。
免疫学检测可以评估免疫系统的功能状态,对于风湿性疾病、自身免疫性疾病、感染性疾病等的诊断和治疗监测具有重要意义。
8. 肿瘤标志物检测:包括甲胎蛋白(AFP)、癌胚抗原(CEA)、前列腺特异性抗原(PSA)、白血病淋巴瘤细胞4(CD4)等指标。
肿瘤标志物检测可以评估肿瘤相关生物标志物的水平,是肿瘤的筛查、诊断和治疗监测的重要手段。
百分吸光系数:指在一定波长下,吸光物质的溶液浓度为1g/100ml,光程为1cm 时的吸光度,单位是ml/(g·cm)。
标准曲线:指通过测定一系列已知组分的标准物质的某理化性质,而得到的性质的数值曲线。
层析:指利用各组分物理性质的不同,随流动相通过固定相时分离速度不同将多组分混合物进行分离及测定的方法。
层析法:混合物中各种色素以不同的速率通过柱子,从而彼此分开。
分离开的色素形成不同的色带而易于区分,由此得名为色谱法(Chromatography),又称层析法。
重组子:两个突变位点之间可发生交换产生野生型的最小单位,即不能由重组分开的基本单位。
重组子另一定义是指,含有重组DNA分子的转化细胞电泳:带电粒子在直流电场中向着所带电性相反的电极移动的现象。
电渗:电动现象之一,指在电场作用下液体(通常是水)相对于和它接触的固定的固体相作相对运动的现象。
等电点:当蛋白质溶液处于某一pH时,蛋白质解离成正、负离子的趋势相等,即成为兼性离子,净电荷为零,此时溶液的pH称为蛋白质的等电点。
(pH大于等电点时蛋白质带正电,小于带负电)分配系数(Kd):物质在两种不相混的溶剂中平衡时的浓度比。
反映了溶质在两相中的迁移能力及分离效能是衡量溶质分子被阻滞程度的一个特征性常数分光光度法:根据物质对光的吸收特性和吸收强度,对物质进行定性和定量的分析方法。
是利用物质对某种波长的光具有选择性吸收的建立起来的鉴别物质或测定其含量的一项技术。
分子筛:狭义上讲分子筛是结晶太的硅酸盐或硅铝酸盐,由硅氧四面体通过氧桥键相连而成,广义上讲,结构中有规整而均匀的孔道,孔径为分子大小的数量级,它只允许直径比孔径小的分子进入,因此能将混合物中的分子按大小加以筛分GOD法测定血糖:葡萄糖氧化酶(GOD)利用空气和水催化葡萄糖分子中的醛基氧化,生成葡萄糖糖酸和过氧化氢;过氧化氢经过氧化物氧化酶(POD)氧化成水和氧;氧将4-氨基安替吡啉和酚氧化成红色的醌化合物,醌和葡萄糖成正比。
将醌与标准液比色,算出血糖的含量。
感受态细胞:受体细胞经过一些特殊方法(如:CaCl2,RuCl等化学试剂法)的处理后,细胞膜的通透性发生变化,成为能容许多有外源DNA的载体分子通过的感受态细胞。
聚丙烯酰胺凝胶浓度(T%):每100ml凝胶溶液中含有的单体(Acr,a)和交联剂(Bis,b)总克数称为凝胶浓度,用T%表示聚丙烯酰胺凝胶交联度(C%):凝胶溶液中,交联剂(Bis)占单体单体(Acr)和交联剂(Bis)总量的百分数称为交联度,用C%表示竞争性抑制:抑制剂的结构域底物结构相似或部分相似,可与底物共同竞争与酶的活性中心结合而抑制酶的活性。
这种抑制使得Km增大,而Vmax不变。
碱裂解法:是一种应用最为广泛的制备质粒DNA的方法,碱变性抽提质粒DNA 是基于染色体DNA与质粒DNA的变性与复性的差异而达到分离目的。
交联度:用C%表示,表示交联剂克数占凝胶总克数的百分数。
交联度过高不仅凝胶变脆缺乏弹性且透明度降低交联度过低凝胶聚合不良呈糊状。
拷贝数:就是指某基因(可以是质粒)在某一生物的基因组中的个数.空白管:即管内溶液用与样本相同的一切试剂而不含被测定的物质的试管,用以抵消或减少实验误差Lambert-Beer定律:是光吸收的基本定律,是描述物质对单色光吸收的强弱与吸光物质的浓度和厚度间的关系的定律,公式为A=Ecl,A为吸光度,E是吸光系数,c为浓度,l为厚度。
摩尔消光系数/摩尔吸光系数:指一定波长时,溶液的浓度为1 mol/L,光程为 1cm 时的吸光度值,用ε表示,单位是L/(mol·cm)。
米氏常数(Km):米氏常数,是酶的一个特征常数大小反映了酶与底物亲和力的强弱。
米-曼氏方程:定量地描述底物浓度与反应速率的关系。
([S]:底物浓度V:不同[S]时的反应初速度Vmax:最大反应速度(maximum velocity) Km:米氏常数(Michaelis constant) )酶促反应动力学:研究酶促反应速率以及各种因素对酶促反应速率影响机制的影响的科学。
酶单位:在最适反应条件下1小时完全消化1ugDNA的酶量为1个单位凝胶层析:是指混合物随流动相流经作为固定相的凝胶层析柱时,混合物中各物质因分子大小不同而被分离的技术内水体积(Vi):层析柱中溶胀凝胶颗粒内部所含水相的总体积ml,也称内水体积,常用Vi表示逆转录:以RNA为模板,由逆转录酶催化4种dNTP聚合,产生DNA的过程,又称为RNA指导的DNA合成。
迁移率:带电颗粒在单位电场强度下的泳动速度,即载流子在电场作用下运动速度的快慢的量度,运动得越快,迁移率越大;运动得慢,迁移率小。
琼脂糖凝胶电泳:是用琼脂或琼脂糖作支持介质的一种电泳方法。
琼脂糖链依分子内与分子间氢键及它力的作用使其互相盘绕形成绳状琼脂糖束,构成大网孔性凝胶。
双缩脲反应:双缩脲在碱性溶液中与硫酸铜反应生成紫红色化合物,称为双缩脲反应双倒数作图法:一个酶促反应速度的倒数(1/v)对底物浓度的倒数(1/[s])的作图。
X和y轴上的截距分别代表米氏常数(Km)和最大反应速度(Vmax)的倒数。
外水体积(Vo):层析柱床中溶胀凝胶颗粒间隙中液体所占的体积,即空隙的总体积,也称外水体积,常用Vo表示洗脱体积(Ve):洗脱时间是指从加样开始到检测器检测出峰所经过的时间。
在这期间内流出的洗脱液体积称为洗脱体积,常用Ve表示。
限制性内切酶:一类具有严格识别位点,并在识别位点内或者附近切割双链DNA 的脱氧核糖核酸酶。
血糖:即血液中所含的糖,通常是葡萄糖,机体能源之一。
主要来源是食物中的淀粉和糖类,正常值为3.89~6.10mmol/L(70~110mg/dl)印记术:将各种生物大分子从凝胶转移到一种固定基质上的过程称为印记术,已广泛用于DNA、RNA、蛋白质的检测。
转化:是将异源DNA分子引入一细胞株系,使受体细胞获得新的遗传性状的一种手段,是基因工程等研究领域的基本实验技术。
质粒DNA:质粒为环形闭合的双股DNA,存在于细胞质中,质粒编码非细菌生命所必需的某些生物学性状,如性菌毛、细菌素、毒素和耐药性等。
质粒具有可自主复制、传给子代、也可丢失及在细菌之间转移等特性,与细菌的遗传变异有关。
绪论简述分光光度法原理。
(5分)分光光度法是利用物质对某种波长的光具有选择性吸收的特性建立起来的鉴别物质或测定其含量的一项技术。
当一束强度为I0的单色光垂直照射某物质的溶液后,由于一部分光被体系吸收,因此透射光的强度降至I,则溶液的透光率T为I/I0。
根据朗伯(Lambert)-比尔(Beer)定律,吸光度与溶液的浓度成正比,与光程成正比:A=KLC,C为该物质浓度,K为吸光系数,L为光程。
简述分光光度法的波长选择的原则。
(5分)一般是选择待测物质最大吸收峰的波长,但在实际测验中应该全面考虑①应使被测溶液有适当的光密度.②应使干扰影响降低至最低限度③应使标准曲线在尽可能大的范围内接近直线实验一、蛋白质定量分析技术简述标准曲线的作用及绘制要点。
(5分)作用:①标准曲线又称校正曲线或工作曲线,它是比色分析法中不可缺少的步骤。
从浓度-光密度直线的直线特性,可以判断所采用方法的呈色反应是否符合Lambert-Beer定律。
②做多次平行测定绘制标准曲线,可判断在整个测定过程中操作、仪器等误差的大小,从而确定该测定方法的可靠性。
③从绘制标准曲线的斜率可以比较各种方法的灵敏度。
④当进行大批样品分析时,可省略多次计算,从光密度值直接查阅标准曲线而求得被测物质的浓度。
作法: ①标准液浓度的选择:在制备标准曲线时,标准液浓度选择一般应能包括待测样品的可能变异最低与最高值,一般可选择5种浓度。
浓度差距最好是成倍增加或等级增加,并应与被测液同样条件下显色测定。
②标准液的测定:在比色时,读取光密度至少读2-3次,求其平均值,以减少仪器不稳定而产生的误差。
绘制要点:①用普通方格纸作图。
图纸最好是正方形(长:宽=1:1)或长方形(长:宽=3 :2),以横轴为浓度,纵轴为光密度,一般浓度的全距占用了多少格,光密度的全距也应占用相同的格数。
②绘制标准曲线时,以浓度位置向上延长,光密度位置向右延长、交点即为此坐标标点。
然后,将各座标点和原点联成一条线,若符合Lambert-Beer氏定律,则系通过原点的直线。
③若各点不在一直线,则可通过原点,尽可能使直线通过更多点,使不在直线上的点尽量均匀地分布在直线的两边。
④标准曲线绘制完毕以后,应在座标纸上注明实验项目的名称,所使用比色计的型号和仪器编号、滤光片号码或单色光波长以及绘制的日期、室温。
⑤绘制标准曲线:一般应作二次或三次以上的平行测定,重复性良好曲线方可应用。
⑥绘制好的标准曲线只能供以后在相同条件下操作测定相同物质时使用。
当更换仪器、移动仪器位置、调换试剂及室温有明显改变时,标准曲线需重新绘制。
双缩脲测定蛋白质浓度原理:双缩脲在碱性溶液中与硫酸铜反应生成紫红色化合物,称为双缩脲反应。
蛋白质分子中含有许多肽键(-CONH-)在碱性溶液中也能与Cu2+反应产生紫红色化合物。
在一定范围内,其颜色的深浅与蛋白质浓度成正比。
方法:标准曲线法优点:操作简便、迅速、受蛋白质种类性质的影响较小;缺点:灵敏度较差,特异性不高。
-CONH2、 -CH2NH2、-CS-NH2等基团也有此反应。
注意事项:双缩脲法测定蛋白质范围为1-10mg。
BCA法测定蛋白质浓度原理:二甲酸喹啉(BCA)与硫酸铜等试剂组成的试剂,混合在一起后颜色为苹果绿,即BCA工作试剂。
在碱性条件下,BCA与蛋白质结合时,蛋白质将Cu2+还原成Cu+,一个Cu+螯合两个BCA分子,工作试剂由原来的苹果绿变成紫色复合物,在一定范围内,颜色深浅与蛋白质浓度成正比。
优缺点:1.操作简单,快速,45分钟内完成测定,比经典的lowry改良法快4倍且更加方便。
2.准确灵敏,试剂稳定性好,bca试剂的蛋白质测定范围是20~200ug/ml,微量bca测定范围在0.5~10ug/ml。
3.经济实用,除试管外,测定可在微孔板中进行,大大节约样品和试剂用量。
4.抗试剂干扰能力强,但仍受一些物质,试剂的干扰。
方法:标准曲线法注意事项:实验操作的一般注意事项。
紫外分光光度法测定蛋白质浓度法原理:蛋白质分子中含有具有共轭双键的罗酪氨酸,色氨酸等芳香族氨基酸。
它们具有吸收紫外光的性质,其吸收高峰在280nm波长处,且在此波长内吸收峰的光密度值与其浓度成正比关系,故可作为蛋白质定量测量的依据。
但由于各种蛋白质的酪氨酸和色氨酸的含量不同,故要准确定量,必须要有待测蛋白质的标准纯品作比较,或且已经知道其消光系数作为参考。
优缺点:1.操作简便,快速,样品经稀释后,倒入比色杯即可测定2.样品不缺失,测定后可以回收,多用于纯化蛋白质的微量测定 3.主要缺点是精确度差,由于其他物质在同一紫外区又吸收以及不同蛋白质中芳香族氨基酸的含量变动过大所造成的。