与凝胶电泳有关的生物学试题例析

与凝胶电泳有关的生物学试题例析李进京河南省汝阳县第一高级中学471200（发表于新高考杂志）凝胶电泳技术用于分离不同物理性质（如大小、形状、等电点等）的分子。

该技术操作简便快速，可以分辨用其它方法（如密度梯度离心法）所无法分离的DNA片段。

在中学生物学习过程中，同学们常常感到与此有关的试题有一定的难度。

因此本文进行例析。

例1 对禽流感的确诊，先用PCR技术将标本基因大量扩增，然后利用基因探针，测知待测标本与探针核酸的碱基异同。

下图P表示禽流感病毒探针基因在凝胶的电泳标记位置，M、N、Q、W是四份送检样品在测定后的电泳标记位置，哪份标本最有可能确诊为禽流感（）A．M B．N C．Q D．W解析：相同的DNA应的相同的电泳图谱，禽流感病毒探针基因在凝胶的电泳标记位置应与禽流感患者的最相似，因此选C例2 在2004年12月26日发生的印度洋地震海啸灾难中，死亡人数已达到15万，为了帮助辨别遇难者身份，我国政府派出了DNA 鉴定专家组到泰国为遇难遗体做法医病理检验。

下列是一组法医检验DNA时常用到的生物技术或物质：（1）PCR技术是把某一DNA片段在体外酶的作用下，合成许多相同片段的一种方法，利用它能迅速而特异的扩增任何要求的目的基因或DNA分子片段；（2）限制性内切酶能识别特定的DNA序列并进行剪切，不同的限制性内切酶可以对不同的核酸序列进行剪切以选择目的基因或DNA片段；（3）电泳技术则是在外电场作用下，利用分子携带电荷不同，把待测分子的混合物放在一定介质（如琼脂糖凝胶）中进行分离和分析的实验技术，利用它能分离氨基酸、多肽、蛋白质、核苷酸、核酸等物质，也可用作亲子法学鉴定。

请阅读上述内容并回答下列问题：（1）PCR技术能把某一DNA 片段进行扩增，是依据什么原理？；利用PCR技术扩增DNA片段时用到的“体外酶”通常是指什么酶？。

（2）电泳过程中分子的迁移率除与本身所带电荷的多少有关以外，你认为还受什么因素影响？（至少列出一种）。

高考生物专题复习《综合PCR的基因工程问题》真题练习含答案一、选择题1．(2024·厦门高三质检)如图表示PCR 过程中某个阶段反应体系的情况，①②③④表示相关物质，L、R 表示方向。

下列叙述正确的是()A．②链从L到R的方向为3′→5′，①②链均可作为子链合成的模板B．PCR 过程需要通过解旋酶断开氢键，且为边解旋边复制C．以1个DNA为模板经3次循环需消耗8个引物③D．物质③的5′端添加了某序列，至少需经2次循环才可获得该序列的双链产物2．(2024·重庆高三质检)不对称PCR是利用不等量的一对引物来产生大量单链DNA(ssDNA)的方法，如图所示。

不对称PCR中加入的一对引物中含量较少的被称为限制性引物，含量较多的被称为非限制性引物，两者的比例通常为1∶100，PCR反应最初的若干次循环中，其扩增产物主要是双链DNA(dsDNA)，但当限制性引物消耗完后，就会产生大量的ssDNA。

下列相关说法错误的是()A．用不对称PCR方法扩增目的基因时，不需要知道基因的全部序列B．进行最初若干次循环的目的是增加模板DNA的量C．最后大量获得的ssDNA与图中乙链的碱基序列一致D．因为双链DNA和单链DNA的分子量大小不同，可通过电泳方法将其分离3．(2024·无锡高三模拟)重叠延伸PCR可实现定点基因诱变，其操作过程如图所示(凸起处代表突变位点)。

下列说法正确的是()A．过程①需要把两对引物同时加入一个扩增体系以提高扩增效率B．过程①需要2轮PCR才能得到图中所示PCR产物C．过程②的产物都可以完成延伸过程D．若过程④得到16个突变基因则需要消耗15个通用引物RP24．反向PCR是一种通过已知序列设计引物对未知序列(图中L、R)进行扩增的技术，其过程如图所示。

下列相关叙述不正确的是()A．过程①用同一种限制酶对未知序列两端进行切割B．过程②需要使用DNA连接酶，形成磷酸二酯键C．过程③PCR体系需要添加耐高温的DNA聚合酶和解旋酶D．该技术可检测T－DNA整合到植物染色体DNA的位置5．IKK激酶参与动物体内免疫细胞的分化。

2023-2024学年人教版高中生物单元测试班级 __________ 姓名 __________ 考号 __________一、选择题（本大题共计14小题每题3分共计42分）1.下列说法错误的是（）A. 凝胶色谱法分离蛋白质时相对分子质量大的蛋白质不能进入凝胶内部故移动速度较快B. 使用SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳的过程中不同蛋白质的电泳迁移率完全取决于分子的大小C. 血红蛋白提取实验中需要加入5倍体积的蒸馏水对红细胞进行洗涤以去除杂蛋白D. 凝胶色谱柱内的气泡会搅乱洗脱液中蛋白质的洗脱次序所以一旦发现有气泡必须重装色谱柱【答案】C【解析】解 A.凝胶色谱法分离蛋白质时相对分子质量大的蛋白质不能进入凝胶内部故移动速度较快 A正确B.在SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳方法中不同蛋白质的电泳迁移率完全取决于分子的大小 B正确C.洗涤红细胞的目的是去除杂蛋白需加入五倍体积的生理盐水进行洗涤 C错误D.凝胶色谱柱内的气泡会搅乱洗脱液中蛋白质的洗脱次序所以一旦发现有气泡必须重装色谱柱 D正确故选 C2.下列关于“DNA的粗提取与鉴定”实验叙述错误的是（）A. 向鸡血溶液中加蒸馏水搅拌可见玻棒上有白色絮状物B. 洗涤红细胞时使用生理盐水可防止红细胞破裂C. DNA在2 mol/L的 NaCl溶液中溶解度较高D. DNA溶液加入二苯胺试剂沸水浴加热后变蓝【答案】A【解析】A、向鸡血细胞液中加蒸馏水搅拌可使破裂细胞释放DNA 但不会观察到玻棒上有白色絮状物 A错误B、生理盐水与细胞内的液体是等渗溶液因此洗涤红细胞时使用生理盐水可防止红细胞破裂 B正确C、DNA在2 mol/L的 NaCl溶液中溶解度较高 C正确D、DNA溶液加入二苯胺试剂沸水浴加热后变蓝 D正确3.在还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定实验中对实验材料选择的叙述错误的是（）A. 马铃薯块茎中含有较多的糖且近于白色可用于进行还原糖的鉴定B. 花生种子富含脂肪且子叶肥厚是用于脂肪鉴定的理想材料C. 大豆种子蛋白质含量高是进行蛋白质鉴定的理想材料D. 鸡蛋清含蛋白质多是进行蛋白质鉴定的动物材料【答案】A【解析】解 A.马铃薯块茎中所含糖类主要是淀粉属于非还原糖不能用于进行还原糖的鉴定 A错误B.花生种子含脂肪多且子叶肥厚是用于脂肪鉴定的理想材料 B正确C.大豆种子蛋白质含量高是进行蛋白质鉴定的理想植物组织材料 C正确D.鸡蛋清含蛋白质多是进行蛋白质鉴定的动物材料 D正确故选 A4.研究发现癌细胞和正常细胞都必须依靠细胞膜上的葡萄糖载体(GLUT)转运葡萄糖葡萄糖进入正常细胞后可通过有氧呼吸分解葡萄糖进入癌细胞后主要以无氧代谢途径降解利用GLUT抑制剂阻断葡萄糖转运让癌细胞缺乏葡萄糖以致饿死据上述材料不能推出的结论是（）A. 葡萄糖进入细胞的方式有协助扩散、主动运输B. 与正常细胞相比癌细胞消耗的葡萄糖多C. 高浓度GLUT抑制剂能杀死癌细胞对正常细胞影响很小D. 癌细胞膜上的葡萄糖载体比正常细胞多【答案】C【解析】解 A.葡萄糖进入细胞需要载体的协助进入红细胞是协助扩散进入其他细胞是主动运输 A正确B.癌细胞分裂旺盛需要大量的能量而癌细胞主要通过无氧呼吸供能所以与正常细胞相比癌细胞消耗的葡萄糖多 B正确C.葡萄糖进入癌细胞和正常细胞都需要葡萄糖载体（GLUT）的协助所以高浓度GLUT 抑制剂能杀死癌细胞对正常细胞影响也很大 C错误D.癌细胞需要的葡萄糖多所以其膜上的葡萄糖载体比正常细胞多 D正确故选 C5.下图凝胶色谱法分离蛋白质示意图和SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳示意图分析错误的是（）A. 在装填图甲中凝胶色谱柱时一旦发现柱内有气泡存在就需要重装B. 图甲中大分子蛋白质因阻力大而移动慢所以最后从层析柱中流出来C.图乙中凝胶中加入的SDS可以使蛋白质迁移速率完全取决于分子大小D. 凝胶中的SDS带负电则应在电泳槽的①处接电源负极②处接电源正极【答案】B【解析】解 A.在装填凝胶色谱柱时凝胶装填在色谱柱内要均匀不能有气泡存在因为气泡会影响蛋白质洗脱的次序 A正确B.图甲中大分子蛋白质因不容易进入凝胶内部的通道路程短移动速度快所以最先从层析柱中流出来 B错误C.图乙凝胶中加入的SDS可以使蛋白质迁移速率完全取决于分子大小 C正确D.凝胶中的SDS带负电所以电泳槽的①处接电源负极②处接电源正极 D正确故选 B6.如图凝胶色谱法分离蛋白质示意图和SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳示意图．据图分析不正确的是（）A. 在装填图甲中凝胶色谱柱时一旦发现柱内有气泡存在就需要重装B. 图甲中大分子蛋白质因阻力大而移动慢所以最后从层析柱中流出来C. 图乙中凝胶中加入的SDS可以使蛋白质迁移速率完全取决于分子大小D. 凝胶中的SDS带负电所以电泳槽的①处接电源负极②处接电源正极【答案】B【解析】解 A、在装填凝胶色谱柱时凝胶装填在色谱柱内要均匀不能有气泡存在因为气泡会影响蛋白质洗脱的次序 A正确B、图甲中大分子蛋白质因不容易进入凝胶内部的通道路程短移动速度快所以最先从层析柱中流出来 B错误C 、SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳的迁移速率完全取决于分子大小因此图乙中凝胶中加入的SDS可以使蛋白质迁移速率完全取决于分子大小 C正确D、凝胶中的SDS带负电所以电泳槽的①处接电源负极②处接电源正极 D正确．故选 B．7.下列关于蛋白质的提取与分离的叙述正确的是（）A. 洗涤红细胞时直到上清液呈黄色表明红细胞已洗涤干净B. 蛋白质的纯化使用最多的是SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳法C. 将红细胞放入蒸馏水中即可获得血红蛋白D. 分离血红蛋白溶液时位于离心管第四层的是其他杂质的暗红色沉淀物【答案】D【解析】解 A.洗涤红细胞时直至上清液不再呈现黄色表明红细胞已洗涤干净 A错误B.鉴定蛋白质的纯度时使用最多的是SDS—聚丙烯酰氨凝胶电泳 B错误C.红细胞放入烧杯中加蒸馏水和40%体积的甲苯充分搅拌才能释放出血红蛋白 C错误D.分离血红蛋白溶液时位于离心管第四层的是其他杂质的暗红色沉淀物 D正确故选 D8.将粗提取的DNA丝状物分别加入0.14mol/LNaCl溶液、2mol/LNaCl溶液、体积分数为95%的酒精溶液中然后用放有纱布的漏斗过滤分别得到滤液P、Q、R以及存留在纱布上的黏稠物p、q、r 其中由于含DNA少可以丢弃的是（）A. P、Q、RB. p、q、rC. p、Q、rD. P、q、R【答案】D【解析】（2）将粗提取的DNA丝状物加入2mol/L的NaCl溶液中此时DNA溶解度较大过滤后 DNA主要存在于滤液q中纱布上的粘稠物q中DNA含量较少可以丢弃（1）（3）将粗提取的DNA丝状物加入体积分数为95%的酒精溶液中 DNA在酒精中的溶解度很低过滤后DNA主要存在于纱布上的粘稠物q中滤液R中DNA含量很少可以丢弃故选 D9.对禽流感的确诊先用PCR技术将标本基因大量扩增然后利用基因探针测知待测标本与探针核酸的碱基异同．右图P表示禽流感病毒探针基因在凝胶的电泳标记位置 M、N、Q、W是四份送检样品在测定后的电泳标记位置哪份标本最有可能确诊为禽流感（）A. MB. NC. QD. W【答案】C【解析】图中P表示禽流感病毒探针基因在凝胶的电泳标记位置 M、N、Q、W是四份送检样品在测定后的电泳标记位置其中Q的电泳位置与P最接近因此最有可能为禽流感10.控制哺乳动物的性别对畜牧业生产具有十分重要的意义 SRY基因是Y染色体上决定雄性性别的基因 SRY-PCR胚胎性别鉴定技术是现阶段进行胚胎性别鉴定最准确和最有效的方法下列说法错误的是（）A. 可利用Y精子DNA含量比Ⅹ精子低的差异筛选两种精子从而对胚胎性别进行控制B. 从Y染色体DNA分子上获取SRY 基因可用SRY 基因的部分核苷酸序列作引物C. SRY-PCR胚胎性别鉴定技术中要用到SRY基因特异性探针进行检测D. 利用PCR经过3次循环理论上获得的SRY基因占扩增产物一半【答案】D【解析】解 A.哺乳动物的Y染色体比X染色体短小故含Y精子DNA含量比含X精子低根据该差异可以筛选两种精子实现对胚胎性别的控制 A正确B.从Y染色体DNA分子上获取SRY基因然后用SRY基因的部分核苷酸序列作引物进行扩增 B正确C.SRY-PCR胚胎性别鉴定技术中要用到放射性同位素标记的SRY基因特异性探针进行检测 C正确D.因为经过3次循环之后才能出现目的基因的片段故利用PCR经过3次循环理论上获得的SRY基因占扩增产物1/4 , D错误故选 D11.下列关于血红蛋白的提取和分离的叙述中错误的是（）A. 红细胞的洗涤效果与洗涤次数、离心速度和离心时间有关B. 凝胶柱中适量气泡的存在会提高分离的效果C. 凝胶色谱法是一种根据相对分子质量的大小来分离蛋白质的方法D. 判断纯化的蛋白质是否为血红蛋白可采用电泳法鉴定【答案】B【解析】解 A.红细胞的洗涤效果与洗涤次数、离心速度和离心时间有关 A正确B.凝胶柱中适量气泡的存在会搅乱洗脱液中蛋白质的洗脱次序降低分离效果 B错误C.凝胶色谱法是一种根据相对分子质量的大小来分离蛋白质的方法 C正确D.判断纯化的蛋白质是否为血红蛋白可采用电泳法鉴定 D正确故选 B12.下列有关PCR技术的叙述错误的是（）A. 每一次循环后目的基因的数量可以增加一倍B. PCR反应过程中需要3个不同的温度范围C. PCR反应过程中加入的酶的显著特性是耐高温D. 模板DNA和引物能在每一次扩增中重复使用【答案】D【解析】解 A.PCR过程中DNA数量的增加呈指数增长所以一次循环可使目的基因的量增加一倍 A正确B.PCR反应过程中需要3个不同的温度范围 90℃~95℃使模板DNA变性、解链 55℃~60℃复性（引物与DNA模板链结合） 70℃~75℃引物链延伸 B正确C.PCR反应过程中加入的酶的显著特性是耐高温 C正确D.PCR中模板DNA序列可反复在每一次循环中用作模板而每一次循环用到的引物都会一直成为产物DNA中的一部分序列在下一个反应循环中作为模板DNA 所以不可重复作为引物 D错误故选 D13.在向溶解DNA的NaCl溶液中不断加入蒸馏水的目的是（）A. 加快溶解DNA的速度B. 加快溶解杂质的速度C. 减小DNA的溶解度加快DNA析出D. 减小杂质的溶解度加快杂质的析出【答案】C【解析】解在DNA粗提取实验中向在溶解DNA的NaCl溶液中不断加入蒸馏水会使NaCl溶液的浓度降低进而减少DNA的溶解度使DNA分子逐渐析出．故选 C．14.下列关于PCR技术的叙述正确的是（）A. PCR技术建立在对扩增的目的基因序列完全已知的基础上B. 该技术需要解旋酶和热稳定的DNA聚合酶C. 该技术需要一对特异性的引物要求一对引物的序列是互补的D. 该技术应用体内DNA双链复制原理也需要模板、原料、能量、酶等条件【答案】D【解析】二、解答题（本大题共计7小题每题10分共计70分）15.（1）从血液中提取和分离p2微球蛋白用________法进行分离其中分子量大的蛋白质________（填“先”或“后”）洗脱出来原因是________15.（2）研究者计划通过培养转基因细菌来获得大量p2微球蛋白采用________法对细菌培养基灭菌调节pH应在灭菌之________（填“前”或“后”）进行实验结束时应选择菌落数在________之间的平板进行计数15.（3）γ酶由4条肽链组成可采用________法对4条肽链进行分离、纯化及分子量测定15.（4）根据材料请提出监测阿尔茨海默症的方案 ________ 治疗阿尔茨海默症的方案________【答案】（1）凝胶色谱, 先, 相对分子质量较大的蛋白质在凝胶颗粒外部移动路程短、移动速度较快【解析】解（1）分离p2微球蛋白用凝胶色谱法进行由于相对分子质量较大的蛋白质不能进入凝胶内部通道只能在凝胶颗粒外部移动路程短、移动速度较快故分子量大的蛋白质先洗脱出来【答案】（2）高压蒸汽灭菌（法）, 前, 30~300【解析】（2）制备培养基的一般步骤为计算、称量、溶化、调pH、灭菌、倒平板其中对细菌培养基灭菌常采用高压蒸汽灭菌法调节pH应在灭菌之前进行实验结束时应选择菌落数在30~300之间的平板进行计数【答案】（3）SDS一聚丙烯酰胺凝胶电泳【解析】（3）γ酶由4条肽链组成对4条肽链进行分离、纯化及分子量测定可采用⑦SDS−聚丙烯酰胺凝胶电泳法【答案】（4）监测p2微球蛋白含量变化（研究p2微球蛋白变化与阿尔茨海默症关系、检查淀粉样斑块沉积的情况等）, 抑制γ酶的（切割）活性（减少淀粉样斑块沉积)【解析】（4）根据材料可知阿尔茨海默症患者脑组织中出现的淀粉样斑块沉积是由淀粉样蛋白前体蛋白被γ酶切割后产生的Aβ多肽逐渐聚集形成的在阿尔茨海默症患者的血液中具有免疫作用的p2微球蛋白浓度较高故监测阿尔茨海默症就需要监测p2微球蛋白含量变化而治疗阿尔茨海默症需要抑制γ酶的（切割）活性（减少淀粉样斑块沉积）16.（1）要想构建基因组文库必须获得该生物体内的全部DNA 用________对全部DNA进行片段化将获得的片段与________连接起来通常导入到原核细胞中最常用的受体细胞是________ 最常用的方法是________ 再通过________鉴别和筛选含目的基因的受体菌16.（2）如果用某种生物发育的某个时期的所有mRNA反转录产生的多种互补DNA片段构建成cDNA文库一般只包含该生物的部分基因原因是________________________________________________16.（3）构建了基因文库并不等于完成了目的基因的分离因此必须用各种方法将目的基因从文库中筛选出来下列不能为筛选目的基因提供依据的是________16.（4）利用PCR技术扩增目的基因这一过程中需要加入一种特殊的酶即________【答案】（1））限制酶, 运载体, 大肠杆菌, 感受态转化法, 标记基因【解析】解（1）基因文库包括基因组文库和部分基因文库要想构建基因组文库必须获得该生物体内的全部DNA 用限制酶对全部DNA进行片段化将获得的片段与运载体连接起来通常导入到原核细胞中最常用的受体细胞是大肠杆菌最常用的方法是感受态转化法标记基因的作用是为了鉴别受体细胞中是否含有目的基因从而将目的基因筛选出来故可通过标记基因鉴别和筛选含目的基因的受体菌【答案】（2）基因的选择性表达在某个时期只表达了部分基因【解析】（2）由于基因的选择性表达在某个时期只表达了部分基因所以如果用某种生物发育的某个时期的所有mRNA反转录产生的多种互补DNA片段构建成cDNA文库一般只包含该生物的部分基因【答案】C【解析】（3）筛选目的基因可以依据目的基因的功能、目的基因的mRNA及目的基因表达产物蛋白质的氨基酸序列由于碱基种类并没有特异性所以不能作为筛选目的基因的依据故选 C【答案】（4）热稳定DNA聚合酶（或Taq酶）【解析】（4）PCR过程包括变性、复性和延伸三步变性过程需要用90℃以上的高温使双链DNA解聚为单链故利用PCR技术扩增目的基因需要加入热稳定DNA聚合酶（或Taq酶）17.血红蛋白的提取和分离一般可分为四步 ________、粗分离、________和_________ 17.实验前取新鲜的血液要切记在采血容器中预先加入柠檬酸钠取血回来马上进行离心收集血红蛋白溶液①加入柠檬酸钠的目的是_________②以上所述的过程即是样品处理它包括红细胞的洗涤、________、分离血红蛋白溶液17.收集的血红蛋白溶液要进行粗分离其方法是________17.然后通过________法将样品纯化样品纯化的目的是________ 最后经________进行纯度鉴定17.电泳利用了待分离样品中各种分子带电性质的差异以及分子的________、形状的不同使带电分子产生不同的迁移速率从而实现样品中各种分子的分离【答案】样品处理, 纯化, 纯度鉴定【解析】血红蛋白提取和分离一般分为四步样品处理、粗分离、纯化和纯度鉴定【答案】①防止血液凝固, ②血红蛋白的释放【解析】①采取血液时要在采血容器中预先加入柠檬酸钠以防止血液凝固②样品处理包括红细胞的洗涤、血红蛋白的释放、分离血红蛋白溶液【答案】透析【解析】将收集的血红蛋白溶液在透析袋中透析进行样品的粗分离【答案】凝胶色谱, 去除大分子杂质蛋白, SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳【解析】通过凝胶色谱法将样品纯化纯化的目的是去除大分子杂质蛋白最后经SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳进行纯度鉴定【答案】大小【解析】电泳利用了待分离样品中各种分子带电性质的差异以及分子的大小、形状的不同使带电分子产生不同的迁移速率从而实现样品中各种分子的分离18.（1）获得某种病毒的蛋白质外壳基因可以使用限制酶处理该酶的作用是____________________________________________________ 在获取病毒的蛋白质外壳基因后为了增加其数量可以采用_____________技术该技术的原理是_________________________18.（2）利用病毒的蛋白质外壳基因和农杆菌的________质粒构建基因表达载体在将病毒的蛋白质外壳基因导入马铃薯细胞之前可以在细胞周围施用酚类化合物该物质的作用是___________________________________________________________18.（3）在检测马铃薯细胞是否转入病毒的蛋白质外壳基因时可以采用如图所示的方法进行检测该检测方法称为______________技术所使用的基因探针为利用___________________基因的一条链进行放射性同位素标记如果出现图中所示的结果则说明_________________________________【答案】（1）能识别双链DNA分子中特定的核苷酸序列并使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开, PCR, DNA双链复制【解析】解（1）一种限制酶能识别双链DNA分子中特定的核苷酸序列并使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开在体外可以采用PCR技术对目的基因进行扩增【答案】（2）Ti, 吸引农杆菌移向马铃薯细胞以便农杆菌的Ti质粒上的T-DNA转移至受体细胞【解析】（2）农杆菌转化法是利用农杆菌的Ti质粒作为目的基因的载体酚类化合物能吸引农杆菌移向马铃薯细胞以便农杆菌的Ti质粒上的T-DNA转移至受体细胞【答案】（3）DNA分子杂交, 病毒的蛋白质外壳（或“目的”）, 受体细胞中已经成功导入了病毒的蛋白质外壳基因【解析】（3）图示检测目的基因的方法为DNA分子杂交法19.（1）凝胶色谱法中所用的凝胶大多数是由_________等多糖类化合物构成的微小多孔球体19.（2）将实验流程补充完整 A为________ B为________19.（3）洗涤红细胞次数过少会影响分离效果的原因是________________________ 19.（4）在装填色谱柱时不能有气泡存在因为________ 降低分离效果如果________ 说明色谱柱制作成功19.（5）SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳中 SDS能与各种蛋白质结合形成蛋白质—SDS复合物由于SDS所带负电荷的量大大超过了蛋白质分子原有的电荷量因而掩盖了不同种蛋白质间的电荷差别从而使电泳的迁移率完全取决于______________________【答案】（1）葡聚糖或琼脂糖【解析】解（1）凝胶色谱法中所用的凝胶大多数是由葡聚糖、琼脂糖等多糖类化合物构成的微小多孔球体【答案】（2）血红蛋白的释放, 凝胶色谱柱的装填【解析】（2）血红蛋白的提取和分离流程为红细胞的洗涤→血红蛋白的释放→分离血红蛋白溶液→透析→凝胶色谱柱的制作→凝胶色谱柱的装填→样品的加入和洗脱可见 A 表示血红蛋白的释放 B表示凝胶色谱柱的装填【答案】（3）无法除去血浆蛋白【解析】（3）洗涤红细胞的目的是去除杂蛋白以利于后续步骤的分离纯化洗涤次数过少无法去除血浆蛋白影响分离效果【答案】（4）气泡会扰乱洗脱液中蛋白质的洗脱次序, 红色区带均匀一致地移动【解析】（4）由于气泡会搅乱洗脱液中蛋白质的洗脱次序降低分离效果所以在装填凝胶色谱柱时不得有气泡产生在蛋白质分离过程中如果红色区带均匀一致地移动说明色谱柱制作成功【答案】（5）分子的大小【解析】（5）SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳中 SDS能与各种蛋白质结合形成蛋白质—SDS 复合物由于SDS所带负电荷的量大大超过了蛋白质分子原有的电荷量因而掩盖了不同种蛋白质间的电荷差别从而使电泳的迁移率完全取决于分子的大小20.（1）单克隆抗体的制备过程中要用到________技术和动物细胞融合技术过程中要经过________次筛选20.（2）根据上述资料分析需要向经过促融处理后的各种细胞混合培养物中加入________ 可使________不能分裂从而筛选出唯一能增殖的________20.（3）将获得的上述细胞在多孔培养板上培养用抗原检测从中选择________的杂交瘤细胞在________中培养一段时间后提取单克隆抗体20.（4）单克隆抗体最主要的优点是________ 并可大量制备利用单克隆抗体和________结合在特定的仪器中成像可以定位诊断肿瘤、心血管畸形等疾病【答案】（1）动物细胞培养, 2【解析】解（1）制备单克隆抗体的诱导过程有正常小鼠免疫处理、动物细胞的融合、杂交瘤细胞的筛选与培养、专一抗体检验阳性细胞培养、单克隆抗体的提纯要用到动物细胞培养和动物细胞融合技术过程中需要筛选2次【答案】（2）氨基蝶呤, 骨髓瘤细胞、骨髓瘤细胞自身融合细胞, 杂交瘤细胞【解析】（2）根据上述资料分析需要向经过促融处理后的各种细胞混合培养物中加入氨基蝶呤可使骨髓瘤细胞、骨髓瘤细胞自我融合的细胞不能分裂从而筛选出唯一能增殖的杂交瘤细胞【答案】（3）能产生特定抗体, 体外或小鼠腹腔【解析】（3）将获得的上述细胞在多孔培养板上培养用抗原检测从中选择能产生特定抗体的杂交瘤细胞在体外或小鼠腹腔中培养一段时间后提取单克隆抗体【答案】（4）特异性强、灵敏度高, 放射性同位素【解析】（4）单克隆抗体最主要的优点是特异性强、灵敏度高、可大量制备利用单克隆抗体和放射性同位素结合在特定的仪器中成像可以定位诊断肿瘤、心血管畸形等疾病21. （1）若某同学从人的基因组文库中获得了干扰素基因并构建了基因表达载体以大肠杆菌作为受体细胞 ________（填“能”或“不能”）得到正常功能的干扰素mRNA 原因是________21. （2）某人以正常功能的干扰素mRNA为模板在________酶的作用下得到单链DNA 形成RNA-DNA杂交分子然后在酶的作用下得到单链DNA 最后在DNA聚合酶的作用下得到双链DNA 构建基因表达载体后导入大肠杆菌中在大肠杆菌中表达出的干扰素一般不具有天然状态下的活性原因是________21. （3）鉴于上述科学家希望将干扰素基因与________等调控组件重组在一起通过________等方法导入哺乳动物的________中然后进行早期胚胎培养获得早期胚胎移植到受体中使其生长发育成转基因动物在胚胎移植前可利用囊胚的________细胞对早期胚胎进行________【答案】【解析】【答案】【解析】【答案】【解析】。

专题22基因工程专题过关检测（一）一、选择题（每小题只有一个选项符合题目要求）1.下列关于凝胶电泳实验操作,叙述错误的是( )A.应根据缓冲液pH的不同确定加样孔是靠近正极端还是负极端B.接通电源后电泳一段时间,离加样孔越近的DNA分子越小C.紫外灯照射下,凝胶上条带的荧光强度与DNA含量呈正相关D.通过观察指示剂在凝胶中迁移的位置来判断何时停止电泳答案 B2.DNA琼脂糖凝胶电泳是一种分离、纯化或分析PCR扩增后的待检DNA片段的技术。

下列关于核酸片段的扩增及电泳鉴定的相关叙述,正确的是( )A.mRNA也是核酸,因此可直接用PCR扩增仪扩增B.PCR的缓冲液中一般要添加ATP,以激活耐高温的DNA聚合酶C.带电量相同的情况下,相对分子质量比较大的DNA片段距离加样孔越近D.琼脂糖凝胶电泳中的电泳缓冲液中含指示剂,其可以在紫外灯下被检测出来答案 C3.图1、2中标注了相关限制酶的酶切位点(甲、乙、丙为引物)。

下列关于培育转基因大肠杆菌的叙述错误的是( )A.若通过PCR获取该目的基因,应该选用引物甲和引物丙B.图中质粒和目的基因构建表达载体,应选用BclⅠ和Hind Ⅲ剪切C.若将基因表达载体导入受体细胞中,需选用Ca2+转化法D.在受体细胞中,氨苄青霉素抗性基因和目的基因可同时表达答案 D4.某一质粒如图所示,Amp r表示氨苄青霉素抗性基因,Tet r表示四环素抗性基因。

有人将此质粒用BamHⅠ酶切后,与用BamHⅠ酶切获得的目的基因混合,加入DNA连接酶进行连接反应,用得到的混合物直接转化后得到多种大肠杆菌,并利用培养基乙和丙筛选出导入重组质粒的大肠杆菌。

下列叙述错误的是( )注:影印接种指用灭菌后的“印章”在培养基中轻按一下,将乙中菌落按相同位置接种到培养基丙A.如图所示的质粒中还应含有复制原点和终止子等结构B.将经转化处理后的大肠杆菌菌液接种至培养基乙使用的是稀释涂布平板法C.配制培养基乙时应加入氨苄青霉素D.培养基丙中生长的菌落即为导入重组质粒的大肠杆菌答案 D5.20世纪60年代末美国微生物学家哈密尔顿·史密斯发现第一种限制性内切核酸酶,获得了开启DNA宝藏的钥匙,目前已发现的限制酶超过了4 000种,极大地推动了对DNA 分子的研究和操作。

高考生物二轮专题复习《关于“电泳”结果分析》专题巩固练习 1．用Xho Ⅰ和Sal Ⅰ两种限制性核酸内切酶分别处理同一DNA 片段 ，酶切位点及酶切产物电泳分离结果如图 。

以下叙述不正确的是（ ）A .如图中两种酶识别的核苷酸序列不同B .如图中酶切产物可用于构建重组 DNAC .泳道①中是用 Sal Ⅰ处理得到的酶切产物D .图中被酶切的 DNA 片段是单链 DNA【答案】D【分析】限制酶具有专一性，能识别特定的核苷酸序列、特定部位的磷酸二酯键。

DNA 连接酶可以连接DNA 片段。

双链DNA 被限制酶切割后的DNA 片段仍然是双链。

电泳可以使不同大小的DNA 片段分离，电泳结果中的条带表示检出的特定长度的酶切片段。

【详解】A 、不同的限制酶能识别不同的核苷酸序列，由电泳图可知 Xho Ⅰ和Sal Ⅰ两种酶分别切割时，酶切产物不同，说明它们识别的序列不同，A 项正确；B 、同种限制酶切割出的DNA 片段，具有相同的末端，再用DNA 连接酶进行连接，可以构成重组DNA ，B 项正确；C 、从酶切位点图可知，Sal Ⅰ酶将DNA 片段切成4段，Xho Ⅰ酶将DNA 片段切成3段，结合电泳结果可知泳道①为Sal Ⅰ，泳道②为Xho Ⅰ，C 项正确；D 、限制酶切割后的DNA 片段仍然是双链DNA ，D 项错误。

2.下图1 是某遗传病家系的系谱图，对该家系中1～4 号个体进行基因检测，将含有该遗传病基因或正常基因的相关DNA 片段用电泳法分离。

正常基因显示一个条带，患病基因显示为另一个不同的条带，结果如图2所示。

下列有关分析判断错误的是( )A ．图2 中的编号c 对应系谱图中的4 号个体B ．条带2 的DNA 片段含有该遗传病致病基因C ．8 号个体的基因型与3 号个体的基因型相同的概率为23D ．9 号个体与该遗传病致病基因携带者结婚，孩子患病的概率为18【答案】 D【分析】分析系谱图：1号和2号（或5号和6号）都正常，但他们的女儿患病，即：“无中生有为隐性，隐性遗传看女病，女病男正非伴性”，说明该病为常染色体隐性遗传病。

⽣化试题第⼆章临床⽣物化学实验室基本技术与管理⼀、A型选择题1．在荧光定量分析法中，下列哪种不是影响荧光强度的因素（）A．荧光物质的浓度 B．溶剂的性质C．荧光物质的摩尔吸光系数D．温度E．溶液的pH值2．琼脂糖凝胶电泳⽤pH8.6的巴⽐妥缓冲液可以把⾎清蛋⽩质分成五条区带，由正极向负极数起它们的顺序是（）A．⽩蛋⽩、β-球蛋⽩、α1-球蛋⽩、α2-球蛋⽩、γ-球蛋⽩B．⽩蛋⽩、α1-球蛋⽩、α2-球蛋⽩、β-球蛋⽩、γ-球蛋⽩C．⽩蛋⽩、α1-球蛋⽩、α2-球蛋⽩、γ-球蛋⽩、β-球蛋⽩D．α1-球蛋⽩、α2-球蛋⽩、β-球蛋⽩、γ-球蛋⽩、⽩蛋⽩E．⽩蛋⽩、β-球蛋⽩、α1-球蛋⽩、γ-球蛋⽩、α2-球蛋⽩3．在区带电泳中，能产⽣电荷效应和分⼦筛效应的固体⽀持介质有（）A．醋酸纤维素薄膜、纤维素、淀粉B．纤维素、淀粉、琼脂糖C．硅胶、琼脂糖、聚丙烯酰胺凝胶D．淀粉、琼脂糖、聚丙烯酰胺凝胶E．醋酸纤维素薄膜、硅胶、纤维素4．利⽤流动相中的离⼦能与固定相进⾏可逆的交换性质来分离离⼦型化合物的⽅法是（）A．凝胶层析法B．吸附层析法C．分配层析法D．亲和层析法E．离⼦交换层析法5．通过在波⽚或硅⽚上制作各种微泵、阀、微电泳以及微流路，将⽣化分析功能浓缩固化在⽣物芯⽚上称（）A．基因芯⽚B．蛋⽩质芯⽚C．细胞芯⽚D．组织芯⽚E．芯⽚实验室6．离⼼机砖头的旋转速度为20000γ/min的离⼼为（）A．低速离⼼B．平衡离⼼C．⾼速离⼼D．超速离⼼E．等密度离⼼7．标本条码下有10个阿拉伯数字，其中第4～5位表⽰（）A．标本号B．标本类型C．组合号D．⽉份E．⽇期8．由实验室⾃⼰配置或为商品，其中有关物质的量由参考⽅法定值的标准品为（）A．⼀级标准品B．⼆级标准品C．控制物D．参考物E．原级参考物9．经过详细的研究，没有发现产⽣误差的原因或在某些⽅⾯不够明确的⽅法为（）A．决定性⽅法B．推荐⽅法C．参考⽅法D．常规⽅法E．对⽐⽅法10．测定恒定误差的试验是（）A．重复性试验B．回收试验C．线性试验D．⼲扰试验E．检测能⼒试验⼆．X型选择题1．酶免疫分析的基本技术组成为（）E．检测放⼤系统及再⽣技术2．免疫⽐浊测定应注意的事项为（）A．抗原或抗体量不能⼤⼤过剩 B．应维持反应管中抗体蛋⽩量始终过剩C．⾼⾎脂标本易受⼲扰D．易受环境温度和pH值的影响E．加⼊聚合剂可促进免疫复合物的形成3．流式细胞仪接受并分析的信号主要有（）A．光散射讯号B．光吸收讯号C．荧光讯号D．电流讯号E．⽣物发光讯号4．鉴定纯酶度的常⽤⽅法是（）A．⽐活⼒测定B．电泳分析C．免疫学分析D．活性浓度测定E．Km测定5．影响⾎标本成份变化的因素有（）A．⽣理 B．饮⾷ C．药物 D．溶⾎ E．储存6．⼀级标准品主要⽤于（）A．校正决定性⽅法 B．评价及校正参考⽅法 C．为次级标准品定值D．常规⽅法的标化 E．质量控制7．常规⽅法的选择在可靠性⽅⾯应具有（）A．较⾼的检测精密度 B．较⼤的检测能⼒ C．较低的检测费⽤D．较快的检测速度 E．较好的检测准确度8．⽅法⽐较试验测定的是侯选⽅法的（）A．偶然误差 B．⽐例误差 C．恒定误差 D．总误差 E．系统误差9．临床⽣化检验⽅法的性能标准应（）A．由临床医学家研究制定 B．由临床化学家研究制定C．由临床医学家和临床化学家共同制定 D．反映临床应⽤与解释结果的要求E．基本符合实验室所能达到的技能状态10．⽅法的性能标准也称分析⽬标，应根据不同的应⽤⽬的⽽异。

电泳试题及答案1. 什么是电泳？电泳是一种利用电场驱动带电粒子在介质中移动的技术。

2. 电泳技术在哪些领域有应用？电泳技术广泛应用于生物化学、分子生物学、医学诊断、蛋白质纯化等领域。

3. 请列举两种常见的电泳类型。

两种常见的电泳类型是：凝胶电泳和毛细管电泳。

4. DNA电泳中，DNA片段的大小如何影响其迁移速度？DNA片段的大小越小，其迁移速度越快。

5. 蛋白质电泳中，蛋白质的等电点如何影响其迁移速度？蛋白质的等电点越接近凝胶的pH值，其迁移速度越慢。

6. 描述SDS-PAGE电泳的原理。

SDS-PAGE电泳是一种利用十二烷基硫酸钠（SDS）处理蛋白质，使其带上负电荷，通过聚丙烯酰胺凝胶进行分离的技术。

7. 什么是等电聚焦电泳？等电聚焦电泳是一种利用pH梯度分离蛋白质的技术，蛋白质在电场作用下移动到其等电点处，达到聚焦效果。

8. 如何通过电泳图谱判断DNA片段的大小？通过与已知大小的DNA标准品进行比较，可以判断DNA片段的大小。

9. 为什么在电泳实验中要使用缓冲液？缓冲液可以维持电泳过程中的pH稳定，防止蛋白质或DNA的降解。

10. 电泳过程中，电压和电流的关系是怎样的？电压与电流成正比，电压越高，电流越大。

11. 请解释电泳迁移率的概念。

电泳迁移率是指带电粒子在单位电场强度下单位时间内的迁移距离。

12. 电泳实验中，为什么需要使用染色剂？染色剂可以使蛋白质或DNA片段在凝胶上显色，便于观察和分析。

13. 什么是双向电泳？双向电泳是一种先进行等电聚焦电泳，再进行SDS-PAGE电泳的蛋白质分离技术。

14. 电泳实验中，凝胶浓度对分离效果有何影响？凝胶浓度越高，对小分子蛋白质的分离效果越好，但对大分子蛋白质的分离效果较差。

15. 描述电泳仪的基本结构。

电泳仪通常包括电源、电泳槽、凝胶和电极。

答案：1. 电泳是一种利用电场驱动带电粒子在介质中移动的技术。

2. 电泳技术在生物化学、分子生物学、医学诊断、蛋白质纯化等领域有应用。

临床分子生物学选择测试题含参考答案一、单选题（共80题，每题1分，共80分）1、单链构象特异性是A、RFLPB、ASΟC、SSCPD、RT-PCRE、bDNA正确答案：C2、SDS-PAGE聚丙烯酰胺凝胶电泳具有A、分子筛效应B、电荷效应C、电渗效应D、浓缩效应E、稀释效应正确答案：A3、用于个体识别最常用的分子生物标志物是A、RFLPB、SNPsC、VNTRD、CNVsE、基因突变正确答案：C4、由线粒体基因编码的ATP酶亚基数目有A、1个B、2个C、7个D、3个E、13个正确答案：B5、关于肿瘤分子诊断的说法正确的是A、肿瘤的分子诊断中根据目的、对象、类型的不同要采取相似的诊断策略与方法B、肿瘤分子诊断就是利用分子生物学原理和技术建立的肿瘤诊断方法C、肿瘤分子诊断的研究成果仅用于临床肿瘤的诊断D、肿瘤分子诊断的核心是基于细胞水平的分子诊断技术E、肿瘤分子诊断的含义主要表现在虽然检测对象众多，但大多数标志物是特异性的肿瘤标志物正确答案：B6、PGS诊断方法主要借助于下列何种技术A、PCRB、CGHC、PGHD、FISHE、基因芯片正确答案：D7、不属于脆性X综合征分子诊断人群的是A、有FraX体格或性格阳性征象者B、没有FraX家族史C、发育迟缓或自闭症的患者D、未诊断的MR家族史E、已明确母亲为携带者的婴儿正确答案：B8、结核分枝杆菌耐呲嗪酰胺的突变基因是A、rrs与rpsLB、pncAC、embBD、gyrAE、rpoB正确答案：B9、BRCA1基因定位于人哪个染色体上A、染色体11q24B、染色体1p32C、染色体9p21D、染色体2p32E、染色体17q21正确答案：E10、Cpn感染的早期诊断需借助于A、病原体分离培养B、血清学检测C、分子生物学检査D、直接涂片镜检E、常规墨汁染色正确答案：C11、结核分枝杆菌耐乙胺丁醇的突变基因是A、rrs与rpsLB、pncAC、embBD、gyrAE、rpoB正确答案：C12、关于APC基因说法不正确的是A、是一种抑癌基因B、定位于染色体5q21上C、通过编码APC蛋白发挥作用D、APC蛋白在细胞周期进程、细胞生长调控及维持自身稳定中起着重要作用E、APC基因在肿瘤发生发展的全过程中并不稳定正确答案：E13、下列何种技术不可用于PGDA、微卫星DNA序列B、变性高效液相色谱分析法C、基因芯片D、基因测序E、Sourthem blot正确答案：E14、关于DNA变性的描述不正确的是A、二级结构破坏B、一级结构破坏C、黏度降低D、生物活性丧失E、浮力密度增加正确答案：B15、HIV-1中最易发生变异的基因是A、envB、polC、tatD、nefE、gag正确答案：A16、关于FISH在白血病的应用中说法正确的是A、主要用于白血病的初诊和复发的检测B、只适用于体液、组织切片标本C、FISH只能检测处于分裂中期的细胞D、FISH的灵敏度高于PCRE、FISH是检测融合基因、确定染色体易位的首选方法正确答案：A17、可以用来检测具有生物活性的蛋白质是A、mative PAGEB、SDS-PAGEC、2-DED、IEFE、Western blotting正确答案：A18、PCR的延伸温度一般为A、94〜95℃B、55℃左右C、75〜80℃D、72℃E、25℃正确答案：D19、检测MELAS综合征、线粒体糖尿病mtDNA突变位点tRNALeu(UUR)，A3243G常用的限制性内切酶是A、BsmAⅠB、MaeⅢC、SsaHⅠD、MvaⅠE、ApaⅠ正确答案：E20、下列符合解脲脲原体基因组结构特征的是A、基因组大于肺炎支原体基因组B、UU为环状染色体C、终止密码子UGA编码赖氨酸D、完全遵循遗传密码的通用性E、G+C含量丰富正确答案：B21、最早发现的Leber遗传性视神经病变mtDNA突变是A、ND1G3460AB、AO4G11778AC、nD6T14484CD、tRNAMetA4435GE、tRNThrAlSQSlG正确答案：B22、提高移植存活率的方法以下不可行的是A、HLA配型B、mH的鉴定C、ABΟ血型鉴定D、移植前输入补体和抗体E、移植前应用免疫抑制剂正确答案：D23、血友病A缺乏的是能够编码血浆凝血活酶的A、FⅧ因子B、FⅨ因子C、FⅪ因子D、FⅩ因子E、FⅣ因子正确答案：A24、基因组中含有线粒体DNA的是A、白假丝酵母菌B、新生隐球菌C、梅毒螺旋体D、沙眼衣原体E、弓形虫正确答案：E25、32p的半衰期是A、8.07天B、67.48天C、14.26天D、5730年E、60.20天正确答案：C26、关于非放射性探针标记，下列描述不正确的是A、灵敏度不如放射性探针B、目前应用的非放射性标志物都是抗原C、对人体危害小D、酶促显色检测最常使用的酶是碱性磷酸酶和辣根过氧化物酶E、可长时间使用正确答案：B27、采用PCR-RFLP检测mtDNA A3243G常用的限制性内切酶是A、BsmAⅠB、ApaⅠC、XbaⅠD、BamHⅠE、KpnⅠ正确答案：B28、能够将蛋白质的分离、纯化、酶解和鉴定等步骤结合在一起的技术是A、2-DEB、ESIC、缩微芯片D、蛋白质功能芯片E、ICAT正确答案：C29、下列DNA序列中的胞嗟嚏易发生甲基化修饰的是A、5'-CCCCCT-3'B、5'-GGGGCC-3'C、5'-CGCGCG-3'D、5'-GCACAC-3'E、5'-CTCTCCC-3'正确答案：C30、细胞周期检查点激酶1基因定位于哪个染色体上A、5q21B、2p32C、4q11-12D、11q24E、1p32正确答案：D31、DHPLC检测要求样品片段大小范围是A、<200bpB、>500bpC、200～500bpD、300〜600bpE、100～300bp正确答案：C32、首个被确定的肿瘤抑制基因是A、p21B、p53C、RbD、CyclinE、p16正确答案：C33、微流控芯片技术的主要特点是A、灵敏度高、耗时短、高通量、可定量、标本需求量少、样本来源广泛B、液体流动可控、标本需求量少、分析速度快、整体微型化、自动化、集成化C、选择性高、分析速度快、操作简易、仪器价格低廉D、分离效率髙、分析速度快、分离模式多、标本需求量少、应用广、可自动化E、灵敏度高、准确度高、特异性强、高通量、可自动化、可绝对定量正确答案：B34、DNA P基因可发生YMDD突变的病毒是A、HCVB、HIVC、HBVD、HPVE、流感病毒正确答案：C35、重复序列通常只有1〜6bp，重复10-60次并呈高度多态性的DNA序列称为A、微卫星DNAB、小卫星DNAC、cDNAD、高度重复顺序DNAE、单拷贝顺序DNA正确答案：B36、目前基于MALDI-TOF-MS进行细菌鉴定的主要标志物是A、16SrRNAB、IS6110C、katGD、特异性保守蛋白-核糖体蛋白E、丰度较高的管家基因正确答案：D37、容易造成“负染”的封闭剂是A、HRPB、脱脂奶粉C、血红蛋白D、SDSE、DTT正确答案：C38、不适宜于直接作为第一代测序技术测序的DNA模板是A、双链DNA片段和PCR产物B、单链DNA片段C、克隆于质粒载体的DNA片段D、克隆于真核载体的DNA片段E、提取的染色质DNA正确答案：E39、淋病奈瑟菌耐青霉素的分子机制与以下哪组基因有关A、katG和inhAB、gyrA和parCC、penA和ponAD、gyrA和gyrBE、rrs和rpsL正确答案：C40、可作为器官移植中供受体是否匹配的配型分子是A、HLAB、单拷贝序列C、高表达蛋白D、RFLPE、染色体正确答案：A41、下列哪种病毒在复制过程中可产生RNA-DNA杂交体A、HIVB、HPVC、HBVD、HCVE、流感病毒正确答案：A42、TaqMan探针技术要求扩增片段应在A、250〜300bpB、200〜250bpC、150〜200bpD、300～350bpE、50〜150bp正确答案：E43、MALDI分析生物大分子的过程中，下列不是一个合适基质应具备的是A、吸收能量B、使生物大分子彼此分离C、使被分析的生物大分子离子化D、基质分子与被分析物质间的摩尔比为100:1～50000:1E、烷基化蛋白质所带的自由筑基正确答案：E44、可负性调控抗凋亡基因BCL2的miRNA是A、miR-155B、miR-15a和miR-16-1C、miR-221D、miR-155E、miR-17-92正确答案：B45、关于定量PCR的描述，不正确的是A、可以定量或半定量PCR产物的方法B、定量PCR主要进行基因表达的分析和病原体的核酸检测C、水解探针技术中TaqMan探针的位置位于两条引物之间D、分子信标在自由状态下为发夹结构，荧光信号极低E、定量PCR在封闭状态下进行，有效避免了产物的实验室污染正确答案：A46、存在于浆液性卵巢癌而不存在于黏液性卵巢癌中的是A、CA72-4B、CA12-5C、CA24-2D、CA15-3E、NSE正确答案：B47、下列叙述不正确的是A、F质粒的主要特征是带有耐药性基因B、R质粒又称抗药性质粒C、CoI质粒可产生大肠杆菌素D、F质粒是一种游离基因E、F和CoIE1质粒可以在同一菌株内稳定共存正确答案：A48、T-ALL中最常见的活化癌基因是A、N-rasB、NOTCH1C、NPMD、FLT3E、C-KIT正确答案：B49、组织DNA提取中，EDTA的作用是A、抑制DNaseB、沉淀DNAC、减少液体表面张力D、抑制RNaseE、去除蛋白质正确答案：A50、下列不属于基因突变的类型是A、等位基因B、插入C、同义突变D、无义突变E、错义突变正确答案：A51、引起线粒体糖尿病、MELAS综合征、综合征耳聋的突变位点是A、C3254AB、T3271CC、A1555GD、A3243GE、T3271C正确答案：D52、检测靶分子是DNA的技术是A、Southern印迹杂交B、Western印迹杂交C、Northern印迹杂交D、Eastern印迹杂交E、杂交淋巴瘤正确答案：A53、PCR中的脱氧核昔三磷酸不包括A、dATPB、dTTPC、dCTPD、dGTPE、dUTP正确答案：E54、SELDI-TOF-MS中，质荷比越大的离子在电场中飞行的时间A、越短B、越长C、与质荷比小的离子没有差异D、无法计算E、无法分离正确答案：B55、G-6-PD缺乏时导致机体下列哪些物质增多(↑)或减少(↓)A、H2O2、GSH和NADPH↑B、H2O2和GSH↑，NADPH↓C、H2O2↑，GSH和NADPH↓D、GSH和NADPH↑，H2O2↓E、H2O2和NADPH↑，GSH↓正确答案：C56、启动子预测分析常涉及A、核心启动子，如TATA盒等元件B、近端启动子，如几个调控元件C、远端启动子，如增强子、沉默子等元件D、基因内部区域的特征，如GC含量、CpG比率E、转录因子结合位点正确答案：D57、镰状细胞贫血患者，代替其血红蛋白β链N端第六个氨基酸残基谷氨酸的是A、丙氨酸B、酪氨酸C、苯丙氨酸D、丝氨酸E、缬氨酸正确答案：E58、DCC基因突变的主要方式不包括A、等位基因杂合性缺失B、5'端纯合性缺失C、3'端纯合性缺失D、DCC基因过甲基化E、外显子的点突变正确答案：C59、上述检测方法中，不可用于对核酸片段突变的检测方法是A、基因测序B、Southern blotC、Western blotD、PCRE、RFLP正确答案：C60、关于RNA探针的描述下列不正确的是A、可用于随机引物标记B、特异性高C、灵敏度高D、可用非同位素标记法标记E、不易降解正确答案：E61、某人核型为46，XY，性腺为睾丸，内外生殖器呈间性，第二性征异常，说明此人为何种患者A、男性假两性畸形B、性逆转综合征C、女性假两性畸形D、性腺发育不全E、真两性畸形正确答案：A62、转座因子是A、质粒B、类核结构C、断裂基因D、可移动基因成分E、基因重叠现象正确答案：D63、作为芯片固相载体的材料描述正确是A、主要有玻片、硅片等实性材料B、不使用硝酸纤维素膜、尼龙膜及聚丙烯膜等膜性材料C、这些载体材料不需要处理，其表面存在活性基团(如羟基或者氨基)D、可以直接固定已经合成的寡核甘酸探针E、不需要对介质表面进行化学预处理——活化正确答案：A64、异种移植的首要障碍是A、超急性排斥反应B、器官大小和功能的匹配C、伦理道德问题D、供器官来源的选择E、人畜共患病正确答案：A65、基因多态性连锁分析中，第一、二、三代遗传标记分别是A、RFLP、SSCP、STRB、RFLP、SNP、STRC、RFLP、STR、SNPD、VNTR、SCCP、SNPE、VNTR、STR、RFLP正确答案：C66、关于mtDNA非编码序列，描述正确的是A、不参与mtDNA的复制、转录等，属“无用”信息B、是高度重复序列C、占整个mtDNA的15%，比例较大D、mtDNA中有两段非编码区E、位于mtDNA的轻链正确答案：D67、关于随机克隆法或称鸟枪法测序策略的叙述不准确的是A、可用于各种大型的测序计划B、是一种完全定向的测序策略C、需将目的DNA大片段随机切割成小片段，并分别进行亚克隆D、可利用通用引物测定亚克隆的序列E、一些区段往往被重复测定正确答案：B68、某临床分子生物学检验项目每2周检测1次，最适用的统计学质控方法是A、Levey-Jennings质控图方法B、6 Sigma质控方法C、Westgard多规则质控方法D、即刻法质控方法E、累积和质控方法正确答案：D69、阳性质控品失控的原因不包括A、扩增产物污染B、核酸提取试剂失效C、扩增仪孔间温度不一致D、Taq酶失活E、提取的核酸残留有抑制物正确答案：A70、构成完整的病毒颗粒的成分是A、核酸B、结构蛋白C、蛋白质与核酸D、糖蛋白E、蛋白质正确答案：C71、最常用的DNA探针标记方法是A、随机引物标记B、切口平移标记C、3'-末端标记D、5'-末端标记E、PCR法正确答案：A72、不仅可以检测DNA样品中是否存在某一特定的基因，而且还可以获得基因片段的大小及酶切位点分布信息的是A、点/狭缝杂交B、菌落杂交C、Southern印迹杂交D、Northern印迹杂交E、原位杂交正确答案：C73、将能识别靶多肽高度特异性的配体放置在芯片上进行检测的是A、蛋白质功能芯片B、缩微芯片C、化学型芯片D、生物化学芯片E、蛋白质检测芯片正确答案：E74、以下不符合沙眼衣原体基因组结构特征的是A、CT染色体为一闭合环状双链DNAB、CT有一个隐蔽性质粒，此质粒与其他生物间没有同源序列C、DNA修复能力较弱D、CT原体和网状体内皆含有DNA和RNA两种核酸E、G+C含量小于A+T正确答案：C75、线粒体基因组编码几种rRNAA、22种B、20种C、18种D、3种E、2种正确答案：E76、SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳的原理不正确的是A、SDS是一种阴离子去污剂B、SDS可以与蛋白质的疏水部分相结合，从而使蛋白质获得负电荷C、SDS-PAGE时蛋白质的迁移率与分子大小相关D、SDS-PAGE使具有不同等电点的蛋白质得以分离E、SDS与蛋白质结合后可以屏蔽天然蛋白质的电荷正确答案：D77、用于病毒基因突变检测的技术是A、荧光定量PCR技术B、PCR-RFLP技术C、PCR微卫星检测技术D、原位杂交技术E、cDNA表达芯片技术正确答案：B78、荧光定量PCR检测核酸量的时间段在A、非指数期B、PCR反应的最初阶段C、PCR反应最后的时间段D、指数期的起始阶段E、指数期的终末阶段正确答案：D79、第一个被发现可以预测晚期转移性结直肠癌患者是否能从靶向治疗药物西妥昔单抗中获益的生物标志物是A、K-rasB、EGFR基因C、TTF-1D、CEAE、bcl-2基因正确答案：A80、可用于转录组学筛选分子生物标志物研究的技术方法是A、SAGEB、GWASC、2D-PAGED、GC-MSE、Southern印迹杂交正确答案：A。

分离纯化试题一、简介分离纯化是一种用于提纯化合物的方法，在许多化学和生物学实验中都非常常见。

本文将介绍几个与分离纯化相关的试题，帮助读者加深对这个主题的理解。

二、蒸馏试题1. 问题描述：如何用蒸馏法从混合物中分离纯净的液体化合物？答案提示：蒸馏法是通过利用液体或溶液中不同的沸点来实现分离的。

通过加热混合物，液体组分具有较低沸点的物质首先蒸发，然后被冷凝回到液体状态，最后收集纯净的液体。

2. 问题描述：什么情况下可以使用简易蒸馏法？答案提示：简易蒸馏法适用于分离沸点相差较大的两种液体组分。

其中一种液体的沸点要远远低于另一种液体，这样就能够通过简单的加热和冷却过程实现分离。

三、萃取试题1. 问题描述：请解释什么是萃取法，并列举其应用领域。

答案提示：萃取法是通过溶剂将混合物中需要分离的物质溶解，实现分离的方法。

它常用于有机合成中，例如分离提纯有机产物，或从天然产物中提取活性化合物等。

2. 问题描述：什么是液液萃取？如何选择合适的萃取溶剂？答案提示：液液萃取是将需要分离的物质溶解于两种不相混溶的溶剂中，通过两相之间的差异来实现分离。

选择合适的萃取溶剂通常需要考虑其溶解度、稳定性和反应性等因素。

四、结晶试题1. 问题描述：为什么结晶是一种常用的纯化方法？答案提示：结晶是通过控制溶液的温度和浓度来实现分离纯化的方法。

由于不同化合物具有不同的溶解度，通过适当的条件调节可以使目标化合物结晶出来，达到分离纯化的目的。

2. 问题描述：在实验室中进行结晶操作时应注意哪些因素？答案提示：实验室进行结晶操作时，应注意温度的控制、溶剂的选择、结晶物质的纯度和晶体生长的控制等因素。

合理操作可以获得纯度高、晶体质量好的结晶产物。

五、凝胶电泳试题1. 问题描述：凝胶电泳主要用于什么样的分离纯化目的？答案提示：凝胶电泳主要用于分离DNA、RNA或蛋白质等生物大分子。

通过在凝胶中施加电场，这些生物大分子会根据大小和电荷的不同而进行分离。