-淀粉酶的提取要点

实验一淀粉酶的提取及作用
一．原理：
1.淀粉淀粉酶水解蓝色糊精红色糊精无色糊精麦芽糖葡萄糖
2.葡萄糖+斐林试剂Cu2O↓(砖红色）
二．植物材料与实验器具：
植物材料：萌动的小麦
实验器具：试管；玻棒；量筒；研钵；漏斗；电炉；水浴锅
试剂：2%淀粉溶液；稀I-KI 溶液（原液稀释5倍）；斐林试
三．操作步骤
1. 取10粒萌动的小麦种子放入研钵中，用量筒取10ml蒸馏水作为淀粉酶提取液总量
（包括研钵清洗、种子研磨），分三次加入，将小麦研成浆状，用脱脂棉过滤于试管中,摇匀。

滤液静置5-10min ,上清液为淀粉酶的提取液。

2. 取2只刻度试管做标记A管、B管
A管：2ml 2%淀粉液+2ml蒸馏水38℃
B管：2ml 2%淀粉液+2ml淀粉酶提取液20min
加I-KI 2~3滴观察并比较两管颜色变化。

3.B管+3ml 斐林试剂沸水浴2~5min观察颜色变化
四。

实验结果
淀粉酶能将淀粉水解成葡萄糖。

α-淀粉酶抑制剂的提取、分离及性质研究的开题报
告
一、研究背景
α-淀粉酶是参与淀粉酶解的重要酶类之一，对其抑制剂的研究具有
十分重要的意义。

α-淀粉酶抑制剂可以调节血糖水平，减少糖尿病和肥
胖等疾病的发生。

因此，开展α-淀粉酶抑制剂的研究具有重要的应用前景。

二、研究目的
本研究的目的在于提取、分离α-淀粉酶抑制剂，并对其进行性质研究。

通过分析其分子量、化学结构和酶抑制活性，为进一步开发α-淀粉
酶抑制剂提供参考。

三、研究内容
1.提取、分离α-淀粉酶抑制剂：采用溶剂提取法和柱层析法分离纯
化α-淀粉酶抑制剂。

2.分子量分析：采用SDS-PAGE电泳法检测α-淀粉酶抑制剂的分子量。

3.化学结构鉴定：采用核磁共振（NMR）和质谱（MS）等技术对α-
淀粉酶抑制剂的化学结构进行鉴定。

4.酶抑制活性测定：采用体外酶活性测定技术，对α-淀粉酶抑制剂
的酶抑制活力进行测定。

四、预期结果
本研究预计可提取到α-淀粉酶抑制剂，并通过分子量分析、化学结
构鉴定和酶抑制活性测定分别对其进行定性、定量和定性分析。

预计能
够得到α-淀粉酶抑制剂的分子量、化学结构及其酶抑制活性等重要信息。

五、研究意义
通过本研究的开展，不仅有助于改善糖尿病和肥胖等疾病的治疗，还能够为进一步研发α-淀粉酶抑制剂提供参考，具有重要的理论和应用价值。

维普资讯
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陕 西 科 技 大 学 学 报
Ａ ｐｒ ０ 。２ ０７
Ｖｏ ． ５ １２
Ｊ ＯＵＲＮＡＩ ＯＦ Ｓ ＨＡＡＮＸＩＵ ＮＩ ＶＥＲＳ ＴＹ Ｃ ＥＮＣＥ ＆ ＴＥＣＨ ＮＯＬＯＧＹ Ｉ ＯＦ Ｓ Ｉ
・７ ・ ９
摘 要 ： 比较 了几 种 豆类 中 旷淀粉 酶 的 活力 ， 结果 表 明 ， 白豆 中 旷淀粉 酶含 量 较 高． 白豆发 芽 对 前后 旷淀 粉 酶 活 力 的 测 定 结 果 表 明 ， 芽 第 三 天 的 白豆 旷淀粉 酶 含 量 最 高． 时 对提 取 时 发 同
ｐ 温度 、 取 时间及金 属 离子 对 酶 活力 的影 响进 行 了研 究 ， 定 出白豆 中 ａ淀粉 酶 的 最佳 提 Ｈ、 提 确 一
・
８ ・ ０
陕 西 科 技 大 学 学 报
第２ ５卷
质量 分数 为 １ ％的 ３ ５二硝 基 水杨 酸 ： 确称 取 １ ０ｇ３ ５二硝 基水 杨 酸 。 ，一 精 ． ，一 溶于 ２ ｌ Ｌ 的 ＯｍＬ ２ｍｏ ・ Ｎａ ＯＨ 溶 液 中 ， 加入 ５ ０ｍＬ蒸 馏水 ， 再加 入 ３ ０ｇ酒 石 酸 钾 钠 ， 溶 解后 用 蒸 馏 水 定 容 至 １ ０ｍＬ 盖 紧 瓶 待 ０ ， 塞， 勿使 Ｃ 入［ ０ 进 ． ｐ 为 ７ ０的柠 檬 酸一 酸氢 二 钠缓 冲溶 液 ：． ｌ － 檬 酸 １ ． Ｈ ． 磷 ０ １ｍｏ ・Ｌ 柠 ７ ８ｍＬ与 ０ ２ｍｏ ・Ｕ 磷 酸氢 二 钠 ． ｌ
８ ． ２ ２ｍＬ混合 ．
１ ２ 实验 方 法 ．
１ ２ １ 水法 提取 Ｏ淀粉 酶 ．． ｌ －
称 取一 定量 的原 料加 入 合适 的水 浸泡一 段 时间 ， 皮 ， 于研 钵 中 ， 入质 量分 数为 １／ Ｎａ １ 液 去 置 加 ５ ９的 Ｃ溶 ５ｍＬ及 ０ １ｇ还 原剂 亚硫 酸钠 （ 。 Ｏ ） 磨 碎后 ， 入 一 定 量 的缓 冲溶 液调 节 ｐ 至 ７ 静 置一 段 时 间 ， ． ＮａＳ 。 ， 加 Ｈ ， 使 其充 分提 取 ， 以 ２０ ０ｒ・ ｎ 离心 １ ｎ 取上 层 清液 即为 提取 液． 再 ０ ｍｉ ０ｍｉ ．

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