新城疫病毒分子生物学及其疫苗的研究进展_侯巍

新城疫疫苗的研究进展摘要综述了常规疫苗和基因工程疫苗2种类型新城疫疫苗南研究进展，分析新城疫疫苗的发展方向，以促进新城疫疫苗的研究。

关键词新城疫；病毒；疫苗；研究进展新城疫病毒属于副粘病毒科副粘病毒属，为有囊膜的单股负链RNA病毒。

其基因组编码6个蛋白：RNA依赖的RNA聚合酶(L基因)、血凝素神经氨酸酶(HN)、融合蛋白(F基因)、基质蛋白(M基因)、磷蛋白(P基因)、核蛋白(NP基因)。

其中F蛋白有使病毒囊膜与宿主细胞融合进而导致病毒传人宿主细胞膜的作用，是决定病毒毒力的关键因子。

而HN蛋白是NDV的另一种重要的致病因子，它的主要作用是参与病毒粒子与细胞受体的最初吸附以及破坏这种吸附作用。

此外，HN蛋白还可使F蛋白充分接近受体而发生病毒与细胞膜的融合而致病。

因此，NDV表面的HN-F糖蛋白在病毒的传染性和治病性上起到至关重要的作用，许多新城疫基因工程疫苗的研制都依赖于F、HN蛋白。

新城疫(ND)是一种侵害禽类的急性高度接触性传染病，由新城疫病毒引起。

自1926年首次在印度尼西亚的爪哇岛和英国的新城暴发以来，至今已有4次世界范围内的大流行，给养禽业带来了严重的经济损失。

NDV基因型已经发生了很大的差异(I-Ⅺ)。

虽然现有的灭活苗和弱毒苗能获得较好的免疫效果，但是近年来由强毒引起的非典型ND在免疫鸡群中时有发生，因而研究出安全、高效的新型疫苗一直备受有关学者的关注。

目前，亚单位疫苗、活载体疫苗、新城疫病毒载体疫苗、DNA疫苗等都被广泛研究。

1常规疫苗1.1灭活苗灭活苗一般是由灭活的感染性尿囊液与载体佐剂混合后制得，能够刺激机体产生有效的免疫应答，使抗体以较高的水平在体内持续较长时间，且易于储存。

目前，广泛使用的灭活苗为油乳剂灭活苗，多用Ulster2e、B1、LaSota及Rokin 等作毒种来生产，这些毒株在鸡胚中均能大量增殖，多用于二联苗或多联疫苗的制造，使用多联苗可以节省劳动力，免疫效力受母源抗体影响较小，免疫后副作用小。

靶向新城疫病毒NP基因的shRNA重组腺病毒表达载体的构建及鉴定杨帆;岳华;侯巍;汤承【期刊名称】《中国预防兽医学报》【年(卷),期】2010(032)001【摘要】为验证腺病毒载体在鸡胚成纤维细胞(CEF)及鸡胚中递送小干扰RNA的可行性,本实验利用共转染技术将表达针对新城疫病毒(NDV)NP基因shRNA的重组质粒同源重组到pGSadeno腺病毒载体系统,用重组腺病毒感染CEF和鸡胚,通过红荧光报告基因的表达情况和荧光定量PCR检测NP基因mRNA的表达对其进行鉴定.并通过细胞形态观察、血凝价的测定评价其在CEF和鸡胚上对NDV增殖的影响.实验结果显示重组腺病毒能够感染CEF,感染CEF后6 h、9 h、12 h与对照组比较NP基因mRNA的表达量分别降低了3.2倍,25.6倍,2.57倍,并能够推迟NDV致细胞病变效应,抑制NDV在鸡胚上的增殖,延缓鸡胚的死亡.本实验构建的重组腺病毒能够在CEF和鸡胚上递送特异的shRNA,为在CEF中的RNA干涉研究开辟了新的递送途径.【总页数】4页(P5-8)【作者】杨帆;岳华;侯巍;汤承【作者单位】西南民族大学生命科学与技术学院,四川,成都,610041;西南民族大学生命科学与技术学院,四川,成都,610041;西南民族大学生命科学与技术学院,四川,成都,610041;西南民族大学生命科学与技术学院,四川,成都,610041【正文语种】中文【中图分类】S852.65【相关文献】1.构建和鉴定PTEN基因的shRNA重组腺病毒表达载体 [J], 韦永琼;曾照芳;陈力学2.大鼠靶向α7nAchR基因shRNA真核表达载体及重组腺病毒构建 [J], 王定坤;陆付耳;邹欣;任妍林;董慧;巩静;方珂;徐丽君;王开富3.CXCR4-shRNA重组腺病毒表达载体的构建及鉴定 [J], 陆航;孙巨峰;刘学政4.靶向山羊△FosB基因的shRNA重组干扰腺病毒的制备及鉴定 [J], 郑惠玲;安俊辉;闫林慧;杨振宇;祝珍珍5.HPV18 E6、E7基因-shRNA重组腺病毒表达载体的构建及鉴定 [J], 李钢;冯彪;邓彦超;李德生;居来提.艾尼瓦尔;张力为因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

新城疫病毒的分离与分子生物学分析新城疫病毒是一种高致死性的病毒，可引发严重的肺炎和急性呼吸道综合征。

自2002年首次在广东出现以来，已经在全球范围内导致了大量感染病例和死亡事件。

在这篇文章中，我们将讨论如何通过分离和分子生物学分析来研究和控制该病毒的传播。

分离新城疫病毒的方法主要包括病人呼吸道标本、血液和尿液等样本的采集和处理。

采集样本的过程必须要遵循一定的操作规范，以确保样本的纯度和完整性。

一旦获得样本后，需要进行初步的分离和纯化，通常采用细胞培养和血清学检测等方法。

细胞培养可以帮助检测新城疫病毒的生长和增殖情况。

以Vero细胞（一种绿猴肾细胞）为例，将样本接种在细胞上，若出现细胞变形、聚集等现象，则说明可能存在病毒污染。

除了细胞培养，还可以通过血清学检测来初步诊断新城疫病毒感染。

检测方法包括免疫荧光抗体（IFA）、酶联免疫吸附测定（ELISA）等。

然而，这些方法只能用于初步筛查，无法确诊新城疫病毒感染。

因此，需要进一步进行分子生物学分析，以明确是否存在新城疫病毒的感染。

分子生物学分析包括核酸检测、基因测序和病毒进化等方面。

其中核酸检测是最常用的方法，包括聚合酶链反应（PCR）、实时荧光PCR、基因芯片等。

这些方法依靠特异性引物或探针在样本中扩增病毒RNA或DNA并定量检测，可以快速、准确地确定新城疫病毒的感染情况。

基因测序是了解病毒的遗传特征和进化过程的重要手段。

通过对新城疫病毒的基因序列进行测定和分析，可以了解其基因型及变异特征。

此外，还可以通过比对不同病毒的基因序列，研究新城疫病毒的进化和传播规律。

例如，近年来新城疫病毒在中国境内的基因型已有较大的变异，有些甚至与在南亚和东南亚地区发现的菲律宾地鼠疫病毒比较相似，进一步增加了疫情的复杂性和危害性。

总之，通过分离和分子生物学分析，可以深入研究新城疫病毒的生物学特征、进化和传播规律，进而为预防和控制该病毒的传播提供重要的科学依据。

新城疫病毒的分子生物学及应用研究进展
周伦江;庄向生;陈少莺
【期刊名称】《中国家禽》
【年(卷),期】2006(28)20
【摘要】新城疫是当今全球范围内最严重的家禽传染病,特别是对养鸡业可造成重大经济损失。

新城疫病毒是一种负链RNA病毒,含有六个主要蛋白,按顺序3′-NP-P-M-F-HN-L-5′排列,其中最主要的糖蛋白是F和HN蛋白,这两个蛋白不仅与病毒的毒力和致病性有关,也是诱导产生保护性抗体的蛋白。

许多分子生物学技术已经应用于新城疫的诊断。

利用分子生物技术也研究出了很多基因工程疫苗比如基因工程活载体疫苗、亚单位疫苗和DNA疫苗等。

近年来反向遗传操作技术的发展,新城疫病毒已经被开发成病毒载体,可以携带外源基因研制新城疫病毒活载体疫苗,表达IBDV和IBV的新城疫活载体疫苗已经研制。

【总页数】5页(P65-69)
【关键词】新城疫病毒;分子生物学;疫苗
【作者】周伦江;庄向生;陈少莺
【作者单位】福建省农业科学院畜牧兽医研究所
【正文语种】中文
【中图分类】S852.659.5
【相关文献】
1.鸡新城疫病毒的分子生物学特性及应用研究进展 [J], 田献礼;宁红梅;银梅;岳峰;魏继涛;郭东光;刘卫
2.新城疫病毒分子生物学特性及检测方法的研究进展 [J], 王玲玲;顾盼;唐晓莲;周康森;蒋鹏俊;吴胜昔
3.新城疫病毒分子生物学特性及检测方法的研究进展 [J], 王玲玲;顾盼;唐晓莲;周康森;蒋鹏俊;吴胜昔;
4.新城疫病毒分子生物学研究进展 [J], 邓紫艳;项勋;段纲;郑勤琴;代飞燕;常华
5.新城疫病毒分子生物学研究进展 [J], 贺奋义
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新城疫病毒的最新研究进展肖华平;黄忍;魏培;杨瑞峰;范建华【摘要】本文从新城疫病毒的理化特性、生物学特性,以及目前主要的诊断、鉴定方法等多方面进行了综述,为今后进一步开展该病毒的防控技术研究,提供了科学的参考和依据.【期刊名称】《中国畜牧兽医文摘》【年(卷),期】2016(032)004【总页数】2页(P43,87)【关键词】新城疫病毒;理化特性;生物学特性【作者】肖华平;黄忍;魏培;杨瑞峰;范建华【作者单位】山东畜牧兽医职业学院,山东潍坊 26104;山东畜牧兽医职业学院,山东潍坊 26104;山东畜牧兽医职业学院,山东潍坊 26104;山东畜牧兽医职业学院,山东潍坊 26104;中国农业科学院家禽研究所,江苏扬州 225125【正文语种】中文新城疫（Newcastledisease，ND）也称亚洲鸡瘟，是由血清1型禽副黏病毒（即新城疫病毒）引起禽类的一种以呼吸道、消化道黏膜出血为主要病变特征的高度接触性、急性败血性传染病。

除家禽外，至少有236种鸟可以自然或实验室感染，是危害养禽业最重要的传染病之一，被世界动物卫生组织（OIE）列为必须报告的传染病，我国农业部在2008年颁布的动物疫病病种目录中，也将其列为一类动物疫病。

新城疫病毒属于副黏病毒科、副黏病毒亚科、腮腺炎病毒属的成员，是Ⅰ型禽副粘病毒的代表株。

1.1 形态结构病毒颗粒在电镜下呈多形性，直径为100～250 nm，常见有横断面100 nm左右的细丝。

囊膜上的纤突长约8 nm，纤突能刺激宿主产生中和抗体。

核衣壳直径为17～18 nm，呈多盘绕的竹状结构，围绕中央孔中心轴呈螺旋对称排列，主要成分是病毒、RNA及与其相连的蛋白质，其中RNA位于核衣壳中央。

1.2 抵抗力一般来说新城疫病毒对理化因素的抵抗力较强，37℃可存活7～9d，鸡粪内病毒50℃可存活5个半月，鸡肉内的病毒15℃可存活98d，骨髓内病毒可存活134d。

NDV对酸、碱的耐受力较强，在pH2和pH10条件下可存活数小时；在ND爆发后经28周仍能从蛋壳、羽毛和鸡舍及鸡舍内物品中分离到NDV。

浅析对新城疫的研究探讨新城疫是一种由卡尔索病毒引起的急性呼吸道感染疾病。

该病毒最初在2002年在中国广东省佛山市爆发，并在短时间内传播到全国各地和其他国家。

该疾病主要通过呼吸道飞沫传播，患者主要表现为发热、干咳、呼吸困难等症状，严重的患者可能导致肺部感染和器官功能衰竭。

尽管自2003年以来已经没有新的病例报告，但研究人员仍在努力研究该疾病的病原体、传播途径和疫苗研发等方面。

一、新城疫的病原体及传播途径新城疫的病原体是一种冠状病毒，与SARS冠状病毒相似，但在基因序列上有所不同。

目前研究者已经将新城疫冠状病毒的基因组进行了测序，并对其进行了系统的分析和比较。

研究结果表明，新城疫冠状病毒与SARS冠状病毒、中东呼吸综合征冠状病毒等属于同一病毒家族，但在基因组结构和序列中存在一定的差异，这也为制定针对新城疫的防控措施提供了新的线索。

新城疫主要通过呼吸道飞沫传播，患者咳嗽、打喷嚏时可将病毒通过飞沫释放到空气中，然后被健康人吸入，从而导致感染。

研究还发现，新城疫冠状病毒还可以通过接触染有病毒的表面物品或直接接触患者的体液而传播，因此个人防护措施也至关重要。

二、新城疫的临床表现及诊断方法新城疫的临床表现主要包括发热、干咳、乏力和呼吸急促等症状。

一般患者在感染后的2-14天内出现症状，严重的病例可能导致肺部感染和器官功能衰竭。

诊断新城疫的主要方法是通过临床症状观察和实验室检测来确认患者是否感染了新城疫冠状病毒。

目前，常用的诊断方法包括病毒核酸检测、病毒抗体检测和病毒分离培养等。

病毒核酸检测主要是利用PCR技术对患者体液或分泌物中的病毒核酸进行检测，以确认患者是否感染了新城疫冠状病毒。

病毒抗体检测则是检测患者体液中的病毒特异性抗体，通常在病毒感染后一段时间内才能出现阳性反应。

病毒分离培养则是将患者的呼吸道分泌物或体液用于培养新城疫冠状病毒，以明确病毒的存在。

三、对新城疫的研究及预防措施目前，研究人员正在对新城疫进行进一步的病原学、流行病学和免疫学研究，以期可以更好地了解该疾病的发病机制和传播规律。

试验研究 | Experimental research新城疫（Newcastle disease，ND）是由新城疫病毒（newcastle disease virus， NDV）引起的一种禽类的急性、高度接触性、烈性传染病[1]。

不仅对我国养禽业带来巨大损失，在世界范围的危害也极大。

弱毒苗和灭活苗虽然能有效控制该病，但它们都还存在一定的缺陷，新城疫基因工程苗相对优越于传统苗，所以，新城疫基因工程苗开始引起重视。

随着反向遗传学的建立[2]，新城疫病毒载体疫苗的研发逐渐活跃起来，为构建新城疫和其他禽病的多联苗奠定了基础。

1　新城疫病毒分子的生物学特性新城疫病毒（newcastle disease virus，NDV）为不分节段单股负链 RNA 病毒 （non segment negativesigle strain virus），本身不能作为 mRNA，不带译制病毒蛋白的信息，必须通过病毒自己的 RNA聚合酶转录出一股互补链作为 mRNA。

新城疫病毒的负链 RNA，一方面转录成 mRNA，合成相应的病毒蛋白成分， 另一方面转录成其互补链 ，再合成病毒 RNA 链，参与病毒包装。

新城疫病毒粒子中心是一个与蛋白质相连接的单股负链 RNA所形成的螺旋形核衣壳，外包一双层脂质囊膜，内衬有一层特殊的 M蛋白，囊膜外有大小2种糖蛋白纤突，前者具有血凝素和神经氨酸酶活性的 HN 蛋白组成，后者具有融合功能的 F蛋白组成。

1.1　新城疫病毒的形态特征新城疫病毒又称亚洲鸡瘟病毒、伪鸡瘟病毒或禽脑肺炎病毒，属于副粘病毒科、副黏病毒亚科、腮腺病毒属、禽副粘病毒I型（APMV-I）。

成熟的新城疫病毒粒子的直径为100～250 nm，由囊膜和核衣壳两部分构成，囊膜是宿主细胞外膜脂类与病毒糖蛋白结合而形成的，表面有刺突，刺突长为8～12 nm，核衣壳是由病毒核酸和蛋白质衣壳粒结合后，对称螺旋缠绕而成，直径约为18 nm。

新城疫病毒的核酸为单链负股、不分节RNA[3]（non segment negative single-stranded　RNA，ssRNA）。