血清总胆固醇测定

血清总胆固醇CHO测定1 检验目的指导本室工作人员规范操作本检测项目，确保检测结果的准确。

2 实验原理胆固醇酯+H2O——→游离胆固醇+脂肪酸CO游离胆固醇+O2——→胆甾烯酮+ H2O2POD2H2O2+4-AAP+4-氯酚————→醌亚胺化合物在一定波长处比色，吸光率（△A）与T-CH浓度成正比。

3 标本：3.1 病人准备：应禁食12小时抽血，24h内不饮酒。

体检对象在抽血前24h内不作剧烈运动。

3.2 类型：血清。

3.3 标本存放留取标本后请尽快分离血清。

在冰箱保存的条件下（2～8℃）稳定3天， -20℃保存至少可以稳定3个月。

3.4 标本运输室温条件下运输。

3.5 标本拒收标准细菌污染的不能做测定。

4 实验材料4.1 试剂:宁波美康生物科技股份有限公司CHO测定试剂盒（浙械注准 20142400134）4.1.1 试剂组成R1试剂：三羟甲基氨基甲烷缓冲液 pH7.0 0.05mol/L胆固醇脂酶（CE） 800U/L胆固醇氧化酶（CO） 400U/L胆酸钠 3.5mmol/LR2试剂：4-氨基安替比林（4-APP） 1mmol/L辣根过氧化物酶（POD） 1000U/L4-氯酚 2.5mmol/L4.1.2 试剂准备试剂为即用式。

4.1.3 试剂稳定性与贮存：试剂保存于2～8℃，若无污染，可稳定至失效期。

试剂不可冰冻。

4.1.4 变质指示：当试剂有看得见的微生物生长，有浊度，或者未开盖的液体有沉淀时，表明试剂已变质，不能继续使用。

4.1.5 注意事项：试剂中含叠氮钠（0.95g/L）为防腐剂。

不可入口！避免接触皮肤及粘膜。

应采取必要的预防措施使用试剂。

4.2 校准品：使用雅培公司提供的TruCal U校准品对自动分析仪进行校准。

4.3 质控品：使用正常值、病理值复合控制品。

5.仪器AU2700生化分析仪，罗氏P800生化分析仪, 西门子ADVIA-2400生化分析仪，东芝TBA-120生化分析仪。

血清总胆固醇测定实验报告血清总胆固醇测定实验报告胆固醇是一种脂类物质，它在人体中起着重要的生理作用。

然而，当胆固醇水平过高时，就会增加心血管疾病的风险。

因此，了解自己的胆固醇水平对于保持健康至关重要。

本实验旨在测定血清中的总胆固醇水平，并通过结果分析对参与者的健康状况进行评估。

实验材料和方法：1. 实验材料：- 血清样本- 高精度血清胆固醇测定试剂盒- 试剂盒使用说明书- 分光光度计- 定量移液器和移液枪- 试管和离心管2. 实验步骤：a. 收集参与者的血液样本，并将其离心分离血清。

b. 根据试剂盒使用说明书，准备所需试剂和标准品。

c. 将标准品和血清样本分别加入试管中，并按照说明书中的步骤进行试剂添加和混合。

d. 使用分光光度计测量各试管中的吸光度，并记录结果。

e. 根据标准曲线计算出各样本中的总胆固醇浓度。

实验结果：通过实验测定，我们得到了参与者血清中的总胆固醇浓度。

根据标准曲线和试剂盒提供的计算公式，我们可以将各样本的吸光度值转换为胆固醇浓度。

根据实验数据，我们将参与者的胆固醇水平分为以下几个等级：1. 理想范围：参与者的胆固醇水平在正常范围内，表明其心血管健康状况良好。

他们应继续保持健康的生活方式，包括均衡的饮食、适当的运动和定期体检。

2. 边缘范围：参与者的胆固醇水平略高于正常范围，但尚未达到危险水平。

他们应该注意饮食结构，减少高胆固醇食物的摄入，并增加运动量。

此外，定期监测胆固醇水平也是必要的。

3. 高风险范围：参与者的胆固醇水平明显升高，表明他们存在心血管疾病的风险。

他们应立即采取行动，改变生活方式，如低脂饮食、戒烟、减少酒精摄入等。

此外，医生可能会建议他们接受进一步的检查和治疗。

实验讨论：通过本实验，我们不仅可以测定参与者血清中的总胆固醇水平，还可以根据结果评估其心血管健康状况。

然而，需要注意的是，本实验只是初步评估，并不能替代专业医生的诊断和建议。

对于高风险范围的参与者，他们应该咨询医生，制定个性化的治疗方案。

血清总胆固醇TC测定操作规程.docx血清总胆固醇（TC）测定操作规程1. 目的本操作规程旨在规范血清总胆固醇（TC）的测定过程，确保检测结果的准确性和重复性。

2. 原理血清总胆固醇（TC）测定通常采用酶法，通过胆固醇酯酶将胆固醇酯水解为游离胆固醇，然后利用胆固醇氧化酶将游离胆固醇氧化为胆甾酮和H2O2，最后利用过氧化物酶将H2O2分解为2H2O和O2，同时产生颜色变化。

颜色的深浅与血清中胆固醇含量成正比，可通过比色法测定。

3. 试剂和材料酶试剂盒（含胆固醇酯酶、胆固醇氧化酶、过氧化物酶等）校准品和质控品血清样本蒸馏水移液枪及吸头比色杯恒温水浴箱自动生化分析仪或分光光度计4. 操作步骤4.1 准备工作确保所有试剂和样本均已在室温下平衡至25°C。

校准生化分析仪或分光光度计至适当的波长（通常为500-550nm）。

4.2 试剂准备根据试剂盒说明书，将酶试剂混合均匀，并预热至25°C。

4.3 样本处理取适量的血清样本，避免溶血和脂血样本。

如有必要，对样本进行离心，去除沉淀物。

4.4 加样使用移液枪准确取样，将血清样本加入比色杯中。

按照试剂盒说明书，加入等量的酶试剂至每个比色杯中。

4.5 反应将比色杯放入恒温水浴箱中，保持37°C反应一定时间（通常为5-10分钟）。

4.6 比色测定将反应后的比色杯放入自动生化分析仪或分光光度计中。

读取吸光度值，并根据标准曲线计算血清总胆固醇浓度。

5. 质量控制每次测定前，使用校准品进行仪器校准。

定期使用质控品进行质量控制，确保结果的准确性和稳定性。

6. 结果记录与报告记录所有测定结果，包括吸光度值、胆固醇浓度等。

根据医院或实验室的标准操作程序，编写并发布检测报告。

7. 安全注意事项操作时应穿戴适当的个人防护装备，如手套和实验服。

避免接触试剂和样本，尤其是避免吸入和摄入。

按照当地法规处理废弃物。

8. 维护和校准定期对生化分析仪或分光光度计进行维护和校准，确保仪器的准确性。

血清总胆固醇的测定实验目的：测量血清中总胆固醇的含量实验原理：胆固醇酯加水在胆固醇酯酶的催化下生成游离胆固醇和脂肪酸。

游离胆固醇加氧在胆固醇氧化酶作用下生成胆烷4-烯-3-酮和过氧化氢，过氧化氢再加4-氨基安替比林和酚在过氧化物酶的作用下生成醌亚胺，醌亚胺在500nm 有特异吸收峰，吸收的强度与胆固醇含量成正比。

反应如下：胆固醇酯+H 2O 胆固醇酯酶→ 游离胆固醇+脂肪酸游离胆固醇+O 2 胆固醇氧化酶→ 胆烷-4-烯-3-酮+H 2O 2H 2O 2+4-氨基安替比林+酚过氧化物酶→ 醌亚胺染料+H 2O 实验操作：取干净干燥的小试管3支，标号，按下表操作混匀，置37℃水浴5-6分钟，以空白管校零，在500nm 波长下比色读取各管吸光度。

实验结果：As= 0.214 A T =0.143标准管胆固醇含量mmol/L=5.00mmol/L测定管胆固醇含量mmol/L=3.34mmol/L分析讨论：为保证实验结果准确，滴加液体时可以先滴加量少的液体，再滴加含量较大的血清蛋白醋酸纤维薄膜电泳实验目的：醋酸纤维薄膜电泳把血清蛋白分离，并测定血清蛋白种类实验原理：带电颗粒在电场作用下，向着与其所带电性相反的电极移动，称电泳。

醋酸纤维薄膜电泳可把血清蛋白分离为：清蛋白、α1、α2、β、γ-球蛋白5条区带实验操作：1.点样：取在缓冲液中浸泡的醋酸纤维薄膜一条（2.5×8cm），轻轻夹于滤纸中，吸去多余的缓冲液，在薄膜的毛面上距一端约1.0cm～1.5cm处，用点样气沾上血清后迅速压一下，然后将毛面向下使两端紧贴在四层滤纸上，加盖，平衡2～3分钟，通电电泳。

2.电泳：恒压120V，0.6mA/cm，时间50～60分钟。

3.染色：电泳完毕后，关闭电源，将薄膜取出，直接浸入氨基黑染色液中染色，取出用漂洗液浸洗3～4次，至背景完全无色为止。

实验结果:电泳后出现5条区带，从正极到负极，分别为清蛋白、α1、α2、β、γ，点样线。

血清总胆固醇测定标准操作规程1.检验原理：（氧化酶法）血清中总胆固醇（TC ）包括游离胆固醇（FC ）和胆固醇酯（CE ）两部分。

血清中胆固醇可被脂蛋白酯酶水解为游离胆固醇和游离脂肪酸（FFA ），胆固醇在胆固醇氧化酶的氧化作用下生成胆甾烯酮和过氧化氢，过氧化氢在4-氨基安替比林和对羟基苯甲酸钠存在时，晶过氧化物酶（POD ）催化，反应生成苯醌亚胺非那腙的红色醌类化合物，其颜色深浅与标本中TC 含量成正比。

胆固醇酯+22O H −−−→−胆固醇酯酶胆固醇+脂肪酸 胆固醇+2O −−−−→−胆固醇氧化酶胆甾烯酮+22O H 222O H +4-AA+对羟基苯甲酸钠−−→−POD红色醌类物质+422O H 2.试剂主要组成成分3.样本要求：新鲜无溶血血清。

在22～25℃保存8小时，2～8℃保48小时，-20℃可保存1年。

样本应避免反复冻融！4.检验方法；仪器法（详见DF-603/DI-600标准操作规程） 5参考范围：6.检验结果的解释：6.1样本含量超出线性范围时，建议用0.9%（W/V）的氯化钠溶液稀释样本。

6.2.单位换算：mg/dl=mmol/L×38.77.检验方法的局限性7.1结果的准确性依赖于仪器的校正和测定温度、时间的控制。

7.2若试剂浑浊，或以水空白在500nm处吸光度大于0.080时不能使用。

8.试剂性能指标8.1试剂外观：无色透明或淡黄色液体，无悬浮物及沉淀。

8.2装量：不低于标识值。

8.3空白吸光度：在500nm处，光径1cm时，空白吸光度A≤0.0808.4线性区间：试剂的线性区间为[0.5-20.0]mmol/L，在此线性区间内：a）线性相关系数r应不小于0.9900；b)[2.0-20.0]mmol/L区间内，线性相对偏差不超过±10%。

8.5准确度：使用具有溯源性的标准品进行测定，实测值与标识值的相对偏差应在±10%内。

8.6分析灵敏度：在500nm处，光径1cm时，测量已知浓度样品换算成1mmol/L 的总胆固醇时，吸光度变化△Ammol/L≥0.0028.7批内精密度：CV≤4.0%8.8批间差：R≤6.0%8.9稳定性：（2-8）℃下，原包装存放的试剂有效期为12个月.取到期后1个月的试剂进行测试，应满足1-8.7的要求。

血清总胆固醇测定实验报告一、实验目的血清总胆固醇（Total Cholesterol，TC）测定是临床生化检验中的常见项目之一，本实验旨在掌握血清总胆固醇测定的原理、方法和操作步骤，熟悉实验过程中的注意事项，并对实验结果进行准确分析和判断。

二、实验原理目前，血清总胆固醇测定常用的方法是酶法。

其原理是胆固醇酯酶（CE）将胆固醇酯水解为游离胆固醇（FC）和脂肪酸，胆固醇氧化酶（COD）将 FC 氧化为胆甾烯酮和过氧化氢，过氧化氢在过氧化物酶（POD）的催化下与 4-氨基安替比林（4-AAP）和酚反应生成红色醌亚胺。

在一定波长下，通过比色法测定吸光度，从而计算出血清总胆固醇的含量。

三、实验材料与设备1、材料血清样本：新鲜无溶血、无脂浊的血清。

试剂盒：包含胆固醇酯酶、胆固醇氧化酶、过氧化物酶、4-氨基安替比林、酚等试剂。

2、设备分光光度计移液器恒温水浴箱离心机四、实验步骤1、样本处理空腹采集静脉血，置于干燥无抗凝剂的试管中，室温下静置 30 分钟使其凝固。

以 3000 转/分钟离心 10 分钟，分离血清，备用。

2、试剂准备按照试剂盒说明书的要求，将试剂 R1 和试剂 R2 分别配制好，并放置于恒温水浴箱中预热至规定温度。

3、测定操作取两支干净的比色管，分别标记为空白管和测定管。

空白管中加入蒸馏水20μL 和试剂R1 1000μL，混匀，置于 37℃恒温水浴箱中保温 5 分钟。

测定管中加入血清样本20μL 和试剂R1 1000μL，混匀，置于 37℃恒温水浴箱中保温 5 分钟。

然后，向空白管和测定管中分别加入试剂R2 500μL，混匀，置于37℃恒温水浴箱中保温 10 分钟。

4、比色测定以空白管调零，在分光光度计 500nm 波长处读取测定管的吸光度值（A）。

五、实验结果计算血清总胆固醇（mmol/L）＝（测定管吸光度空白管吸光度）×校准品浓度÷校准管吸光度六、实验结果本次实验测定的血清总胆固醇结果为_____mmol/L。

血清总胆固醇的测定实验报告胆固醇是人体内一种重要的脂质物质，它在维持细胞膜的完整性、合成激素和胆汁酸等方面发挥着重要作用。

然而，过高的血清总胆固醇水平会增加心脑血管疾病的风险。

因此，及时测定血清总胆固醇水平对于预防和治疗心脑血管疾病具有重要意义。

本实验旨在通过测定血清中总胆固醇的含量，掌握其测定方法，并了解不同因素对血清总胆固醇含量的影响，为临床诊断和研究提供参考。

1. 实验原理。

本实验采用酶法测定血清总胆固醇含量。

首先，将血清样本与试剂中的胆固醇酯酶和胆固醇氧化酶发生反应，将胆固醇酯水解成游离的胆固醇和脂肪酸，然后游离的胆固醇与试剂中的胆固醇氧化酶再次发生反应，生成过氧化物酶，最终生成带有颜色的化合物。

通过测定产生的有色产物的光密度，即可计算出血清中总胆固醇的含量。

2. 实验步骤。

（1）取适量血清样本，离心沉淀，取上清液备用。

（2）将标准品和上清液分别加入反应管中，加入试剂A和试剂B，混匀后放置37℃恒温水浴中反应一定时间。

（3）加入硫酸后，混匀放置10min，再加入试剂C混匀后放置2min。

（4）测定吸光度值，并根据标准曲线计算出血清总胆固醇的含量。

3. 实验结果。

通过实验测定，得出不同血清样本中总胆固醇的含量分别为X mg/dL、Ymg/dL和Z mg/dL。

根据实验结果，我们可以得出……（根据实验结果进行分析和讨论）。

4. 实验结论。

本实验通过酶法测定了血清中总胆固醇的含量，结果表明……（根据实验结果进行结论）。

5. 实验注意事项。

（1）在实验过程中，要注意血清样本的保存和处理，避免样本受到污染或变质。

（2）在试剂配制和使用过程中，要按照相关操作规程，严格控制试剂的质量和使用量。

（3）实验操作过程中，要注意实验室安全，避免发生意外。

6. 实验意义和应用。

本实验方法可以准确测定血清中总胆固醇的含量，为临床诊断和研究提供了重要的参考数据。

同时，也为进一步研究血清总胆固醇与心脑血管疾病的关系提供了实验基础。

授课对象：06级检验1-5班 课 时：2学时血清总胆固醇（TCH ）测定目 标：1.掌握酶法测血清TCH 的基本原理及注意事项。

2.熟练操作步骤。

3.了解TCH 测定的主要临床意义。

实验用品：总胆固醇酶试剂盒（3v ），，721型分光光度计，YZ-602稀释器，血清等。

内 容： 原理：胆固醇酯 + H 2O −−−−→−胆固醇酯酶胆固醇 + RCOOH胆固醇 + O 2 −−−−−→−胆固醇氧化酶Δ 4 -胆甾烯酮 + H 2O 2H 2O 2 + 4 – AA + 酚 −−−−→−过氧化物酶醌亚胺染料 + H 2O在500 nm 波长下比色测定，可求得标本内总胆固醇的含量。

操作步骤：加入物 R S B 血清（μl ） 15 — 标准液(μl) — 15 — 蒸馏水 — — 15 酶工作液(ml)1.51.51.5混匀，置37℃水浴6～10分钟。

以B 管校“0”，500 nm 波长比色，取A 值。

结果计算：TCH (mmol/L) = A R / A S × 5.17结果报告：TCH：mmol/L正常参考值： 2.33～5 .69mmol/L临床意义：TCH↑：常见于动脉粥样硬化等。

TCH↓：甲亢、严重贫血、急性感染等。

注意事项：1.试剂与样品的用量可按其比例放大缩小，计算公式不变。

2.溶血标本胆红素引起正偏差，维生素C、谷胱甘肽、氟化物引起负偏差。

3.样品中的总胆固醇＞15.5mmol/L, 用生理盐水稀释后再重新测定，结果乘以稀释倍数。

课后小结：。