血浆纤维蛋白原测定
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血浆纤维蛋白原测定seek; pursue; go/search/hanker after; crave; court; woo; go/run after
血浆纤维蛋白原测定
正常参考值
2~4g/L
临床意义
1.纤维蛋白原减少
原发性纤维蛋白原减少的病例极少.先天性纤维蛋白缺乏症是极为罕见的遗传性疾病,通过常染色体隐性基因遗传,此患者肝脏不能合成纤维蛋白原.男、女两性均能发生,但以男婴为多见,患婴出生时,半数出现脐带出血.其血液凝固缓慢或只有部分凝固.
继发性血浆纤维蛋白原减少的原因是由于纤维蛋白溶解酶溶解纤维蛋白所致.如胎盘早剥,分娩时羊水进入血管形成血栓,引起弥漫性血管内凝血,激活纤维蛋白溶酶原,使血中纤维蛋白溶酶活力增加,溶解纤维蛋白,消耗了体内原有的纤维蛋白原,使其含量减少.有时可降至0.5g /L以下.
严重的肝实质损害,如各种原因引起的肝坏死、慢性肝病晚期、肝硬化等都可出现纤维蛋白原的减少.此类疾病还常伴有凝血酶原及第七因子缺乏,往往是病情严重的先兆.
此外,严重的低纤维蛋白原血症也可见于肺及前列腺手术中.
2.纤维蛋白原增加
纤维蛋白原是一种急性时相蛋白,其增加往往是机体的一种非特异反应,常见于下列疾病:1感染:如毒血症、肺炎、轻型肝炎、胆囊炎、肺结核及长期的局部炎症等.
2无菌炎症:如肾病综合征、风湿热、恶性肿瘤、风湿性关节炎等.
3其他:如外科手术、放射治疗、月经期及妊娠也可轻度增高.
3.纤维蛋白原异常
纤维蛋白原异常是一种遗传性疾病,是常染色体显性遗传.患者纤维蛋白原含量可能在正常范围,但纤维蛋白原有质的异常.主要是纤维蛋白原分子的一个多肽上出现了一个异常的氨基酸,临床上可无症状或仅有轻度的出血倾向.。
纤维蛋白原(FIB)一、测定原理:1、仪器自动加样并记录待测血浆在凝血活酶的参与下所需的凝固时间。
2、仪器检测原理(凝固法):检测杯两侧独立的线圈产生相反的磁场,驱动钢珠在杯底沿弯曲的轨道运动。
一旦被测血浆开始凝固(加入少激活试剂),血浆粘度增加,改变了钢珠的运动,使其减慢,并且振减小。
此振幅的变化由数学算法通过计算得到凝固时间。
二、标本要求:1、凝血专用管(CTAD管,枸椽酸钠0.109M,蓝帽)抽取静脉血至刻度线,充分混匀。
2500转离心10分钟后2小时内测定完毕。
2、测定量 5ul血浆1:20稀释三、试剂:1、STAGO公司原装试剂STA®-FIBRINOGEN、OWREN-KOLLER(稀释液)2、保存条件:2-8°C3、使用条件:使用前加蒸馏水5ml混匀,条码扫描后放入仪器试剂柜。
使用时试剂柜内(17±2°C)稳定4天四、仪器和材料:1、STA 全自动血凝仪2、含有磁珠的反应杯五、标准和质控:1、标准:预定标,标准曲线由厂家在试剂中提供。
2、质控品为原装STA-COAG CONTROL N+P两批号定值血浆干粉,保存条件2-8℃。
使用前加蒸馏水1ml,混匀,开启后试剂柜内稳定8小时。
编写:伍海波制定日期:2011.12.1六、操作程序:1、装卸试剂:F2键打开试剂柜,条码扫描后确认试剂量,放入合适孔即可。
2、定标与室内质控:更换试剂批号时仪器自动定标,24小时室内质控自动测定一次,未通过仪器有提示报警。
3、标本测定:F1键打开标本柜,输入号码后随机插入标本孔,选择测定项目后关闭标本柜。
仪器1:20稀释血浆加100ul入反应杯,预温240秒后加入50ul试剂并开始计时,根据曲线自动得出含量。
4、传送并核收结果。
七、注意事项:1、血量与抗凝剂比例适宜,离心时间充分以确保血浆中无血小板干扰测定结果。
2、标本无凝固。
七、计算和参考值计算由仪器自动完成,正常参考值:2-4g/L八、方法学特性1、分析范围:1.5-9g/L,低于1.5g/L仪器可自动减少稀释倍数重测2、不精密度:CV 3.85% (批内)CV3.57%(批间)3、干扰实验编写:伍海波制定日期:2011.12.1。
血浆纤维蛋白原测定方法血浆纤维蛋白原是一种重要的凝血因子,它参与了机体的止血过程。
因此,准确测定血浆纤维蛋白原的含量对于诊断和评估血液病变具有重要意义。
本文将介绍一种常用的血浆纤维蛋白原测定方法。
一、测定原理血浆纤维蛋白原的测定方法主要基于血浆纤维蛋白原与特定试剂的反应原理。
常用的测定方法包括免疫比浊法、免疫电泳法、免疫荧光法、酶联免疫吸附法等。
二、免疫比浊法免疫比浊法是一种常用的血浆纤维蛋白原测定方法。
其原理是利用特异性抗体与血浆中的纤维蛋白原结合形成免疫复合物,进而使溶液的浊度增加。
通过测量溶液的光密度变化,可以计算出血浆纤维蛋白原的含量。
三、免疫电泳法免疫电泳法是一种常用的血浆纤维蛋白原测定方法。
其原理是利用电泳的原理,将血浆中的纤维蛋白原与特异性抗体结合,然后通过电泳分离。
根据纤维蛋白原在电泳中的迁移距离,可以确定其含量。
四、免疫荧光法免疫荧光法是一种常用的血浆纤维蛋白原测定方法。
其原理是利用特异性抗体与血浆中的纤维蛋白原结合,并标记荧光物质。
通过荧光显微镜观察样品中荧光信号的强度,可以确定血浆纤维蛋白原的含量。
五、酶联免疫吸附法酶联免疫吸附法是一种常用的血浆纤维蛋白原测定方法。
其原理是利用特异性抗体与血浆中的纤维蛋白原结合,并标记酶类物质。
通过测量酶的活性或底物的反应产物,可以确定血浆纤维蛋白原的含量。
六、测定结果的解读血浆纤维蛋白原的正常浓度范围在2-4 g/L之间。
如果测定结果低于正常范围,可能表示机体合成纤维蛋白原的能力减弱,或者存在纤维蛋白原消耗过多的情况。
而高于正常范围的测定结果,则可能意味着机体正在经历炎症、肿瘤、肝脏疾病等情况。
七、测定方法的优缺点不同的血浆纤维蛋白原测定方法具有不同的优缺点。
免疫比浊法操作简便、成本低廉,但对样品的干扰较大;免疫电泳法分离效果好,但操作复杂、耗时较长;免疫荧光法灵敏度高,但设备要求较高;酶联免疫吸附法操作简便,但对样品的处理要求较高。
八、总结血浆纤维蛋白原的测定方法有多种,每种方法都有其适用的场景和优缺点。
纤维蛋白原(FIB)含量测定方法操作规程一.【产品名称】纤维蛋白原(FIB)含量测定试剂盒(凝固法)二.【预期用途】用于体外人血浆中纤维蛋白原含量测定,用于辅助诊断。
三.【临床意义】FIB含量增高:见于糖尿病及其酸中毒,动脉粥样硬化,急性传染病,急性肾炎尿毒症,休克,外科术后及轻度肝炎等。
FIB含量减低:见于DIC,原发性纤溶症,重症肝炎,肝硬化等。
四.【检验原理】采用Clauss凝固法原理,高浓度凝血酶存在时,待测稀释血浆的凝固时间与其纤维蛋白原(FIB)含量成反比关系。
五.【主要组成成分】1.FIB凝血酶:5瓶/6瓶(内含凝血酶、缓冲液、高岭土、稳定剂、防腐剂)2. FIB定值血浆:1瓶,定值见瓶标FIB定值血浆经HBsAg、HIV抗体、HCV抗体检测,结果为阴性,但仍需如病人样本一样小心处理。
3.FIB缓冲液:2瓶(内含缓冲液、防腐剂)4.说明书:1份注:不同批号试剂盒中各组份不可互换。
六.【储存条件及有效期】未开启试剂于+2℃~+8℃保存可稳定至标签所示失效日期。
FIB凝血酶试剂复溶后于+2℃~+8℃可保存7天;4小时内-20℃冻存,可稳定20天,使用时37℃迅速解冻,勿反复冻融。
FIB定值血浆复溶后于+2℃~+8℃可保存8小时。
七.【适用仪器】血凝分析仪。
八.【样本要求】1. 静脉采血,置于含有1/10体积0.109mol/L枸橼酸酸钠抗凝液(1份抗凝液+9份全血)的塑料管或硅化玻璃管中,轻轻颠倒混匀,3000rpm(或2500g)离心15分钟,收集上层液(血浆,黄色)。
2.不宜使用EDTA●Na2、肝素、草酸盐作为抗凝剂。
3.红细胞比容超过55%或小于20%时,应调整抗凝剂用量。
抗凝剂体积(ml)=0.00185x血液体积(ml)x(100 - 比容)。
4.样本采集避免溶血及组织液污染。
5.样本保存时间如下:+2℃~+8℃保存,不宜超过8小时。
九.【检验方法】1. 试剂重建与保存每瓶FIB凝血酶加入瓶标标示体积的蒸馏水,轻摇溶解。
纤维蛋白原测定(FIB)标准操作规程(SOP)原理:在确定量的血浆样本经过一定时间的加温后,加入试剂。
加入试剂后,采用波长为660nm的光照射样本。
凝血过程(纤维蛋白原转化为纤维蛋白)中血的浑浊度可以通过测量散射光光强度的改变来测定。
从散射光光强度的测定,可以做出凝血曲线,通过Percentage Detect ion Method方法求得凝血时间。
一、仪器:(一)型号:Sysmex CA—1500自动血液凝血分析仪(二)分析和计算参数:1.处理量:约120个测试/小时2.所需样本量:10μl3.检验时间:在最长检验时间之内测出结果,典型最长检验时间:100秒4.重复性:CV≤4%5. 计算参数:纤维蛋白原浓度(Fbg)二、试剂及配套品:(一)试剂:1. 凝血酶试剂(Thrombin Reagent)(1)商标:德灵(DADE BEHRING)(2)包装规格:Pack for 10×1ml(3)代码:B4233 G25 E0533 (961) W(4)成分:牛凝血酶冻干粉(lyophilized preparation of bovine thrombin)(近似100 NIH units/ml)(3)代码:B4234-25(4)成分:1)2.84×10²M的巴比妥钠 (sodium barbital)2)1.25×10¹M 的氯化钠 (sodium chloride)3) PH 7.35±0.13. 清洗液(Cleaning)2%次氯酸钠溶液(自配)(二)配套品:1.标准血浆(Standard Human Plasma)(1) 商标:德灵(DADE BEHRING)(2) 代码:No. ORKL2.校准质控血浆(Ci-Trol®)(1) 商标:德灵(DADE BEHRING)(2) 代码:Level 1, B4244-10Level 2, B4244-20Level 3, B4244-303.质控血浆(Control Plasma)(1) 商标:太平洋(Pacific Hemostasis)(2) 代码及规格:Level 1 (Normal), 100595 10×1mlLevel 2 (Abnormal), 100596 10×1mlLevel 3 (Abnormal), 100597 10×1ml三、操作步骤:(一)开机:开机前,先打开连机的打印机。
纤维蛋白原(FIB)含量测定标准操作规程1.检验原理:采用Clauss凝固法原理,在过量凝血酶作用下,待测稀释血浆的凝固时间与其纤维蛋白原(FIB)含量呈双对数负相关。
在光学比浊法仪器上测定凝固时间,从标准曲线得出纤维蛋白原含量。
2.试剂主要组成成分:R1:FIB试剂:牛凝血酶、稳定剂R2:咪唑缓冲液:咪唑;R3:FIB定值血浆:纤维蛋白原、稳定剂。
3.样本要求:3.1.采集静脉血,立即按9份血:1份抗凝剂比例与0.109mol/L枸橼酸钠充分混合均匀。
室温3000rpm离心12分钟,上层淡黄色液体为待检的乏血小板血浆。
3.2血浆室温放置,宜在2小时内检测。
3.3血浆若不能及时检测,用塑料吸管分离,-20℃可保存2周。
测定前37℃快速融化,轻微混匀后立即检测。
4.检验方法:全自动血凝分析仪测定(详见雷杜RAC-1830标准操作规程)5.参考区间:2—4g/L6.检验结果的解释:报告FIB含量,单位为g/L,检验结果与各实验室的参考值范围相关。
7.检验方法的局限性7.1凝血过程中从因子激活到纤维蛋白激活到纤维蛋白形成的一系列反应。
因此,检验结果可能受到治疗药物(干扰物)、检验操作、检验系统等因素的影响,应考虑这些因素。
7.2试剂被污染,或者样品杯、吸管等被凝血试剂污染,会导致凝血异常,需严格控制。
7.3纤维蛋白原降解产物(FDP)含量过高会延长凝固时间,产生假性纤维蛋白原低水平。
8产品性能指标8.1重复性:用质控血浆重复测试所得结果的变异系数(CV),正常值应不超过5.0%,异常值应不超过8.0%8.2瓶间差:用质控血浆测试,瓶间差应不超过6.0%。
8.3线性:FIB试剂在测试范围内,线性相关系数r应大于0.98.9临床意义FIB含量增高:见于糖尿病及其酸中毒,动脉粥样硬化,急性传染病,急性肾炎尿毒症,休克,外科术后及轻度肝炎等。
FIB含量减低:见于DIC,原发性纤溶症,重症肝炎,肝硬化等。
低纤维蛋白原血症的诊断标准低纤维蛋白原血症(hypofibrinogenemia)是指血浆中纤维蛋白原水平低于正常范围。
纤维蛋白原是一种由肝脏合成的血浆蛋白,它在血液凝固和止血过程中起着至关重要的作用。
低纤维蛋白原血症可能是先天性或获得性的,且严重程度可因个体差异而有所不同。
主要诊断标准如下:1.测定血浆纤维蛋白原水平:低纤维蛋白原血症的首要诊断标准是测定血浆中纤维蛋白原(Fibrinogen)的水平。
参考范围通常介于2.0–4.0 g/L。
如果测定结果低于2.0 g/L,可以初步诊断为低纤维蛋白原血症。
2.排除其他凝血因子缺乏:低纤维蛋白原血症可能是凝血因子缺乏的结果之一,因此需排除其他凝血因子(如凝血酶原、纤维蛋白聚合酶等)的缺乏。
这可以通过测定其他凝血因子的水平来完成。
3.确定纤维蛋白原合成异常:对于发现纤维蛋白原水平低下的患者,需要进一步评估纤维蛋白原的合成情况。
可通过测定肝功能、血清白蛋白和转铁蛋白等指标来评估肝脏合成功能。
此外,也可以进行基因检测,以确定是否存在纤维蛋白原合成相关的遗传变异。
4.观察临床表现和病史:临床上,患者可能出现易出血的症状,如皮肤出血、黏膜出血、鼻出血等。
对于家族史阳性的患者,需要注意先天性纤维蛋白原缺乏的可能性。
5.除外其他原因:低纤维蛋白原血症也可以是由其他原因引起的。
因此,在诊断之前,需要排除其他导致纤维蛋白原水平降低的因素,如DIC(弥散性血管内凝血)等。
总之,低纤维蛋白原血症的诊断需要综合临床表现、病史、实验室检查和影像学检查等多方面的信息。
准确的诊断对于制定恰当的治疗方案和预后评估至关重要。
因此,对于可疑的低纤维蛋白原血症患者,建议及时咨询专业医生进行进一步的评估和诊断。
血浆纤维蛋白原(Fbg)测定(分析仪器法)1. 实验原理:确定量的血浆样本经过一定时间的加温后,加入纤维蛋白原试剂,采用波长为660nm的光照射样本,凝血过程中血浆的混浊度可以通过测量散射光光强度的改变来测定,从散射光光强度的测定,可以作出凝血曲线,通过Percentage Detection Method法求得凝血时间,再通过凝血时间,求出Fbg含量.2. 标本采集2.1早晨空腹采血(空腹12小时左右),静脉采血.2.23.8%(w/v)枸椽酸钠0.2ml+静脉血1.8ml,混匀.3. 标本存放1小时内(3000r/min×15min)分离血浆,室温放置不超过2小时,2~8℃保存不超过4小时,长时间保存需在冰冻条件下,(-70℃不超过6个月),只能冻融1次,在37℃迅速解冻,以减低凝血因子的消耗,解冻后立即测试.4. 标本运输:低温条件下运输.5. 标本拒收的标准:抗凝剂不符合,采血量不准确,凝固,溶血,脂血标本不能作测定.6. 实验材料:6.1 德国Dade Behring Marburg 公司凝血酶试剂,每瓶加1ml蒸馏水溶解(20人份),未开封试剂2~8℃贮存到说明书上有效期.复溶试剂2~8℃保存不超过5天.6.2 Owren′s巴比妥绥冲液(PH7.35±0.1)用于标本的稀释,2~8℃贮存到说明书上有效期.6.3 Dade Control质控血浆.用蒸馏水1ml溶解后放置30分钟,才能使用或分装.复溶后,室温保存2小时,2~8℃4小时.7. 仪器设备:7.1 仪器名称: Sysmex CA-1500全自动血液凝固分析仪7.2 仪器厂家:日本Sysmex公司7.3 仪器型号:Sysmex CA-15007.4 仪器技术参数:7.4.1 速度:最快检测速度180测试/小时,组合检测约140测试/小时7.4.2 试剂位:36个,具冷藏功能.7.4.3 样本位:50个,可自动连续添加.7.5 仪器校准程序:7.5.1 校准频率:当方法改变,试剂厂家或试剂型号改变,仪器维修影响测定结果等情况时,必须进行校准.7.5.2 校准操作:设置标准曲线分析(由仪器提供商指定工程师执行)8. 操作步骤:8.1 检查前准备:8.1.1 清空废液瓶,清空反应杯抛弃槽.8.1.2 添加足够反应杯(不能超出警告线)8.1.3 添加清洁液试剂,清洗用蒸馏水等.8.2 开机先开打印机再开主机,开机后仪器自检,约15分钟,屏幕上方“Not Ready”变为“Ready”,表示仪器预热完成,进入系统准备工作状态,可进行测定.8.3 输入工作清单:从主菜单选,选入第一个样本号→按相应实验项目名称键并同时输入此标本的其他测试项目,若选“凝血四项(PT、APTT、Fbg、TT)”,可按选中项目相应位置标记为“○”,选完项目后按需按该项目(按键如号项目。
纤维蛋白原(FIB)纤维蛋白原(FIB)含量测定方法操作规程一.【产品名称】纤维蛋白原(FIB)含量测定试剂盒(凝固法)二.【预期用途】用于体外人血浆中纤维蛋白原含量测定,用于辅助诊断。
三.【临床意义】FIB含量增高:见于糖尿病及其酸中毒,动脉粥样硬化,急性传染病,急性肾炎尿毒症,休克,外科术后及轻度肝炎等。
FIB含量减低:见于DIC,原发性纤溶症,重症肝炎,肝硬化等。
四.【检验原理】采用Clauss凝固法原理,高浓度凝血酶存在时,待测稀释血浆的凝固时间与其纤维蛋白原(FIB)含量成反比关系。
五.【主要组成成分】1.FIB凝血酶:5瓶/6瓶(内含凝血酶、缓冲液、高岭土、稳定剂、防腐剂)2. FIB定值血浆:1瓶,定值见瓶标FIB定值血浆经HBsAg、HIV抗体、HCV抗体检测,结果为阴性,但仍需如病人样本一样小心处理。
3.FIB缓冲液:2瓶(内含缓冲液、防腐剂)4.说明书:1份注:不同批号试剂盒中各组份不可互换。
六.【储存条件及有效期】未开启试剂于+2℃~+8℃保存可稳定至标签所示失效日期。
FIB 凝血酶试剂复溶后于+2℃~+8℃可保存7天;4小时内-20℃冻存,可稳定20天,使用时37℃迅速解冻,勿反复冻融。
FIB定值血浆复溶后于+2℃~+8℃可保存8小时。
七.【适用仪器】血凝分析仪。
八.【样本要求】1. 静脉采血,置于含有1/10体积0.109mol/L枸橼酸酸钠抗凝液(1份抗凝液+9份全血)的塑料管或硅化玻璃管中,轻轻颠倒混匀,3000rpm(或2500g)离心15分钟,收集上层液(血浆,黄色)。
2.不宜使用EDTA●Na2、肝素、草酸盐作为抗凝剂。
3.红细胞比容超过55%或小于20%时,应调整抗凝剂用量。
抗凝剂体积(ml)=0.00185x血液体积(ml)x(100 - 比容)。
4.样本采集避免溶血及组织液污染。
5.样本保存时间如下:+2℃~+8℃保存,不宜超过8小时。
九.【检验方法】1. 试剂重建与保存每瓶FIB凝血酶加入瓶标标示体积的蒸馏水,轻摇溶解。
血浆纤维蛋白原的检测方法引言:血浆纤维蛋白原是一种重要的血液凝血因子,在人体中起着至关重要的作用。
检测血浆纤维蛋白原的水平可以帮助医生判断炎症、凝血功能异常、心血管疾病等疾病的风险,从而指导临床诊断和治疗。
本文将介绍几种常见的血浆纤维蛋白原检测方法。
一、免疫测定法免疫测定法是一种常用的血浆纤维蛋白原检测方法。
该方法利用特异性抗体与纤维蛋白原结合,形成抗原-抗体复合物,然后通过染色、荧光或酶标记等方式进行定量分析。
免疫测定法的优点是灵敏度高、结果准确可靠,但也存在一定的局限性,如受到其他因素的影响可能导致假阳性或假阴性结果。
二、凝血时间测定法凝血时间测定法是一种简单而常用的血浆纤维蛋白原检测方法。
该方法通过观察血浆样品在特定条件下的凝血时间来判断纤维蛋白原的水平。
通常采用的方法是添加活化的凝血酶,观察血浆样品凝固的时间。
凝血时间的延长可能意味着纤维蛋白原水平的降低。
三、电泳测定法电泳测定法是一种能够分离不同蛋白质的方法,也可以用于血浆纤维蛋白原的检测。
该方法通过在电场中对血浆样品进行分离,根据纤维蛋白原在电泳过程中的迁移速度来确定其水平。
电泳测定法可以提供纤维蛋白原的定量分析,但需要复杂的设备和操作技术。
四、DNA测定法近年来,一种新的血浆纤维蛋白原检测方法——DNA测定法逐渐被应用于临床实践。
该方法利用纤维蛋白原与DNA相互作用的特性,通过测定DNA与纤维蛋白原结合后的信号变化来确定纤维蛋白原的水平。
相比传统的免疫测定法,DNA测定法具有更高的灵敏度和准确性。
五、质谱测定法质谱测定法是一种高分辨率的检测方法,可以用于血浆纤维蛋白原的定量和定性分析。
该方法通过将血浆样品中的纤维蛋白原分离和离子化,然后根据质量-电荷比对其进行测定。
质谱测定法具有高灵敏度和高特异性的特点,可以同时检测多种蛋白质。
结论:血浆纤维蛋白原的检测方法多种多样,每种方法都有其独特的优点和适用范围。
在临床实践中,医生根据具体情况选择合适的检测方法进行血浆纤维蛋白原的检测,以辅助疾病的诊断和治疗。
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血浆纤维蛋白原
导语:很多朋友在做身体检查的时候,发现血浆纤维蛋白原不在正常值的范围之内,出现了偏高或者是偏低的情况,但是却不知道是什么原因引起的,也不
很多朋友在做身体检查的时候,发现血浆纤维蛋白原不在正常值的范围之内,出现了偏高或者是偏低的情况,但是却不知道是什么原因引起的,也不知道血浆纤维蛋白原具体是怎么回事。
如果是这样的话,对于您了解自己的身体状况是很不利的。
因此,在这里我们首先要了解一下血浆纤维蛋白原到底是怎么回事。
简单来说血浆纤维蛋白原就是具有凝血功能的蛋白原,存在于人体的血液之中,在正常的情况下,它不会发挥任何的作用,但是如果是受伤出血之后,它才会显现出来它的具体作用。
具体血浆纤维蛋白原在人体中的作用如下:
纤维蛋白是在凝血过程中,凝血酶切除血纤蛋白原中的血纤肽A和B而生成的单体蛋白质。
简单地说,就是一种与凝血有关的蛋白质,即凝血因子。
浆纤维蛋白原 - 血浆纤维蛋白
在人的血浆中含有0.2—0.3g/dl左右。
是一种球蛋白.含有3%的碳水化合物,在对血浆进行Tiselius电泳、滤纸电泳、醋酸纤维素膜电泳中存在于4分段中。
用25—50%饱和度的硫酸铵、半饱和的氯化钠和1.1—1.2M磷酸盐可沉淀。
含于Cohn的第一分段中.人的血纤维蛋白等电点而为pH5.2—5.6,牛的血纤维蛋白等电点为pH5.5,据称分子量为32—34万。
人体血纤维蛋白原在体内的半衰期是4—5天,主要在肝细胞中产生.血纤维蛋白原分子由称为α(A)链、β(B)链、γ链的三种多肽链,各自
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纤维蛋白原FIB测定简介用途人血浆中纤维蛋白原定量测定。
概述和解释纤维蛋白原降解见于:a)获得性低纤维蛋白血症或无纤维蛋白血症获得性纤维蛋白原缺乏见于凝血酶(凝血病理性消耗,如产科术后),蛇毒或纤溶酶(链激酶或尿激酶或tPA治疗产生的原发性纤维蛋白溶解亢进)引起血管内纤维蛋白原水解。
而且,中度低纤维蛋白原血症见于合成减低(急性或慢性肝病),血容量降低(如腹水或急性出血,红斑症)或降解增加(休克或肿瘤)。
b)先天性低纤维蛋白原血症和无纤维蛋白原血症纤维蛋白原水平暂时升高见于纤维蛋白原作为“急性相蛋白”时:a)一过性高纤维蛋白原血症可见于手术、创伤、心脏病发作和感染。
b)持续性高纤维蛋白原血症可见于肿瘤和慢性感染性疾病。
纤维蛋白原水平随年龄轻度增高。
纤维蛋白原水平增高有心血管疾病危险性。
方法学原理纤维蛋白原是一种蛋白质,因凝血酶的作用使可溶性蛋白质转换成不溶性多聚体,形成纤维蛋白凝块。
稀释血浆的凝血酶凝固时间与纤维蛋白原血浆含量成反比。
根据此原理,Clauss建立了一种简单的定量纤维蛋白原方法,即加入过量的凝血酶测量稀释血浆的凝固时间。
然后,与纤维蛋白原标准品的凝固时间进行比较。
试剂成分凝血酶试剂:冻干的牛凝血酶(约100NIH单位/ml)制剂,含稳定剂和缓冲液。
纤维蛋白原标准品:枸橼酸抗凝血浆(人),含HEPES缓冲液,稳定且冻干。
纤维蛋白原含量采用可凝固蛋白测定方法。
瓶标签上注明标准品浓度。
缓冲液:2.84×10-2M巴比妥钠溶解于1.25×10-1M氯化钠溶液中,pH7.35±0.1。
警告和注意事项1.仅适用于体外诊断。
2.纤维蛋白原标准品含有人源性物质。
当作感染性物质处理。
每位供血者或供血个体都经EU或FDA认可的体外诊断检测方法检测,皆为HIV1、HIV2、HBV及HCV阴性。
因为至今仍没有一种方法可以完全排除传染性抗原的存在,因此所有人源性的血制品都应该谨慎处理。
血浆纤维蛋白原(Fbg)测定
1. 实验原理
将试剂加入稀释的抗凝血浆中,试剂中过量的牛凝血酶可直接作用血浆中的纤维蛋白原转化为纤维蛋白,此反应过程的速率即反映了纤维蛋白原的浓度和功能。
通过660nm光照射血浆,测定其凝固反应的散射浊度变化。
2. 标本采集
2.1 早晨空腹采血(空腹12小时左右),静脉采血。
2.2
3.8%(w/v)枸椽酸钠0.2ml+静脉血1.8ml,混匀。
3. 标本存放全血贮存在4~10oC不超过2小时,最好1小时内(3000r/min×15min)分离血浆,此血浆在室温22~24oC 下可存放2小时,在2~4oC可存放4小时,在-20oC可存放2周,长时间保存需在冰冻条件下,在-70oC可存放6个月。
冷冻血浆融化时,应将盛血浆的容器置37oC水浴中,并轻轻摇动,使其迅速融化,以免凝血因子消耗,解冻后立即测试。
冷冻过的标本不能再次冷冻,否则结果不准确。
4. 标本运输:低温条件下运输。
5. 标本拒收的标准:抗凝剂不符合,采血量不准确,凝固,溶血,脂血标本不能作测定。
6. 实验材料:
6.1每个试剂均购自德国Dade Behring Marburg公司。
1)FIB-C测定试剂盒(代号P/N:8469110)
冻干牛凝血酶(>35uNIH/ml)8瓶
异常质控血浆2瓶
2)定标血浆Calibration Plasma(代号P/N: 20003700)3)正常质控血浆Normal control plasma(代号P/N: 20003110)
4)低纤维蛋白原质控血浆 Low fibrinogen control(代号P/N:20004200)
5)因子稀释液(代号P/N:9757600)
6)清洗液A Cleaning solution(代号P/N:9831700)
7)清洗液B Cleaning agent(代号P/N:9832700)
6.2试剂准备
牛凝血酶:用2mL NCCLS II型或相同质量的蒸馏水溶解1瓶牛凝血酶,盖上盖子,轻摇至完全溶解,置15~25oC 30分钟,用前摇匀,勿用力振摇。
异常质控血浆:用1mL NCCLS II型或相同质量的蒸馏水溶解1瓶血浆,盖上盖子,轻摇至完全溶解,置15~25oC 30分钟,用前摇匀,勿用力振摇。
6.3试剂保存
未开封的试剂可保存在2~8 oC至试剂盒上标明的有效期。
试剂溶解后,
凝血酶:于原瓶中2~8 oC,3天内有效;于原瓶中-20 oC,
1个月有效;ACL(15oC),3小时有效。
异常质控血浆:于原瓶中,15~25oC,4小时有效;-20 oC,7天有效。
建议试剂不使用时,最好将其倒回原瓶中,保存于2~8 oC。
7. 仪器设备:
7.1 仪器名称:syxmex CA7000全自动血凝仪
7.2 仪器厂家:日本希森美康公司
7.3 仪器型号:CA7000
7.4 仪器技术参数:
7.4.1 试剂位:18个,具冷藏功能。
7.4.2 样本位:40个,可通过换盘连续添加。
7.5 仪器校准程序:
7.5.1 校准频率:当方法改变,试剂厂家或试剂型号改变,仪器维修影响测定结果等情况时,必须进行校准。
7.5.2 校准操作:设置标准曲线分析(由仪器提供商指定工程师执行)。
8. 操作步骤:
8.1 开机:CA7000的开关在仪器的右侧。
开机后仪器自检,当屏幕上边显示Ready时可进行试检
8.2洗针:在主屏幕上选Rinse Probe键,然后按Execute进行洗针
8.3 检查消耗品:
1.准备反应杯:打开仪器上盖装反应杯的盖子查看反应杯是否够量,不足时,需及时添加。
2.准备试剂:按照仪器对试剂的要求,把每一项的试剂准备好,放到仪器内相应位置,注意查看试剂的量和有效期。
如还不熟悉试剂位置时,可在主屏幕上选Reagent Setting,按屏幕显示位置放置试剂。
注意:共三个位置放清洗液。
3.查看仪器的洗液瓶和废液瓶
8.4 准备标本:将样本离心好,放入样本架,再将样本架放到仪器进样器上。
8.5 输入检测项目:
主菜单上的按下Work list键,进入工作菜单。
输入项目,直接点击相应的实验项目键
重复:按屏幕下菜单的REPEAT键,在屏幕弹出的键盘上输入相应测试数,仪器会自动重复与光标所在位置相同的测试信息。
输入样本号:按屏幕下菜单的ID NO.Entry按顺序输入样本的序号或病人的病历号。
开始检测:录入完所有测试信息,按下屏幕右上角START 键,开始检测
查看结果:返回到主屏幕,检测的项目如果由○变成●表明此试验已经完成。
按下Stored Date键,出现已存储结果界面,屏幕显示已完成的测试的信息。
如果查看反应曲线,按
下边菜单第一项Gragph查看凝集趋势、吸光度、错误信息等。
8.6 洗针:当做完一批标本后,需要洗针,按下Rinse Probe 然后按下Execute进行洗针
8.7 关机:回到主屏幕下,在洗完针后方可关机,切断电源,同时关闭压力泵和总电源。
9. 检验结果的判断与分析:
9.1 仪器测定Fbg线性范围在0.25g/L-10g/L,测定完成仪器将显示每个参数的计算结果(包括凝固时间与Fbg含量g/L),若不能对参数进行正确计算,将出现下列信息:
﹡﹡﹡,﹡出现错误,不能得到分析数据
ˉˉˉ,ˉ不能计算参数
+++,+数值超出线性范围.
9.2 仪器设定Fbg参考范围在2-4g/L,如果得到一个不正常数值,在数据的左侧将出现下列标记:
﹡出现错误信息
< 数据低于可报告的低限
> 数据高于可报告的高限
10. 质量控制:每批样本同时测定三个浓度水平(正常值低值和高值)的质控品,以2S为警告限,3S为失控限,绘制质控图,判断是否在控。
每个实验室均应建立自己的质控均值和SD值以检测实验质量。
至少每8小时做一次质控分析。
用
Westgard等方法进行质控数据的分析和处理,评定质量情况。
请参考CA7000全自动血凝仪操作手册。
11. 临床意义:Fbg是用于判定血栓前状态或血栓性疾病的必查项目.
11.1 参考范围:2-4g/L
11.2 Fbg含量增高:高凝状态(如糖尿病伴血管病变,急性心肌梗塞,脑血管病变,口服避孕药,妊娠及其中毒症,深静脉血栓形成,动脉粥样硬化,高血脂症等);亦见于急性传染病,急性感染,肾小球疾病活动期,放射治疗后,烧伤,休克,外科手术后,恶性肿瘤,多发性骨髓瘤等.
11.3 Fbg含量减少:肝脏疾病(重症肝炎,慢性肝炎,肝硬化等);DIC消耗性低凝血期及纤溶期,溶栓治疗的监测,原发性纤维蛋白原缺乏症,原发性纤溶活性亢进,恶性贫血及肺、甲状腺、子宫、前列腺手术等.
11.4 纤维蛋白原异常:纤维蛋白原异常是一种遗传疾病,是常染色体显性遗传.患者Fbg含量可能在正常范围,但纤维蛋白原有质的异常.主要是Fbg分子的一个多态上出现一个异常氨基酸,临床上可无症状或有轻度出血倾向.
12. 变异的潜在来源
12.1 抗凝剂:草酸盐、EDTA、肝素不能用于Fbg测定项目,抗凝比例不当也将
影响结果的准确性。
12.2 样本采集处理不当,如血与抗凝剂未充分混匀,出现小凝块;混匀时过分用力,使红细胞破坏出现溶血,均会造成结果变异。
12.3 纤溶药物的影响:如双香豆素、链激酶、尿酶等
12.4 妊娠与急性炎症的影响
13. 操作注意事项:干粉试剂及质控血浆溶解
13.1 确认溶剂类型,一般溶解液包括:蒸馏水、生理盐水、缓冲液、厂家特定溶解液,必须按说明书要求使用。
13.2 溶解时,轻轻转动容器,保证干粉完全溶解,避免剧烈振荡。
14. 仪器维护与保养
14.1 每日保养:
14.1.1开机前观察样品参比液液面,看是否够做测定。
14.1.2 注意检查液面水平并倒空废液瓶,确保废液能顺利流入废液瓶。
14.1.3让开关机尽量减少到最少。
14.1.4 检查废反应盘杯,必要时倒空废反应盘杯。
14.1.5在每天工作前和工作后,执行冲洗程序:按“PROG”,显示应用菜单,选择“PRIMING”,按“ENTER”确认。
14.2每周保养
14.2.1清洁仪器表面,标本区域内壁和分析腔。
14.2.2进入清洁程序清洁吸样针。
14.2.3清洁冲洗/废液池。
14.3每月保养
清洁空气过滤网
14.4根据需要
14.4.1清洁废液管路
14.4.2清洁溢出的样本
14.4.3更换吸样针组件
14.4.4调整吸样针位置
14.4.5对吸样针/试剂针排污处理
15. 参考文献。