浅谈组织工程神经血管化研究进展.docx
- 格式:docx
- 大小:17.24 KB
- 文档页数:5
第27卷第1期2006年1月武汉大学学报(医学版)Medical Journal of Wuhan University Vol.27No.1J an ,2006课题来源:国家自然科学基金(30471670)作者简介:刘阳,男,19782,医学硕士生,主要从事组织工程血管方面的研究通讯作者:谭最,男,19612,医学博士,主任医师,主要从事血管外科方面的研究组织工程血管支架研究进展刘 阳 谭 最武汉大学中南医院血管外科 武汉 430071摘要 组织工程血管支架是血管组织工程学中的一个重要组成部分。
过去20多年时间里,组织工程血管支架材料由简单的天然材料发展到高分子可降解材料和生物材料的复合物;设计和加工的方式由单纯的手工发展到潜力巨大的快速成型技术,取得了令人瞩目的成绩。
目前组织工程血管支架材料的性能还有待完善,设计加工方法还不够成熟,该领域今后的发展方向为支架材料的复合化和支架设计加工的产业化。
关键词 组织工程;血管支架;可降解材料;快速成型中图分类号 R318.11 文献标识码 A 文章编号 167128852(2006)0120124206Study of Scaffold on Tissue E ngineered Blood V esselL IU Yang ,TAN ZuiDe pt.of V ascul ar S ur gery ,Zhongnan Hos pit al of W uhan U ni versit y ,W uhan 430071,Chi naAbstractThe blood vessel scaffold is one of t he important part s of tissue engineered blood vessel.In t he past twenty years ,t he simple crude materials used in tissue engineered blood vessel had been substit uded by t he compounds of macro molecule synt hetic biodegradable polymers and biomateri 2als ;man 2made skill of t he design and manufact ure scaffolds had been substit uded by t he more po 2tential technique of rapid p rototyping (RP ).The performance of tissue engineered blood vessel scaffold is not satisfied and t he technique of t he design and manufact ure scaffolds is not perfect by now.The compo sition of t he materials and t he indust rialization of t he design and manufact ure is t he destination of developing tissue engineered blood vessel in t he f ut ure.K ey Words Tissue Engineering ;Blood Vessel Scaffold ;Degradable Polymers ;Rapid Proto 2typing1 介绍 组织工程学是20世纪80年代提出的一门新兴交叉学科。
组织工程在血管再生中的研究进展血管系统在维持人体正常生理功能中起着至关重要的作用,它负责输送氧气、营养物质,并带走代谢废物。
然而,由于各种疾病(如动脉粥样硬化、血管损伤等)导致的血管功能障碍和血管缺失,严重威胁着人类的健康。
传统的治疗方法,如血管移植和介入治疗,在某些情况下存在局限性。
因此,组织工程技术的出现为血管再生带来了新的希望。
组织工程是一门融合了生物学、工程学和医学的交叉学科,旨在构建具有生物活性和功能的组织替代物。
在血管再生领域,组织工程的核心目标是利用生物材料、细胞和生物活性因子,制造出能够替代或修复受损血管的功能性血管移植物。
一、生物材料在血管组织工程中的应用生物材料是血管组织工程的基础,其作用是为细胞提供生长和分化的支架。
理想的血管组织工程生物材料应具备良好的生物相容性、可降解性、适当的机械强度和孔隙结构。
天然生物材料,如胶原蛋白、纤维蛋白和壳聚糖等,由于其与人体组织的相似性,具有良好的生物相容性。
胶原蛋白是血管细胞外基质的主要成分之一,以其为基础的支架可以模拟天然血管的结构和功能。
纤维蛋白则具有良好的止血和促进细胞黏附的特性,常用于构建血管组织工程的临时支架。
合成生物材料,如聚乙醇酸(PGA)、聚乳酸(PLA)及其共聚物(PLGA)等,具有可调控的机械性能和降解速率。
通过改变材料的组成和结构,可以定制满足不同需求的血管支架。
此外,还有一些新型的生物材料,如纳米材料和水凝胶等,也在血管组织工程中展现出了巨大的潜力。
纳米材料具有高比表面积和独特的物理化学性质,可以增强细胞与支架的相互作用。
水凝胶则能够模拟细胞外基质的湿润环境,为细胞提供良好的生存空间。
二、细胞在血管再生中的作用细胞是血管组织工程的关键组成部分,包括内皮细胞、平滑肌细胞和成纤维细胞等。
内皮细胞是血管内壁的主要细胞类型,负责维持血管的通透性和抗血栓形成。
在血管再生过程中,内皮细胞的快速覆盖对于防止血栓形成和血管狭窄至关重要。
组织工程在软组织修复中的研究进展软组织损伤和缺陷是临床上常见的问题,给患者带来了巨大的痛苦和生活不便。
传统的治疗方法如自体组织移植、异体组织移植和人工材料替代等存在着诸多局限性,如供体组织来源有限、免疫排斥反应、术后并发症等。
组织工程的出现为软组织修复带来了新的希望,其通过构建生物活性的组织替代物,有望实现受损组织的完美修复和再生。
一、组织工程的基本概念和原理组织工程是一门融合了生物学、工程学和医学的交叉学科,旨在利用细胞、生物材料和生物活性因子的协同作用,构建具有特定功能和结构的组织或器官。
其基本原理是从患者体内获取少量的细胞,在体外进行培养扩增,然后将这些细胞种植在具有良好生物相容性和生物可降解性的支架材料上,同时添加适量的生物活性因子,促进细胞的黏附、增殖和分化,最终形成具有特定功能的组织或器官。
二、软组织修复中常用的组织工程策略1、细胞治疗细胞是组织工程的核心要素之一。
在软组织修复中,常用的细胞类型包括成纤维细胞、间充质干细胞、脂肪干细胞等。
成纤维细胞是皮肤和结缔组织中的主要细胞类型,能够合成和分泌胶原蛋白等细胞外基质成分,促进组织的修复和再生。
间充质干细胞具有多向分化潜能,能够分化为成纤维细胞、脂肪细胞、软骨细胞等,在软组织修复中发挥着重要的作用。
脂肪干细胞来源丰富,易于获取和培养,也成为了软组织修复的理想细胞来源之一。
2、生物材料支架生物材料支架为细胞的生长和分化提供了三维空间和物理支持。
理想的生物材料支架应具有良好的生物相容性、生物可降解性、合适的孔隙结构和机械性能。
目前,用于软组织修复的生物材料支架主要包括天然材料(如胶原蛋白、明胶、壳聚糖等)和合成材料(如聚乳酸、聚乙醇酸、聚己内酯等)。
此外,一些新型的生物材料如纳米材料、水凝胶等也在软组织修复中展现出了良好的应用前景。
3、生物活性因子生物活性因子能够调节细胞的行为和功能,促进组织的修复和再生。
在软组织修复中,常用的生物活性因子包括生长因子(如表皮生长因子、成纤维细胞生长因子、血管内皮生长因子等)、细胞因子(如白细胞介素、肿瘤坏死因子等)和激素(如胰岛素、甲状腺素等)。
组织工程学的研究现状及进展
组织工程学是一门研究如何利用细胞、材料和生物技术等技术手段来构建和修复人体组织的学科。
它的发展始于20世纪80年代,经过几十年的研究和发展,已经取得了一些重要的进展和成果。
目前,组织工程学的研究现状主要包括以下几个方面:
1. 细胞种源和生物材料:研究人员正在探索不同种类的细胞种源,如干细胞、成体细胞和外源细胞等,并寻找合适的生物材料作为支架来支持和引导细胞生长和分化。
2. 细胞培养和生长条件:研究人员致力于优化细胞的培养和生长条件,包括培养基组分、生长因子的添加和物理条件的调控,以促进细胞的增殖和定向分化。
3. 组织结构的构建:研究人员通过三维打印、微织造和自组装等技术手段,构建具有特定结构和功能的人工组织。
近年来,通过纳米技术和生物打印等新技术的应用,已经能够构建出更加复杂和精确的组织结构。
4. 血管化和神经化:研究人员正在探索如何在构建的组织中实现血管化和神经化,以提供养分和氧气的供应以及神经信号的传导。
5. 生物材料的改良和仿生模拟:研究人员致力于改良和设计新型生物材料,在物理和化学性质上更接近人体组织,并通过仿生模拟的方法来研究组织和器官的功能和行为。
除了上述的研究方向之外,组织工程学还在伦理和法规、移植和临床应用等方面面临一些挑战和问题,需要继续深入研究和解决。
总的来说,组织工程学在人体组织修复和再生领域具有广阔的应用前景,但仍需要进一步的研究和发展来实现其在临床上的应用。
浅谈组织工程神经血管化研究进展临床上,由于创伤、肿瘤等原因造成的周围神经缺损非常多见,周围神经损伤已成为全球所面临的健康问题之一[1]。
目前,临床修复周围神经缺损的主要方法是自体神经移植,但存在自体神经来源有限、供区神经功能丧失及神经直径难以匹配等问题。
同种异体神经或异种神经是理想的神经来源,但因存在严重免疫排斥反应常导致治疗失败[2]。
因此需要进一步研究理想的永久性修复材料。
近年来,随着材料科学、细胞生物学的进步,采用组织工程技术构建组织工程周围神经,为神经损伤的修复带来了新希望。
但构建的组织工程周围神经修复大段周围神经缺损还存在诸多问题,尤其是组织工程周围神经的血管化问题成为限制其发挥生物学效能的一个“瓶颈”[3-4]。
组织工程周围神经早期血管化问题日益受到学者们的关注。
组织工程周围神经血管化的研究主要包括以下5个方面:周围神经再生局部微环境及血供特点、支架材料修饰、种子细胞、自体血管束的植入、促血管因子。
本文将围绕上述5个方面进行文献回顾及总结。
1周围神经再生局部微环境及血供特点
众所周知,周围神经主干结构是由神经纤维束及其周围包括血管在内的结缔组织构成[5]。
神经移植后,移植段神经血管再形成大致有两种形式:①神经内形式,即内部丛状血管,可持续24周;②神经外形式,即外部纵行血管,出现在移植后3~6周内。
有研究表明[6],不带血管的神经移植后3d内为缺血状态,1周左右开始出现血流急剧增加;而带血管的神经移植后早期虽有血流增加,但基本处于
平稳状态,这对于维持周围神经微环境的稳定具有一定意义。
局部微环境及神经再生所需要的各种营养物质对周围神经的修复再生非常重要,而这些都与局部血供有重要关系[7]。
神经移植物早期血管化,可以为移植的各种细胞提供足够营养,进而促进轴突生长、神经再生;另一方面,可以减少体内胶原纤维形成,便于新生轴突通过。
另外,神经移植物早期的血管化还可以聚集来源于血液中的巨噬细胞[8],以利于快速清除周围神经损伤后轴突、髓鞘的各种溃变产物,从而为新生轴突向远端生长提供良好的通道[9]。
近年来,随着组织工程学迅速发展,应用组织工程周围神经修复神经缺损已成为研究趋势[10]。
对于大段神经缺损,血管化不足是制约其修复成功的关键因素。
组织工程周围神经不能早期血管化,不能早期在体内建立血液循环,制约了其进一步向临床应用[11]。
有研究表明,细胞在血管周围150~20XX 年,最初研究者们试图通过离子交互作用将肝素锚定在生物材料表面,减轻材料致凝性并获得成功[20]。
随着对生物材料研究的深入,为了增加材料的生物相容性以及对细胞的黏附性等生物特性,药物缓释系统成为研究热点,而肝素具备与多种蛋白结合的能力,基于肝素的药物缓释系统被证明可以装载各种生物效应迥异的生长因子[21]。
本课题组利用肝素作为缓释载体,制备了能够缓释VEGF的组织工程周围神经,促进了组织工程周围神经形成血管的能力,实现了组织工程周围神经的血管化[22]。
3种子细胞
ECs是血管形成、再生中的主要细胞[23]。
刘春晓等[24]在体外成
功建立了人脐静脉内皮细胞与BMSCs共培养体系。
高宏阳等[9]将胎兔ECs与雪旺细胞共培养后,植入脱细胞神经支架中修复兔坐骨神经缺损,结果优于单纯植入雪旺细胞的脱细胞神经支架。
但ECs为终末细胞,增殖速度缓慢[25],短时间内促进血管新生的能力较弱,故应用ECs来促进周围神经修复过程中血供的重建及血管的再生较难实现。
而血管内皮祖细胞(endothelialprogenitorcells,EPCs)作为ECs的前体细胞,是出生后机体血管形成最主要的干/祖细胞类型[26]。
EPCs 不仅参与了胚胎发育过程中的血管形成,也参与了出生后的血管形成[27]。
EPCs可有效地促进周围神经缺损区域的血管再生,并能明显增强周围神经修复和再生能力[28]。
在很多种缺血性疾病动物实验中,外源性注入EPCs能明显改善损伤组织局部血流供应,增强缺血组织局部的新生血管生成,进而促进组织修复[29]。
当机体发生创伤、缺血等病理变化时,存在于循环血液中的EPCs能够迁移并定植在损伤缺血部位,分泌促血管生成因子,促进侧支血管生长至缺血组织,参与组织血管新生,促进组织修复[30]。
EPCs能够促进骨修复过程中的血管形成,将MSCs与EPCs共同作为种子细胞,能够加快骨缺损的修复[31]。
Zigdon-Giladi等[32]采用人外周血来源内皮祖细胞修复鼠颅骨缺损,促进血管形成及骨形成。
对于周围神经而言,伤后1周左右是周围神经缺损修复重建过程中血管生成的关键时期,如果错过了这个时期,新生血管的生成效率和速度会明显降低,进而影响神经修复重建的速度。
所以对于组织工程周围神经而言,早期血管化至关重要。
因此,本课题组认为将具有血管形成能力的内皮祖细胞与神经细胞或
干细胞联合应用,是血管化组织工程周围神经最有前景的方法之一。
4自体血管束的植入
临床上,随着显微外科技术的发展,有学者采用带血管的神经移植物修复大段神经缺损,取得了较好临床效果。
早在1976年,Taylor 等[33]为了改善神经移植物的血供,提出吻合血管的神经移植,采用携带桡动脉及桡静脉的桡神经浅支成功修复了正中神经缺损。
受其启发,在进行组织工程神经移植的同时,可以寻找1根血管固定于组织工程神经周围,形成带血管蒂的组织工程周围神经,这样可以维持移植物稳定,并且有持续的血液供应,实现组织工程周围神经早期血管化,最终达到促进周围神经再生及轴突生长的目的。
正常情况下,周围神经与血管存在伴行且距离较近的关系,将血管束植入移植神经符合上述供血关系。
19XX年,Cavadas等[34]进行了植入血管束预制血管化周围神经的研究。
此外,有研究表明,大网膜脂肪细胞能够合成VEGF,大网膜微血管内皮细胞能够合成bFGF[35],VEGF及bFGF具有促血管生成的作用。
有学者将带蒂的大网膜移位包裹人工神经移植物修复周围神经缺损,术后3d即出现了血管化,修复效果明显好于单纯人工神经移植[36]。
以上方法通过增加移植神经血供,达到了促进人工神经移植物血管化的目的,取得了较好疗效。
但上述方法存在一个共同问题,即在损伤神经周围不一定存在适合吻合、转移且稳定的血管,并且对显微外科技术要求较高,限制了临床应用。
5促血管因子
多种细胞因子及生长因子能够促进EPCs或ECs增殖,促进新生
血管生成,进而促进组织血管化。
VEGF、bFGF、PDGF等均具有间接或直接促血管生成的作用,其中以VEGF应用最为广泛。
VEGF是目前已知最强的血管生成诱导剂,它可以特异性地作用于内皮细胞,促进内皮细胞增殖和血管形成,促进内皮祖细胞分化为ECs。
有学者将VEGF用于神经组织工程研究中,将携带VEGF165基因的质粒或病DU 载体植入组织内,但该方法不能在局部缓释而起到有效的诱导血管生成作用[37]。
VEGF的使用可促进血管生成,但因半衰期短,局部直接应用效果欠佳。
采用合适的基因转染技术将VEGF基因转染到细胞中,使细胞持续表达具有生物活性的生长因子[38],可以促进新生血管形成,加速神经修复与重建。
6展望
目前,组织工程周围神经血管化方面的研究,主要集中于利用各种生长因子、成血管细胞、支架材料表面修饰、基因转染生长因子技术、血管植入等技术来促进神经移植物血管形成。
但每种方法均有一定局限性,都不能完美解决组织工程周围神经血管化的问题。
VEGF165基因与EPCs联合应用能够达到事半功倍的效果。
因此,我们认为,采用转染技术将VEGF165基因转染EPCs,并与ADSCs诱导后的类雪旺细胞共同作为神经组织工程种子细胞,能够促进组织工程周围神经早期血管化,进而提高动物体内神经移植修复效果。