(医学课件)莱卡显微镜的使用说明
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Leica徕卡产品,由Christophe Apothéloz设计徕卡与众不同明快、清晰!Leica APO OptiChrome TM M820光学系统呈现的高分辨率图像是您观察解剖细节最佳的解决方案。
患者安全,医生轻松!Leica独到的直接照明系统,在低照度安全照明下保证最佳的清晰度、对比度和色彩还原度。
双光束立体照明系统!独特的8-系列双光束照明系统保证医生获得稳定的红光反射和三维图像。
OttoFlex II OttoFlex II任何情况下都能实现完美的人机工效性 徕卡显微系统的全球运作分为四个部门,已进入各地市场领导者行列:• Life Science Division徕卡公司生命科学部门为科研用户提供最先进的显微成像技术,实现显微结构的观察、测量和分析。
理解并满足用户的科研应用是我们在市场中领先的关键。
• Industry Division徕卡公司工业部门的工作核心工作是支持客户寻求高质量的最终结果。
徕卡公司提供了最好、最新颖的成像系统,满足他们在日常工作以及在工业研究应用中的观察、测量和分析微观结构的需要,满足材料科学和质量控制、法医学科学调查和教育应用的需要。
• Biosystems Division徕卡公司病理系统部门为组织病理学实验室和研究人员带来了最全面的高质量病理产品系列。
从病人到病理学家,该范围包括每个组织学步骤所需要的理想的产品,还包括整个实验室所需要的高效工作流程解决方案。
借助以自动化革新和 Novocastra™ 试剂为特色的全套组织学系统,徕卡公司通过迅速、准确的诊断和密切的客户协作,更好地关心病人。
• Surgical Division徕卡公司手术显微镜部门的工作重点是与手术外科合作,以无论是现在还是将来都是最优秀、最新颖的手术显微技术为他们提供支持,照顾他们的病人。
“与用户合作,使用户受益”徕卡显微系统Ernst Leitz 于 1907 年发表了“与用户合作,使用户受益”的声明,描述了徕卡显微系统与最终用户的通力协作以及不断创新的驱动力。
Leica M220 F12
手术xx简要操作与维护指南
一、调整显微镜头部的灯源亮度旋钮到最小亮度;
二、打开位于主摇臂上的电源开关,电源开关的指示灯点亮成绿色;
三、按下XY装置复位指示灯,使XY复位至中央;
四、检查调焦装置是否位于Reset位置,若不在,通过脚踏上的调焦开关调整至Reset位置;
五、拉动显微镜头部两侧的手柄,调整显微镜到合适的位置,通过目镜大致看清手术部位;
六、调整显微镜头部灯源亮度旋钮到合适亮度,以便看清手术部位;
七、调整脚踏开关上的XY控制杆,使手术不部位位于视野中央;
八、通过脚踏上的调焦开关,调整焦距到可以最清晰观察手术部位;
九、手术过程中,变倍后,通过调焦开关细微调整焦距获得最清晰效果;通过调整XY控制杆,使手术部位始终位于视野中央;
十、手术结束,调整焦距至Reset位置,按下XY复位按钮使其复位;
十一、调整显微镜头部的灯源亮度旋钮到最小亮度;
十二、关闭电源开关,旋转摇臂收好显微镜,罩上徕卡专用防尘罩;显微镜光学部分的清洁:
清洁液:
丙酮、乙醚或无水乙醇;
清洁方法:
先用吹气球用力吹待清洁光学部位,再用长绒脱脂棉蘸少许上述清洁
液,对光学镜片由中央向外围轻轻擦拭,待干后,用吹气球轻吹几次即可。
擦拭目镜的时候,注意不要让清洁液碰到塑胶的接目罩,以免减少其使用寿命;
如有问题或者故障请拨打徕卡中国客服中心免费电话:
固定电话请拨打:
32、32
手机请拨打:32
或发邮件给徕xxxx服务中心:
徕卡显微系统(xx)贸易有限公司。
Leica 荧光显微镜操作指南荧光显微镜型号:Leica DMR生产商:德国Leica公司Leica 荧光显微镜操作指南有关显微镜的的结构:荧光显微镜荧光汞灯:荧光汞灯价格昂贵,样品应集中观察,荧光光源关闭后距离下次开机时间须在30分钟以上,否则会大大降低你观察的效果及灯泡的寿命。
更换新的灯泡后第一次使用必须持续15,30分钟后方可关闭荧光电源。
光圈:孔径光阑挡板,荧光转换光路倾斜器:照明视场光阑:一般调至最大不动变倍器:1.0× ,Bose 一般不用只有在相差时选用。
照相机拍照转换档:不拉出为不能拍照只能观察,拉出一半即能观察又可拍照,全部拉出只能拍照目镜观察不到。
筒: 双目镜HC荧光滤光片 1为普通光2为蓝光3为绿光4为紫外光物镜转盘:100倍为油镜,40倍与100倍之间应有空挡便于加油取片。
(注意: 转换镜头时应转动物镜转盘齿轮,不应转动物镜,否则会导致物镜过紧或过松,易使物镜损坏。
)载物台:上有压片夹(注意:放取样本时应扳动压片夹小夹不应直接扳动压片夹) XY调节机械装置:将样品前后左右移动聚光镜转盘:10倍以上要用聚光镜相差环:H 明场直接观察亮 1、2、3、相差,观察不染色的样品D 暗场主要用于观察金属材料显微镜臂上有焦距调节,粗的调节钮为粗调调节幅度较大,细的调节钮为细调,调节幅度小慢调节。
基座:A孔径光阑高大低小,相差时最大视场光阑一般最大Gray on 光强减少,off 光强增大DLF( Day Light Filter )一般白光滤片N4灰度滤片减少1/4Green:绿色滤片B 调中操作指南:1(使用显微镜前,请打开空调除湿一小时。
若不除湿观察样品所拍的照片中会留下水渍状斑。
2. 打开总电源,打开电脑,打开电脑桌面上的的Adobe Photoshop软件的下拉菜单Import Leica.3 打开显微镜上的电源。
注意只有进行荧光观察时才能打开荧光电源,否则不要打开,以免影响高压汞灯的寿命。
Leica共聚焦显微镜使用说明Step 1: 打开PC电源——“1”Step 2: 打开汞灯控制开关——“2”Step 3: 打开中控盒——“3”Step 4: 打开计算机主机——“4”,启动计算机。
注:计算机操作系统启动后方可继续开机!!Step 5: 顺序打开激光器电源Scanner—“5”,激光冷却系统LASER Ar/ArKr—“6”★注:须确认冷风开启后方可打开激光电源!!!!!Step 6: 将上图虚线框中激光功率控制旋钮——“6.5”顺时针旋转60°左右。
Step 7: 将上图所示488 nm激光管开关——“7”钥匙沿顺时针旋转约120°至显示灯亮,再将钥匙旋回竖直位置Step 8: 依次将上图所示543/594 nm激光管开关——“8”和633 nm 激光管开关——“9”钥匙沿顺时针旋转约90°至显示灯亮。
Step 9:依次打开半导体激光器电源——“10”和405 nm激光管开关——“11”,(“11”的开启方式同“8”、“9”。
)Leica共聚焦显微镜关机顺序及注意事项Step 1: 关闭软件→拷贝Data→关闭计算机Step 2: 依照开机顺序倒序关闭各个开关,由”11”→”7”, ”5”→”1”。
★注:(1)冷风——”6”不能立即关闭!!须在关闭所有硬件设备30min 后方可关闭,以使激光管完全冷却,延长使用寿命。
(2)PC电源——“1”须在电脑确定关闭后方可关闭!!数据采集Step 1: 实验前扫描样本片观察激光通路是否正常工作。
Step 2: 上样,须轻起轻落科勒照明系统,选择合适倍数物镜,通过FLUO键选择相应荧光通道,调节载物台和焦距,找到合适视野。
Step 3: 点击由Visual→Scan,点击选择扫描模式,如xy, xyz, xyt, xyzt, xyλ etc..点击选择扫描格式(一般为默认值512*512)。
Step 4: 点击打开Beam path setting窗口,对光路和检测器进行设置。
徕卡显微系统(上海)贸易有限公司Leica Microsystems Trading Limited Shanghai 上海市淮海中路398号世纪Unit C, 18/F, Century Ba-Shi Building, 巴士大厦18层C 座398#, Huaihai Rd(M), Shanghai, PRC 200020 Tel: +86-21-6387-6606 Fax: +86-21-6387-6698 Leica M220 F12手术显微镜简要操作与维护指南一、 调整显微镜头部的灯源亮度旋钮到最小亮度;二、 打开位于主摇臂上的电源开关,电源开关的指示灯点亮成绿色;三、 按下XY 装置复位指示灯,使XY 复位至中央;四、 检查调焦装置是否位于Reset 位置,若不在,通过脚踏上的调焦开关调整至Reset 位置;五、 拉动显微镜头部两侧的手柄,调整显微镜到合适的位置,通过目镜大致看清手术部位;六、 调整显微镜头部灯源亮度旋钮到合适亮度,以便看清手术部位;七、 调整脚踏开关上的XY 控制杆,使手术不部位位于视野中央;八、 通过脚踏上的调焦开关,调整焦距到可以最清晰观察手术部位;九、 手术过程中,变倍后,通过调焦开关细微调整焦距获得最清晰效果;通过调整XY 控制杆,使手术部位始终位于视野中央;十、 手术结束,调整焦距至Reset 位置,按下XY 复位按钮使其复位; 十一、 调整显微镜头部的灯源亮度旋钮到最小亮度;十二、 关闭电源开关,旋转摇臂收好显微镜,罩上徕卡专用防尘罩;显微镜光学部分的清洁:清 洁 液:丙酮、乙醚或无水乙醇;清洁方法:先用吹气球用力吹待清洁光学部位,再用长绒脱脂棉蘸少许上述清洁液,对光学镜片由中央向外围轻轻擦拭,待干后,用吹气球轻吹几次即可。
擦拭目镜的时候,注意不要让清洁液碰到塑胶的接目罩,以免减少其使用寿命;如有问题或者故障请拨打徕卡中国客服中心免费电话:固定电话请拨打:8008208932、4008208932手机请拨打:4008208932或发邮件给徕卡中国服务中心: china.servicehotline@徕卡显微系统(上海)贸易有限公司。
Leica DM4B荧光显微镜操作规程一.操作步骤1.打开电源,连接电脑(DM4B确认USB白色数据线连接好电脑背后口)2.放好样本,找到合适视野,从低倍到高倍观察(物镜转盘),调好焦距。
3.液晶屏说明-每次机器启动都会保留最上次操作设置4.STATUS为目前机器状态--TL表示目前是透射光状态5.AP-孔径光栏,视场光栏,光强显示在状态中,通过机身左侧键盘控制6.BF-明场,正常染色的样品,用的比较多7.PH-相差观察方法-适应于透明非染色薄样品,有些样慢反射会反射亮光8.FL-荧光-呈现荧光的效果,适用细胞特异性染色效果/机身左侧下部TL/IL点击切换明场和荧光切换,或直接点击软件切换二.拍照摄取步骤1.确认数码CCD和电脑连接线是否连接;(注意显微镜镜先开机再开软件)2.明场状态下观察样品请调节合适的照明【充足的合理曝光可以调节显微镜照明或曝光时间。
可用目镜盖盖住目镜以避免日光灯影响-有一横线】3.把三目镜筒如果有拉杆(需要把拉杆拉到拍照位置,一般往外拉)4.确认选择软件中摄取界面的MIC显微镜控制面板部分5.白平衡设置选择自动白平衡;一般自动曝光(如果反应慢是样品照明不足,可增加照明-切换到手动,超过0.5秒是相机需时间照明)6.饱和度一般150,伽马值一般玻片0.6(明场状态),荧光或其他状态可以适当拉高去除背景噪音(每次使用完需要回复正常值,避免其它人留意)7.调整完毕,选择采集图像三.图像处理步骤可以后期进行图像各种处理,如曝光,剪切,注释等等四.图像分析步骤图像分析,添加标尺(图像浏览边上第1个图标点开),注意要合并原图添加注释等等保养与维护:D需要经常通电使用,注意湿度,否则需放到干燥器里封闭保存2.除湿机如有条件尽量长期开放,每天清空水箱3.防尘,每段工作期之后,应用软质防尘罩罩住,以避免显微镜和附属设备染灰尘。
灰尘和松放的污粒,可用软毛刷或不掉毛心棉布除掉。
顽固性的污物可用一块于净的棉布上普通水溶液、汽油或酒精擦掉。
徕卡显微镜的使用流程1. 准备工作在使用徕卡显微镜之前,需要进行一些准备工作。
以下是准备工作的流程:•确保显微镜的放置位置稳定,避免晃动。
•清理工作台,确保工作区域干净整洁。
•检查显微镜是否正常工作,包括调节机械部件和检查光源是否正常。
2. 调节显微镜在使用徕卡显微镜之前,需要进行显微镜的调节。
以下是调节显微镜的流程:•使用目镜调节放大倍数,通常徕卡显微镜的放大倍数可以通过旋转目镜上的调节环进行调节。
•调节照明系统,确保样品能够被照亮,并且光源均匀分布在整个视野中。
•使用聚焦调节旋钮,将样品调整到最清晰的位置。
3. 准备样品在开始观察样品之前,需要准备好样品。
以下是准备样品的流程:•将待观察的样品放置在显微镜的样品台上。
•如果样品是生物样品,可以使用带有盖玻片的载玻片将样品封装起来,以避免样品的干燥和污染。
•确保样品平整,避免产生旋转和晃动现象。
4. 观察样品在准备好样品之后,可以开始观察样品。
以下是观察样品的流程:•通过目镜观察样品的大致结构和形状。
•使用目标镜头进行更详细的观察,调整放大倍数以获得所需的细节。
•如果需要,可以调整显微镜的对比度和亮度,以获得更清晰的图像。
•在观察过程中,可以使用显微镜上的移动平台来调整样品的位置,以便获得更全面的视野。
5. 记录和保存观察结果在观察样品之后,可以记录和保存观察结果,以便后续的分析和研究。
以下是记录和保存观察结果的流程:•使用相机或手机等设备拍摄样品的照片,确保照片清晰可见。
•将观察结果记录在笔记本或电脑中,包括样品的名称、观察日期等相关信息。
•可以将观察结果保存为电子文件,或者打印出来进行存档。
6. 清理和维护显微镜在使用完显微镜之后,需要进行清理和维护工作,以保证显微镜的正常使用和延长寿命。
以下是清理和维护显微镜的流程:•使用干净的软布或棉签清洁显微镜的外表面。
•使用适当的清洁剂清洁目镜和物镜,避免使用有机溶剂和腐蚀性物质。
•定期检查显微镜的各个部件是否正常工作,如调节旋钮、光源等。
一、运行程序:打开显微镜电源后,双击打开软件二、设定菜单栏禁止设置(非专业人员勿动)三、采集图片:(一)采集基本设置下有有三个设置参数:(Mic即microscope) 一)设定:可进行物镜倍数切换,建议重低倍镜到高倍镜进行观察BF:明场,PH:相差,DIC:,POL:,FLUO:荧光Ap:孔径光阑Int.Fine:光强荧光激发光选择:I3(GFP)设置目镜与摄像头分光情况可存储上面拍摄的参数,建议连续拍摄多个样品使用(如芯片)二):选择调焦(F精细,C粗调)后,把鼠标放在右侧,用鼠标滚动轮进行调焦(先粗调,后精细)载物台移动调节快速/精确图中+为现在拍摄位置,任意点击框中地方,进行快速切换拍摄位置片子任意位置切换对比:在预设位置上,下拉窗口中选择位置1,点击保存更换位置后,下拉窗口中选择位置2,点击保存下拉窗口中选择位置1,点击,即可快速切换到位置1(如此类推)三)以下不建议使用:点击后→自动曝光→(不能调节增益)建议:不要使用自动曝光。
曝光时间是指从快门打开到关闭的时间间隔,在这一段时间内,物体可以在底片上留下影像,曝光时间是看需要而定的,没有长短好坏的说法只有需要的讲法。
曝光时间越大,摄像头反应就越长。
对于很弱的信号,曝光也不能无限增加,因为随着曝光时间增加,噪音也会积累。
增益:拍摄图片时,增益不能调,需要放到最小。
增益稍大一些,图像的噪声就出来了。
画质反而不好。
增益越大噪音越大,同等质量下的图片信噪比越低,图像质量越差。
在不过曝的前提下,增加曝光时间可以增加信噪比,使图像清晰。
(拍摄荧光时,用到该原理)饱和度是指的色彩饱合度。
适可而止。
调小了没色,调大了也会有噪声。
建议参数1.5伽玛值的意义是增强亮部反差(伽玛值小于1)或者增强暗部反差(伽玛值大于1)。
是一种非线性的亮度调整。
即伽马调整是部分增强图片暗的部分和亮的部分的对比所以拍摄荧光照片时,将伽玛值调大会感觉能增加暗荧光的亮度。
建议参数0.6/1免疫组化拍摄方法:1.选择BF,5X倍镜下观察,调焦2.调节曝光时间,至适中(通过观察柱状图,为正态分布)。