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比较ELISA和TRUST梅毒检测方法的敏感性和特异性-性医学论文-临床医学论文-医学论文——文章均为WORD文档，下载后可直接编辑使用亦可打印——梅毒(syphilis) 是由苍白螺旋体(Treponemapallidum,TP)(又称梅毒螺旋体)引起的一种性传播疾病,可侵犯皮肤黏膜及神经、心血管、骨骼等组织器官,引起慢性病变.近年来,我国梅毒的患病率呈逐渐上升趋势,筛选一种高敏感性和特异性的血清学检测方法,对于梅毒的诊断和治疗具有重要的现实意义.同时,区县疾控中心每年开展哨点监测工作,包括艾滋病、梅毒以及丙型肝炎检测,从而监测本区县性病门诊、吸毒人群等特定人群的梅毒流行状况,哨点监测的梅毒检测通常采用酶联免疫试验(ELISA) 和梅毒甲苯胺红不加热血清试验(TRUST) 的试剂组合来筛查梅毒.本文通过对2013 年801 份哨点监测梅毒检测数据的回顾性分析,来比较ELISA和TRUST 这两种检测方法的敏感性和特异性.1 材料和方法1.1 研究对象2012 年闸北区哨点监测样本801 份.用枸橼酸钠抗凝管采集性病门诊、吸毒人群全血2mL~3mL,采血后立即颠倒混匀8 次,离心后取血浆1.2ml留存待检测.1.2 试剂与仪器TRUST 试剂盒由金豪制药股份有限公司提供,Anti-TP(ELISA) 试剂盒由珠海丽珠试剂股份有限公司提供,梅毒螺旋体明胶凝集实验(TPPA)试剂盒由日本富士瑞必欧株式会社提供.酶标仪用Anthos 2010 酶标仪,全自动洗板机用宝特ELX-50,梅毒振荡仪用TY2D-Ⅲ.1.3 方法所有标本均采用TPPA、Anti-TP (ELISA)、TRUST 法进行梅毒螺旋体抗体检测.具体操作方法严格按照试剂盒说明书进行操作,并在有效期内使用,结果判定依据试剂盒规定标准.1.4 统计学处理应用SPSS10.0 统计软件处理实验结果.2 结果2.1 两种方法检出情况在801 份标本中,经TPPA 确认后检测出92份阳性标本,阳性率11.49%;Anti-TP (ELISA) 检出90 例阳性,阳性率为11.24%;TRUST 检出53例阳性,阳性率为 6.62%.两种检测方法比较,Anti-TP (ELISA) 的阳性率高于TRUST,与TPPA接近.Anti-TP (ELISA) 的假阳性率为0.12%,TRUST 的假阳性率为0.25%.Anti-TP (ELISA) 检测假阳性率低于TRUST 法.见表1.2.2 两种检测方法比较的评价TRUST 检测特异度较高,为96.36%,灵敏度较差为57.61%,Youden 指数为0.54;Anti-TP(ELISA) 检测法的特异度更高,为98.90%,灵敏度较高为97.83%,Youden 指数为0.97.综合来看,Anti-TP (ELISA) 法的灵敏度和特异性均高于TRUST 法,与TPPA 结果接近.见表2.3 讨论梅毒是由梅毒螺旋体引起的慢性传染病,几乎可侵犯全身各器官,早期传染性强,主要侵犯皮肤粘膜,常表现为生殖器溃疡、淋巴结肿大及全身皮疹.晚期破坏性大,常引起心血管系统及神经系统损害.该病主要通过性接触传染,少数通过输血、污染的生活用具传染;患梅毒的孕妇还可传染胎儿,引起流产、早产、死产及娩出先天梅毒儿.目前,区县疾控中心每年开展哨点监测工作,包括对梅毒的检测.该项目主要监测区县性病门诊、吸毒人群以及孕产妇等特定人群的梅毒流行状况.哨点监测中的梅毒检测通常采用ELISA 和TRUST 的试剂组合来筛查梅毒.因此,做好这两种梅毒检测方法在哨点检测中的运用效果分析,对于防控和治疗梅毒具有重要的意义.梅毒螺旋体感染后机体可产生特异性的梅毒螺旋体抗体,TPPA可检测血清中梅毒特异性抗体,灵敏度高特异性好.同时,梅毒螺旋体感染后,此抗体可在体内持续存在,检测结果不随病情发展和治疗而变化[1],故TPPA作为梅毒的检测方法对各期梅毒的检测结果都有较好的稳定性,不易出现假阳性反应.因此,本次研究使用TPPA作为金标准来评价Anti-TP(ELISA) 和TRUST 的检测结果.TRUST 采用(VDRL) 纯化的心磷脂、卵磷脂,胆固醇配制的VDRL 抗原重悬于含甲苯胺红的特制溶液中制成,梅毒患者血清中存在能与VDRL抗原发生凝集反应的反应素,当待测样本中存在反应素时,即与其发生凝集反应,出现肉眼可见的粉红色凝块,反之则无凝块出现[2].TRUST 试验检查的是人体内的反应素,是一种非特异性类脂质抗体.人体在某些生理状态,如怀孕时,TRUST 可以出现假阳性;患有隐性传染病,如风疹、水痘、病毒性肝炎、上呼吸道感染、肺结核、肺炎、亚急性细菌性心内膜炎等疾病时,TRUST 也可以呈假阳性;许多慢性病,如类风湿性关节炎、SLE、风湿性心脏病、肝硬化、干燥综合征、慢性胃炎和海洛因成瘾等,TRUST 同样可以呈假阳性.该方法操作简便,试剂价格便宜,反应快,不需要特殊仪器设备,方便测定梅毒抗体滴度,其滴度变化与梅毒治疗情况呈正相关,该法最适用于临床医生对梅毒性疾病的疗效观察和随防[3].Anti-TP (ELISA) 用纯化的基因重组梅毒螺旋体抗原包被的微孔板和酶标记抗原及其他试剂组成,应用双抗原夹心法原理检测人血清或血浆中的梅毒螺旋体抗体.文献[4]报道:双抗原夹心法ELISA 检测梅毒螺旋体敏感性高,结果可与TPPA试验媲美,且假阳性和假阴性不易出现,故特异性也较好.而且由于机体不会产生太多的抗体,所以不会有钩状效应的出现,也不会因此而产生假阴性.此方法操作简便,一次可完成多份标本的检测,其试验结果由仪器分析,客观而准确,易于读取和保存.可以自动化、标准化、大批量同时检测,工作中对ELISA 的室内质量控制也有更多的经验.因此,Anti-TP(ELISA) 法是目前梅毒筛选、早期诊断和确认的方法之一.但Anti-TP(ELISA)法主要缺点为该法检测的是梅毒IgM 和IgG 的混合抗体,梅毒IgG 抗体治愈后相当长时间内仍然存在较高的阳性率,甚至终身.因此,Anti-TP(ELISA)单独阳性只能说明正在感染或曾经感染过,不能判断梅毒疾病活动与否,或处于恢复期,因此不能作为疗效监测手段.目前哨点监测检测梅毒采用Anti-TP(ELISA)和TRUST 的组合检测.其中,Anti-TP(ELISA) 具备良好的检测灵敏度和特异性,能够很好地了解性病门诊以及吸毒人群梅毒的感染现状,TRUST 又能了解筛查阳性的检测者是否是现症患者.同时Anti-TP (ELISA) 试剂盒单价只有同样人份的TPPA试剂盒价格的一半,效果和TPPA相近.因此,采用Anti-TP (ELISA) 和TRUST 的组合常用的TPPA 和TRUST 的组合来进行梅毒哨点监测是一套既有良好的检测效果,又有一定经济效率的检测试剂组合.参考文献[1] 程艳杰, 王广杰, 王旭梅, 等. 梅毒螺旋体血清学检测方法的实验室评价[J]. 中国皮肤性病学杂志, 2005,19(8):503-504.[2] Wang F, Cheng H. The detection technique to treponemapallidum in the laboratory[J]. The Chinese Journal ofDermatovenereology, 2003, 17(2):135.[3] 潘兰. 四种梅毒血清检测方法比较分析[J]. 当代医学杂志, 2011, 17(28):8-10.[4] 叶应抚, 王毓三, 申子喻. 全国临床检验操作规程[M].3版. 南京: 东南大学出版社, 2006: 9-650.。
梅毒螺旋体三种血清学实验方法的比较摘要】目的：比较三种血清梅毒抗体检测方法的性能及检测价值。
因明胶颗粒凝集试验（TPPA）是公认的最佳梅毒确认方法，所以我们以TPPA方法作为参照，进行比较。
方法：采用酶联免疫吸附试验（ELISA）和甲苯胺红不加热血清试验（TRUST）作同步检测，用明胶颗粒凝集试验（TPPA）作参照对比。
结果：160例标本，以TPPA作为参照，ELISA法假阳性仅2例，TRUST法假阳性有7例，另有假阴性9例。
结论：ELISA法检测血清中梅毒抗体灵敏度和特异性均明显高于TRUST，与TPPA法无显著差异，但两种方法各有其优点，在方法学上呈互补性，将两种方法结合更有利于提高检测的敏感性和特异性。
【关键词】梅毒抗体；甲苯胺红不加热血清试验（TRUST）；酶联免疫吸附试验（ELISA）；明胶颗粒凝集试验（TPPA）【中图分类号】R965.3 【文献标识码】B 【文章编号】2096-0867（2016）-08-284-011.材料和方法：1.1标本来源：我院2015—2016年门诊疑为梅毒的患者标本和母婴阻断及输血手术前的梅毒，160例，其中女性62例，男性98例。
1.2 试剂：TRUST试剂盒由上海荣盛生物技术有限公司提供；ELISA试剂盒为北京万泰生物药业股份有限公司产品；TPPA试剂盒为日本富士株式会社产品。
1.3 实验方法：采用甲苯胺红不加热血清试验（TRUST）和酶联免疫吸附试验（ELISA）同步进行检测，以明胶颗粒凝集试验（TPPA）作参照。
甲苯胺红不加热血清试验（TRUST）是由心磷脂+胆固醇+卵磷脂组成的复合抗原，吸附于甲苯胺红上，检测血清中非特异性抗体。
使用试剂，用旋转仪振摇，室温保持20—24，每分钟转摇100次，8分钟观察结果。
TRUST试验是一种非特异性血清试验。
酶联免疫吸附试验（ELISA）为双抗原夹心法，使用试剂，比色用全自动酶标仪比色。
ELISA法检测梅毒螺旋体是将基因重组表达的梅毒膜特异性抗原包被在微孔板上，用双抗原夹心法测定梅毒特异性抗体，主要检测梅毒螺旋体IgG和IgM抗体。
化学发光免疫法与胶体金法检测梅毒抗体的比较摘要目的:通过比较这两种梅毒血清学检测方法的敏感性和特异性,选择敏感性高和特异性强的检测方法。
提高对梅毒的早期诊治,控制梅毒传播。
方法:采用化学发光免疫法和梅毒螺旋体抗体诊断试剂盒(胶体金)检测190例已确诊为梅毒患者的血清标本。
结果:化学发光免疫法与胶体金法对190例确诊梅毒患者的血清标本的敏感性分别为97.9%、88.4%,特异性分别为98.4%、96.7%。
化学发光免疫法的敏感性高于胶体金法,差异有统计学意义(P<0.05);化学发光免疫法的特异性高于胶体金法,差异有统计学意义(P<0.05)。
结论:胶体金法简便快速,适用于临床急诊标本检测。
化学发光免疫法特异性强、敏感性高适合于大批量的梅毒抗体筛查,提高了梅毒检测的阳性率对有效控制妊娠期梅毒和胎传梅毒的发生及梅毒传播都要重要的临床意义[1]。
关键词梅毒;化学发光法;胶体金梅毒(Syphilis)是由梅毒螺旋抗体(又称苍白螺旋体)引起的常见性传播疾病之一。
其临床病程漫长,临床表现极为复杂,几乎可侵犯皮肤粘膜,晚期侵犯内脏器官。
实验室可以通过检测血液中的非特异性抗体和特异性抗体[2],判断是否感染梅毒螺旋体。
现采用化学发光免疫法和胶体金法检测190例梅毒患者的血清标本,结果报告入下。
1 材料和方法1.1 标本来源经病史、临床症状及血清学实验确诊的梅毒患者的血清标本190例。
1.2 试剂科美CHEMCLIN600全自动化学发光免疫分析仪,试剂是由北京科美东雅生物技术有限公司提供的配套试剂盒,(胶体金法)梅毒螺旋体抗体诊断试剂盒是由广州万孚生物技术有限公司生产。
1.3 方法采用化学发光免疫法和胶体金法严格按照说明书对190例确诊标本进行检测。
1.4 结果判定化学发光免疫法的结果判定:临界值=2.1×N(N为阴性对照RLU的平均值),待测样品RLU值≥临界值,判定为阳性,待测样品RLU值<临界值,判定为阴性。
第31卷第3期长治医学院学报Vol.31 No.32017 年 6 月JOURNAL OF CHANGZH1 MEDICAL COLLEGE Jun. 2017 223不同检验方法对梅毒的敏感度及特异度对比分析沈丽丽摘要目的：探讨不同检验方法对梅毒不同分期的敏感度及特异度。
方法：抽取80例梅毒患者为 研究组，另选取80例同期体检健康者为对照组。
抽取3.0 m L静脉血，离心后采用梅毒螺旋体血球凝集 试验、梅毒螺旋体明胶颗粒凝集试验及酶联免疫吸附试验测定血液标本。
对比分析3种检测方式对各组 研究对象血液样本检测结果及其敏感度、特异度、阳性預测值和阴性预测值。
结果：酶联免疫吸附试验敏 感度（98. 8%)及梅毒螺旋体明肢颗粒凝集试验（96. 3%)高于梅毒螺旋体血球凝集试验（87. 5%)，差异有 统计学意义（P<〇. 05),且酶联免疫吸附试验敏感度高于梅毒螺旋体明股颗粒凝集试验，但差异无统计学 意义（尸>0. 05);酶联免疫吸附试验特异度（100%)、梅毒螺旋体明肢颗粒凝集试验特异度（100%)及梅毒 螺旋体血球凝集试验特异度（100%)对比差异无统计学意义（P>0. 05)。
结论：酶联免疫吸附试验及螺旋 体明胶颗粒凝集试验在不同分期的梅毒患者中均具有较高敏感度和特异度，其中酶联免疫吸附试验具有 操作简单等优点，易于自动化及标准化操作，可应用于批量检测。
关键词梅毒；不同分期；酶联免疫吸附试验；螺旋体明胶颗粒凝集试验；螺旋体血球凝集试验中图分类号則46. 1文献标志码A文献编号1006-(2017)03-223-03梅毒为临床常见慢性传播疾病，同时也是人类 特有的疾病类型1]。
梅毒传播途径较为多样，包括 母婴传播、性交、输血等，也可通过间接接触公共用 品进行传播。
有研究指出，早期诊断梅毒并实施积 极千预治疗可对临床疗效及预后效果产生一定改 善作用，因此，做好梅毒预防及早期诊断成为控制 该病的关键工作2]。
两种梅毒血清学检验方法比较【摘要】目的比较甲苯胺红不加热血清试验(TRUST)、螺旋体明胶颗粒凝集试验(TPPA)两种梅毒血清学试验，研究这两种梅毒检测方法的检测效率。
方法将确诊的129例梅毒患者血清同时用甲苯胺红不加热血清试验（TRUST）、螺旋体明胶颗粒凝集试验TPPA试验检测，比较两种梅毒检测实验方法的灵敏度和特异性。
结果129份血清中，97份血清TRUST阳性，TPPA试验126份血清为阳性,21份经抗梅毒治疗血清TRUST阴性。
结论TRUST试验可作为梅毒的人群筛查、疗效、复发和再感染的检测指标，TPPA试验是检测梅毒螺旋体抗体的特异性方法，主要作为梅毒的确证试验。
【Abstract】Objective To compare two kinds of syphilises examination methods,they are TRUST and TPPA.Evaluate their efficiency.Methods Using TRUST,TPPA to exam 129 patients’sample who have been made definite diagnosis of pare their sensitivity and Specificity.Results In the 129 patients’sample,TRUST positive sample are 97,TPPA positive samples are 126．21 after the anti- syphiliscurative serum TRUST are negative.Conclusion The TRUST may be the target in sifting the crowd,curative effect,recuring and infecting again.TPPA is a Specific examines methods of treponemapallidum antibody and main achievement syphilis proof experiment.【Key words】Syphilis;TRUST;TPPA梅毒螺旋体(treponemapallidum,TP)是引起性传播性疾病梅毒的主要病原体。
TPPA、TP—AbELISA、TRUST三种方法检测血清梅毒结果分析目的分析TPPA、TP-Ab（ELISA）、TRUST三种方法检测血清梅毒的结果。
方法采用梅毒螺旋体明胶凝集试验（TPPA）、酶联免疫吸附试验（TP-Ab）、甲苯胺红不加热血清试验（TRUST）来对比检测150例临床确诊的梅毒阳性血清标本和70例正常血清标本。
结果TP-Ab、TPPA检测方面的灵敏性、特异性显著高于TRUST检测方法，P＜0.05。
结论TPPA具有较高的特异性，可以将其作为梅毒确证实验；TP-Ab（ELISA）法的灵敏度、特异性与TPPA法比较接近，是现阶段对梅毒抗体进行检测的首选方法；TRUST法的特异性较差，可以将其当成TP-Ab（ELISA）法的补充。
标签：TPPA；TP-Ab（ELISA）；TRUST；检测；血清梅毒梅毒作为慢性全身性性传播疾病，主要是因为梅毒螺旋体感染导致的，梅毒的病程较长，临床表现复杂，表现为多样性，会对患者的全身各个器官造成损害；疾病早期主要对黏膜和皮肤造成侵犯，疾病后期则会对中枢神经系统、心血管系统等器官造成侵犯。
现阶段因为人们滥用抗生素药物，导致部分梅毒患者表现为隐性感染，缺乏临床表现，因此在临床诊断中容易出现误诊和漏诊的情况[1]。
世界卫生组织认为，全球输血不安全是导致没有有效筛选传染性因子的主要原因。
所以采用高灵敏度、强特异性的筛选方式，对安全输血非常重要。
本研究主要分析了TPPA、TP-Ab（ELISA）、TRUST三种方法检测血清梅毒的结果，现将情况做如下分析。
1 资料与方法1.1一般资料1.1.1标本选择选择2014年1月～2016年1月经我院临床确诊的梅毒感染输血患者输血前的标本150例，并选择同期非梅毒感染输血患者的血清标本70例，对血清进行分离后再进行检测。
1.1.2试剂和方法TPPA试剂盒选择富士瑞必欧株式会社所提供的；TP-Ab 试剂盒则是由珠海丽珠试剂有限公司提供；TRUST试剂盒则是由上海荣盛生物技术有限公司所提供；选择SUNRISE酶标仪、新康医疗器械有限公司提供的XK-96型梅毒旋转振荡器和HydroFLex洗板机。
比较两种检测方法诊断梅毒的敏感性和准确性摘要：目的：比较两种检测方法诊断梅毒的敏感性和准确性。
方法：对2017年5月~2018年9月来我院进行梅毒诊断的850例受检者的临床资料进行回顾性分析，采集血清标本，分别采用两种检测方法：ELISA和ECILA。
经病理学检查，230例确诊为梅毒，另外620例非梅毒。
比较两种检测方法的诊断结果。
结果：ELISA检测的阳性预测值和特异性略高于ECILA检测，ECILA的准确率、敏感度、阳性预测值略高于ELISA检测，但两者没有统计学差异（P＞0.05）；结论：应用ELISA、ECILA检测梅毒各有优势，临床诊断应充分参考患者的体征、症状，同时联合不同检测方法的诊断结果进行综合考量，提高诊断的准确率。
关键词：ELISA；ECILA；梅毒；敏感性；准确性梅毒指的是因感染梅毒螺旋体而导致的急性或慢性传播性疾病，随着感染时间的推移，病情也在不断发展，很有可能损伤患者的神经系统和心、肝、肾等重大脏器，特别是妊娠期间的隐性梅毒，很有可能会通过胎盘累及胎儿[1]。
但梅毒是一种能够治愈的感染性疾病，如果早期确诊，及时采取治疗措施，患者的病情会得到控制。
而且梅毒的潜伏性很强[2]，大部分患者都处于没有明显症状的潜伏期，所以早期的准确识别和诊断十分重要。
血清实验是检测梅毒的重要方法，但检测流程比较复杂。
本文比较了特异性密螺旋抗体元实验酶联免疫吸附法（ELISA）和电化学发光免疫法（ECLIA）检测梅毒的应用价值，现将结果汇报如下。
1资料与方法1.1资料收集2017年5月~2018年9月230份梅毒血清标本和同期620例非梅毒的健康体检者的血清标本。
参与研究的850例受检者中，男性435例、女性415例，年龄26岁~58岁，平均年龄（43.54±7.83）岁。
1.2方法采集所有患者的晨空腹静脉血3mL，以3000r/min的速度离心分离10min获得血清。
ELISA检测的试剂盒购自厦门新创科技有限公司；ECILA检测所用到的E601电化学发光免疫分析仪和配套试剂均购自瑞士罗氏公司。
ELISA法和TRUST法检测梅毒结果比较摘要目的比较酶联免疫吸附试验（ELISA）和梅毒甲苯胺红不加热血清试验（TRUST）检测方法的敏感性和特异性，评价其在临床诊断中的应用价值。
方法应用ELISA和TRUST联合检测1913例血清标本，包括手术前和输血前筛查的1715例以及门诊内镜检查前的198例血清标本，可疑阳性结果采用梅毒螺旋体明胶凝集试验（TPPA）确诊。
结果共检测1913例，用TPPA法确诊32例为阳性。
用TRUST法检出29例阳性，其中26例确诊阳性，3例为假阳性，敏感性为81.3%（26/32），特异性为89.7%（26/29）。
用ELISA法检出33例阳性，其中32例确诊阳性，1例为假阳性，敏感性为100.0%（32/32），特异性为97.0%（32/33）。
结论ELISA法操作相对简单，结果判定可标准化，特异性和敏感性好，可作为梅毒抗体检测较理想的方法，适合大批量标本检测。
TRUST法可作为梅毒筛查方法之一，配合ELISA法使用，特别适合作为临床观察效果的治疗指标。
关键词梅毒螺旋体；梅毒螺旋体特异性抗体明胶凝集试验；酶联免疫吸附试验；梅毒甲苯胺红不加热血清试验梅毒是一种慢性性传播疾病，具有高度危险性。
该病可累及全身各组织、器官的损害，甚至死亡，也可以呈多年潜伏状态而无症状。
梅毒螺旋体是引起人类梅毒的病原体，梅毒患者是唯一传染源，传染方式有母婴垂直传播、经血传播和性传播。
目前检测梅毒的方法主要有病原学、血清学检测，其中血清学检测又有多种不同的方法，一类是非梅毒螺旋体抗原血清试验，如TRUST；另一类是采用梅毒螺旋体抗原血清试验，如TPPA、ELISA等[1]。
本文就两种方法在梅毒检测中的比较进行探讨，现报告如下。
1 材料与方法1. 1 标本来源本院2006年6月～2014年6月手术前和输血前筛查的1715例以及门诊内镜检查前的198例血清标本，无性别年龄限制。
1. 2 标本采集采集以上所有标本，用普通试管，清晨空腹采集，1 h内分离血清，严格避免溶血。
化学发光免疫法与胶体金法检测梅毒抗体的比较摘要目的:通过比较这两种梅毒血清学检测方法的敏感性和特异性,选择敏感性高和特异性强的检测方法。
提高对梅毒的早期诊治,控制梅毒传播。
方法:采用化学发光免疫法和梅毒螺旋体抗体诊断试剂盒(胶体金)检测190例已确诊为梅毒患者的血清标本。
结果:化学发光免疫法与胶体金法对190例确诊梅毒患者的血清标本的敏感性分别为97.9%、88.4%,特异性分别为98.4%、96.7%。
化学发光免疫法的敏感性高于胶体金法,差异有统计学意义(P<0.05);化学发光免疫法的特异性高于胶体金法,差异有统计学意义(P<0.05)。
结论:胶体金法简便快速,适用于临床急诊标本检测。
化学发光免疫法特异性强、敏感性高适合于大批量的梅毒抗体筛查,提高了梅毒检测的阳性率对有效控制妊娠期梅毒和胎传梅毒的发生及梅毒传播都要重要的临床意义[1]。
关键词梅毒;化学发光法;胶体金梅毒(Syphilis)是由梅毒螺旋抗体(又称苍白螺旋体)引起的常见性传播疾病之一。
其临床病程漫长,临床表现极为复杂,几乎可侵犯皮肤粘膜,晚期侵犯内脏器官。
实验室可以通过检测血液中的非特异性抗体和特异性抗体[2],判断是否感染梅毒螺旋体。
现采用化学发光免疫法和胶体金法检测190例梅毒患者的血清标本,结果报告入下。
1 材料和方法1.1 标本来源经病史、临床症状及血清学实验确诊的梅毒患者的血清标本190例。
1.2 试剂科美CHEMCLIN600全自动化学发光免疫分析仪,试剂是由北京科美东雅生物技术有限公司提供的配套试剂盒,(胶体金法)梅毒螺旋体抗体诊断试剂盒是由广州万孚生物技术有限公司生产。
1.3 方法采用化学发光免疫法和胶体金法严格按照说明书对190例确诊标本进行检测。
1.4 结果判定化学发光免疫法的结果判定:临界值=2.1×N(N为阴性对照RLU的平均值),待测样品RLU值≥临界值,判定为阳性,待测样品RLU值<临界值,判定为阴性。
梅毒两种检测方法的灵敏度和特异性比较摘要：目的:探讨酶联免疫吸附试验法(ELISA)和明胶颗粒凝集试验法(TPPA)检测梅毒螺旋体的灵敏度和特异性。
方法:将200例确诊梅毒感染的血液样本列入检查组,将200例体检梅毒阴性的血液样本列入对照组,所有样本均分别采用ELISA和TPPA 两种方法进行检测,比较两种检测方法的灵敏度及特异性。
结果：TPPA法检测灵敏度为99%,,明显高于ELISA法的检测灵敏度93.5%, 具有显著差异（P＜0．05）；TPPA的检测特异性为99.5%,也高于ELISA法的检测特异性95%, 两种有显著差异（P＜0．05）。
结论：明胶颗粒凝集试验法(TPPA)进行梅毒检测其灵敏度和特异性均高于酶联免疫吸附试验法(ELISA)，用于检测梅毒准确率较高，可以用于梅毒确证实验。
关键词：梅毒螺旋体；酶联免疫吸附试验；明胶颗粒凝集试验梅毒是一种系统性的性传播疾病，病原体苍白（梅毒）螺旋体，性接触是其主要传播途径，少数可通过输血、母婴传播，根据其临床表现分为一期、二期、三期、潜伏期和先天（胎传）梅毒等[1]。
由于梅毒是系统性疾病，感染后可以累及到身体各个器官与组织，且病程漫长，造成多系统的损伤，严重危害患者健康，而患有梅毒的孕妇可通过胎盘传染给胎儿，分娩出梅毒胎儿或引起流产、早产、死胎，给患者及家庭带来巨大的痛苦[1]。
报告显示[2]，近年来梅毒在我国的感染人数呈逐年增高的趋势，已然成为感染人数最多的性传播疾病。
因此，快速准确的检测出梅毒阳性患者，对他们进行及时治疗和生活生育指导意义重大。
梅毒血清学试验方法很多，有特异性和非特异性两类，特异性方法包括梅毒螺旋体酶联免疫吸附试验（ELISA）、梅毒螺旋体颗粒凝集试验（TPPA）、化学发光法( CMIA)及胶体金法等，其中前两种最常用[3]。
本文针对这两种方法检测梅毒的灵敏度和特异性进行分析, 现将结果报道如下。
1 资料与方法1.1一般资料检查组的标本来自2013年1月-2014年6月在我中心确诊的200例确诊梅毒感染的患者血样，确诊根据临床症状和梅毒螺旋体的检测的结果。
患者中男性113例, 女性87例，年龄20～65岁，平均（33.3±4.7）岁；病程1～25年，平均（10.1±3.1）年；200例患者中潜伏期梅毒21例，一期梅毒88例，二期梅毒65例，三期梅毒26例。
对照组的标本来自于我我单位体检中心同期体检结果为梅毒阴性的200例健康人血样，其中男性121例, 女性79例，年龄22～64岁，平均（35.2±5.1）岁。
1.2试剂和方法空腹抽取病人促凝全血样本，3500r/min离心2分钟分离上清液，静置室温或4℃环境保存备用。
洗板机采用赛默飞世尔科技公司提供的全自动立式洗板机，酶标仪采用TECAN sunrise酶标仪。
ELISA法所用试剂盒为珠海丽珠试剂股份有限公司生产的96T，TPPA：使用富士瑞必欧公司生产的试剂盒。
1.2.1酶联免疫吸附试验法(ELISA)：取出所需板条平衡30min至室温。
①加样：设置阴性对照3孔、阳性对照2孔，分别加入阴性、阳性对照各50ul；设置空白对照1孔，不加样品。
其余孔加入待测样品50ul。
②温育：置37℃温育60min。
③洗涤：反应完成后取出用洗板机洗板6次，并在吸水纸上拍干。
④加酶：空白对照孔不加酶标记物。
其余孔加入酶标记物50ul，震荡混匀。
⑤温育：置37℃温育30min。
⑥洗涤：反应完成后取出用洗板机洗板6次，并在吸水纸上拍干。
⑦显色：每孔加入底物缓冲液50μL，再加入底物液50μL，震荡混匀，置37℃温育30min。
⑧终止：所有孔加入终止液50μL，轻拍混匀。
⑨：读值：用酶标仪读值，在单波长450nm处（须以空白对照孔校零）读取各孔的OD值。
实验结果符合阴性、阳性和空白对照标准，样品OD值≥临界值为TP抗体阳性；样品OD值＜临界值为TP抗体阴性。
（临界值=阴性对照平均OD值+0.10）1.2.2明胶颗粒凝集试验法(TPPA)：于室温下使用稀释液在U型反应板上对各血清样本进行稀释处理, 一共6孔，稀释度依次为1：10、1：20、1：40、1：80、1：160、1：320；混匀细胞工作液，第2孔加25µl未致敏颗粒（最终稀释度1：40），第3、4、5、6孔加25µl致敏颗粒（最终稀释度1：80、1：160、1：320、1；640、1：1240），加盖，15℃-25℃孵育2h。
结果判定：阴性（-）颗粒聚集在孔底中央、光亮、边缘光滑，可疑（±）颗粒浓集呈边缘光滑小环状阳性，阳性（1+）颗粒凝集呈多边形性粗糙大环状，阳性（2+-4）颗粒凝集覆盖整个孔底，多边形膜状，边缘粗糙。
以出现阳性(1+)的最高稀释度作为最终滴度。
1.3观察指标分别观察和记录两种方法检测两组样本的阳性和阴性检出率, 计算各自灵敏度和特异性。
灵敏度=梅毒患者检测为阳性例数/确诊梅毒患者总数（200）×%, 特异性=非梅毒人员检测为阴性例数/ 非梅毒人员总数（100）×%。
1.4统计学处理所得数据位计数资料，采用卡方检验, 使用SPSS18.0 软件进行数据处理，P＜0．05表示差异具有统计学意义。
2 结果2.1 阳性和阴性检测ELISA法检测200例梅毒标本结果为阳性191例，阴性9例，检测200例梅毒阴性标本结果为阳性例，阴性例。
TPPA法检测200例梅毒标本结果为阳性191例，阴性例，检测200例梅毒阴性标本结果为阳性例，阴性例。
详情见表1。
3 讨论随着社会生活的改变与人们性观念的逐渐开放，婚前性行为和非法性行为现象愈加普遍，但人们的自我保护观念却不够强，导致艾滋、梅毒等性传播疾病的发病率与日俱增，严重威胁人们的生命健康[4，5]。
梅毒作为最具代表性的性传播疾病，其诊断和治疗应该受到足够的重视。
患者感染梅毒后，免疫系统会产生两类抗体，非特异性的抗类脂类抗体和特异性的抗梅毒螺旋体，通过血液检测这些抗体可以检测梅毒的感染与否[5]。
临床上梅毒较常用的非特异性检测方法有RPR（快速血浆反应素环状卡片试验）、甲苯胺红不加热血清学试验（TRUST）等，次法由于假阳性率较高，一般用于判断疗效而不做确证实验[6]。
而梅毒的确证实验一般需运用特异性的检测方法如梅毒螺旋体酶联免疫吸附试验（ELISA）和梅毒螺旋体颗粒凝集试验（TPPA）等[6]。
ELISA法是检测梅毒的常用方法，可用于梅毒各期的诊断，具有操作简单、设备廉价、结果可记录、适用于大批量标本同时检测的优点，可广泛用于梅毒筛查[7]。
TPPA法拥有极高的灵敏度与特异性，但由于其试剂昂贵、操作繁琐、耗时较长，而比较常用于疑似阳性标本的确证实验[8]。
TPPA检测一旦显示阳性，无论疾病的治疗及活动情况如何，患者终身可以检测到抗体，因此此法不应作为评价疗效或判定复发与再感染的指标，只能够作为梅毒的确认试验[8]。
本研究将TP-ELISA法和TPPA法检测结果进行比较，发现TPPA法的灵敏度（99%）和特异性（99.5%）都比ELISA法高，差异具有可比性（P＜0．05）。
TPPA法采用明胶颗粒包裹抗原，并与血清中梅毒特异性抗体结合生成沉淀进行结果判断。
该方法排除了其他非特异性抗体的干扰，利用抗原抗体特异性提高本实验的特异性，同时其具有高灵敏度。
TPPA法是检测梅毒的金标准试验。
李小红[9]用ELISA法检测梅毒的灵敏度和特异性分别为98.3%和90.5%，TPPA法的敏感性和特异性分别为97.8%和92.7%，两者灵敏度无明显差异而特异性存在统计学差异；而吕志军[10]的研究发现ELISA法检测梅毒的灵敏度和特异性分别为93.3%和96.5%，TPPA法的敏感性和特异性分别为98.2%和96.7%，两者灵敏度存在显著差异而特异性统计学差异。
但两位学者基本认为实验中的操作误差会对结果造成影响，TPPA法总体上灵敏度和特异性更高，但论梅毒筛查临床实用性以ELISA法更佳[9-10]。
综上所述，梅毒的这两种检测方法各有其优缺点, 虽然TPPA法的灵敏度和特异性更高，但临床应根据实际需要选择合适的检测方法或采用多方法联合检测的形式在保证工作效率的同时提高检测的准确率。
参考文献：[1]疾病预防控制中心性病控制中心．性传播疾病临床诊疗指南[M]．2006：33-37．[2]李军，郑和义.梅毒检测研究进展[J].中国医学科学院学报,2012,34(1):95-98.[3]陈辉，魏聪，李媛.梅毒三种检测方法的比较[J].检验医学与临床,2011,８(15):1817-1818 ［4］隗功浩．梅毒螺旋体实验室检测技术与研究进展[J].职业与健康，2011，27( 2) : 202－204.[5] Lin LR1, Tong ML, Fu ZG, Dan B, Zheng WH, Zhang CG, Yang TC, Zhang ZY. Evaluation of a colloidal gold immunochromatography assay in the detection of Treponema pallidum specific IgM antibody in syphilis serofast reaction patients: a serologic marker for the relapse and infection of syphilis[J].Diagn Microbiol Infect Dis. 2011 May;70(1):10-16.[7] Busse C, Navid MH, Strubel A, Schnitzler P.Evaluation of a new recombinant antigen-based Virotech Treponema pallidum screen ELISA for diagnosis of syphilis[J]. Clin Lab. 2013;59(5-6):523-529.[8]Wang TT, Li Q, Yu JF, Xiao CY, Zhang LP.Application of TRUST, TP-ELISA and TPPA in the serologic diagnosis of syphilis[J].Zhonghua Nan Ke Xue. 2012Nov;18(11):1020-1022.[9] 李小红ELISA-TP和TPPA梅毒血清学检测的灵敏度和特异性分析[J].中国医药指南，2013，9（25）：120-121.[10]吕志军. 不同检测方法检测梅毒螺旋抗体的效果比较分析[J]. 临床与病理杂志, 2014, 34(6): 693-696.。
