课题6 DNA的粗提取与鉴定(学案)
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高二生物教案:DNA的粗提取与鉴定【导语】高二一年,强人将浮出水面,鸟人将沉入海底。
高二重点解决三个问题:一,吃透课本;二,找寻适合自己的学习方法;三,总结自己考试技巧,形成习惯。
为了帮助你的学习更上一层楼,高二频道为你准备了《高二生物教案:DNA的粗提取与鉴定》希望可以帮到你!【篇一】目的要求1.了解实验原理。
2.学会DNA的粗提取和鉴定的方法,观察提取出来的DNA物质。
3.通过本实验培养实验操作能力和观察能力。
实验原理1.DNA在NaCl溶液中的溶解度,是随着NaCl的浓度的变化而改变的。
当NaCl的物质的量浓度为0.14mol/L时,DNA的溶解度最低。
利用这一原理,可以使溶解在NaCl溶液中的DNA析出。
2.DNA不溶于酒精溶液,但是细胞中的某些物质则可以溶于酒精溶液。
利用这一原理,可以进一步提取出含杂质较少的DNA.3.DNA遇二苯胺(沸水浴)会染成蓝色,因此,二苯胺可以作为鉴定DNA的试剂。
注意事项1.步骤3析出含DNA的黏稠物中,蒸馏水要沿烧杯内壁缓缓加入,不能一次快速倒入。
2.实验中有多个步骤都要用玻璃棒进行搅拌,但是在不同的步骤中玻璃棒的用法不同。
实验用具鸡血细胞液(5~10mL);体积分数为95%的冷酒精,蒸馏水,质量浓度为0.1g/mL的柠檬酸钠溶液,物质的量浓度分别为2mol/L 和0.015mol/L的NaCl溶液,二苯胺试剂;烧杯(100mL,1个,50mL,500mL,各2个),漏斗,试管(2020,2个),玻璃棒,滴管,量筒(100mL,1个),纱布,镊子,滤纸,铁架台,铁环,三角架,酒精灯,石棉网,载玻片,试管夹。
课前准备制备鸡血细胞液,方法是:将质量浓度为0.1g/mL的柠檬酸钠溶液100mL,置于500mL烧怀中,注入新鲜的鸡血(约180mL),用玻璃棒搅拌,使其充分混合,以免凝血。
静置于冰箱内一天,使血细胞自行沉淀。
(也可以用离心机离心2min(转速1000转/分)。
DNA的粗提取与鉴定教案一、教学目标1. 理解DNA的粗提取与鉴定的基本原理。
2. 学会使用不同的方法进行DNA的粗提取。
3. 学会使用不同的方法进行DNA的鉴定。
4. 能够独立完成DNA的粗提取与鉴定实验。
二、教学重点与难点1. 教学重点:DNA的粗提取与鉴定的基本原理、方法与步骤。
2. 教学难点:DNA的鉴定方法。
三、教学准备1. 实验室器材:试管、移液器、玻璃棒、滤纸、离心机等。
2. 实验材料:鸡血细胞、植物细胞、细菌等。
3. 试剂:酒精、盐、洗涤剂等。
四、教学过程1. 引入:通过讲解DNA的发现历程,引发学生对DNA的兴趣。
2. 讲解:讲解DNA的粗提取与鉴定的基本原理、方法与步骤。
3. 实验操作:引导学生独立完成DNA的粗提取与鉴定实验。
4. 讨论与思考:引导学生思考DNA的粗提取与鉴定在实际应用中的意义。
五、教学评价1. 学生能够理解DNA的粗提取与鉴定的基本原理。
2. 学生能够独立完成DNA的粗提取与鉴定实验。
3. 学生能够理解DNA的鉴定方法及其应用。
六、实验原理1. DNA的溶解性:DNA和蛋白质、脂质等成分在不同浓度NaCl溶液中溶解度不同;DNA不溶于酒精溶液,但细胞中的某些蛋白质溶于酒精。
2. DNA的稳定性:DNA对酶、高温和洗涤剂的耐受性。
七、实验材料与试剂1. 实验材料:鸡血细胞、植物细胞、细菌等。
2. 试剂:2mol/L NaCl溶液:用于提取DNA。
0.14mol/L NaCl溶液:用于进一步纯化DNA。
冰醋酸:用于进一步纯化DNA。
50%酒精溶液:用于鉴定DNA。
二苯胺试剂:用于鉴定DNA。
八、实验步骤1. DNA的粗提取:a. 将实验材料加入2mol/L NaCl溶液,充分搅拌后放置一段时间。
b. 收集上清液,加入等体积的0.14mol/L NaCl溶液,轻轻搅拌后放置一段时间。
c. 收集上清液,加入等体积的冰醋酸,轻轻搅拌后放置一段时间。
d. 收集上清液,加入等体积的50%酒精溶液,轻轻搅拌后放置一段时间。
DNA的粗提取与鉴定教案第一章:DNA的简介1.1 课程目标:了解DNA的定义和结构理解DNA在生物体内的功能和重要性1.2 教学内容:DNA的定义和组成DNA的双螺旋结构DNA的复制和遗传信息的传递1.3 教学活动:引入话题:通过播放一个关于DNA的科普视频或进行一个简短的讨论来引起学生对DNA的兴趣。
讲解DNA的定义和组成:使用PPT或板书来展示DNA的基本结构和组成单位。
讲解DNA的双螺旋结构:使用模型或动画来展示DNA的双螺旋结构。
讲解DNA的复制和遗传信息的传递:使用示例或图解来说明DNA的复制过程和遗传信息的传递方式。
1.4 作业与评估:给学生发放相关的阅读材料或布置相关的阅读作业,以加深对DNA的理解。
进行小组讨论或小测验,以评估学生对DNA的掌握程度。
第二章:DNA的粗提取2.1 课程目标:学习DNA的粗提取方法理解DNA在不同溶液中的溶解度特性2.2 教学内容:DNA的溶解度特性:介绍DNA在不同溶液中的溶解度变化。
DNA的粗提取方法:介绍使用不同的溶液和离心方法来粗提取DNA。
2.3 教学活动:讲解DNA的溶解度特性:使用PPT或板书来展示DNA在不同溶液中的溶解度变化。
讲解DNA的粗提取方法:使用PPT或板书来展示使用不同的溶液和离心方法来粗提取DNA的步骤。
进行实验演示:演示如何使用不同的溶液和离心方法来粗提取DNA。
2.4 作业与评估:给学生发放实验指导书或布置相关的实验作业,以指导学生进行DNA的粗提取实验。
进行小组讨论或小测验,以评估学生对DNA的粗提取方法的掌握程度。
第三章:DNA的鉴定3.1 课程目标:学习DNA的鉴定方法理解DNA的电泳迁移和光谱特性3.2 教学内容:DNA的电泳迁移:介绍使用琼脂糖凝胶电泳来鉴定DNA的迁移速度。
DNA的光谱特性:介绍使用紫外光谱仪来鉴定DNA的吸收光谱。
3.3 教学活动:讲解DNA的电泳迁移:使用PPT或板书来展示琼脂糖凝胶电泳的原理和步骤。
预习导航一、提取DNA的方法1.DNA的粗提取,就是要利用DNA与RNA、蛋白质和脂质等在物理和化学性质方面的差异提取DNA,去除其他成分。
2.DNA的溶解性:(1)DNA和蛋白质等其他成分在不同浓度的NaCl溶液中溶解度不同,选择适当的盐浓度就能使DNA充分溶解,而使杂质沉淀,或者相反,以达到分离目的.(2)DNA不溶于酒精溶液,某些蛋白质则溶于酒精.可以将DNA与蛋白质进一步的分离。
自主思考根据下图分析,要使DNA溶解,需要使用什么浓度?要使DNA析出,又需要使用什么浓度?提示:在0.14 mol/L时DNA溶解度最小。
较高(或较低)浓度可使DNA溶解;0。
14 mol/L可使DNA析出。
3.DNA对酶、高温和洗涤剂的耐受性:蛋白酶能水解蛋白质,但是对DNA没有影响。
大多数蛋白质不能忍受60~80 ℃的高温,而DNA在80_℃以上才会变性.洗涤剂能够瓦解细胞膜,但对DNA没有影响。
4.DNA的鉴定:在沸水浴条件下,DNA遇二苯胺会被染成蓝色,因此二苯胺可以作为鉴定DNA的试剂。
二、实验设计1.实验材料的选取:凡是含有DNA的生物材料都可以考虑,但是选用含DNA含量相对较高的生物组织,成功的可能性更大。
自主思考你认为教材提供的材料中哪些不适合提取DNA?提示:哺乳动物的血液和液体培养基中的大肠杆菌。
2.破碎细胞,获取含DNA的滤液:在鸡血细胞液中加入一定量的蒸馏水,过滤后收集滤液即可。
如果实验材料是植物细胞,需要先用洗涤剂溶解细胞膜.如果以洋葱作实验材料,先将洋葱切碎,然后加入一定的洗涤剂和食盐,进行充分搅拌和研磨,过滤后收集研磨液。
温故知新为什么加入蒸馏水能使鸡血细胞破裂?提示:鸡血细胞与外界溶液相当于一个渗透系统,在蒸馏水中会发生渗透吸水,使细胞涨破.3.去除滤液中的杂质(1)方案一:通过控制NaCl溶液的浓度去除杂质。
(2)方案二:直接向滤液中加入嫩肉粉,反应10~15 min,添加物中的木瓜蛋白酶能够分解蛋白质。
《DNA的粗提取和鉴定》教学设计一、教学目标概述DNA粗提取与鉴定的原理、过程。
二、教学重难点DNA粗提取的原理、DNA鉴定的原理三、教学过程导入新课大家回忆一下,真核细胞中DNA主要存在于在细胞核中的染色体上, DNA,蛋白质以及少量的RNA一起构成染色体,那么我们怎样将DNA与细胞中的其他物质分离?并鉴定我们提取的DNA?本节课我们就来解决这些问题,基本思路:我们的基本思路是利用DNA与RNA、蛋白质和脂质等在物理和化学性质方面的差异,提取DNA,去除其他成分。
基本原理:首先DNA不溶于酒精溶液,但细胞中某些蛋白质则溶于酒精。
利用这一原理,可初步分离DNA 与蛋白质。
其次 DNA在不同浓度的NaCl溶液中的溶解度不同。
DNA在NaCl溶液中的溶解度是如何变化的?我们来看一下这个曲线。
(当NaCl溶液浓度低于0.14 mol/L时,DNA的溶解度随NaCl溶液浓度的增加而逐渐降低;当NaCl溶液浓度大于0.14 mol/L时,DNA的溶解度随NaCl溶液浓度的增加而逐渐增大。
)利用这一点我们可以选择2mol/ L盐浓度使DNA充分溶解,进而进行DNA的鉴定。
DNA对酶、高温和洗涤剂的耐受性较大,①蛋白酶—水解蛋白质,对DNA没有影响。
②高温—大多数蛋白质在60~80℃时变性沉淀,而DNA在80℃以上才会变性。
③洗涤剂—溶解细胞膜,去除脂质、蛋白质;但对DNA没有影响。
怎样鉴定我们提取的物质是DNA呢?在沸水浴条件下,DNA遇二苯胺试剂会呈现蓝色,因此用二苯胺试剂鉴定DNA分子。
实验目的:(1)了解DNA的物理化学性质;理解DNA粗提取和鉴定的原理,(2)学会DNA粗提取的方法以及利用二苯胺试剂对DNA进行鉴定实验材料:不同生物的组织中DNA含量不同。
在选取材料时,应本着DNA含量高、材料易得、便于提取的原则。
你认为如下提供的材料中哪些不适合提取DNA?为什么?哺乳动物成熟的红细胞不合适,因为它没有细胞核,细胞中没有DNA。
DNA的粗提取与鉴定实验一、教学背景分析【教材分析】生物体的性状之所以能够遗传给后代,是由于生物体内具有DNA或RNA这些遗传物质。
通过必修2《遗传与进化》的学习,学生已经学习了证明DNA是主要的遗传物质的实验证据。
那么DNA究竟是什么样的呢?本课题通过尝试对植物或动物组织中的DNA进行粗提取,了解DNA的物理化学性质,理解DNA粗提取以及DNA鉴定的原理,使学生对DNA有一定的感性认识。
“DNA的粗提取与鉴定实验”在《普通高中生物课程标准》和《考试大纲》对实验内容考查的要求中属D 级要求,新课标强调能力培养,高考对实验能力的考核比重也逐年加大。
学生通过本次实验探究活动,可进一步提高动手能力和创新能力。
【学情分析】通过必修2《遗传与进化》的学习,学生已经了解了证明DNA是主要的遗传物质的实验证据,知道生物体的形状之所以能够遗传给后代,是由于生物体内具有DNA或RNA这些遗传物质。
通过本课题的学习,使学生对DNA有一定的感性认识。
二、教学目标【知识目标】本实验通过尝试对植物或动物组织中的DNA进行粗提取,了解DNA的物理化学性质,理解DNA 粗提取方法以及DNA鉴定的原理内容。
【能力目标】1.实验中能运用已有的知识,选择实验材料用具;2.通过具体的材料,学生尝试课题研究,体验科学探究的一般过程。
3.初步掌握DNA的粗提取和鉴定的方法4.在对实验原理、步骤的理解和分析过程中发展学生的科学思维。
5.熟悉粗提取生物大分子的的一般性方法【情感态度与价值观目标】1.通过小组之间的分工合作,逐渐养成协作精神;2.通过科学与数学的整合,逐渐形成简约、严谨的思维品质;3.在实验过程中培养学生严谨细致、实事求是的科学态度三、教学重难点【教学重点】DNA的粗提取与鉴定方法及其相关原理【教学难点】DNA的粗提取与鉴定方法及其相关原理四、实验实施准备【教师准备】1.分组。
学生平均分配,两人一组。
2.实验用具。
移液管、烧杯、滴管、玻璃棒、研钵、冰箱、湿纱布、试管、离心机、水浴锅等。
课题1DNA的粗提取与鉴定课前预习情景导入秦始皇陵考古队在秦兵马俑坑旁发现一“劳工墓"。
“劳工墓”内埋有121具人骨架,死者们生前是2 000年前修建秦始皇陵的劳工。
专家们随机选取其中50个劳工遗骨个体进行了DNA检测研究,他们最近通过DNA检测发现,在秦始皇兵马俑坑旁埋葬着一具2 200年前具备“欧亚西部特征”的人类遗骸。
2006年6月28日,秦始皇陵考古队队长、陕西省考古所研究员段清波说,这是首次发现“洋劳工"在2 200年前已来到中国腹地。
DNA检测之前首先要进行DNA 提取.你知道DNA是怎样提取的吗?本课题我们来学习一下DNA 的粗提取。
知识预览一、基础知识1.DNA的粗提取(1)概念:要利用DNA与,蛋白质和等在物理和方面的差异,提取DNA,去除其他成分。
(2)方法:DNA和蛋白质等其他成分在不同浓度的溶液中溶解度不同。
利用这一特点,选择适当的就能使DNA充分溶解,而使杂质沉淀,或者相反,以达到分离的目的。
DNA不溶于_______,但是细胞中的某些蛋白质则溶于此溶液。
能水解蛋白质,但对DNA没有影响.大多数蛋白质不能忍受的高温,而DNA在以上才会变性。
洗涤剂能瓦解,但对DNA没有影响。
2.DNA的鉴定在的条件下,DNA遇二苯胺会染成.答案:1.(1)RNA 脂质化学性质(2)NaCl 盐浓度酒精溶液蛋白酶60~80 ℃80 ℃细胞膜2.沸水浴蓝色二、实验设计1。
选取实验材料选用的生物组织,成功的可能性更大。
2。
破碎细胞,获取含DNA的滤液动物细胞的破碎较易,例如,在鸡血细胞液中加入一定量的,同时,过滤后收取滤液即可。
如是植物细胞,需要先用溶解。
3.DNA的析出与鉴定DNA的析出用的是与滤液体积相等的、的溶液。
鉴定DNA时在试管中先加入物质的量浓度为的NaCl溶液5 mL。
两支试管中其中一支加入DNA丝状物,各加入二苯胺______。
答案:1.DNA含量相对较高2.蒸馏水用玻璃棒搅拌洗涤剂细胞膜3.冷却酒精 2 mol/L 4 mL。
2023高中生物人教版DNA的粗提取与鉴定实验教案一、实验目的通过本实验,学生将了解到DNA的结构和提取方法,并学会进行DNA的粗提取与鉴定实验。
二、实验原理DNA是一种复杂的分子,存在于细胞核中。
DNA的提取是将细胞溶解,分离出DNA分子的过程。
本实验采用CTAB法进行DNA的提取。
CTAB(正十六烷基三甲基溴化铵)可与DNA中的脂质结合,使其在酒精中沉淀出来,然后进行纯化。
三、实验材料1. 鸽子肌肉组织2. CTAB提取液(含CTAB、EDTA等)3. 去离子水4. 洗涤溶液(含乙醇、酒精等)5. 漂白粉溶液6. 碘酒溶液7. NB试剂液(含甲酚、硫酸等)8. DNA鉴定试剂盒9. 细胞破碎管10. 离心管11. 显微镜四、实验步骤1. 取适量鸽子肌肉组织,用漂白粉溶液清洗约5分钟,然后用去离子水洗净。
2. 将清洗后的组织切成小块,加入细胞破碎管中。
3. 加入适量的CTAB提取液,轻轻颠倒破碎管,使其均匀混合。
4. 将混合液放入水浴中加热,温度控制在60℃,保持30分钟。
5. 在水浴中加热过程中,制备NB试剂液。
取一定体积的NB试剂液加入离心管中。
6. 完成加热后,将破碎管置于冷水中快速降温。
7. 按顺序加入等体积的NB试剂液和酒精,轻轻摇晃离心管。
8. 静置一段时间后,观察管内是否有白色物质沉淀,即DNA。
9. 使用显微镜观察提取的DNA样品,并拍照记录。
五、实验结果与分析通过上述实验步骤,我们成功从鸽子肌肉组织中提取到了DNA。
观察显微镜下的DNA样品,可以观察到DNA的纤维状结构,证明DNA成功提取。
通过DNA鉴定试剂盒,可以进一步鉴定DNA的质量和纯度。
六、实验扩展1. 不同来源的细胞组织是否存在DNA含量差异?2. 不同提取方法对DNA的效果有何不同?3. 通过PCR技术对提取的DNA进行进一步分析。
七、实验注意事项1. 实验过程中需注意个人安全,避免接触有害物质。
2. 实验器材需干净无污染,避免杂质对实验结果的影响。
《DNA 的粗提取及鉴定》导学案一、学习目标1、理解 DNA 粗提取和鉴定的原理。
2、学会 DNA 粗提取和鉴定的方法及步骤。
3、通过实验操作,提高动手能力和实验探究能力。
二、学习重难点1、重点(1)DNA 粗提取的原理和方法。
(2)DNA 鉴定的原理和方法。
2、难点(1)实验材料的选择和处理。
(2)去除杂质的方法和技巧。
三、知识链接1、 DNA 的基本组成单位是脱氧核苷酸,它由一分子磷酸、一分子脱氧核糖和一分子含氮碱基组成。
2、 DNA 分子具有独特的双螺旋结构,两条链通过碱基互补配对原则相互连接。
四、实验原理1、 DNA 在氯化钠溶液中的溶解度,是随着氯化钠的浓度变化而改变的。
当氯化钠的物质的量浓度为014mol/L 时,DNA 的溶解度最低。
利用这一原理,可以使溶解在氯化钠溶液中的 DNA 析出。
2、 DNA 不溶于酒精溶液,但是细胞中的某些蛋白质则溶于酒精。
利用这一原理,可以进一步提取出含杂质较少的 DNA。
3、 DNA 遇二苯胺(沸水浴)会染成蓝色,因此,二苯胺可以作为鉴定 DNA 的试剂。
五、实验材料和用具1、材料新鲜的鸡血细胞液(或菜花、洋葱等)2、用具(1)烧杯、量筒、玻璃棒、研钵、纱布、漏斗、试管、滴管、离心机等。
(2)体积分数为 95%的酒精溶液、2mol/L 的氯化钠溶液、0015mol/L 的氯化钠溶液、二苯胺试剂等。
六、实验步骤1、制备鸡血细胞液(1)在鸡血中加入柠檬酸钠,防止血液凝固。
(2)将鸡血离心,去除血浆,留下血细胞。
2、提取细胞核物质(1)向血细胞中加入蒸馏水,使细胞吸水涨破,释放出细胞核物质。
(2)搅拌,加速细胞膜和核膜的破裂。
3、溶解细胞核内的 DNA向溶液中加入 2mol/L 的氯化钠溶液,搅拌,使 DNA 溶解。
4、析出含 DNA 的黏稠物(1)缓慢加入蒸馏水,降低氯化钠溶液的浓度,直至浓度为014mol/L,使 DNA 析出。
(2)用玻璃棒搅拌,卷起黏稠物。
省海中高二生物(选修)教学学案
课题5DNA的粗提取与鉴定
一、达标
(一)知识目标
知识与技能: 1、通过尝试对植物或动物组织中的DNA进行粗提取,了解DNA的物理化学性质。
2、理解DNA粗提取与鉴定的原理
过程与方法:掌握DNA如提取计数,能利用DNA的性质进行实验设计和操作
情感态度与价值观:通过对DNA的粗提取的实验过程的设计及操作,锻炼科学的思维方法,培养实事求是的科学态度。
(二)重点和难点
重点: DNA的粗提取和鉴定方法难点: DNA的粗提取和鉴定方法
二、基础知识
1.提取DNA的方法
提取生物大分子的基本思路是。
对于DNA的粗提取而言,就是要利用、等在物理和化学性质方面的差异,提取DNA,去除其他成分。
1)DNA的溶解性DNA和蛋白质等其他成分在不同浓度的中溶解度不同,利用这一特点,选择适当的盐浓度就能使充分溶解,而使杂质沉淀,或者相反,以达到分离目的。
图5—1是DNA在NaCl溶液中的溶解度曲线,请根据曲线图,思考:
①在什么浓度下,DNA的溶解度最小?DNA在NaCl溶液中的溶解度是如何变化的?
②如何通过控制NaCl溶液的浓度使DNA在盐溶液中溶解或析出?
此外,DNA不溶于溶液,但是细胞中的某些蛋白质则溶于酒精。
利用这一原理,可以将DNA与蛋白质进一步的分离。
2)DNA对酶、高温和洗涤剂的耐受性蛋白酶能水解,但是对没有影响。
大多数蛋白质不能忍受60—80o C的高温,而DNA在以上才会变性。
洗涤剂能够瓦解,但对DNA没有影响。
3)DNA的鉴定在条件下,DNA遇会被染成色,因此二苯胺可以作为鉴定DNA的试剂。
2.实验设计
1)实验材料的选取凡是含有的生物材料都可以考虑,但是使用的生物组织,成功的可能性更大。
在下面的生物材料中选取适合的实验材料:
鱼卵、猪肝、菜花(花椰菜)、香蕉、鸡血、哺乳动物的红细胞、猕猴桃、洋葱、豌豆、菠菜、在液体培养基的大肠杆菌
思考:哺乳动物的红细胞的特点?
2)破碎细胞,获取含DNA的滤液动物细胞的破碎比较容易,以鸡血细胞为例,在鸡血细胞液中加入一定量的,同时用搅拌,过滤后收集滤液即可。
如果实验材料是植物细胞,需要先用溶解细胞膜。
例如,提取洋葱的DNA时,在切碎的洋葱中加入一定的和,进行充分的搅拌和研磨,过滤后收集研磨液。
思考:①为什么加入蒸馏水能使鸡血细胞破裂?
②加入洗涤剂和食盐的作用分别是什么?
③如果研磨不充分,会对实验结果产生怎样的影响?
④此步骤获得的滤液中可能含有哪些细胞成分?
3)去除滤液中的杂质阅读课本的三个方案,思考:
为什么反复地溶解与析出DNA,能够去除杂质?
方案二与方案三的原理有什么不同?
4)DNA的析出与鉴定将处理后的溶液过滤,加入与滤液体积、冷却的,静置,溶液中会出现,这就是粗提取的DNA。
用玻璃棒搅拌,卷起丝状物,并用滤纸吸取上面的水分。
取两支20ml的试管,各加入物质的量浓度为的NaCl溶液5ml,将丝状物放入其中一支试管中,用玻璃棒搅拌,使丝状物溶解。
然后,向两支试管中各加入4ml的。
混合均匀后,将试管置于中加热5min,待试管冷却后,比较两支试管溶液颜色的变化,看看溶解有DNA的溶液是否变。
3.操作提示
以血液为实验材料时,每100ml血液中需要加入3g ,防止。
加入洗涤剂后,动作要、,否则容易产生大量的泡沫,不利于后续步骤地操作。
加入酒精和用玻璃棒搅拌时,动作要,以免,导致DNA分子不能形成絮状沉淀。
二苯胺试剂要,否则会影响鉴定的效果。
4.结果分析与评价
三、总结DNA的粗提取与鉴定
一、植物DNA的粗提取
1.取材称取30g的菜花,去梗、切碎。
2.研磨将切碎的菜花放入研钵中,加入洗涤剂和食盐,充分研磨搅拌。
3.过滤在漏斗中放上,进行过滤。
4.去除滤液中的杂质
第二次过滤在滤液中加入2mol/L的NaCl,。
第三次过滤沿烧杯壁加蒸馏水使NaCl的浓度为0.14mol/L时,析出DNA,用纱布过滤。
第四次过滤将纱布中的DNA溶于2mol/L的NaCl,用二层纱布过滤,去除。
5.沉淀在一倍体积的上清液中倒入体积相等的冷却的酒精,溶液中析出白色丝状物。
6.鉴定取两支试管,各加入2mol/L的NaCl溶液5ml,将丝状物溶于其中一支试管中,然后向两支试管中各加入4ml的,混合均匀,沸水浴加热,待冷却后,比较两支试管的颜色变化。
二、动物DNA的提取
1.取材取鸡血加入抗凝剂。
(抗凝剂为柠檬酸钠)
2
3.过滤用3-4层纱布过滤,除去。
4.去除滤液中的杂质
四、突破训练
1.在研究DNA的基因样本前,采集来的血样需要蛋白水解酶处理,然后用有机溶剂除去蛋白质。
用蛋白水解酶处理血样的目的是
A.除去血浆中的蛋白质B.除去染色体上的蛋白质
C.除去血细胞表面的蛋白质
D.除去血细胞中的所有的蛋白质,使DNA释放,便于进一步提纯
2.与析出DNA粘稠物有关的叙述,不正确的是
A.操作时缓缓滴加蒸馏水,降低DNA的溶解度
B.在操作A时,用玻璃棒轻缓搅拌,以保证DNA分子完整
C.加蒸馏水可同时降低DNA和蛋白质的溶解度,两者均可析出
D.当丝状粘稠物不再增加时,此时NaCl的浓度相当于0.14mol/L
3.洗涤剂能够瓦解(),但对DNA没有影响
A.细胞壁B.细胞膜C.细胞核D.细胞质
4.在沸水浴的条件下,DNA遇()会被染成蓝色。
A.斐林试剂B.苏丹Ⅲ染液C.双缩脲试剂D.二苯胺
5.在DNA提取过程中,最好使用塑料试管和烧杯,目的是
A.不易破碎B.减少提取过程中DNA的损失
C.增加DNA的含量D.容易洗刷
6.下列操作中,对DNA的提取量影响最小的是
A.使鸡血细胞在蒸馏水中充分破裂,放出DNA等核物质
B.搅拌时,要使用玻璃棒沿一个方向轻缓搅拌
C.在“析出DNA粘稠物”时,要缓缓加蒸馏水,直至溶液中粘稠物不再增加
D.在用酒精沉淀DNA时,要使用冷酒精,甚至再将混合液放入冰箱中冷却E在DNA的溶解和再溶解时,要充分搅拌
7.DNA的粗提取中,将与滤液体积相等的、冷却的(),静置2—3min,溶液中会出现白色丝状物。
A.0.9%的NaCl B.0.14mol/L的NaCl溶液
C.质量分数15%的HCl D.体积分数为95%的酒精溶液
8.以血液为实验材料时,需要向血液中加入(),防止血液凝固。
A.醋酸钠B.龙胆紫C.柠檬酸钠D.醋酸洋红
9.在向溶解DNA的NaCl溶液中,不断加入蒸馏水的目的是
A.加快溶解DNA的速度B.加快溶解杂质的速度
C.减少DNA的溶解度,加快DNA析出D.减小杂质的溶解度,加快杂质的析出
10.DNA的提取和鉴定中:实验中有三次过滤:⑴过滤用蒸馏水稀释过的鸡血细胞液⑵过滤含粘稠物的0.14mol/LNaCl溶液⑶过滤溶解有DNA的2mol/LNaCl溶液以上三次过滤分别为了获得
A.含核物质的滤液、纱布上的粘稠物、含DNA的滤液
B.含核物质的滤液、滤液中DNA粘稠物、含DNA的滤液
C.含核物质的滤液、滤液中DNA粘稠物、纱布上的DNA
D.含较纯的DNA滤液、纱布上的粘稠物、含DNA的滤液
11.提取鸡血中DNA时,要除去血液中的上清液,这是因为什么?
12.填写本实验完成下列实验操作时所用试剂。
⑴提取鸡血细胞中核物质
⑵溶解核内DNA:
⑶析出2mol/LNaCl溶液中的DNA
⑷DNA粘稠物的再溶解
⑸提取杂质较少的DNA白色乳状丝状物
⑹DNA的鉴定
13.关于DNA粗提取的实验材料的选择,也经过了多次实验效果的比较,最终选择鸡血做实验材料的原因是什么?请回答下列问题:
⑴鸡血细胞中红细胞,家鸡属于鸟类,新陈代谢旺盛,因而血液中细胞树木较多,可以提供丰富的。
⑵实验前由老师制备血细胞液供同学们做实验材料,而不用鸡全血,主要原因是。
⑶生活在牧区的人们,采集牛、羊和马血比较方便,若他们按实验要求完成实验步骤后,结果是,这是因为这些动物和人一样,成熟的红细胞中,但若改用动物肝脏做实验材料,实验能顺利进行。
这是因为。
⑷若选用动物肝脏做实验材料,在提取之前,最好增加程序,使组织细胞更易分离。