中和抗体推荐——neutralizing antibody, more than Nat Commun

人源性抗汉滩病毒中和活性抗体的制备和鉴定肾综合征出血热(hemorrhagic fever with renal syndrome,HFRS)是一种以发热、出血、急性肾功能损害为特征的急性传染病,通常由汉坦病毒(Hantaviruses,HTV)感染引起,在世界范围内广泛分布,中国是世界上发病人数最多的国家,而陕西省为我国HFRS的高发地区之一。

长期以来,我国通过对重点疫区人群进行疫苗接种预防HFRS的发生,因此需要对HFRS疫苗的免疫效果进行定期评价。

抗汉滩病毒(Hantaan virus,HTNV)抗体特别是中和抗体(neutralizing antibody,NAb)可直接与HTNV结合,参与机体对病毒的免疫清除。

鼠源性抗体因为异源性反应很难应用于人体,目前很少有人源性抗体用于HFRS的紧急预防和治疗,因此,制备具有潜在中和活性的人源性抗体十分必要。

本研究在评价了HFRS抗体检测试剂盒和疫苗接种者免疫接种效果的基础上,建立了疫苗接种者的B淋巴母细胞系(Blymphoblastoid cell lines,BLCLs)。

将NAb阳性的疫苗接种者和HFRS患者的BLCLs抗体基因重组到噬菌体载体上,建立噬菌体Fab抗体库,筛选HTNV特异性抗体和中和活性抗体,经表达、纯化和鉴定获得了具有潜在中和活性的人源性抗HTNV Fab抗体,为HFRS的紧急预防、治疗以及疾病的诊断提供新的途径。

为此,我们进行了以下实验:第一部分:HFRS疫苗接种者和患者BLCLs的建立、筛选和克隆化首先,基于HTNV抗体检测的需要,评价了国产与进口HFRS IgG抗体ELISA试剂盒的性能,结果表明国产试剂盒敏感性高,进口试剂盒特异性强。

然后,采集疫苗接种者的血液标本,应用EB病毒(Epstein-Barr virus,EBV)转化技术建立了70株疫苗接种者BLCLs,检测了疫苗接种者的血清标本和BLCLs培养上清中HTNV特异性抗体,评价了咸阳地区HFRS疫苗接种的免疫效果。

1.内毒素：即G-菌细胞壁外膜中的脂多糖，由O特异性多糖（O抗原，种特异性），核心多糖（属特异性）和脂质A（无特异性，毒性及生物学活性成分）三个部分组成。

当细菌存活时，LPS是细胞壁结构成分，没有毒性作用，当细菌死亡，人工破坏菌体，LPS游离出来发挥毒性作用。

2.L型细菌：细菌细胞壁缺陷型。

在理化或生物因素作用下，细菌胞壁中的肽聚糖的合成被抑制或直接破坏，这种细胞壁受损的细菌需在高渗的环境下可以存活。

呈现出多形性，格兰染色多呈阴性，在琼脂平板上形成中间较厚，四周较薄的荷包蛋菌落。

3.荚膜：许多细菌细胞壁外围一层较厚，黏性，胶冻样物质，普通染色不易着色，与四周有明显界限，称为荚膜，功能主要为抗吞噬，粘附和储留水分。

4.芽胞：某些细菌在一定条件下，在菌体内部形成一个圆形或卵圆形的小体，是细菌的休眠形式，称为芽胞，能产生芽胞的都是G+菌（炭疽在有氧形成芽胞，破伤风在厌氧条件形成）5.热原质：也称致热源，是细菌合成的一种注入人体或动物内引起发热的物质，产生热原质的物质大多G-，本质是LPS，蒸馏法去除热原质效果最好。

6.消毒：杀死物体上病原微生物的方法，并不一定能杀死细菌的芽胞。

7.灭菌：杀灭物体上所有微生物的方法，包括杀灭细菌芽胞在内的病原微生物和非病原微生物。

8.高压蒸汽灭菌法：是杀死包括芽胞在内的一切微生物最有效方法，常设定在121.3度，用时15-20min。

9.质粒：存在于细菌染色体以外，能进行自主复制的遗传因子, 是环状闭合的双链DNA, 对细菌的遗传性状有着重要的影响。

10.噬菌体:噬菌体是感染细菌、真菌、放线菌或螺旋体等微生物的病毒。

11.毒性噬菌体：能在宿主菌细胞内复制增殖，产生许多子代噬菌体，并最终裂解细菌，称为毒性噬菌体。

12.温和噬菌体：噬菌体基因与宿主菌染色体整合，不产生子代噬菌体，但噬菌体DNA 能随细菌DNA复制，并随细菌的分裂而传代，称为温和噬菌体或溶原性噬菌体。

13.前噬菌体：整合在细菌基因组中的噬菌体基因组称为前噬菌体。

1.Plasmid(质粒):是细菌染色体外的遗传物质,存在于细胞质中,为闭合的环状双股DNA,带有遗传信息,控制细菌的某些特定的遗传性状.2.Colony(菌落):单个细菌经一定时间培养后形成的一个肉眼可见的细菌集团称为菌落.3.Prophage(前噬菌体):在溶原状态下,整合在细菌染色体上的噬菌体基因组称为前噬菌体.4.Conjugation(接合):细菌通过性菌毛相互连接沟通,将遗传物质(主要是质粒DNA)从供体菌转移给受体菌,使后者获得前者的部分遗传性状的过程.5.Lysongenic conversion(溶原性转变):温和噬菌体的DNA作为一种外源性基因与细菌染色体通过溶原性整合而重组,使细菌的遗传结构发生改变而导致细菌性状的改变.6.Bacteremia(菌血症):在局部生长繁殖的病原菌一过性或间歇性进入血流,但未在血中繁殖,全身中毒症状轻.7.Endotoxemia(内毒素血症):革兰阴性菌侵入血流,并在血中大量繁殖.死亡分解释放出大量的内毒素或细菌在局部繁殖后,分解释放大量的内毒素进入血液,引起如发热,DIC,休克等轻重不同的临床症状.8.Toxoid(类毒素):外毒素可用人工方法处理脱毒,但保留抗原性,用于人工主动免疫的制剂称为类毒素.9.Tuberculin test(结核菌素试验):用旧结核菌素/纯蛋白衍生物为试剂做皮肤实验,通过观察注射局部是否出现红肿,硬节等迟发型超敏反应,判断机体有无结核分枝杆菌感染和对该菌的免疫力,感染过结核分枝杆菌或接种过卡介苗者一般都出现阳性反应.10.Inapparent infection(隐性感染):当机体抗感染免疫力较强或入侵细菌数量不多,毒力较弱,感染后对机体损害较轻,不出现或出现不明显的临床症状,又称亚临床感染.11.SPA(葡萄球菌A蛋白):是葡萄球菌细胞壁的一种表面蛋白,能与人及某些哺乳类动物的IgG分子Fc段发生非特异性结合,与吞噬细胞的Fc受体争夺Fc段,从而降低了抗体的调理吞噬作用,起到了协助细菌抗吞噬的作用.12.Nucleocapsid(核衣壳):病毒核心与衣壳共称为核衣壳,是病毒所必需的基本结构,病毒核酸构成核心,包围在核心周围的蛋白质构成衣壳.13.Abortive infection(顿挫感染/流产性感染):是指有些宿主细胞不能全部提供病毒复制所需的必要因子,致使所复制的病毒为不完整的、无感染性的病毒颗粒或亚颗粒.这种感染过程称称流产性感染.14.Horizontal transmission(水平传播):病毒在人群中不同个体之间的传播称为水平传播.15.Slow viral infection(慢发病毒感染):病毒或致病因子感染后,经过很长的潜伏期,有的可达数年或数十年之久,以后出现慢性进行性疾病,直至死亡.16.Viral neutralizing antibody(病毒中和抗体):指针对病毒某些表面抗原的抗体,此抗体可与细胞外游离的病毒结合后阻碍病毒吸附,并能消除或减弱病毒感染性,成为中和抗体.17.Antigenic shift(抗原转换):指甲型流感病毒每隔十数年发生抗原性大变异(或质变)而产生新的亚型.抗原转变可分为大组变异(HA和NA均变异)和亚型变异(仅HA变异．而NA未变或小变异)两种.18.HBeAg(乙肝病毒e抗原):由HBV的前C和C基因编码的一种可溶性蛋白,可存在于感染者血液中,其消长与病毒体及DNA聚合酶的消长基本一致,故HBeAg可作为体内HBV复制及血液具有强感染性的一个指标.19.HIV(人体免疫缺陷病毒):属逆转录病毒科,核心为单正链RNA二聚体,含有逆转录酶,是获得性免疫缺陷综合症的病原体,主要通过性接触,血液和垂直传播三种方式传播.20.Prion(朊病毒):又称传染性蛋白粒子.其主要成分是一种蛋白酶抗性蛋白,对各种理化作用的抵抗力强,不含核酸.它具有传染性,潜伏期长,在人和动物中引起以海绵状脑病为特征的致死性中枢神经系统的慢性退行性疾病.21.Widal test(肥达氏试验):系用已知的伤寒杆菌O、H抗原和甲、乙型副伤寒杆菌的H抗原,与不同稀释度的待检血清作定量凝集试验,根据抗体的含量和动态变化以辅助临床诊断伤寒、副伤寒的一种血清学试验.22.IMViC test(IMViC试验):吲哚试验(I),甲基红试验(M)、VP试验(V)、柠檬酸试验(C)四种试验常用于肠道杆菌的鉴别,合称IMViC试验.23.TAT(破伤风抗毒素):能中和破伤风毒素的特异性抗体.主要用于破伤风感染的治疗和紧急预防.。

DOI: 10.3969/j.issn.1673-713X.2021.03.009·综述·蛋白多肽类药物和单抗药物免疫原性评价方法及研究进展王慧敏，闻镍，王晓霞，刘丽，刘会芳免疫原性是指药物刺激机体产生特异性抗体或致敏淋巴细胞的性质[1]。

许多生物药物在体内都具有免疫原性，对动物或人给予蛋白多肽类药物或单克隆抗体（简称单抗）药物后可能会引起机体产生抗药物抗体（anti-drug antibody，ADA）。

ADA 会对药物暴露、药物代谢动力学特征、药效、药物毒性作用等造成影响，主要包括：ADA 与药物结合，可能增加或减少药物的清除、影响血浆半衰期和组织分布、改变药物的暴露水平和药代动力学特征；ADA 降低药物暴露水平可能使非临床毒理研究中药物毒性作用被部分掩盖，影响对药物毒性作用的评价及对临床研究中起始剂量的评估；中和抗体（neutralizing antibody，NAb）会中和药物的活性，降低药物的药效作用；ADA 与药物及内源性同系蛋白结合后，可能会导致该蛋白缺陷综合征，引起相应毒性作用；对药物的免疫应答可能会导致过敏反应、自身免疫等，ADA-药物免疫复合物沉积可能引起免疫病理变化和相关不良反应。

因此，在非临床药代动力学、药理和毒理研究中评价免疫原性有助于对研究结果作出更加合理的解释，是生物药申报临床试验的重要内容。

同样，免疫原性评价也是蛋白多肽类药物和单抗药物临床研究中重要的评价项目，是监管部门关注的重要内容。

在生物类似药物研发中，也是进行相似性比对的主要指标之一。

EMA、FDA、NMPA 相关技术指导原则中都要求检测此类药物的免疫原性，检测的要求越来越严。

蛋白多肽类和单抗药物免疫原性评价主要包括判定ADA 的存在与否、ADA 水平（抗体滴度）、是否具有中和能力、抗体产生比例和发展变化情况等。

有多种方法和技术可用于ADA 检测。

蛋白多肽类和单抗药物由于给药剂量大、半衰期长，循环中的高浓度药物给免疫原性的评估带来了很大挑战。

常用病原生物学与免疫学中英文词汇AAcari 蜱螨亚纲acetabulum 腹吸盘acid-fast stain 抗酸染色Actinomyces 放线菌属Aedes albopictus 白纹伊蚊aerial hypha 气生菌丝agar 琼脂agglutination 凝集反应alkaline phosphatase, AP 碱性磷酸酶allergen 变应原alpha-fetal protein, AFP 甲胎蛋白amastigote 无鞭毛体amoeba 阿米巴anaerobe 厌氧菌Ancylostoma duodenale 十二指肠钩口线虫Anopheles minimus 微小按蚊Anopheles sinensis中华按蚊antibody,Ab 抗体antigen, Ag 抗原antistreptolysin O, ASO 抗链球菌溶血素“O”antitoxin抗毒素apoptosis细胞凋亡Arachnida 蛛形纲Ascaris lumbricoides似蚓蛔线虫asepsis无菌autoclave高压蒸气灭菌器autolysin 自溶酶BB cell receptor, BCR B细胞受体Bacillus 杆菌Bacillus anthracis炭疽杆菌bacteriophage, phage 噬菌体bacteriostasis 抑菌bacterium细菌Balantidium coli 结肠小袋纤毛虫basic medium 基础培养基basophil 嗜碱性粒细胞bed bugs 臭虫bioaerosol 生物气溶胶bio-hazard 生物危害Biological safety cabinets，BSCs 生物安全柜bio-safety containment 生物安全防护bio-safety containment for laboratories 生物安全防护实验室Bio-safety in Microbiological and Biomedical Laboratories，BMBL 微生物和生物医学实验室的生物安全bio-safety level, BSL 生物安全水平blastospore 芽生孢子Blattella gemanica 德国小蠊blepharoplast 毛基体blood fluke 血吸虫body nuclei 体核Borrelia 疏螺旋体Broth 肉汤培养基Brugia malayi 马来布鲁线虫CC．trachomatis 沙眼衣原体Campylobacter jejuni 空肠弯曲菌Candida albicans白色念珠菌（白假丝酵母菌）capsule 荚膜cellular immune 细胞免疫cephalic space 头间隙cercaria 尾蚴cestode 绦虫Chlamydia 衣原体Chlamydia pneumoniae 肺炎衣原体chromosome 染色体chromatoid body 拟染体Chrysomyia megacephala 大头金蝇ciliate 纤毛虫circumoval precipitin （COP）环卵沉淀实验Clonorchis sinensis华支睾吸虫Clostridium botulinum肉毒梭菌Clostridium perfrigens 产气荚膜梭菌Clostridium tetani 破伤风梭菌coagulase 凝固酶coccus 球菌cockroaches 蜚蠊,蟑螂colony forming unit, CFU 菌落形成单位complement, C 补体Corynebacterium diphtheriae白喉棒状杆菌crescentic space 半月形空隙cross antigen 交叉抗原cryptococcus 隐球菌Cryptosporidium parvum 微小隐孢子虫Culex pipiens pallens 淡色库蚊Culex tritaeniorhynchus三带喙库蚊culture medium 培养基cyst 包囊cysticercus bovis 牛囊尾蚴cysticercus cellulosae 猪囊尾蚴cytokine, CK 细胞因子cytopharynx 胞咽cytoprocte 胞肛cytostome 胞口cytotoxic T lymphocyte, CTL或Tc 细胞毒性T细胞Ddarkfield microscopy 暗视野显微镜Demodex folliculorum毛囊蠕形螨Demodex brevis皮脂蠕形螨Dermatophytes 皮肤癣菌differentiated medium 鉴别培养基Direct agglutination 直接凝集反应disinfect 消毒disk diffusion susceptibility test纸片法药物敏感实验double agar immunodiffusion test 双向琼脂免疫扩散实验drug-resistant bacterium 耐药菌dysentery bacterium 痢疾杆菌EEscherichia coli大肠埃希菌Echinococcus geanulosus 细粒棘球绦虫ectoplasm 外质egg 虫卵egg shell 卵壳electron microscopy 电子显微镜elementary body 原体elevated shoulder 肩峰embryophore 胚膜Encephalitis B virus 流行性乙型脑炎病毒endoplasm 内质enterohemorrhagic E.coli, EHEC 肠出血型大肠埃希菌enteroinvasive E.coli, EIEC 肠侵袭型大肠埃希菌enterotoxigenic E.coli，ETEC 肠产毒素型大肠埃希菌Enterovirus肠道病毒Enzyme linked immunosorbent assay, ELISA 酶联免疫吸附试验Enzyme linked immunospot assay, ELISPOT酶联免疫斑点试验Entamoeba coli 结肠阿米巴Entamoeba histolytica 溶组织内阿米巴Enterobius vermicularis 蠕形住肠线虫Entamoeba gingivalis齿龈内阿米巴eosin and methylene blue 伊红美兰平板（EMB平板）eosinophil 嗜酸性粒细胞epidermophyton表皮癣菌erythrocyte 红细胞FFasciolopsis buski 布氏姜片吸虫female 雌虫fertilized egg 受精卵filamentous colony 丝状菌落filariform larvae 丝状蚴filament substance 丝状物flagellum 鞭毛flagellate 鞭毛虫fleas 蚤flow cytometry, FCM 流式细胞术fluorescence quantitative polymerase chain reaction, FQ—PCR 荧光定量聚合酶链反应fluorescent treponemal antibody-absorption test FTA-ABS 荧光密螺旋体吸收试验fly，flies 蝇fungus，fungi 真菌Ggametocyte 配子体Giardia lamblia 蓝氏贾第鞭毛虫Giemsa staining 姬姆萨染色glycogen vacuole 糖原泡gnathosoma 颚体gonococcus 淋球菌Gram’s stain革兰染色法gravid proglottid 妊娠节片gynecophoral canal 抱雌沟HHBcAb 乙型肝炎核心抗体HBeAb 乙型肝炎e抗体HBsAg 乙型肝炎表面抗原hemolytic plaque forming cell assay，HPFC溶血空斑形成细胞检测hepatitis A virus, HA V 甲型肝炎病毒hepatitis B virus, HBV乙型肝炎病毒hepatitis B virus-associated glomerulonephritis，HBV-GN 乙型肝炎病毒相关性肾炎hepatitis C virus, HCV 丙型肝炎病毒herpes simplex virus HSV 单纯疱疹病毒hexacanth larva 六钩蚴hooklet 小钩horseradish peroxidase, HRP 辣根过氧化物酶hot air sterilizer 干烤箱human immunodeficiency virus, HIV 人类免疫缺陷病毒hydatid sand 棘球砂hydatid cyst 棘球蚴Hymenolepis nana 微小膜壳绦虫hypersensitivity超敏反应hypha菌丝Iidosoma 躯体imago 成虫immature schizont 未成熟裂殖体immunoglobulin，Ig 免疫球蛋白inclusion 包涵体incomplete egg 不完整带绦虫卵Indamoeba butschlii布氏嗜碘阿米巴Influenza-virus 流行性感冒病毒initial body 始体Insecta 昆虫纲intermediate host 中间宿主intestinal fluke 肠吸虫iron hematoxylin stain 铁苏木素染色isolation culture 分离培养Ixodes persulcatus 全沟硬蜱JJapanese encephalitis virus日本脑炎病毒Kkaryosome 核仁kinetoplast 动基体Llaboratory-associated infection 实验室相关感染laminar air flow room LAFR 层流室langerhans cells, LC 郎格罕斯细胞larva 幼虫larva capcule 囊包幼虫lateral spine 侧棘lecthinase 卵磷脂酶Leishmania donovani 杜氏利什曼原虫Lentivirinae慢病毒亚科Leptotrombidium deliensis地里纤恙螨leukocyte differentiation白细胞分化抗原liver fluke 肝吸虫lice 虱Lowenstein-jensen medium 罗氏培养基Lucilia sericata 丝光绿蝇lung fluke 肺吸虫lyophilization 冷冻真空干燥法lysogenic bacteria 溶原性细菌Mmacrogametocyte 雌配子体macrophages, MΦ巨噬细胞malarial parasites 疟原虫malarial pigment 疟色素male 雄虫mature proglottid 成节mature schizont 成熟裂殖体Maure’s dots 茂氏小点measles virus麻疹病毒medical arthropods 医学节肢动物medical helminthology 医学蠕虫medical protozoa 医学原虫medium body 中体memory T cell 记忆T细胞meningococcus 脑膜炎球菌merozoite 裂殖子metacercaria 囊蚴metachromatic granule 异染颗粒microbes 微生物microfilariae 微丝蚴microgametocyte 雄配子体microhemagglutination assay for antibodies to Treponema pallidum MHA-TP 梅毒螺旋体抗体微量血凝试验microorganism 微生物minimal bactericidal concentration, MBC最低杀菌浓度minimal inhibitory concentration, MIC最低抑菌浓度miracidium 毛蚴mite 螨mitogen 丝裂原mold 霉菌monoclonal antibody, McAb单克隆抗体monocyte单核细胞mononuclear-phagocyte单核吞噬细胞mosquito 蚊mouthcapsule 口囊mucosal immune system MIS 粘膜免疫系统multiple drugresistant bacterium, MDR 多重耐药菌mumps virus 腮腺炎病毒Musca domesticia 舍蝇mycelium菌丝体Mycobacterium 分枝杆菌属Mycobacterium tuberculosis 结核分枝杆菌mycoplasma 支原体Mycoplasma pneumoniae肺炎支原体mycotoxins 真菌毒素NNecator americanus美洲板口线虫Negri body 内基小体Neisseria gonorrhoeae 淋病奈瑟菌Neisseria meningitides 脑膜炎奈瑟菌nematode 线虫neurotoxin神经毒素neutralizing antibody 中和抗体neutrophil 中性粒细胞nongonococcal urethritis, NGU 非淋菌性尿道炎normal flora of microbe 正常微生物群nucleus 细胞核nutrient medium 营养培养基Oobligate anaerobe专性厌氧菌operculum 卵盖oocyst 卵囊oral streptococcus 口腔链球菌oral sucker 口吸盘Ornithodoros papillies 乳突钝缘蜱ovary 卵巢ovum 卵细胞PP. aeruginosa铜绿假单胞菌Pagumogonimus skrjabini 斯氏狸殖吸虫Paragonimus westermani 卫氏并殖吸虫pathogen 致病菌，病原菌，病原体Pediculus humanus capitis人头虱Pediculus humanus corporis人体虱Penicillium 青霉菌peripheral blood monocuclear cells, PBMC 外周血单个核细胞Periplaneta americana 美洲大蠊phagocytes 吞噬细胞phagosome 吞噬体phytohemagglutinin, PHA 植物血凝素pinworm 蛲虫pilus或fimbriae 菌毛plaque forming cell, PFC 空斑形成细胞plasmid 质粒Plasmodium falciparum 恶性疟原虫Plasmodium vivax 间日疟原虫Plate 平板（平皿）Pneumocystis carinii卡氏肺孢子虫polymerase chain reaction, PCR多聚酶链反应precipitation reaction 沉淀反应promastigote 前鞭毛体protoscolex 原头节（原头蚴）psedocyst 假包囊pseudohypha 假菌丝pseudopodia 伪足Pthirus pubis 耻阴虱Pulex irritans致痒蚤pupa 蛹pyemia脓毒血症pyogenic coccus 化脓性球菌pyrogen 热原质pyrogenic exotoxin 致热外毒素Rrabies virus 狂犬病毒rapid plasma reagin, RPR 快速血浆反应素redia 雷蚴refractive granules 屈光颗粒rhinovirus 鼻病毒ring form 环状体Rotavirus 轮状病毒rubella virus风疹病毒roundworm 蛔虫SSabourand medium 沙保培养基Saccharomyces albicans白假丝酵母菌Salmonella 沙门菌属Salmonella-Shigella agar SS平板Sand flies 白蛉Sarcophaga sp麻蝇Sarcoptes scabiei 人疥螨SARS（severe acute respiratory syndrome,SARS）严重急性呼吸道综合症S.dysenteriae痢疾志贺菌S.hirschfeldii希氏沙门菌S.paratyphi A甲型副伤寒沙门菌S.schottmuelleri 肖氏沙门菌S.typhi伤寒沙门菌Schistosoma janonicum日本裂体吸虫scolex 头节schizont 裂殖体Schuffner’s dots 薛氏小点selective medium 选择培养基semi-solid medium 半固体培养基serological reaction 血清学反应sheep red blood cell, SRBC 羊红细胞Shigella志贺菌属single agar immuno diffusion test单向琼脂免疫扩散slant 斜面small wart 小疣solid medium 固体培养基sparganosis 裂头蚴spiral bacterium 螺形菌Spirochete螺旋体Spirometra mansoni曼氏迭宫绦虫spore 芽孢，孢子sporocyst 胞蚴sporozoa 孢子虫sporozoite 子孢子staphylococcus 葡萄球菌sterilization 灭菌stormy fermentation 汹涌发酵streptoavidin, SA 链霉亲和素streptococcus链球菌Streptococcus pneumoniae 肺炎链球菌streptolysin O, SLO 链球菌溶血素“O”strobila 链体superantigen, sAg 超抗原TT cell receptor, TCR T细胞受体T helper cell, Th 辅助T细胞T. rubrum 絮状表皮癣菌T lymphocyte transformation test T淋巴细胞转化实验tadpole-like embrgo 蝌蚪状胚胎Taenia saginata肥胖带吻绦虫Taenia solium链状带绦虫thick film 厚血膜thin film 薄血膜thread-like larva 线形幼虫ticks 蜱titer 滴度，效价toxeamia 毒血症Toxoplasma gondii 刚地弓形虫transmission electron microscope，TEM 透射式电镜trematode 吸虫Treponema. pallidum苍白密螺旋体(梅毒螺旋体) treponemal pallidum immobilizing，TPI 梅毒螺旋体制动试验Trichinella spiralis旋毛形线虫Trichomonas vaginalis阴道毛滴虫trichophyton毛癣菌Trichuris trichiura毛首鞭形线虫trophozoite 滋养体UU. urealyticum溶脲脲原体undulating membrane 波动膜unfertilized egg 未受精卵Vvacuole 空泡Vibrio cholerae霍乱弧菌vegetative hypha 营养菌丝vegetative mycelium 营养菌丝Vibrio弧菌属virus 病毒vaccine 疫苗vitelline membrane 卵黄膜WWestern blotting 蛋白印迹whipworm 鞭虫Widal test 肥达实验Wright staining 瑞氏染色Wuchereria bancrofti 班氏吴策线虫XXenopsylla cheopis 印鼠客蚤Yyeast酵母菌yeast type colony 酵母型菌落yeast-like colony 类酵母菌落yolk cell 卵黄细胞Zzoonosis 人兽共患病β-lactamase β-内酰胺酶。

20世纪60年代初,WHO 开始推荐使用小鼠脑内中和法(Mouse neutralization test ,MNT 测定抗狂犬病病毒中和抗体。

但自80年代中期开始,发现MNT 法实验时间较长(至少需14d ,受动物质量、攻击病毒的滴度、实验人员的操作技术和经验等多种因素的影响,重复性、一致性和灵敏性均较差,而且需要使用大量动物,不符合国际上动物实验3R 的原则[1]。

为此,WHO 在许多国家实验的基础上,推荐快速、精确和重复性好的体外检测抗狂犬病病毒中和抗体的方法,即快速荧光灶抑制试验(Rapid flu -orescence focus inhibition test ,RFFIT 和荧光抗体病毒中和试验(Fluorescent antibody virus neutralizationtest ,FAVNT [2,3]。

本文对RFFIT 法与MNT 法的相关性进行了分析,现将结果报道如下。

作者单位:1中国药品生物制品检定所病毒一室(北京100050;2Institut Pasteur,Paris,France.通讯作者:董关木,E -mail :gmdong@中国图书分类号R392Q33文献标识码A 文章编号1004-5503(200911-1145-04【实验技术】抗狂犬病病毒中和抗体效价快速荧光灶抑制试验(RFFIT 的建立及应用吴小红1李加1唐建蓉1Herv éBourhy 2刘景华1曲效民1曹守春1董关木1【摘要】目的建立抗狂犬病病毒中和抗体效价的快速荧光灶抑制试验(RFFIT ,验证其与小鼠脑内中和法(MNT 的相关性,并用于马抗狂犬病病毒血清(ERIG 和人狂犬病免疫球蛋白(HRIG 及狂犬病疫苗免疫后血清中和抗体效价的测定。

方法待测血清或免疫球蛋白在96孔板中作3倍系列稀释,与能感染80%~95%细胞量的攻击病毒混合后,37℃体外中和1h ,接种BSR 细胞,培养24h 后荧光染色,荧光显微镜下读取结果。

2024狂犬病暴露前预防专家共识要点（全文）狂犬病（rabies）是由丽沙病毒属（Lyssavirus）病毒感染引起的一种人兽共患急性传染病。

2021年国际病毒分类委员会（International Committee of Taxonomy Virus，ICTV）的最新分类明确了17种丽沙病毒，根据遗传构成、血清学交叉反应性等，可分为三个遗传谱系。

其中狂犬病病毒（rabies virus，RABV）为该属的代表种，属于遗传谱系Ⅰ，是引起人间狂犬病的最主要病原。

目前的狂犬病疫苗通常只对遗传谱系Ⅰ的丽沙病毒有效。

狂犬病目前仍缺乏效果满意的治疗方法，一旦发病，病死率几乎100%。

现全球有100多个国家和地区有狂犬病流行，大部分发生在亚洲和非洲的发展中国家，每年造成约59 000例死亡，是致死人数最多的动物源性传染病之一。

其中，亚洲国家的狂犬病病例数居世界首位，估计年死亡例数达30 000例，由于部分亚洲国家狂犬病病例可能存在漏报，实际死亡例数可能更多。

我国是狂犬病流行地区，十余年来，随着相关法律法规和疫情监测体系的不断完善、狂犬病暴露后处置的可及性和规范性不断提高，以及犬只管理、流浪动物救助工作的不断加强，我国狂犬病发病率呈逐年下降趋势。

2021年我国共有116个县报告157例狂犬病病例，已经达到了狂犬病控制阶段，但距离世界卫生组织（WHO）、世界动物卫生组织（OIE）、世界粮农组织（FAO）和全球狂犬病控制联盟（GARC）共同提出的2030年消除犬传人的狂犬病的目标仍有一定差距。

预防狂犬病的主要策略包括：（1）对犬、猫等动物进行免疫预防，这是公认的最具成本效益的方法，WHO相关研究表明，当一个地区的犬免疫覆盖率达到70%以上，可有效阻断区域内的狂犬病传播；（2）暴露后预防（postexposure prophylaxis，PEP），是我国目前主要的预防狂犬病措施，根据我国人用狂犬病疫苗的使用量估计全国年暴露人次数逾4 000万；（3）暴露前预防（pre-exposure rabies prophylaxis，PrEP），主要是指暴露前免疫预防，由于目前国内缺乏专门、全面论述狂犬病PrEP的指南或规范，我国的临床医师及人民群众对狂犬病PrEP的认识相对不足，狂犬病病毒高暴露风险的人群PrEP普及率较低。

《药物毒理学》复习要点整理《药物毒理学》复习要点整理许华⽼师部分1、药物毒理学: 研究药物对机体的毒性反应、中毒机制及其防治⽅法的⼀门独⽴的学科，它也是药理学研究不可缺少的内容之⼀。

是研究药物对⽣命有机体有害作⽤的科学是毒理学的分⽀学科之⼀是⼀门与药学、药理学、临床药物治疗学密切相关和交叉的药学边缘学科。

2、毒物: 指在⼀定条件下，以较⼩剂量进⼊机体就能⼲扰正常的⽣化过程或⽣理功能，引起暂时或永久性的病理改变，甚⾄危及⽣命的化学物质。

3、终毒物: 指与内源靶分⼦（如受体、酶、DNA、微丝蛋⽩、脂质）反应或严重地改变⽣物学（微）环境、启动结构和（或）功能⽽表现出毒性的物质。

4、治疗指数: 药物的LD50和 ED50的⽐值称为治疗指数 (therapeutic index,TI），⽤以表⽰药物的安全性。

TI= LD50/ ED50此值越⼤越安全。

但仅仅⽤TI来判断两个药物的安全性并完全可靠5、毒性反应 : 在剂量过⼤、⽤药时间过长或体内药物蓄积过多时对机体的危害性的反应。

如异烟肼－肝损伤；氯霉素－灰婴综合征等.6、毒代动⼒学: 运⽤药代动⼒学的原理和⽅法，定量地研究毒性剂量下药物在动物体内的吸收、分布、代谢、排泄过程及其特点, 进⽽探讨药物毒性发⽣和发展规律性的⼀门学科。

7、半数致死量LD50: 指动物单次⼤剂量给药或在24⼩时内接受多次⼤剂量受试药物后，引起50%动物死亡的剂量。

8、安全范围: LD5和ED95 的⽐值，称作安全范围。

MOS=LD5/ED9越⼤越安全9、最⼤耐受量(MTD):指动物单次⼤剂量给药或在24⼩时内接受多次⼤剂量受试药物后,不引起动物死亡的最⼤给药量的试验。

10、停药反应: 长期⽤药因减量太快或突然停药时引起的不良反应，包括“反跳现象”（原病复发或加重）及“停药症状”(病⼈出现⼀些原来疾病没有的症状)。

11、镇痛剂肾病: Analgesicnephropathy，AN，指由于长期滥⽤或⼤剂量使⽤⾮甾体镇痛药物，所引起的慢性⼩管间质损害和（或）肾乳头坏死，此种疾病被称为镇痛剂肾病。

病原生物学名词解释&英文词汇部分英文词汇应不属名词解释范畴，故未做整理。

微生物学部分：1. 非细胞型微生物acellular microbe2. 原核细胞型微生物Prokaryote microbe3. 真核细胞型微生物eukaryote microbe4. 脂多糖LPS ：是G-菌的内毒素，由脂质A、核心多糖和特异多糖等三部分组成。

其中脂质A为内毒素主要毒性部分。

5. 荚膜capsule6. 菌毛pilus（or fimbria）7. 芽孢spore8. 鞭毛fllagellum9. L型细菌：细菌在溶菌酶和青霉素的作用下，细胞壁肽聚糖直接破坏或合成被抑制，进而形成一种细胞壁缺失或缺陷的细菌。

但在高渗环境中仍能存活。

10. 中介体：细菌细胞膜向细胞质内陷入、折叠形成的囊状物，其功能类似线粒体，故称拟线粒体。

11.质粒plasmid ：是细菌染色体以外的遗传物质，为双股闭合环状DNA分子，可独立自行复制，也可整合到细菌染色体上。

12. 异染颗粒：又称迂回体，最早在迂回螺菌中被发现，并可用亚甲蓝或甲苯胺蓝等染料染成红紫色。

颗粒大小为0.5—1.0μm，是无机偏磷酸的聚合物。

有鉴别细菌的作用。

13.毒性噬菌体：能在宿主细胞内复制增殖，产生许多子代噬菌体，并最终使细菌裂解的噬菌体。

14. 溶原状态、温和噬菌体：有些噬菌体感染细菌后不增殖，不裂解细菌，其核酸整合到细菌染色体上，并能与染色体一起复制、传代。

这类噬菌体称为温和噬菌体。

15. 前噬菌体：温和噬菌体整合到宿主菌的基因组，称为前噬菌体。

16. 溶原性细菌：染色体上带有前噬菌体的细菌。

17. R质粒：使细菌对抗菌药物产生耐药性。

分两类，接合性R质粒和非接合性r质粒。

18. F质粒：编码细菌的性菌毛的质粒，又称致育因子。

带有F质粒的细菌为雄性菌(F+)。

19. H-O变异：使细菌失去鞭毛的变异称为H-O变异。

20. S-R变异：菌落由光滑型变为粗糙型称为S-R变异。

真菌1.真菌的致病性：真菌性感染；真菌性超敏反应；真菌毒素中毒。

P3322.白假丝酵母所致疾病：皮肤、粘膜感染——鹅口疮、口角糜烂、外阴与阴道炎；内脏感染——肺炎、支气管炎、肠炎、膀胱炎、肾盂肾炎等，偶尔还可引起败血症。

中枢神经系统感染——脑膜炎、脑膜脑炎、脑脓肿等。

3.新生隐球菌所致疾病：P341病毒的形态与结构：1.病毒（virus）：一类体积微小，结构简单，只含一种类型核酸（DNA或RNA），严格细胞内寄生，在活的易感细胞内以复制方式增殖的非细胞型微生物。

2.病毒的特点：体积微小，20 - 300 nm，可通过除菌滤器；结构简单，无细胞结构，由核酸和蛋白质组成；只含有一种核酸（DNA或RNA）；严格寄生在活细胞内，在无生命培养基上不能生长；以复制方式繁殖；对抗生素不敏感3.病毒体（virion)：有感染性的、成熟的、完整的病毒颗粒。

大小为20-300 nm4.病毒的形态：球形、类球形（大多数人类和脊椎动物病毒）；子弹状（狂犬病毒）；丝状（马尔堡病毒、埃博拉病毒）；砖块状（痘病毒）；蝌蚪状（噬菌体）；杆状（多种植物病毒）5.病毒的结构：特殊结构：包括包膜（由脂质和糖蛋白组成）和触须（纤维突起，仅有腺病毒有触须）基本结构：核衣壳，包括核酸（DNA或RNA）和蛋白衣壳（由壳粒组成）。

6.按核酸类型将病毒分为六大类：双链DNA病毒（大多数人和动物DNA病毒，例如：HBV,疱疹病毒）单链DNA病毒（TT病毒，SEN病毒）正单链病毒（脊髓灰质炎病毒，HAV, HCV, HEV）负单链病毒（大多数有包膜的RNA病毒，例如：流感病毒）双链RNA病毒（呼肠病毒）逆转录病毒（HIV, HTLV-I）7.衣壳(capsid)的对称类型：20面体立体对称（球形病毒）；螺旋对称（丝状病毒、弹状病毒）；复合对称（蝌蚪状病毒、砖形病毒）8.病毒衣壳的功能：保护病毒核酸, 免遭核酸酶及其他因素破坏；可特异性地吸附于易感细胞受体，并介导病毒核酸进入宿主细胞；构成病毒的特异性抗原。