紫外分光光度法含量测定计算公式

【含量测定】 照紫外-可见分光光度法(附录V A)测定。

1.仪器与测定条件： 室温：____℃ 相对湿度：____%

分析天平编号： ；水浴锅编号： ；

紫外可见分光光度计编号： ；

2. 对照品溶液的制备：

取西贝母碱对照品适量，精密称定，加三氯甲烷制成每1ml含_______mg的溶液，即得。

3. 供试品溶液的制备：

取本品粉末(过三号筛)约______g，精密称定，置具塞锥形瓶中，加浓氨试液3ml，浸润1小时。加三氯甲烷-甲醇(4：1)混合溶液40ml，置80℃水浴加热回流2小时，放冷，滤过，滤液置50ml量瓶中，用适量三氯甲烷-甲醇(4：1)混合溶液洗涤药渣2～3次，洗液并入同一量瓶中，加三氯甲烷-甲醇(4：1)混合溶液至刻度，摇匀,即得。

4.标准曲线的制备：

精密量取对照品溶液0.1ml、0.2ml、0.4ml、0.6ml、1.0ml，置25ml具塞试管中，分别补加三氯甲烷至10.0ml，精密加水5ml、再精密加0.05％溴甲酚绿缓冲液(取溴甲酚绿0.05g，用0.2mol／L氢氧化钠溶液6ml使溶解，加磷酸二氢钾1g，加水使溶解并稀释至100ml，即得)2ml，密塞，剧烈振摇，转移至分液漏斗中，放置30分钟。取三氯甲烷液，用干燥滤纸滤过，取续滤液，以相应的试剂为空白。

5.测定法：

照紫外-可见分光光度法 (附录Ⅴ A），在 nm波长处测定吸光度，以吸光度为纵坐标，浓度为横坐标，绘制标准曲线。依法测定吸光度，从标准曲线上读出供试品溶液中含西贝母碱的重量，计算，即得。

6.结果与计算

6.1 标准曲线制备： 对照品批号

纯 度 S

对照品来源 干燥条件

对照品称重W对(mg)

各浓度点稀释倍数f对

溶液浓度C对(ug/ml)

吸光度A对

紫外分光光度法测定常见水果维生素C的含量

1 序言

1.1 研究的目的和意义

维生素是必须得从食物中获取并且在物质代谢过程中起到了极其重要的作用的一种物质[1]。这类物质在生物体内不能合成或者合成量特别少，不足以维持生物体的正常的生理功能，虽然生物体对维生素的需要量很少，但所需量必须经常从食物中获得，所以我们研究维生素具有重要的意义[2]。维生素C是维生素的一种，维生素C在医学上被称作抗坏血酸，具有防治坏血病的功效，它是显示抗坏血酸生物活性的一类有机化合物的总称[3]。维生素C广泛的存在于我们常见的水果和蔬菜中，所以我们能够准确地测定出水果中地维生素C的含量，对我们的日常饮食和健康的生活具有重要的指导意义。

1.2维生素C含量的研究史

中国是人口众多的国家，人口密度相对较大，病毒发病率较高，我国在对抗病毒的战争中起到一个关键作用。SARS病毒首先出现在我们中国，死于SARS病毒的90%是我们中国人。国内对于维生素C的生产水平已经处于领先地位,可以彻底解决病毒的问题，只是生产的维生素C大部分都外销，我们中国人服用维生素C的平均剂量，远远低于一些欧美国家和日本。目前，围绕着维生素C含量的测定产生了一系列的研究课题和任务，因为它对人们日常饮食具有重要指导意义，成为了现今国内外研究的热点，现在主要有2,4-二硝基苯肼比色法、碘量法、高效液相色谱法、紫外分光光度法等来测定维生素C的含量。

1.2.1碘量法

武文等 [4]利用I₂的氧化性,用淀粉作指示剂,采用I₂作标准溶液进行直接滴定,这叫做直接碘量法。直接碘量法的滴定原理:维生素C分子中的二烯醇基可被I₂氧化成二酮基,当维生素C分子中的二烯醇基被I₂完全氧化后,过量的I₂与淀粉指示剂发生显色作用,使溶液变蓝,所以当滴定到溶液中有蓝色出现时，即为滴定终点。直接碘量法测定水果和蔬菜中维生素C的含量时，要求所测的果蔬溶液为无色和浅色的是样溶液或者提取液,该方法测维生素C不需要特殊的测定仪器,操作非常简便、准确。

计 量 标 准 技 术 报 告

计量标准名称 紫外可见分光光度计检定装置

计量标准负责人

建标单位名称（公章）新月市质量技术监督检验测试中心

填 写 日 期

目 录

一、建立计量标准的目的……………………………………………………… ( 01 )

二、计量标准的工作原理及其组成……………………………………( 01)

三、计量标准器及主要配套设备…………………………………………( 02 )

四、计量标准的主要技术指标………………………………………………( 03 )

五、环境条件…………………………………………………………………( 03 )

六、计量标准的量值溯源和传递框图………………………………………( 04 )

七、计量标准的重复性试验…………………………………………………( 05 )

八、计量标准的稳定性考核……………………………………………………( 06 )

九、检定或校准结果的测量不确定度评定…………………………………( 07 )

十、检定或校准结果的验证…………………………………………………( 11 )

十一、结论……………………………………………………………………( 12 )

十二、附加说明…………………………………………………………………( 12 )

一、建立计量标准的目的

紫外可见分光光度计属强制检定的计量器具，为了统一这些计量器具的量值，向企业提供全面可靠的计量服务，确保该计量器具不影响我市的工业安全生产，卫生环境检测，建立了这一社会公用计量标准。

二、计量标准的工作原理及其组成

紫外可见分光光度计检定装置根据JJG178-2007《紫外、可见、近红外分光光度计检定规程》提供的方法, 紫外、可见分光光度计的主要检定项目是波长准确度和透射比准确度两项。

陕西香菊药业集团有限公司GMP管理文件

题 目 紫外分光光度法检测标准操作规程 编 码：

XJWS/QC20403 共7页

第1页

制 定 审 核 批 准

制定日期 审核日期 批准日期

颁发部门 GMP办 颁发数量 2份 生效日期

分发单位 质量技术部、综合部 版 本 号 A/0

1. 目的：建立用紫外分光光度法检测药品质量的标准操作规程，保证标准操作。

2. 引用标准：《中华人民共和国药典》（2015年版四部）通则。

3. 范围：本标准适用于用紫外分光光度法进行的检测。

4. 责任人： QC检验员对本标准的实施负责，QC主管负责检查监督。

5. 内容：

5.1定义：紫外分光光度法是通过被测物质在紫外光区的特定波长处或一定波长范围内光的吸收度，对该物质进行定性和定量分析的方法，本法在药品检验中主要用于药品的鉴别、检查和含量测定。

5.1.1. 定量分析通常选择在物质的最大吸收波长处测出吸收度，然后用对照品或百分吸收系数计算出被测物质的含量，多用于制剂的含量测定。

5.1.2. 对已知物质定性可用吸收峰波长或吸光度比值作为鉴别方法；若化合物本身在紫外光区无吸收，而杂质在紫外光区有相当强度的吸收，或在杂质的吸收峰处该化合物无吸收，则可用本法作杂质检查。

5.2 原理：物质对紫外辐射的吸收，是由于分子中原子的外层电子跃迁所产生的，因此，紫外吸收主要决定于分子的电子结构，故紫外光谱又称电子光谱。有机化合物分子结构中如含有共轭体系、芳香环或发色基团，均可在近紫外区（200~400nm）或可见光区（400~760nm）产生吸收。通常使用的紫外分光光度计的工作波长范围为190~900nm，因此又称紫外-可见分光光度计。紫外吸收光谱为物质对紫外区辐射的能量吸收图。朗伯·比耳（lambert-Beer）定律为光的吸收定律，它是紫外分光光度法定量分析的依据，其数学表达式为：