UV2600型紫外分光光度计操作指导书

UV-2600 型紫外分光光度计操作指导书

1 概况

1.1 仪器概况：

UV-2600 型紫外分光光度计是由日本岛津 （ Shimadzu ）生产制造， 与功能强大的操作软件UVProbe

结合，操作简单方便，且符合 SH/T0181 方法的测量精度要求。

1.2 主要技术参数

波长范围 185nm～ 900nm ISR- 分辨率 0.1nm

图象面板 分球附件使（用积 2600Plus 时

① 220nm～ 1400nm）①

定期维护

检查表

波长准确性 0.3nm ±列名

②

谱带范围 2、5nm 、、 0.10.2 、 0.51 、 测光方式 双光束方式

杂散光 0.005% 以下 检测器 R-928 光电倍增管

测光范围 5Abs ～ -5 比色池 1cm

光源 卤素灯、氘灯 50W 单色器 切尼尔 - 特纳单色器

主电压 240V 主频率 50/60Hz

～ AC100V

1.3 使用条件 15 操作温度：～℃ 35805% 操作湿度： 30%～ 仪器结构 2 型紫外分光光度计和计算机组成。仪器由 UV-2600

操作步骤

3 开机

3.1

确认检查仪器样品室应无遮挡光路的物品。

在使用前先确认仪器和计算机的工作电源，

启动电脑

桌待分光光度计外侧的指示灯显示绿色时，然后开启仪器电源。后先开启计算机，

UVPROBE

面上的程序。 然后点击上图首先从下拉式菜单的仪器项上追加需要的仪器， 操作完毕如下图①所

示，通讯口的指定等都是（当然，的连接键②，这样仪器与计算机连接中间的通讯电缆的连接、

1

必须的，此处不再赘述）并开始下示的初始化面。

⑧①

⑨② ⑩ ③⑾④

⑿ ⑤

⒀ ⑥

⒁ ⑦

如一切顺利通过就可以开始测 5 分钟左右，进行一系列的检查和初置，初始化大约需要 定。

3.2 测定

首先选择测定的方式，在主菜单上能发现右图所示的各键，自左至右分别为：

①报告生成器：用于制作各种格式的报告。

②动力学测定方式：一般测定吸收值随时间的变化，通常用于酶反应随时间的变化。

③光度测定（定量）方式：可进行多波长、单波长、峰高或峰面积定量。校准曲线可使用多点、

单点、 K 因子等方法。由于具有自定义方程的功能， DNA/ 蛋白质测定等以前需 2

UVPROBE

要特殊选购的软件才能进行的工作，使用可自编程序进行测定。

④光谱测定方式：

可进行紫外可见区的光谱测定。

3.3 光谱测定方式

点击菜单栏上的键，即可出现如下图所示的选择测定条件的画面：

在此对话框中可选择波长测定的范围、扫描的速度、采样间隔等条件。 点击图中［试样准备］标签，可输入重量、体积、稀释因子、光程长等信息。点击图中［仪器参数］标签，可选择测定种类（吸收值、透射率、能量、反射率）以及 通带（狭逢）等条件。

、数据处理面板点击主菜单上的键，可分别开关图象面板（图中的左键）

（右键）。 数据处理面板

（中）以及方法面板

⑤ ④ ③ ②

方法面板

3.3.2 光谱测定

首先点击上图的②进行基线校正，然后点击③波长设置到 500nm ，再点击①自动调零。 3

为何要如此做？原因非常简单，由于一般的分光光度计的能量在

零可得到最正确的基线。 通常上述操作在开机后进行一次就足够了。

可开始测定。

3.4 光度测定方式

500nm 左右最强，在此自动调

此后，设置样品点击④键即

3.4.1 参数的设定

点击菜单栏中的键，出现下图：

测定的方式

的长定选择测波

选择和登录波长

此处显示的波长类型是“点”表示测定高度，如果选择的是范围，则需输入起始和结 束波长，

并可选择最大、最小、峰、谷或面积等作为定量的依据。 无论如何选择，波长都是必须的，并

要加入以后才有效。 、样在某单栏上有右列各键， 点击以后分别出现标

准表（最左） ） 2、品表（左 2 工作曲线图（右）和样品图（最右） 。

工作曲线 标准表

样品图 样品表

3.4.2 定量测定在此决定用工作曲线法定量，首先如前所述，选择了点及波长，然后在方法中选择校准， 4

因子法等。并选择多点、 单点或 K 进行定量测定也需要基线校正和自动调零， 方法如前面所述。

注意，无论是测定标准或样品室内逐个放入标准，点击上图下方的读数键即可。 此后， 接下去就

可测定未知必须输入名称才有效。标准测定完毕，工作曲线自动显示。未知样品， ，则在校准方

法中选择“原始数据”样品的浓度了。有时不测定浓度，只测定某些波长的读数， 在登录时选

择若干需要的波长， 即可测定各波长的读数。 ，再放入两只均 287.5nm 使用 SH/T0181 方法标准进

行光谱测定时， 点击③设置波长到将外面一只比色皿中装入需要测定的最后， 装有光谱纯异辛烷的比色皿，点击①自动调零， 样品，点击④键读数，即可测得在该波长处的样品的吸光度值。见下可从该图象上得到许多有用的信息，在工作曲线图象上点击鼠标右键，选择属性，

图：

见下图只需在这些显示的项目中做标记，相应的信息即出现在工作曲线图象的左下方。 的划圈

部分：

5

所谓

K 因子法实际上可称为已知工作曲线法（而且不局限于直线）

，即工作曲线回归方程的系数

和次数已知， 故而只要输入这些系数以及工作曲线的次数。

这一方法对工作曲线较为稳定的日常

分析非常有效。设置方法见下图：

动力学分析 3.5 ，得到如下图象：在菜单栏中点击方法键

，时间总量中需手动设置测定的时间。 由于是自动计此处的计时方式选择的是“自动” 此外可设

时方式，所以采样步长（图中为时间周期）和读数次数将根据时间总量自动设置。如果相反，置

波长以及活度计算的开始和结束时间。 设置大短的活度范围会出现错误信息。 会根计时方式选择

的是手动的话，则可输入时间周期和读取次数，而时间总量 （测定时间） 如果单纯据输入的时间

周期和读取次数自动计算得到。活度范围用于酶反应随时间的变化， 进行时间扫描的话，则可

不考虑活度范围。 ）两种方法。 选波长 l/2 或波长波长测定的波长栏内可选择单波长或双波长 （波

长 l-2 择后输入相应的波长。 数据处理面板、各键，主菜单中有如右自主到

右分别是时间扫描图象、 6

测定参数面板和酶活度图象。 点击各键屏幕出现相应的板块。 下图中表示已经测定得到数据的显示情况。

4

3 年年

○

检查维护项目

检查外观

2 年

1 每天 ○ 检查样品室

确认光源点灯时间

更换 W1（卤素）灯

D2 （氘）灯 ○

常见故障及排除 5

编号 检查位置

○

○

更换 ○性能确认 ○ ○

初始化室的异常状况（以下编号见前文初始化窗口中内容）

处理措施

5.1

⑧⑨

，进新仪

OFF关闭（）本产品的电源开关后再次打开

（）ON 器

初始化。

⑨、⑩、

样品室池架上是否有

）本产品的电源开关。

OFF暂时关闭（

）电源。

ON取出遮

⑿

遮挡光线的物品？

挡光线的物品后再次打开（

是否 W1观察光源室，

漏光？

W1 如果没有漏光将熄灭。

（ OFF暂时关闭（ ON）。

）本产品的电源开关后再次打开

7

灯。如果光源不亮，请更换

W1

光源的使用时间是否

超过使用寿命？

“配显示菜单的 “配置”，在 UVProbe 软件中单击 “仪器” 置”窗口后单击“点灯时间”选项卡。 ，请更换光源。如果各光源灯的点灯时间超过“灯寿命”

⑾、⒀

样品室池架上是否有遮挡光线的物品？

）本产品电源开关。暂时关闭（取出遮挡光线的物品后再次打开（

OFF）电源，对仪器进行

初始化。

ON

样品室盖是否敞开？

）本产品电源开关。暂时关闭（

行初 ON关闭样品室盖后再次打开（

OFF）电源开关，对仪器进

始化。