蛋白超滤操作规程
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重组蛋白质超滤浓缩和换液超滤浓缩和换液是重组蛋白质制备过程中常用的两个操作步骤。
本文将对这两个步骤进行详细介绍,以帮助读者了解其原理和操作方法,从而更好地进行蛋白质制备工作。
一、超滤浓缩超滤浓缩是指通过超滤膜将溶液中的大分子物质(如蛋白质)从小分子物质(如盐、溶剂)中分离出来,从而实现溶液浓缩的过程。
超滤膜是一种具有特定孔径大小的薄膜,可以选择性地阻止大分子物质通过,而允许小分子物质自由通过。
超滤浓缩的步骤如下:1. 准备超滤膜:选择合适的超滤膜,根据所需的分子量截留范围和操作条件来确定膜的孔径大小和材料。
2. 装置超滤系统:将超滤膜装置在超滤设备中,通常有两个腔室,分别为上腔和下腔。
上腔为溶液输入腔室,下腔为浓缩物输出腔室。
3. 装样:将待浓缩的溶液加入上腔中,打开上腔的进样阀门,使溶液进入超滤膜腔室。
4. 超滤:通过施加压力或负压,推动溶液中的小分子物质通过超滤膜,而大分子物质被截留在上腔中。
5. 浓缩:随着溶液中小分子物质的渗透,上腔中的溶液体积减小,浓度增加,从而实现溶液的浓缩。
6. 收集浓缩物:关闭进样阀门,打开下腔的出样阀门,将浓缩物收集。
超滤浓缩的优点是操作简单、快速,并且不需要添加化学试剂。
然而,需要注意的是,超滤浓缩可能导致蛋白质在浓缩过程中发生失活或聚集,因此在操作过程中要尽量减小蛋白质的接触时间和高压力的使用。
二、换液换液是指将蛋白质溶液中的缓冲剂、盐和其他杂质替换成新的缓冲液的过程。
换液的目的是为了调整溶液的pH值、离子强度和组成,以满足后续实验或应用的要求。
换液的步骤如下:1. 准备新的缓冲液:根据实验需求和蛋白质特性,选择合适的缓冲液,并调整其pH值和离子强度。
2. 装置换液系统:将蛋白质溶液加入换液设备中,通常有两个腔室,分别为上腔和下腔。
上腔为旧溶液输入腔室,下腔为新溶液输出腔室。
3. 换液:通过施加压力或负压,推动旧溶液中的缓冲剂、盐和杂质通过膜,而新的缓冲液进入腔室,实现溶液的换液。
超滤系统操作规程通用超滤系统操作规程通用一、安全操作规范1. 操作人员必须经过系统操作培训,并理解超滤系统的构造和工作原理;2. 操作人员必须身着合适的防护服装和防滑鞋,并佩戴所需的个人防护设备,如安全帽、耳塞、口罩等;3. 操作人员在操作过程中务必注意周围环境,避免发生安全事故;4. 严禁在操作时吸烟、饮食或饮酒等不安全行为;5. 操作结束后,必须及时清理操作现场和清洗工具设备。
二、超滤系统的启动和停机操作1. 启动操作1.1 确保超滤系统的进出口阀门处于关闭状态;1.2 检查系统的电源及控制设备是否正常工作;1.3 打开进水阀门,缓慢调节开度,使水流进入系统;1.4 启动水泵,并调节出水流量。
2. 停机操作2.1 关闭进水阀门;2.2 关闭出水阀门;2.3 停止水泵运行;2.4 关闭电源。
三、超滤系统的日常操作1. 系统监测1.1 监测系统的进出水压力,确保在正常范围内;1.2 监测系统的进出水流量,并与设计参数进行对比;1.3 监测系统的泵状态和滤芯状态,如有异常应及时处理。
2. 滤芯清洗2.1 定期检查滤芯的脏污程度,如果脏污程度较高,应进行清洗;2.2 清洗滤芯时,先关闭进出水阀门,并停止水泵运行;2.3 使用合适的清洗设备,如高压水枪等,喷洒清水对滤芯进行清洗;2.4 清洗完毕后,开启进出水阀门,启动水泵。
3. 维护操作3.1 定期检查系统的阀门、管道、仪表等设备,如发现漏水、松动等情况应及时处理;3.2 定期更换滤芯,避免滤芯使用过久导致滤效降低;3.3 定期清理系统的沉淀物、污垢等,保持系统的正常工作状态。
四、事故应急处理1. 发生事故时,操作人员要冷静应对,切勿慌乱;2. 确认事故范围,并对周围人员进行安全疏散;3. 关闭相关阀门和电源,以避免事故扩大;4. 在安全情况下,进行事故现场的排查和处理;5. 及时报告事故情况,并向相关部门请求支援。
五、超滤系统的维护保养1. 定期对超滤系统的设备和管道进行检查和维护,确保其正常工作;2. 定期更换滤芯和密封件,以保持系统的滤效和密封性;3. 定期清理系统的沉淀物和污垢,避免堵塞和破坏设备;4. 定期校准系统的仪表,保证工作参数的准确性;5. 定期对系统进行漏水、渗漏等方面的检查,保持系统的安全运行。
蛋白超滤设备工作流程英文回答:Protein Ultrafiltration Equipment Workflow.Protein ultrafiltration is a process used to separate proteins from other molecules in a solution. This processis used in a variety of applications, including the purification of proteins for research and therapeutic purposes.Here is a general overview of the proteinultrafiltration equipment workflow:1. Sample preparation: The first step is to prepare the sample for ultrafiltration. This may involve diluting the sample, adjusting the pH, or adding salts or other chemicals to the solution.2. Loading the ultrafiltration device: The preparedsample is then loaded into the ultrafiltration device. Ultrafiltration devices are available in a variety of sizes and formats, depending on the volume of the sample and the desired level of purification.3. Filtration: The ultrafiltration device is then placed in a centrifuge or other device that will apply pressure to the sample. This pressure forces the liquid portion of the sample to pass through a semipermeable membrane, while the proteins are retained by the membrane.4. Retentate collection: The liquid portion of the sample that passes through the membrane is called the permeate. The proteins that are retained by the membrane are called the retentate.5. Cleaning and sterilization: After theultrafiltration process is complete, the ultrafiltration device must be cleaned and sterilized. This is necessary to prevent contamination of the next sample.Here are some additional details about each step of theprotein ultrafiltration equipment workflow:Sample preparation: The sample preparation step is important because it can affect the efficiency of the ultrafiltration process. For example, if the sample is too concentrated, it may clog the ultrafiltration membrane.Loading the ultrafiltration device: Theultrafiltration device should be loaded according to the manufacturer's instructions. Overloading the device can lead to reduced efficiency and premature failure.Filtration: The filtration step is the most critical step in the ultrafiltration process. The pressure applied to the sample should be high enough to force the liquid portion of the sample through the membrane, but not so high that it damages the membrane.Retentate collection: The retentate should becollected in a clean container. The retentate can befurther processed to purify the proteins.Cleaning and sterilization: The ultrafiltration device should be cleaned and sterilized after each use. This is necessary to prevent contamination of the next sample.中文回答:蛋白质超滤设备工作流程。
超滤设备安全操作规程一、前言为确保超滤设备(以下简称设备)的安全运行和使用,经过认真研究和总结,制定了本安全操作规程。
本规程适用于所有使用设备的操作人员,必须严格遵守。
二、设备概述设备是一种利用超滤膜技术进行水处理的设备,主要用于去除水中的悬浮颗粒、胶体、细菌、病毒等杂质,可广泛应用于饮用水、工业用水、医药用水等领域。
设备结构简单、运行维护方便,是一种经济实用的水处理设备。
三、操作流程1. 设备启动(1)检查设备电源和控制系统是否正常。
确认无异常后可启动设备。
(2)检查设备进出水口是否正确连接。
确认无误后打开进水阀门。
(3)设备运行后,应观察压力表指针是否运转正常;同时检查设备是否存在泄漏现象。
(4)确认设备无异常后,即可打开出水阀门。
2. 设备停机(1)关闭出水阀门。
(2)关闭进水阀门。
(3)关闭设备电源。
3. 设备维护(1)经常清洗超滤膜,避免污染堵塞。
(2)设备运行一段时间后需进行一次彻底清洗,清洗过程中需按规范操作。
(3)注意设备的润滑和保养,定期检查设备各部件的磨损情况,及时更换损坏部件。
四、安全注意事项(1)严禁在设备运行过程中随意触碰、拆卸或操作未经许可的设备部件。
(2)加热设备使用时,应注意安全使用电源,防止发生电气事故。
(3)必须保持设备周围的通风良好,避免设备因过热而发生事故。
(4)设备内的水质应符合规范要求,禁止使用污染水源进行处理。
(5)操作设备时,应正确佩戴防护设备,如手套、口罩等。
五、灾难应对措施(1)设备发生泄漏时,应立即关闭进水阀门并通知相关负责人进行处理。
(2)设备突然停电时,应立即关闭进水阀门,等待正常供电后再启动设备。
(3)设备发生故障时,应及时通知设备维修人员进行处理。
六、结论本规程不但为设备的安全运行和使用提供了必要的保障,而且为人员的安全保证提供了保障。
所有设备操作人员必须严格遵守本规程,防止设备发生故障,确保设备的正常运行。
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蛋白超滤操作规程
1.选取适当规格的超滤管(orencia和Her1-ECD-his用10KD的超滤管,IL17A-his
用3KD的超滤管),先将之前保存在超滤管中的PBS倒掉,加入一些新的PBS,
7500g离心5min,洗一下超滤管。
2.倒掉超滤管中的PBS,加入要超滤浓缩的样品,7500g离心至截留部分剩余
200-300ul液体(orencia用时8min,Her1-ECD-his8min,IL17A-his16min)。
为了避免流下去的液体中可能含有蛋白而导致浪费,先将流下去的液体收集到
一个管中。
3.向上层截留住的液体中加入4mlPBS,混匀后7500g离心至截留部分剩余
200-300ul液体。
4.重复第3个步骤三次,取出最后一次截留住的200-300ul液体,以PBS作空
白,测浓度即可。
超滤管中的废液倒掉,加入PBS保存在4℃即可。
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超滤操作规程-仅供参考超滤系统操作规程(仅供参考)1超滤系统操作说明1.1超滤(UF)技术概述超滤是一种筛孔分离技术,超滤膜表面分布有一定形状和大小的孔,在压力作用下,溶剂水和小尺寸的溶质粒子透过膜而到达产水侧,大尺寸粒子组分被膜阻挡。
可用微孔模型来描绘超滤过程:以膜两侧的压差作为推动力,根据膜的孔径来选择分离溶液中所含的微粒或大分子。
X-Flow Aquaflex HP超滤膜的孔径最大为25nm。
超滤膜是由表面致密薄层(过滤分离层)和相对较厚的致密层的支撑层构成的不对称膜。
超滤能够有效地去除水中的悬浮物、胶体、有机大分子、细菌、微生物等杂质。
由于超滤具有优良的过滤性能,因而被广泛应用于各种水处理系统中。
1.2超滤的技术优点(1) 出水水质大幅度提高,可以去除绝大部分悬浮物、胶体、微生物、大分子有机物。
超滤产水污染指数SDI15<3。
(2) 出水水质稳定,不随时间和进水水质的变化而变化。
(3) 大幅减少后级RO膜的污染趋势,延长反渗透膜的使用寿命。
(4) 操作强度大大降低,易实现全自动控制。
(5) 大大节省占地面积。
1.3超滤装置的特性超滤(UF)装置是本系统预处理部分的关键设备,而超滤装置的核心部分为荷兰X-Flow公司生产的Aquaflex HP膜组件。
该膜组件由亲水性的聚醚砜中空纤维组成的,每一根膜组件由上千根中空纤维组成,膜组件长度为1.5m,外径220mm。
有效过滤面积为55 m2,截留分子量为150,000道尔顿。
原水在中空纤维的内部流动,而产水则是在原水流经膜的过程中逐渐由内壁向外壁透过(称为内压式),收集后,成为超滤产水从产水端排出。
被截留的悬浮物、细菌、大分子有机物、胶体等就堆积在纤维内表面,此时膜的进水侧与产水侧的压差会逐渐增加,经运行一段时间后(设计过滤时间为35min),就需要停止过滤操作,进行水力清洗(HC),反冲洗水为超滤产水。
经多次反冲洗后,可能在膜表面粘附着不易冲洗掉的污染物和微生物,此时就采用含有一定浓度的化学药剂的水进行反冲洗和浸泡,即化学加强水力清洗(CEB),以增强水力清洗效果。
蛋白质超滤操作
一、准备超滤膜
在进行蛋白质超滤操作之前,需要准备超滤膜。
超滤膜是一种特殊的过滤膜,能够只允许小分子物质透过,而阻止大分子物质通过。
根据所需的超滤膜的孔径大小和超滤设备的规格,选择合适的超滤膜。
在操作前要检查超滤膜是否完好无损,并按照厂家提供的说明进行安装。
二、加样
将待超滤的蛋白质溶液加入到超滤设备中,注意不要加入过多,以免影响超滤效果。
加样时要保证均匀分布,避免产生气泡。
三、施压
对超滤设备施加一定的压力,使蛋白质溶液在压力的作用下通过超滤膜。
施加的压力大小要根据超滤膜的孔径和设备而定,一般在0.1-0.5MPa之间。
在施压过程中要保持压力稳定,避免波动过大影响超滤效果。
四、循环
在进行超滤过程中,需要保证蛋白质溶液在超滤膜表面形成循环流动,以保证超滤效果。
在循环过程中,需要定期检查循环流量和压力,保证正常运转。
五、收集
经过一段时间的超滤后,小分子物质会透过超滤膜进入收集袋中。
收集时要及时记录收集时间和重量,以便后续分析。
六、清洗
在超滤结束后,要对超滤膜进行清洗。
清洗时要选用适当的清洗剂,并按照厂家提供的说明进行操作。
清洗时要保证清洗彻底,以免影响下次超滤效果。
七、保存
清洗完毕后,要将超滤膜晾干并保存好。
保存时要放在干燥、阴凉的地方,避免阳光直射和潮湿环境。
同时也要定期检查超滤膜是否完好无损,及时更换破损的超滤膜。
离子交换层析岗位标准操作规程文件名称:离子交换层析岗位标准操作规程制订人制订日期年月日审核人审核日期年月日批准人批准日期年月日颁发部门:质量管理部执行日期:年月日分发部门:生产技术部、设备部、各生产车间变更原因:变更内容:目的: 建立离子交换层析岗位标准操作规程范围:离子交换层析所有操作责任人:操作人员、工序负责人、车间生产负责人对执行本SOP负责内容:准备工作:1检查操作间是否清洁并有QA签发的“清场合格证”且在有效期内,有无其他杂物,否则重新清场2检查离子交换层析仪是否悬挂“清洁”标识3取下“清洁”标识,换上“生产证”工作内容:离子交换剂的选择离子交换剂的种类很多,离子交换层析要取得较好的效果首先要选择合适的离子交换剂。
首先是对离子交换剂电荷基团的选择,确定是选择阳离子交换剂还是选择阴离子交换剂。
这要取决于被分离的物质在其稳定的pH下所带的电荷,如果带正电,则选择阳离子交换剂;如带负电,则选择阴离子交换剂。
例如待分离的蛋白等电点为4,稳定的pH范围为6-9,由于这时蛋白带负电,故应选择阴离子交换剂进行分离。
强酸或强碱型离子交换剂适用的pH范围广,常用于分离一些小分子物质或在极端pH下的分离。
由于弱酸型或弱碱型离子交换剂不易使蛋白质失活,故一般分离蛋白质等大分子物质常用弱酸型或弱碱型离子交换剂。
其次是对离子交换剂基质的选择。
前面已经介绍了,聚苯乙烯离子交换剂等疏水性较强的离子交换剂一般常用于分离小分子物质,如无机离子、氨基酸、核苷酸等。
而纤维素、葡聚糖、琼脂糖等离子交换剂亲水性较强,适合于分离蛋白质等大分子物质。
一般纤维素离子交换剂价格较低,但分辨率和稳定性都较低,适于初步分离和大量制备。
葡聚糖离子交换剂的分辨率和价格适中,但受外界影响较大,体积可能随离子强度和pH变化有较大改变,影响分辨率。
琼脂糖离子交换剂机械稳定性较好,分辨率也较高,但价格较贵。
另外离子交换剂颗粒大小也会影响分离的效果。
离子交换剂颗粒一般呈球形,颗粒的大小通常以目数(mesh)或者颗粒直径(mm)来表示,目数越大表示直径越小。
超滤系统操作规程及维护保养SANY GROUP system office room 【SANYUA16H-超滤系统操作规程及维护保养1、超滤的手动操作1.1产水操作(1)气动阀门动作及状态确认超滤装置上的产水、浓水排放、进水气动阀开启。
气动阀门的开关通过超滤装置上的就地控制柜完成。
保证超滤处于产水状态时,再启动原水进水阀的操作,从而保证超滤运行负荷不超标。
(2)混凝剂加药确认药箱液位足够,开启加药泵进出口阀门,启动加药泵。
停原水进水阀门后,再停加药泵。
2、反洗操作2.1简反洗(包括上反洗和下反洗)关闭一台超滤进水、产水和浓水排放气动阀,再启动两台反洗水泵对这台装置执行反洗操作,简反洗流量为310M3/H。
(1)上反洗上反洗采用超滤产水作为反冲水,由组件产水口进入,浓水出口流出。
此时入口水阀和产水阀关闭,反洗至排水清澈。
(2)下反洗下反洗采用超滤产水作为反冲水,由组件产水口进入,进水口流出。
此时浓水出口阀和产水阀关闭,反洗至排水清澈。
二台超滤的反洗时间应错开,即一台执行反洗程序时另一台应处在待机或运行状态。
超滤反洗完成后,先关闭反洗水泵。
2.2完整反洗(1)前正冲由组件进水口至浓水出口,产水阀门关闭。
(2)上反洗上反洗采用超滤产水作为反冲水,由组件产水口进入,浓水出口流出。
此时入口水阀和产水阀关闭。
执行此步骤时随反洗泵的投运启动次氯酸钠加药泵,投加浓度约为150PPM。
(3)下反洗下反洗采用超滤产水作为反冲水,由组件产水口进入,进水口流出。
此时浓水出口阀和产水阀关闭,执行此步骤时随反洗泵的投运启动次氯酸钠加药泵,投加浓度约为150PPM。
(4)后正冲由组件进水口至浓水出口,产水阀门关闭。
冲洗至出水清澈为止。
2.3化学加强反洗程序在反洗过程中向反洗水中假如化学药品。
为了增加化学药品的反应时间,在彻底反洗后可增加一定时间的浸泡时间。
3、性能检测手动对膜组件进行完整性检测时,用气泡观察法。
3.1原理检测完全浸泡过的膜组件时,当洁净的压缩气体从进水端进入膜组件时,气体会经过中空纤维的内腔的破裂处或大孔缺陷处,漏入纤维丝外侧,气泡经过中空纤维丝内腔上端或直接从产水端流入产水端透明管,即可观察到泄露的气泡,进而确定有问题的组件。
蛋白质超滤浓缩和换液1. 背景介绍蛋白质是生物体内最重要的宏分子之一,扮演着多种生物学功能。
研究蛋白质的结构和功能对于理解生命的基本过程至关重要。
然而,在研究和应用中,常常需要对蛋白质进行浓缩和换液处理。
本文将介绍蛋白质超滤浓缩和换液的原理、方法以及相关注意事项。
2. 蛋白质超滤浓缩的原理蛋白质超滤浓缩是利用透析膜对溶液进行分离的方法,通过调节溶液中的渗透压差来实现溶液中溶质(如蛋白质)的浓缩。
超滤膜通常具有不同孔径大小,可以选择性地阻隔不同分子量范围内的物质。
在超滤过程中,将待浓缩溶液置于超滤装置中,施加一定压力使溶液通过超滤膜。
由于超滤膜具有特定孔径大小,较大分子量的溶质无法通过膜孔,而较小分子量的水分子和离子则可以通过膜孔进入超滤液。
在超滤过程中,由于超滤液中的水分子和离子可以通过膜孔而流失,从而使溶液中的溶质浓度增加。
通过控制超滤时间和压力,可以实现对蛋白质等大分子的高效浓缩。
3. 蛋白质超滤浓缩的方法3.1 准备工作•准备适当大小和孔径的超滤膜。
•清洗超滤装置并进行消毒。
•准备待浓缩溶液,并根据需要调整渗透压。
3.2 超滤操作步骤1.将待浓缩溶液注入超滤装置。
2.施加适当压力,使溶液通过超滤膜。
3.收集通过膜孔的超滤液。
4.根据需要调整浓缩倍数,重复步骤2和步骤3直至达到所需浓度。
3.3 浓缩后处理•将浓缩后的样品转移到合适容器中。
•对样品进行进一步的分析或保存。
4. 蛋白质换液的原理蛋白质换液是将溶液中的有害物质、杂质或缓冲剂等去除,同时将溶液中的目标蛋白质置于新的溶液中的过程。
换液可以用于去除低分子量物质、调整pH值、更换缓冲剂等。
常见的蛋白质换液方法包括透析和凝胶过滤。
透析是利用半透膜对溶液进行分离,通过控制渗透压差来实现目标物质从高浓度到低浓度的迁移。
凝胶过滤则是通过选择性孔径大小的凝胶颗粒,将大分子量蛋白质滞留在凝胶上,而较小分子量物质则可以通过凝胶颗粒进入新溶液中。
5. 蛋白质换液的方法5.1 准备工作•准备合适孔径和材料的透析袋或凝胶颗粒。
第1篇一、目的为确保蛋白质实验的顺利进行,保证实验结果的准确性和安全性,特制定本操作规程。
二、适用范围本规程适用于蛋白质的提取、纯化、鉴定、分析等实验操作。
三、操作步骤1. 实验准备(1)实验前应仔细阅读实验方案,了解实验原理、目的、步骤及注意事项。
(2)准备实验所需试剂、仪器和设备,确保其处于正常工作状态。
(3)实验前应佩戴防护眼镜、手套和口罩,避免接触有害物质。
2. 蛋白质提取(1)取适量组织或细胞,用组织匀浆器或超声波破碎器破碎。
(2)加入适量裂解液,充分搅拌,使蛋白质溶解。
(3)低温离心,收集上清液,即为蛋白质粗提液。
3. 蛋白质纯化(1)根据蛋白质的性质,选择合适的纯化方法,如离子交换、凝胶过滤、亲和层析等。
(2)将蛋白质粗提液按照纯化方法进行操作,如加入缓冲液、平衡液、洗脱液等。
(3)收集纯化后的蛋白质,低温保存。
4. 蛋白质鉴定(1)采用SDS-PAGE电泳对蛋白质进行初步鉴定。
(2)通过Western blot技术检测蛋白质的特异性抗体。
(3)通过质谱分析等技术对蛋白质进行结构鉴定。
5. 蛋白质分析(1)采用紫外分光光度计测定蛋白质浓度。
(2)采用凝胶过滤色谱、动态光散射等技术研究蛋白质的分子量。
(3)通过酶活性、底物消耗等方法研究蛋白质的生物活性。
四、注意事项1. 实验过程中应严格遵守无菌操作原则,防止污染。
2. 实验操作应规范,避免人为误差。
3. 试剂、仪器和设备应定期校准、维护,确保实验结果的准确性。
4. 实验过程中产生的废弃物应按照相关规定进行处理。
5. 实验过程中应关注自身安全,防止化学品、生物制品等对人体的危害。
五、实验记录1. 实验记录应详细记录实验时间、试剂、仪器、操作步骤、实验结果等。
2. 实验记录应真实、准确、完整,便于实验结果的追溯和分析。
六、附则本规程由实验室负责解释和修订,自发布之日起实施。
第2篇一、前言蛋白质是生命活动的重要物质基础,广泛应用于生物学、医学、农业等领域。
超滤系统操作规程
. 目的:
建立超滤系统操作规程,确保设备正常运转,保证设备使用的安全性、有效性。
2. 范围:
适用于超滤系统的操作。
3. 职责:
设备技术人员、超滤器的操作人员对本标准的实施负责。
4.程序:
4.1.开机前准备及检查:
4.1.1. 用75%乙醇消毒超滤系统外壁。
4.1.2. 清洗液:
4.1.2.1. 0.4%氢氧化钠溶液。
4.1.2.2. 0.9%氯化钠溶液。
4.1.3. 在储水罐内接注射用水4-5万ml水温在40-60℃之间。
4.1.4. 打开电源开关,微调泵速,检查蠕动泵运转有无异常声响、震动等。
4.2. 开机操作:
4.2.1. 超滤器按超滤器清洁消毒规程(SOP SC1037)进行清洁。
4.2.2.超滤操作:
4.2.2.1. 将进液管、回流管放入色泽、澄明度、符合标准的原液瓶内,封好瓶口。
4.2.2.2. 滤过管用干热灭菌瓶盛接滤液,密封瓶口。
打开电源,超滤器进口压为
1.5kg/cm2-2kg/cm2,回流压为0.5kg/cm2-1kg/cm2,开始超滤。
4.2.2.3. 随时查看压力表压力及药液色泽、澄明度。
4.2.3. 取样:用灭菌后的吸管,取规定量于灭菌输液瓶内,用灭菌胶塞密封瓶口贴明标签,送至QC室待测含量和热原。
4.2.4. 滤液瓶口用灭菌胶塞密封后,用灭菌硫酸纸、包装纸、棒绳扎紧,贴明标签送恒温冷室冷藏。
4.3. 关机。
4.3.1. 超滤结束后,关闭电源开关。
4.3.2. 超滤器按超滤器清洁消毒规程(SOP SC1037)进行清洁。
超滤岗位操作规程1:职责1.1 负责砂滤设备间内动、静设备的操作,负责O-MBR超滤设备间内动、静设备的操作。
1.3 负责保证二次沉淀池、清水池、浓水池液面稳定,并控制在规定范围内。
1.3 贯彻执行岗位操作规程及有关规章制度。
1.4 负责本岗位所属设备的使用、维护、保养及环境设备卫生。
1.5 负责本岗位记录的填写。
2:应知应会2.1 应知2.1.1 岗位操作规程。
2.1.2 本岗位生产流程及车间工艺流程。
2.1.3所属设备的工作原理及作用。
2.1.4所属设备的技术规定。
2.1.5 岗位安全、防火知识。
2.1.6 一般电气常识及安全知识。
2.1.7 一般事故的判断、原因分析、处理方法及防范措施。
2.2 应会2.2.1 正确操作,完成本工序污水处理指标。
2.2.2 正确使用、维护、保养设备。
2.2.3 执行工艺、设备一般巡检办法(听、摸、闻、看),及时发现问题,采取得当措施进行处理。
2.2.4 一般管线冻、堵的判断及处理。
2.2.5 按规定填写岗位记录。
3:工艺流程3.1 O-MBR超滤膜设备40支为一组,二组为一套,两套并列使用。
3.2二次沉淀池出水由砂滤给水泵送入砂滤罐,砂滤罐出水经O-MBR保安过滤器过滤后,进入O-MBR超滤膜设备,O-MBR超滤膜产水率为80%~90%,根据水质情况浓水产率在10%~20%之间进行调整。
3.3 O-MBR超滤膜产水一部分自流入O-MBR反洗水储罐,做为O-MBR超滤膜反洗水使用,另一部分自流入RO清水池,进入RO反渗透膜处理工序,或直接进入外排水管线外排。
3.4 砂滤设备反洗水自流进入二次沉淀池入水口。
O-MBR浓水自流进入二次沉淀池入水口。
3.5 O-MBR反洗水通过调整可自流进入浓水池、二次沉淀池入水口、事故调节池、均和调节池。
3.6 膜处理设施停运,二次沉淀池出水可直接进入清水池、浓水池,满流后,自流入外排水管线外排。
4:技术规定4.1 工艺指标膜过滤形式:外压式中空纤维膜丝外壳材料:UPVC膜材质:改性PVDF 中空纤维内径:0.9mm中空纤维外径:1.6mm 纤维粘接材料:环氧树脂膜表面积:45.5m2 每支组件纤维数:8000根切割分子量 / 截留孔径:100K / 0.01μm纯水初始通量(25℃ 0.2MPa):6375L/h产水浊度≤0.5NTU 悬浮物(SS)≤1mg/L大肠杆菌群:未检出原水水质:达标二级排污水保证使用年限:5 年4.2 操作指标运行方式:全量过滤或错流过滤入水设计通量(25℃):500L/h 最大进水压力:0.3 MPa最大透膜压差:0.2MPa 使用温度范围5~45℃产水量设定:100-500L/h 酸碱度范围:PH 2~12使用压力:0.05~0.2 Mpa 进水滤液最大颗粒粒径≤100μm原水中含油量<5mg/L 操作压力≤0.2 MPa正洗时间:20~60秒系统回流量≥10%(建议10~50%)反洗水进水要求:本组膜组件的过滤水最大反洗水流量:1000L/h 反洗水压力:0.2Mpa反洗时间:20~60秒在线反洗水量:1m3/小时/支化学清洗周期:1-3个月在线反洗周期:20~60min原水进口与产水出口压差≥ 0.1MPa时,必须进行化学清洗。
单纯超滤临床操作和标准操作规程一、定义和概述单纯超滤是通过对流转运机制,采用容量控制或压力控制,经过透析器或血滤器的半透膜等渗地从全血中除去水分的一种治疗方法。
在单纯超滤治疗过程中,不需要使用透析液和置换液。
二、适应证和禁忌证(一)适应证1、药物治疗效果不佳的各种原因所致的严重水肿。
2、难治性心力衰竭。
3、急、慢性肺水肿。
(二)禁忌证无绝对禁忌证,但下列情况应慎用。
1、严重低血压。
2、致命性心律失常。
3、存在血栓栓塞疾病高度风险的患者。
三、治疗前患者病情评估(一)生命体征评估患者的意识状态、(二)血容量状态评估全面了解患者容量负荷状态,如水肿程度、体位(能否平卧)、心脏舒张期奔马律、双肺底部湿性罗音及胸、腹腔积液情况等。
如条件允许,应测定中心静脉压(CVP)和(或)肺毛细血管楔嵌压(PCWP),以客观评估患者的血容量状态。
(三)出、凝血功能评估了解并观察患者脏器出血及各种引流液和伤口的渗血情况,检测出凝血相关参数。
(四)血液生化指标评估应全面了解患者的肾功能、血清白蛋白水平、血清电解质浓度(血清钾、钠离子等)及酸碱平衡状态(CO2CP 或做血气分析)等,为确定治疗处方提供依据。
四、设备选择可依据各医院实际情况,选择普通血液透析机、单纯超滤机或连续性床旁血滤机等。
在单纯超滤过程中,血液透析机处于旁路状态,连续性床旁血滤机置换液、透析液处于停止状态,通过跨膜压完成超滤过程。
五、血管通路临时(中心静脉导管)或长期血管通路(内瘘),参照血管通路建立章节。
六、透析器或血滤器选择推荐选择中、高通量的透析器或血滤器,可根据患者的体表面积、水肿程度选择适宜的滤器面积。
七、治疗方式和处方(一)选择单纯超滤,还是缓慢连续性超滤(slow continuous ultrafiltration,SCUF)应从患者病情及设备条件等方面权衡利弊后确定。
SCUF 是利用对流原理清除溶质和水分的一种特殊治疗方式,特点是不补充置换液,也不用透析液,与单纯超滤比较,SCUF 的超滤率较低,持续时间可视病情需要延长,对血流动力学影响较小,患者更容易耐受,适用于心血管功能状态不稳定而又需要超滤脱水的患者。
蛋白质溶液的浓缩方法蛋白质是生物体内最重要的有机物之一,是生物体的重要组成部分,具有关键的功能作用。
为了进行相关实验和研究,往往需要浓缩蛋白质溶液以提高浓度和减少体积。
下面将介绍几种常用的蛋白质溶液浓缩方法。
1.超滤浓缩法:超滤是一种利用膜的选择性渗透性来进行溶质分离的方法。
超滤膜的孔径通常在1至100纳米之间,可以通过选择不同孔径的膜来实现对蛋白质的浓缩。
超滤浓缩法操作简单、快速,可以在常温下进行。
首先,将待浓缩的蛋白质溶液用搅拌均匀,再将其放置在超滤膜的上部,然后用压力或离心力将蛋白质溶液通过膜孔径进行过滤。
超滤膜上的蛋白质颗粒被滞留在膜表面,而小分子物质则通过孔径被排除。
通过多次过滤,可以实现蛋白质的浓缩。
2.醋酸盐沉淀法:醋酸盐沉淀法是利用醋酸盐的作用使蛋白质从溶液中沉淀,进而实现蛋白质的浓缩。
首先,在蛋白质溶液中加入一定浓度的醋酸盐溶液,调整溶液的pH值和离子强度,使蛋白质发生变性并沉淀。
随后,将沉淀后的蛋白质离心沉淀下来并去除上清液,再用适量的溶液重新悬浮沉淀物,搅拌后通过离心分离上清液,最后反复洗涤和离心,可以得到较浓缩的蛋白质溶液。
3.非变性洗涤法:非变性洗涤法常用于浓缩敏感性较高的蛋白质,避免在浓缩过程中对蛋白质造成变性损伤。
该方法主要利用表面活性剂类似于SDS(十二烷基硫酸钠)或Triton X-100等来改变蛋白质表面电荷,增加亲水性从而减少溶液界面张力,从而帮助蛋白质从溶液中浓缩。
同时,非变性洗涤剂也能够稳定蛋白质的空间结构。
具体操作时,将蛋白质溶液与相应的洗涤剂混合,搅拌均匀后使用超滤膜或有机溶剂进行蛋白质浓缩。
4.枯萎滤纸法:枯萎滤纸法是一种简便、快速的蛋白质浓缩方法。
首先,将待浓缩的蛋白质溶液与适量的滤纸混合,搅拌均匀。
滤纸的枯萎性能可以减少水分量并吸附溶剂,从而帮助蛋白质浓缩。
随后,使用离心力将溶液离心,上清液即为浓缩后的蛋白质溶液。
枯萎滤纸法操作简便、经济,适用于小规模的实验。
超滤膜使用操作流程1.超滤器使用前处理1.1把超滤器各部件拆卸开,用过滤去离子水冲洗每个部件;1.2 按照蛋白分子量及超滤目的选择所需规格的超滤膜并填写超滤膜使用记录;1.3 用过滤去离子水冲洗滤膜后正面朝上(光面)装入超滤器中,同时用红色垫圈压住超滤膜;1.4 按照说明书的安装方式依次安装下盖和搅拌器;1.5 加入适量的过滤去离子水检查超滤器是否密封严实;1.6 用1M NaCL冲洗超滤器10分钟;1.7 用过滤去离子水冲洗3-5次去除残留的NaCL2.超滤样品的准备2.1 根据蛋白的浓度及澄清度确定蛋白是否需要离心,如有絮状或沉淀需离心;离心条件根据需要而定;2.2 离心后样品经注射器用0.45um滤膜过滤去除悬浮颗粒;3.样品的超滤3.1把样品加入超滤杯中(一般不要装太满,防止搅拌时液体溅出);装上超滤器上盖后放入超滤器框架中;3.2把超滤器与液氮罐连接的管道连接,关闭超滤器上的黑色按钮,检查是否有漏气;3.3把超滤器放在磁力搅拌器上调节磁力搅拌器转速;3.4打开液氮罐阀门(顺时针扭动调节阀)至压力在0.2MP(10KD及以下的滤膜可以加压至0.3MP)以内,同时观察流出液速度;3.5待样品浓缩到需要的体积及浓度后关闭液氮罐阀门(逆时针扭动调节阀);同时打来超滤器上端压力调节阀放气;3.6用移液枪或直接倒出超滤后样品(注意如用枪吸取时,千万不可让枪头触碰到膜,以防刮坏滤膜),如果体积太大可以按以上操作进行第二次浓缩;4.超滤器的清洗4.1取出样品后卸掉与液氮罐连接的管路,用过滤去离子水冲洗超滤杯3-5次;4.2 用1.0M NaCL浸泡30分钟,同时打开磁力搅拌器充分洗涤;4.3 再次用过滤水冲洗滤器清除残留NaCL;4.4把超滤器每一部分拆开后对每一部分再进行清洗,防止有蛋白污染;4.5去除超滤膜放入装有20%乙醇的培养皿中于4度保存(使用完毕标示使用情况、使用次数、蛋白名称等信息后统一收回);其他部分晾干后装入超滤器盒中放回指定位置。
蛋白浓缩超滤管使用方法
蛋白浓缩超滤管是一种常用的实验室工具,用于从混合物中分离和浓缩蛋白质。
下面介绍一下蛋白浓缩超滤管的使用方法。
将需要浓缩的蛋白质混合物加入到超滤管中。
注意,超滤管的容量是有限的,不要加入过多的混合物,以免超出容量而导致泄漏。
接下来,将超滤管放入离心机中,进行离心。
离心的时间和速度取决于样品的性质和需要浓缩的程度。
一般来说,离心速度应该在5000-10000rpm之间,离心时间为10-30分钟。
离心完成后,将超滤管从离心机中取出,将滤液倒掉。
注意,滤液中的蛋白质已经被浓缩,不要将其倒掉。
接下来,加入适量的缓冲液,将超滤管放回离心机中进行再次离心。
这一步的目的是去除残留的杂质和盐类,使得蛋白质更加纯净。
离心完成后,将超滤管从离心机中取出,将滤液倒掉。
此时,超滤管中的蛋白质已经被浓缩到一定程度,可以进行后续的实验操作。
需要注意的是,蛋白浓缩超滤管是一次性使用的,不能重复使用。
此外,在使用过程中,要注意避免超滤管的破裂和泄漏,以免对实验产生影响。
蛋白浓缩超滤管是一种非常实用的实验室工具,可以方便地从混合
物中分离和浓缩蛋白质。
只要按照上述步骤正确使用,就可以得到高质量的蛋白质样品,为后续的实验操作提供保障。
问题:超滤膜处理蛋白时,使用前应该做哪些处理呢?1 .使用后应将超滤膜用0.2MNaOH处理30分钟,然后用水清洗之中性,最后保存在20%的乙醇中。
2 .根据使用的超滤膜的性质(稳定性),一般情况建议用0.1〜0.5MNAOH,进行30分钟以上的清洗,在使用前后通过测试膜的水通量评估膜的透过性能和清洗效果。
为了减少蛋白的损失,建议浓缩前用缓冲液润洗膜,浓缩后用缓冲液冲洗膜回收蛋白。
并且保存膜的条件也要根据膜性质选择合适的条件。
问题:虽然知道是一次性的,但实验室的millipore超滤还是久经考验,用了又用。
但最近超滤一个悬浊液,不慎把膜堵了,请教高手有没有在不损伤膜的前提下把堵膜的物质洗下来。
(改物质可能是一些蛋白沉淀)呵呵不要仅仅建议我重新买噢!我需要建设性意见,先谢谢了!1 .如果堵得比较厉害,还可以在NaOH溶液中加点NaClO效果会更好,洗膜的时候最好用热的溶液。
2 .我用一个管子提一种蛋白的不同溶液,纯化后的分部收集管子.如果保养的好可以用很多次.一般不用时候放在乙醇中,放置染菌.另外,容易出问题的环节主要有滤膜破裂,套管破裂,滤膜堵塞等.我最近碰到的问题就是堵塞.楼上的方法不错,今天试用过了.另外,需要提醒你的是:滤膜过滤后,附着在膜上的蛋白量比较大,也就是说,体积的变化倍数和浓缩倍数是不一样的3 .可以使用0.1-0.5MNAOH清洗问题:在使用之后,用水和1NNAOH清洗完后,测得水通量也没问题。
但是在把膜包从夹具拿出来准备保存的时候,发现膜包边上的小孔仍然有很多可见杂质。
这些杂质是否需要用物理方法处理掉?建议在你的样品上超滤前选用0.45um的膜过滤一下,这样就不会有这个问题了,长时间有大颗粒或别的杂质进去对膜包可不太好。
问题:我的蛋白14kD,用截流10000的怎么一点都离不下。
而且在我只加超纯水时,水也离不下,十分迷惑你是用超滤离心管吗?水都离心不下,不是离心力不够吧,要不膜用别的什么处理过了变疏水的了。
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蛋白超滤操作规程
1.选取适当规格的超滤管(orencia和Her1-ECD-his用10KD的超滤管,IL17A-his
用3KD的超滤管),先将之前保存在超滤管中的PBS倒掉,加入一些新的PBS,
7500g离心5min,洗一下超滤管。
2.倒掉超滤管中的PBS,加入要超滤浓缩的样品,7500g离心至截留部分剩余
200-300ul液体(orencia用时8min,Her1-ECD-his8min,IL17A-his16min)。
为了避免流下去的液体中可能含有蛋白而导致浪费,先将流下去的液体收集到
一个管中。
3.向上层截留住的液体中加入4mlPBS,混匀后7500g离心至截留部分剩余
200-300ul液体。
4.重复第3个步骤三次,取出最后一次截留住的200-300ul液体,以PBS作空
白,测浓度即可。
超滤管中的废液倒掉,加入PBS保存在4℃即可。
5.
1。