常用缓冲溶液的配制方法

常用缓冲溶液配制方法一、酸碱配制法：该方法通过酸和碱两种溶液的混合反应来控制溶液的pH值。

常用的酸碱配制法有以下几种：1.酸和碱的摩尔比例法：前提是需要知道所配制溶液的酸碱消耗量。

首先分别测量酸和碱的摩尔消耗量，然后按照摩尔比例混合酸和碱的溶液。

例如，如果酸的摩尔消耗量为1mol，碱的摩尔消耗量为1.5mol，则将1mol酸和1.5mol碱混合配制成缓冲溶液。

2.浓度法：通过将已知浓度的酸和碱溶液混合配制成缓冲溶液。

首先确定所需缓冲溶液的pH值和酸碱消耗量，然后调整酸和碱溶液的浓度，最后按照一定的体积比例混合两种溶液。

二、配制法控制pH值：该方法根据所需缓冲溶液的pH值，通过使用酸和碱的不同混合配比来控制溶液的pH值。

常用的方法有以下几种：1.酸碱体积法：根据Henderson-Hasselbalch方程，通过将酸和碱的体积按照一定比例混合配制成缓冲溶液。

对于酸性缓冲溶液，通常用酸体积除以碱体积；对于碱性缓冲溶液，通常用碱体积除以酸体积。

2.四倍溶液法：如果需要配制缓冲溶液的pH值为pHx，可以制备pH(x-1)和pH(x+1)的四倍浓度溶液，在适当比例下混合这两种溶液，可以得到所需pH值的缓冲溶液。

三、缓冲剂配制法：缓冲剂是一种特殊的溶液，能够在酸和碱之间进行迅速的反应，稳定溶液的pH值。

常见的缓冲剂有磷酸盐缓冲剂、醋酸缓冲剂、碳酸氢盐缓冲剂等。

1.磷酸盐缓冲剂的配制方法：磷酸盐缓冲剂的配制，通常选择以二氢磷酸盐（H2PO4-）和氢磷酸盐（HPO42-）为主要组分。

根据所需pH值和缓冲溶液的酸碱消耗量，可以计算出所需H2PO4-/HPO42-的比例，然后按照一定的体积和浓度配制出满足比例的溶液。

2.醋酸缓冲剂的配制方法：醋酸缓冲剂的配制通常选择乙酸（CH3COOH）和乙酸钠（CH3COONa）为主要组分。

根据所需缓冲溶液的pH值和酸碱消耗量，可以计算出所需CH3COOH/CH3COONa的比例，然后按照一定的体积和浓度配制出满足比例的溶液。

常用缓冲溶液的配制方法1.氯化钾-盐酸缓冲液(0・2mol/L)邻苯二甲酸氢钾：分子量=204.23,0.2mol/L邻苯二甲酸氢钾溶液含40.85g/L 4.磷酸氢二钠-柠檬酸缓冲液pH 0.2mol/LNa2HPO4(mL)0.1mol/L柠椽酸(mL)pH0.2mol/LNa2HPO4(mL)0.1mol/L柠椽酸(mL)2.2 0.40 10.60 5.2 10.72 9.28 2.4 1.24 18.76 5.4 11.15 8.85 2.6 2.18 17.82 5.6 11.60 8.402.83.17 16.83 5.8 12.09 7.913.04.11 15.896.0 12.637.373.24.94 15.066.2 13.22 6.78 3.4 5.70 14.30 6.4 13.85 6.153.6 6.44 13.56 6.6 14.555.453.8 7.10 12.90 6.8 15.454.554.0 7.71 12.29 7.0 16.47 3.53 4.2 8.28 11.72 7.2 17.39 2.61 4.4 8.82 11.18 7.4 18.17 1.83 4.6 9.35 10.65 7.6 18.73 1.274.8 9.86 10.14 7.8 19.15 0.85Na2HPO4分子量=141.98,0.2mol/L溶液为28.40g/L。

Na2HPO4・2H2O分子量=178.05,0.2mol/L溶液含35.61g/L。

C6H8O7•H2O分子量=210.14,0.1mol/L溶液为21.01g/L。

5.使用时可以向每升混合液中加入1g酚，若最后p H值有变化，再用少量50%氢氧化钠溶液或浓盐酸调节,冰箱保存。

6•柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液(0・1mol/L)柠檬酸C6H8O7・H2O：分子量210.14,0.1mol/L溶液为21.01g/L。

常用缓冲溶液配制方法 Prepared on 24 November 2020常用缓冲溶液的配制方法1．甘氨酸–盐酸缓冲液（L）X毫升 mol/L甘氨酸+Y毫升 mol/L HCI，再加水稀释至200毫升甘氨酸分子量 = ， mol/L甘氨酸溶液含15.01克/升。

2．邻苯二甲酸–盐酸缓冲液（ mol/L）X毫升 mol/L邻苯二甲酸氢钾 + mol/L HCl，再加水稀释到20毫升邻苯二甲酸氢钾分子量 = ， mol/L邻苯二甲酸氢溶液含40.85克/升3．磷酸氢二钠–柠檬酸缓冲液Na2HPO4分子量 = ， mol/L溶液为28.40克/升。

Na2HPO4·2H2O分子量 = ， mol/L溶液含35.01克/升。

C4H2O7·H2O分子量 = ， mol/L溶液为21.01克/升。

4．柠檬酸–氢氧化钠-盐酸缓冲液①使用时可以每升中加入1克克酚，若最后pH值有变化，再用少量50%氢氧化钠溶液或浓盐酸调节，冰箱保存。

5．柠檬酸–柠檬酸钠缓冲液（ mol/L）柠檬酸C6H8O7·H2O：分子量， mol/L溶液为21.01克/升。

柠檬酸钠Na3 C6H5O7·2H2O：分子量， mol/L溶液为29.41克/毫升。

6．乙酸–乙酸钠缓冲液（ mol/L）Na2Ac·3H2O分子量 = ， mol/L溶液为27.22克/升。

7．磷酸盐缓冲液（1）磷酸氢二钠–磷酸二氢钠缓冲液（）Na2HPO4·2H2O分子量 = ， mol/L溶液为85.61克/升。

Na2HPO4·12H2O分子量 = ， mol/L溶液为克/升。

NaH2PO4·2H2O分子量 = ， mol/L溶液为克/升。

磷酸盐是化学研究中使用最广泛的一种缓冲剂，由于它们是二级解离，有二个pKa 值，所以用它们配制的缓冲液，pH 范围最宽：NaH2PO4： pKa1＝，pKa2＝；Na2HPO4：pKa1＝，pKa2＝配酸性缓冲液：用NaH2PO4，pH＝1～4，配中性缓冲液：用混合的两种磷酸盐，pH＝6～8，配碱性缓冲液：用Na2HPO4，pH＝10～12。

实验常用试剂缓冲液的配制方法
一、常用试剂和试剂配置
1、氯仿。

将1L 99.7%纯度的氯仿加入水中，调节pH值至7.4，溶解
即可得到0.5mol/L的氯仿溶液。

2、二氧化碳水。

将100mL弱碳酸氢氧化钠溶液（NaHCO3，0.5mol/L）加入1L水中，经过气泡交换，可制得CO2水。

3、磷酸盐缓冲液。

将200mL磷酸盐溶液（K2HPO4，0.5mol/L）加入800mL水中，调节pH值至7.2，搅拌均匀，即可得到0.2mol/L磷酸盐缓
冲液。

4、EDTA标准溶液。

将25.0g EDTA·4Na（C10H14N2O8Na2）加入
1000mL水中，热溶解，调节pH值至7.0，搅拌均匀，得到0.2mol/LEDTA
标准溶液。

5、肌酐标准溶液。

将10.0g肌酐（C10H13N3O8)=14.2H2O）加入
1000mL的水中，搅拌，调节pH值至7.4，搅拌均匀，即可得到0.1mol/L
的肌酐标准溶液。

二、缓冲液的配置
1、弱酸缓冲液。

将3.0mL 0.2mol/L磷酸钠溶液（Na2HPO4）加入到
97mL 0.2mol/L磷酸钙溶液（Ca(H2PO4)2）中，搅拌均匀，即可得到
0.2mol/L的弱酸缓冲液。

2、弱碱缓冲液。

将3.0mL 0.2mol/L磷酸氢氧化钠溶液（NaH2PO4）
加入到97mL 0.2mol/L碳酸氢钙溶液（Ca(HCO3)2）中，搅拌均匀，即可
得到0.2mol/L的弱碱缓冲液。

3、弱盐缓冲液。

常见缓冲溶液配制方法1.醋酸钠/醋酸酸性缓冲液醋酸钠/醋酸酸性缓冲液适用于pH范围为4.0-6.0的实验。

配制方法如下：- 准备质量浓度为0.1mol/L的醋酸钠溶液和0.1mol/L的醋酸溶液。

-根据所需pH值，按照相应的比例混合醋酸钠溶液和醋酸溶液即可。

2.磷酸/盐酸性缓冲液磷酸/盐酸性缓冲液适用于pH范围为1.0-3.0的实验。

配制方法如下：- 准备0.2mol/L的盐酸溶液。

- 准备分别为0.2mol/L和0.1mol/L的磷酸溶液。

-具体配制时，根据所需pH值，按照相应的比例混合盐酸溶液和磷酸溶液即可。

3.磷酸/氢磷酸二盐酸性缓冲液磷酸/氢磷酸二盐酸性缓冲液适用于pH范围为2.0-7.0的实验。

配制方法如下：- 准备0.2mol/L的盐酸溶液。

- 准备分别为0.2mol/L、0.1mol/L和0.05mol/L的氢磷酸二盐溶液。

-具体配制时，根据所需pH值，按照相应的比例混合盐酸溶液和氢磷酸二盐溶液即可。

4.磷酸盐缓冲液磷酸盐缓冲液适用于pH范围为5.0-8.0的实验。

配制方法如下：- 准备分别为0.2mol/L的梯度磷酸盐溶液。

-根据所需pH值，按照相应的比例混合相应浓度的磷酸盐溶液即可。

5.三氯乙酸/三氯乙酸钠酸性缓冲液三氯乙酸/三氯乙酸钠酸性缓冲液适用于pH范围为3.0-4.6的实验。

配制方法如下：- 准备质量浓度为0.2mol/L的三氯乙酸钠溶液和0.2mol/L的三氯乙酸溶液。

-根据所需pH值，按照相应的比例混合三氯乙酸钠溶液和三氯乙酸溶液即可。

以上是一些常见的缓冲溶液配制方法，具体的配制过程可能会因实验需求和具体试剂而略有不同。

在配制缓冲溶液时，一定要注意使用高纯度的试剂，并按照配制方法进行准确的实验操作。

常用缓冲溶液的配制方法1．甘氨酸–盐酸缓冲液（L）X毫升mol/L甘氨酸+Y毫升mol/L甘氨酸分子量= ，mol/L甘氨酸溶液含15.01克/升。

2．邻苯二甲酸–盐酸缓冲液（mol/L）X毫升mol/L邻苯二甲酸氢钾+邻苯二甲酸氢钾分子量= ，mol/L 邻苯二甲酸氢溶液含40.85克/升Na2HPO4分子量= ，mol/L溶液为28.40克/升。

Na2HPO4·2H2O分子量= ，mol/L 溶液含35.01克/升。

C4H2O7·H2O分子量= ，mol/L溶液为21.01克/升。

①使用时可以每升中加入1克克酚，若最后pH值有变化，再用少量50%氢氧化钠溶液或浓盐酸调节，冰箱保存。

柠檬酸C 6H 8O 7·H 2O ：分子量， mol/L 溶液为21.01克/升。

柠檬酸钠Na 3 C 6H 5O 7·2H 2O ：分子量， mol/L 溶液为29.41克/毫升。

Na2Ac·3H2O分子量= ，mol/L溶液为27.22克/升。

7．磷酸盐缓冲液（1）磷酸氢二钠–磷酸二氢钠缓冲液（）Na2HPO4·2H2O分子量= ，mol/L溶液为85.61克/升。

Na2HPO4·12H2O分子量= ，mol/L 溶液为克/升。

NaH2PO4·2H2O分子量= ，mol/L溶液为克/升。

磷酸盐是生物化学研究中使用最广泛的一种缓冲剂，由于它们是二级解离，有二个pKa 值，所以用它们配制的缓冲液，pH 范围最宽：NaH2PO4：pKa1＝，pKa2＝；Na2HPO4：pKa1＝，pKa2＝配酸性缓冲液：用NaH2PO4，pH＝1～4，配中性缓冲液：用混合的两种磷酸盐，pH＝6～8，配碱性缓冲液：用Na2HPO4，pH＝10～12。

用钾盐比钠盐好，因为低温时钠盐难溶，钾盐易溶，但若配制SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳的缓冲液时，只能用磷酸钠而不能用磷酸钾，因为SDS(十二烷基硫酸钠)会与钾盐生成难溶的十二烷基硫酸钾。

各种缓冲液的配制方法缓冲液是一种用于调节溶液酸碱度（pH值）的溶液，它可以稳定溶液的pH值，满足实验的需要。

不同实验需要使用不同pH值的缓冲液，因此配制方法也会有所不同。

下面将介绍常见的几种缓冲液的配制方法。

1.磷酸盐缓冲液：磷酸盐缓冲液是最常用的一种缓冲液，在生物化学和分子生物学实验中广泛应用。

配制方法：-0.2M磷酸盐酸（pH2.5）：用稀磷酸（H3PO4）溶液调节酸度至所需pH值。

-0.2M磷酸盐盐（pH2.5）：用0.2M磷酸钠（Na2HPO4）溶液调节碱度至所需pH值。

-混合上述两种液体，按体积比例混合即可配制所需pH值的磷酸盐缓冲液。

2.乙酸缓冲液：乙酸缓冲液常用于酶催化反应的研究和生物制剂的稳定。

配制方法：-0.1M乙酸酸（pH3.6）：用浓烧碱（CH3COOH）溶液调节酸度至所需pH值。

-0.1M乙酸盐（pH3.6）：用0.1M乙酸钠（CH3COONa）溶液调节碱度至所需pH值。

-混合上述两种液体，按体积比例混合即可配制所需pH值的乙酸缓冲液。

3.碳酸氢盐缓冲液：碳酸氢盐缓冲液常用于生命科学实验中。

配制方法：-0.1M碳酸酸（pH6.0）：用稀碳酸（H2CO3）溶液调节酸度至所需pH 值。

-0.1M碳酸盐（pH6.0）：用0.1M碳酸氢钠（NaHCO3）溶液调节碱度至所需pH值。

-混合上述两种液体，按体积比例混合即可配制所需pH值的碳酸氢盐缓冲液。

4. Tris缓冲液：Tris缓冲液是一种多用途的缓冲液，在生物化学和分子生物学研究中广泛应用。

配制方法：- 0.1 M Tris酸（pH 8.0）：用三羟甲基氨基甲烷（Tris）溶液调节酸度至所需pH值。

- 0.1 M Tris盐（pH 8.0）：用0.1 M Tris盐溶液调节碱度至所需pH值。

- 混合上述两种液体，按体积比例混合即可配制所需pH值的Tris缓冲液。

配制缓冲液时需要准备所需浓度的酸液和盐液，然后根据所需pH值逐渐调整酸度和碱度至目标值。

各种缓冲液配制方法不同缓冲液的缓冲范围pH缓冲液是化学实验室中常用的一种试剂，可以帮助维持溶液的酸碱度。

下面介绍三种常用缓冲液的配制方法和缓冲范围。

一、甘氨酸-盐酸缓冲液（0.05 mol/L）配制方法：取X毫升0.2 mol/L甘氨酸和Y毫升0.2 mol/L 盐酸，加入适量的水稀释至200毫升。

缓冲范围：pH值在2.2至3.6之间，X和Y的取值见上表。

二、邻苯二甲酸-盐酸缓冲液（0.05 mol/L）配制方法：取X毫升0.2 mol/L邻苯二甲酸氢钾和Y毫升0.2 mol/L盐酸，加入适量的水稀释至20毫升。

缓冲范围：pH值在2.2至3.8之间，X和Y的取值见上表。

三、磷酸氢二钠-柠檬酸缓冲液配制方法：根据上表中的数据，取相应的0.2 mol/L和0.1 mol/L的Na2HPO4和柠檬酸，加入适量的水稀释至20毫升。

缓冲范围：pH值在2.2至8.0之间，具体取值见上表。

以上缓冲液的配制方法和缓冲范围可根据实验需要进行调整和改变。

在实验过程中，正确选择缓冲液可以提高实验的成功率和准确性。

以下是已经修改好的文章：柠檬酸的浓度可以用毫升表示，其浓度数据如下：9.28 mL8.85 mL8.40 mL7.91 mL7.37 mL6.78 mL6.15 mL5.45 mL4.55 mL3.53 mL2.61 mL1.83 mL1.27 mL0.85 mL0.55 mL对于Na2HPO4，其分子量为141.98，0.2 mol/L的溶液需要28.40 g/L。

而Na2HPO4·2H2O的分子量为178.05，0.2 mol/L的溶液需要35.61 g/L。

最后，Na2HPO4·12H2O的分子量为358.22，0.2 mol/L的溶液需要71.64 g/L。

对于C6H8O7·H2O，其分子量为210.14，0.1 mol/L的溶液需要21.01 g/L。

以下是柠檬酸-氢氧化钠-盐酸缓冲液的相关数据：pH: 2.2.3.1.3.3.4.3.5.3.5.8.6.5钠离子浓度(mol/L): 0.20.0.20.0.20.0.20.0.35.0.45.0.38柠檬酸(g) 氢氧化钠(g) 盐酸(mL)C6H8O7·H2O NaOH 97% HCl (浓)210 210 210210 245 285266 84 8383 144 186156 160 116106 45 68105 126最终体积(L)：10使用时可以每升中加入1克酚。

常用缓冲溶液的配制方法1．甘氨酸–盐酸缓冲液LX毫升 mol/L甘氨酸+Y毫升 mol/L HCI,再加水稀释至200毫升甘氨酸分子量 = , mol/L甘氨酸溶液含15.01克/升;2．邻苯二甲酸–盐酸缓冲液 mol/LX毫升 mol/L邻苯二甲酸氢钾 + mol/L HCl,再加水稀释到20毫升邻苯二甲酸氢钾分子量 = , mol/L邻苯二甲酸氢溶液含40.85克/升3．磷酸氢二钠–柠檬酸缓冲液Na2HPO4分子量 = , mol/L溶液为28.40克/升;Na2HPO4·2H2O分子量 = , mol/L溶液含35.01克/升;C 4H2O7·H2O分子量 = , mol/L溶液为21.01克/升;4．柠檬酸–氢氧化钠-盐酸缓冲液①使用时可以每升中加入1克克酚,若最后pH值有变化,再用少量50%氢氧化钠溶液或浓盐酸调节,冰箱保存;5．柠檬酸–柠檬酸钠缓冲液 mol/L柠檬酸C 6H 8O 7·H 2O ：分子量, mol/L 溶液为21.01克/升;柠檬酸钠Na 3 C 6H 5O 7·2H 2O ：分子量, mol/L 溶液为29.41克/毫升; 6．乙酸–乙酸钠缓冲液 mol/LNa 2Ac·3H 2O 分子量 = , mol/L 溶液为27.22克/升; 7．磷酸盐缓冲液1磷酸氢二钠–磷酸二氢钠缓冲液Na2HPO4·2H2O分子量 = , mol/L溶液为85.61克/升;Na2HPO4·12H2O分子量 = , mol/L溶液为克/升;NaH2PO4·2H2O分子量 = , mol/L溶液为克/升;磷酸盐是化学研究中使用最广泛的一种缓冲剂,由于它们是二级解离,有二个pKa 值,所以用它们配制的缓冲液,pH 范围最宽：NaH2PO4： pKa1＝,pKa2＝；Na2HPO4：pKa1＝,pKa2＝配酸性缓冲液：用NaH2PO4,pH＝1～4,配中性缓冲液：用混合的两种磷酸盐,pH＝6～8,配碱性缓冲液：用Na2HPO4,pH＝10～12;用钾盐比钠盐好,因为低温时钠盐难溶,钾盐易溶,但若配制SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳的缓冲液时,只能用磷酸钠而不能用磷酸钾,因为SDS十二烷基硫酸钠会与钾盐生成难溶的十二烷基硫酸钾;磷酸盐缓冲液的优点为：①容易配制成各种浓度的缓冲液；②适用的pH 范围宽；③pH 受温度的影响小；④缓冲液稀释后pH 变化小,如稀释10倍后pH 的变化小于;其缺点为：①易与常见的钙Ca2+离子、镁Mg2+离子以及重金属离子缔合生成沉淀；②会抑制某些化学过程,如对某些酶的催化作用会产生某种程度的抑制作用;2磷酸氢二钠–磷酸二氢钾缓冲液1/15 mol/L15M11.876克15M9.078克0.05M0.2M18℃0.04M8.25克0.05M25℃0.1M严;11．硼酸–硼砂缓冲液0.2M 硼酸根硼砂Na 2B 4O 7·10H 2O,分子量=;溶液=0.2M 硼酸根含19.07克/升; 硼酸H 3BO 3,分子量=,溶液为12.37克/升; 硼砂易失去结晶水,必须在带塞的瓶中保存; 12．甘氨酸–氢氧化钠缓冲液0.05MX 毫升0.2M甘氨酸+Y 毫升加水稀释至200毫升甘氨酸分子量=;0.2M 溶液含15.01克/升; 13．硼砂-氢氧化钠缓冲液0.05M 硼酸根 X 毫升0.05M 硼砂+Y 毫升加水稀释至200毫升硼砂Na 2B 4O 7·10H 2O,分子量=;0.05M 溶液为19.07克/升; 14．碳酸钠-碳酸氢钠缓冲液0.1M Ca 2+、Mg 2+存在时不得使用Na 2CO 2·10H 2O 分子量=;0.1M 溶液为28.62克/升; N 2HCO 3分子量=;0.1M 溶液为8.40克/升; 15．“PBS”缓冲液pH标准缓冲溶液Standard pH Buffer Solutions注：为保证pH值的准确度,上述标准缓冲溶液必须使用pH基准试剂配制;常用pH缓冲溶液的配制和pH值Preparation and pH Values of Common pH Buffer Solutions。

常用缓冲溶液的配制方法缓冲溶液是一种能够稳定溶液酸碱度的溶液，是化学和生物学实验中必不可少的试剂。

它们能够在一定范围内抵抗外界酸碱变化，保持溶液的PH值稳定，从而确保实验结果的准确性和可重复性。

本文将介绍一些常用的缓冲溶液的配制方法。

一、醋酸酸钠缓冲溶液醋酸酸钠缓冲溶液适用于酸性条件下的实验。

它的PH值稳定在4.0左右，适用于生物学实验和某些化学分析。

配制方法：1.称取3.9克醋酸酸钠三水合物（CH3COONa·3H2O）并溶解在80毫升蒸馏水中。

2.加入相同质量的冰乙酸，溶解均匀。

3.用蒸馏水稀释至100毫升。

将溶液过滤或使用磁力搅拌器搅拌，使溶液变得均匀。

二、磷酸二氢钠/磷酸氢二钠缓冲溶液磷酸二氢钠/磷酸氢二钠缓冲溶液适用于酸性至中性条件下的实验。

它的PH值稳定在6.8-7.4范围内，适用于细胞培养和某些生物化学实验。

配制方法：1.称取磷酸二氢钠（NaH2PO4）7.5克并溶解在200毫升蒸馏水中。

2.用氢氧化钠（NaOH）溶液调节至PH值7.4。

3.将溶液稀释至250毫升。

使用磁力搅拌器搅拌溶液使其均匀。

三、碳酸氢钠/碳酸钠缓冲溶液碳酸氢钠/碳酸钠缓冲溶液适用于中性至碱性条件下的实验。

它的PH值稳定在9.6-11.0范围内，适用于某些酶反应和某些化学分析。

配制方法：1.称取2.54克碳酸氢钠（NaHCO3）和2.93克碳酸钠（Na2CO3）并溶解在200毫升蒸馏水中。

2.使用酚红指示剂滴定硫酸（H2SO4）溶液，直至PH值为10.0。

3.将溶液稀释至250毫升。

使用磁力搅拌器搅拌溶液使其均匀。

四、Tris缓冲溶液Tris缓冲溶液适用于酸性至中性条件下的实验。

它是一种常用的生物化学缓冲溶液，适用于DNA/RNA电泳和蛋白质电泳等实验。

配制方法：1.称取12.11克Tris氨基甲烷（Tris base）并溶解在800毫升蒸馏水中。

2.使用盐酸（HCl）溶液调节至PH值 7.4。

3.加入1克EDTA四钠盐并溶解。