pcr实验室规章制度

简介

Pcr实验室又叫基因扩增实验室。PCR是聚合酶链式反应(Polymerase Chain Reaction)的简称。是一种分子生物学技术，用于放大特定的DNA片段，可看作生物体外的特殊DNA复制。通过DNA基因追踪系统，能迅速掌握患者体内的病毒含量，其精确度高达纳米级别，精确检测乙肝病毒在患者体内存在的数量、是否复制、是否传染、传染性有多强、是否必要服药、肝功能有否异常改变能及时判断病人最适合使用哪类抗病毒药物、判断药物疗效如何、给临床治疗提供了可靠的检验依据

条件

1、必须拥有标准的的PCR荧光实验室;

实时荧光定量PCR技术于1996年由美国Applied Biosystems公司推出

由于该技术不仅实现了PCR从定性到定量的飞跃，而且与常规PCR相比，它

有特异性更强、有效解决PCR污染问题、自动化程度高等特点，目前已得到广

泛应用。本文试就其定量原理、方法及参照问题作一介绍

2、检测设备必须符合标准PCR荧光实验室设置要求;

荧光定量PCR仪+实时荧光定量试剂+通用电脑+自动分析软件，构成PCR-DNA/RNA实时荧光定量检测系统。

3、必须通过国家临床检验中心的验收和认证;

4、检测人员必须通过国家临检中心业务培训并取得合格证书;

PCR实验室内工作人员必须参加由国家卫生部或各省临床检验中心举办的临床基因扩增培训班，并持证上岗。PCR实验室通过验收，实验室至少必须应有两个以上持有“临床基因检测上岗证”。PCR实验室必须建立严格的实验室管理制度、建立标准化操作程序（SOP）、建立系列质量管理文件等，确保实验室日常运行符合国家卫生部的要求，确保检测结果准确、确保实验室卫生安全，确保实验室长期稳定运行

5、必须在无菌无尘环境下进行操作

功能

能够对患者病情进行科学、准确、实时的掌控，并结合抗HBV与T细胞免疫来打破免疫耐受，阻断肝病病毒复制的疗法、有效的分解肝炎病毒，解决了乙肝病毒易变异、耐药，病毒复制模板难以治疗，人体免疫耐受状态不易打破等医学难题，能迅速消除临床症状，而且有效抑制乙肝病毒复制，明显加快e抗原、抗体的血清转换速度，杀灭血液及肝细胞内的病毒，为防止再感染提供了长期保护，有效阻断和逆转肝纤维化、肝硬化进程。

1/3 PCR实验室管理制度 第0次修改 文件编号：

PCR实验室管理制度 拟制人：

生效日期： 审核人：

版 本： 批准人：

1. 目的：

建立PCR实验室分区管理规定，保证检验结果的真实性。

2. 范围：

适用于PCR实验室管理。

3. 职责：

质量部。

4. 工作流程：

4.1 实验室按照功能分以下区域：

4.1.1试剂准备区（体系室）：为PCR体系配制区域。

4.1.2标本制备区（模板室）：为模板DNA制备、扩增体系模板添加的区域。

4.1.3扩增区（扩增室）：为PCR模板进行扩增区域。

4.1.4扩增产物分析区（产物分析室）：为PCR模板进行扩增、电泳检测或扩增产物分析的区域。本区域为PCR产物污染区。

4.2实验室要求：

4.2.1实验室着装要求

4.2.1.1试剂准备区、标本制备区、扩增区、扩增产物分析区，四个区域配备有不同颜色的防静电实验服和专用鞋套。进入实验室区域后，需更换对应区域的实验服及鞋套。

4.2.1.2各区域工作服及鞋套不能混穿。

4.2.1.3离开当前实验区域时，应在黄色警戒线内脱掉该区实验服和鞋套，再进入其他区域，更换相应区域的工作服和鞋套。

4.2.2各实验室内试验仪器、耗材、移液器使用规则：

4.2.2.1在各操作间配有专用仪器、耗材、移液器，绝不能混用以避免污染。

4.2.2.2每个房间都有功能标识，根据房间功能进行实验，不能混用。如试剂准备区不能用于模板DNA制备。

4.3 日常清洁要求：

4.3.1 各个实验室应配备专用的清洁设施，不得混用。

2/3 PCR实验室管理制度 第0次修改 4.3.2 实验员每月用1mol/L盐酸（50ml 12mol/L盐酸（即浓盐酸）和550ml纯化水混合）擦拭操作台、门把手及移液器、离心机等设备外表面，30分钟后用清水擦拭。注意金属表面不能用本试剂进行擦拭，可用水代替反复擦洗。

4.3.3每个房间实验服在相应房间洗手盆中清洁，在相应房间自然晾干。各区域服装不能混洗，洗涤时以单件形式进行洗涤。

检测报告管理制度

1. 目的

为了规范分析检测报告（表）格式，使之内容齐全，操作程序化，特制订本制度。

2. 试用范围

本制度适用于化验室的各类分析报告（表）

3. 制度细则

3.1分析检测报告应采用统一格式，填写完整，签名齐全，文字简洁，字迹清晰，数据准确，结论正确。

3.2分析检测报告一律由化验员钢笔填写并签字，并由审核人员审核并签字确认，分析检测报告严禁更改。

3.3分析检测报告采用计算机处理和备份，并按规定程序上传至数据中心。

3.4分析检测报告的计量数据均采用法定计量单位，有效数据的取舍应按仪器的检出限而定，除pH、SS、温度外，保留三位有效数字，并且其值不得低于方法检出限。

3.5分析检测报告均由质量管理员审核，审核范围包括报告的外观质量和内在质量，在审核过程中若发现错误，应由填写人重新进行填写，审核人不准自行更改。

3.6分析检测报告必须经由化验室主任签字后方可生效，化验室按《H-005文件资料归档制度》存放副本备案。

3.7分析检测报告应及时由文件管理员送到相关部门。

3.8已发出的分析检测报告，一经发现错误，必须立即收回登记更改。

化验室安全卫生管理制度

1. 目的

为了保持化验室良好的工作环境，使检测结果准确可靠，使事故发生率为零，特制订本制度。

2. 试用范围

化验室全体人员

3. 制度细则

3.1积极参加上级组织的安全教育，提高化验室工作人员对安全工作的认识，遵守安全制度，真正树立“安全第一”的思想，化验人员进入化验室，必须做好化验室的各种安全防护和个人安全防护工作。

3.2学习消防、用电、化学基础知识，做到人人会用消防器材，人人懂用电常识和化学基础常识，化验室配备相应的消防器材，用电器老化或存在相应的安全隐患后应及时更换，化验室内严禁吸烟，在化验过程中，必须严格按照标准操作步骤进行，不得违章作业，严禁化验过程中离开工作岗位。

3.3易燃、易爆、有毒物品及贵重物品必须妥善保管，化学危险品应存放在专用房间，放置地点要远离火源，电源，药品库内严禁吸烟。

PCR实验室分为四个区域，进入各工作区域必须严格按照单一方向进行，不同的工作区域使用不同的工作服（例如不同的颜色）。工作人员离开各工作区域时，不得将工作服带出，四区域分别为：

1.试剂配制区n

2.样品处理区n

3.核酸扩增区n

4.产物分析区n

如使用全自动分析仪，区域可适当合并,三四区可合并为扩增产物分析。

各区的功能是：

试剂准备区：扩增试剂的配制、分装和保存。

样品处理区：样品登记、分装；核酸提取、保存和加样。

扩增产物分析区：扩增产物的测定、结果分析、登记及报告。

扩增前区与扩增后区应严格分开，须使用不同的房间，两区之间有一定的间隔。

使用商品化试剂盒可在样品处理区进行少量试剂配制。

在满足下列操作和清洁处理要求的前提下样品处理区和试剂准备区可设在同一房间内：

在生物安全柜内操作。

每个实验人员、实验组分别使用各自的试剂及耗材。

盛放污染材料的器皿密封并一次性使用。 用有效的方法对操作区域和共享器具在实验前后进行清洁及消毒。

设计要求：

PCR实验室可以是分散形式，也可以是组合形式,现要主要是以组合形式为主流。完成一组PCR实验，通常应经过试剂配制、样品处理、核酸扩增及产物分析四个实验过程，若实验工艺需要，还应增加样品粉碎过程。

一、分散形式PCR实验室

所谓分散形式PCR实验室，是指完成上述实验过程的实验用房彼此相距较远，呈分散布置形式。对于这种布置形式的PCR实验室，由于各个实验之间不易相互干扰，因此无需特殊条件要求。

二、组合形式PCR实验室

所谓组合形式PCR实验室, 是指完成PCR四个实验过程的实验用房相邻布置，组成独立实验区域的形式。对于组合形式PCR实验室，由于各个实验间集中布置，容易造成相互干扰，因此，对总体布局以及屏障系统具有一定的要求。各室在入口处设缓冲间，以减少室内外空气交换。