实验二减数分裂标本的制作与观察

实验02 观察蝗虫精母细胞减数分裂装片目的要求通过观察蝗虫精母细细胞减数分裂固定装片，识别减数分裂不同的阶段染色体的形态、位置和数目，加深对减数分裂过程的理解。

实验原理蝗虫的精母细胞进行减数分裂形成精细胞，再形成精子。

此过程要经过两次连续的细胞分裂：减数第一次分裂和减数第二次分裂。

在此过程中，细胞中的染色体形态、位置和数目都在不断地发生变化，因而可据此识别减数分裂的各个时期材料用具蝗虫精母细胞减数分裂固定装片、显微镜实验步骤1、把蝗虫精母细胞减数分裂固定装片放到显微镜的载物台上，用标本夹夹好。

2、调好显微镜在高倍镜下观察，识别初级精母细胞、次级精母细胞和精细胞。

3、先在低倍镜下依次找到件数第一次分裂中期、后期和减数第二次分裂中期、后期的细胞，再在高倍镜下仔细观察染色体的形态、位置和数目。

4、根据观察结果，尽可能多地绘制减数分裂不同时期的细胞简图（左眼观察，右眼绘图）。

(1)宜选用雄性个体生殖器官如植物的花药、动物的精巢作为观察减数分裂的实验材料的原因：①雄性个体产生精子的数量多于雌性个体产生卵细胞的数量。

②在动物卵巢内的减数分裂没有进行彻底，排卵时排出的仅仅是次级卵母细胞，其只有和精子相遇后，在精子的刺激下，才能继续完成减数分裂Ⅱ。

(2)精巢内精原细胞既可进行有丝分裂，又可进行减数分裂，因此可以观察到染色体数为n、2n、4n的不同细胞分裂图像。

观察减数分裂实验的关键提醒（1）临时装片制作时应特别注意的几个关键环节①为了更加清晰地观察染色体形态，在解离前，一般要对动物组织进行低渗处理，其目的是凭借渗透作用使细胞膨胀，染色体铺展，同时可使黏附于染色体的核仁物质散开，以便能在一个平面上观察所有染色体形态。

②低渗处理后再进行解离固定，将细胞杀死并去除细胞之间的黏连物，使细胞彼此分开，经压片，细胞会彼此分散开，解离后进行漂洗，去除解离液对染色效果的影响，染色体容易被醋酸洋红(染)液或龙胆紫溶液染色，染色完成后进行制片并压片。

姓名郭雪飞系年级2014级生物基地班同组者科目遗传学题目减数分裂标本的制作与观察学号201400140095一、实验名称减数分裂标本的制作与观察二、实验目的1、从遗传与变异的角度掌握其解百纳过程，并理解减数分裂的意义。

2、学会正确进行生殖细胞的取材和制作减数分裂玻片标本的技术。

3、观察前期I，认识减数分裂前期I染色体的复杂变化，了解其各个时期的具体特征。

三、实验原理1、减数分裂及其意义减数分裂是生物细胞中染色体数目减半的分裂方式。

性细胞分裂时，染色体只复制一次，细胞连续分裂两次，这是染色体数目减半的一种特殊分裂方式。

减数分裂不仅是保证物种染色体数目稳定的机制，同时也是物种适应环境变化不断进化的机制。

减数分裂的结果是：成熟生殖细胞中的染色体数目比原始生殖细胞的减少一半。

减数分裂（Meiosis）范围是进行有性生殖的生物；时期是从原始生殖细胞发展到成熟生殖细胞。

它是有性生殖的个体在形成生殖细胞过程中发生的一种特殊分裂方式，不同于有丝分裂和无丝分裂，减数分裂仅发生在生命周期某一阶段，它是进行有性生殖的生物性母细胞成熟、形成配子的过程中出现的一种特殊分裂方式。

受精时雌雄配子结合，恢复亲代染色体数，从而保持物种染色体数的恒定。

另外，在减数分裂过程中同源染色体和非姐妹染色单体间发生基因重组，使配子的遗传多样化，增加了后代对环境的适应性，因此减数分裂不仅是保证生物种类染色体数目稳定的机制，同时也是物种适应环境变化不断进化的机制。

减数分裂不仅是保持物种遗传物质稳定传递的手段；在减数分裂过程中，通过同源染色体非姐妹染色单体的联会，非同源染色体的自由组合以及四分体中非姐妹染色体的部分片段的交叉互换，增加了基因变异种类，增强了群体的遗传多样性，为自然选择提供更多原材料。

姓名郭雪飞系年级2014级生物基地班同组者3、减数第二次分裂过程姓名郭雪飞系年级2014级生物基地班同组者科目遗传学题目减数分裂标本的制作与观察学号201400140095 精子：经过变形期形成精子，精子可分为头、中段和尾三部分（精子的变化过程是从圆形→椭圆形→梭形→丝状）。

小鼠细胞分裂标本的制备与观察一、实验目的a)掌握小鼠精巢染色体标本制作法。

b)观察减数分裂过程中不同时期的染色体。

c)观察腹水瘤细胞有丝分裂中不同时期的染色体形态。

二、实验原理a)减数分裂（Meiosis）是发生于生殖细胞的一种特殊的细胞分裂方式，DNA复制一次，而细胞连续分裂两次，形成单倍体的精子和卵子。

减数分裂远比有丝分裂复杂，经两次细胞分裂，分别称减数分裂Ⅰ、减数分裂Ⅱ，两次分裂间又一个较短的间期，这个间期DNA不复制。

b)雄性动物精子发生于睾丸曲精细管的生精上皮细胞，由其中的精原细胞经多次有丝分裂和生长，形成初级精母细胞，初级精母细胞经减数分裂形成次级精母细胞，次级精母细胞有丝分裂成精细胞，再经一系列变化成精子。

c)因此，通过分离曲细精管、剪碎并加入液体吹打，可使官腔各种细胞游离出来，然后经过低渗、固定、染色等过程就可制成包含减数分裂各期的标本。

三、实验试剂及仪器a)材料：成年雄性小白鼠b)用品：注射器、平皿、尖头镊子、剪刀（普通剪刀、眼科小剪刀）、吸管、离心管、离心机、玻片等。

c)试剂：1、100μg/ml秋水仙素。

2 、2％柠檬酸钠溶液3、 0.075M的KCI4、3:1甲醇:冰醋酸及1:1甲醇:冰醋酸（应现配）5、PH6.8，0.01M的PBS缓冲液6、Gimesa原液7、Gimesa工作液：1份Gimesa原液加9份PH6.8，0.01M的PBS缓冲液，混匀。

工作液应现用现稀释。

四、实验步骤a)细胞收集i.小鼠精巢细胞收集1.注射秋水仙素，增加中期分裂相。

(试验前4－5小时，小鼠腹腔注射秋水仙素0.5ml（100μg/ml）。

2.取睾丸并清洗。

断颈处死小鼠，剖开腹部，取出肾形睾丸，放入盛有4－5 ml2％柠檬酸钠溶液的平皿中，洗去污血，去掉胞外脂肪等物。

3.挑出曲细精管并剪碎。

弃污液，另加柠檬酸钠溶液1 ml，用尖头镊尖将曲细精管拉出，并用眼科剪尽量将其剪碎。

4.游离并收集细胞。

制备减数分裂细胞标本低渗处理的操作步骤制备减数分裂细胞标本低渗处理的操作步骤引言：减数分裂是生物体繁殖中一种重要的细胞分裂方式，用于有性生殖的过程中。

为了研究减数分裂的机制和过程，科学家需要制备高质量的减数分裂细胞标本。

在制备减数分裂细胞标本时，低渗处理是一个关键步骤，它可以帮助保持细胞形态和结构的完整性。

下面将详细介绍制备减数分裂细胞标本低渗处理的操作步骤。

一、材料准备1. 细胞培养基：根据实验需要选择适当的培养基，如DMEM或RPMI-1640等。

2. 10% PBS：将PBS溶液稀释至10%浓度。

3. 磷酸缓冲液（PB）：配制1M磷酸二氢钾（KH2PO4）和1M磷酸二氢钠（Na2HPO4）溶液，并按比例混合得到pH为7.4的PB缓冲液。

4. 0.25% 吡啶蓝溶液：将0.25g吡啶蓝溶解在100ml PB缓冲液中。

5. 2% 钾氯化铷（KCl）溶液：将2g KCl溶解在100ml去离子水中。

二、细胞处理1. 细胞收集：将培养皿中的细胞用PBS洗涤一次，然后加入足够的PBS悬浮细胞。

2. 离心：将细胞悬液转移到离心管中，并以1000rpm的速度离心5分钟，倒掉上清液。

3. 固定：用10% PBS缓冲液固定细胞，将固定液滴加到细胞沉淀上，轻轻混匀，静置15分钟。

4. 再次离心：以相同的速度和时间离心，倒掉上清液。

三、低渗处理1. 加入低渗处理缓冲液：向沉淀中加入足够的0.25% 吡啶蓝溶液，使其完全浸泡细胞沉淀。

2. 低渗处理时间：根据实验需要和样本类型确定低渗处理时间。

通常情况下，10-30分钟的低渗处理时间足够保持细胞形态和结构的完整性。

3. 再次离心：以相同的速度和时间离心，倒掉上清液。

四、细胞固定1. 加入固定液：向沉淀中加入足够的2% KCl溶液，使其完全浸泡细胞沉淀。

2. 固定时间：根据实验需要和样本类型确定固定时间。

通常情况下，10-30分钟的固定时间足够保持细胞形态和结构的完整性。

实验2 减数分裂与配子形成一、实验目的1.通过对动物精子形成过程中减数分裂的观察，了解动物生殖细胞形成的一般过程以及染色体在这一过程中的动态变化，深刻理解减数分裂的遗传学意义。

2.掌握制作玻片标本的技术二、实验原理减数分裂是有性生殖的生物在形成配子的过程中所进行的一种特殊形式的细胞分裂，与有丝分裂相比，减数分裂的前期很长，可以划分为5个时期。

细线期染色质浓缩、凝聚成染色体，DNA还不能看出双线结构，染色体之间缠绕扭曲，无法计数；偶线期同源染色体配对，形成二价体，比细线期要清楚，染色体比较细长，无法计数；粗线期染色体变粗变短，可以看到交叉，基本能够辨别染色体头尾，可以初步计数；双线期染色体进一步缩短；终变期染色体浓缩得最短，可以看到染色体团块。

三、实验用具及材料实验用具：显微镜、解剖针、镊子、解剖盘、吸水纸、载玻片、盖玻片、改良苯酚品红染液、材料：蝗虫精巢四、实验步骤1.将已经取出的蝗虫的精巢中分离出两根精细小管，放在干净的载玻片上，用吸水纸将上面的水吸净。

2.在精细小管的位置滴加1滴改良苯酚品红染液，在室温下染色10到15min。

3.盖上盖玻片，在盖玻片上垫上两层吸水纸，用解剖针的针柄轻敲盖片，使材料充分均匀分散开，使细胞分散压平。

4. 置于显微镜下观察，先用低倍镜（10×）观察，找到比较好的视野后转用高倍镜（40×）观察。

分辨减数分裂各个时期，特别是前期的各个时期，绘制所看到的分裂时期的图。

五、实验结果1.取材：我们取的是已经准备好的蝗虫精巢，所以不存在错取到肌肉组织或其他组织的可能。

虽然动物的精巢里不断进行着减数分裂，但是蝗虫的精细小管很多，有的精细小管里的正在分裂的细胞较多，而有的则含较多的精细胞。

我最初观察时，视野里全是很小的颗粒状细胞，还有很多梭形的精子，几乎没有看到分裂期的细胞，就是因为取材的时候取到了一根大部分细胞已完成减数分裂的精细小管。

幸好最初取材时取了两根精细小管，这时候才意识到为什么一开始老师让我们多取一根。

实验二减数分裂的制片与观察PB12210261 徐导中国科学技术大学生命科学学院【摘要】本实验选取玉米雄花作为实验材料，首先将已固定好雄花的花药剥离出来，然后通过对花粉母细胞进行解离、染色、压片来观察细胞减数分裂的全过程。

【关键词】减数分裂细线期偶线期粗线期双线期终变期【Abstract】In this experiment, we chose Zea mays as the material. We got a lot of cells in meiosis. Then we disposed the cells in order to observe the whole processes of the meiosis.【Key words】Meiosis leptonema zygonema pachynema diplonema diakineses【实验部分】一、实验目的1、了解植物生殖细胞的形成过程；2、熟悉减数分裂各时期的特点，加深对减数分裂的认识；3、掌握植物花粉母细胞的压片技术和方法。

二、基本原理减数分裂（meiosis）,又称成熟分裂（maturation division）是在性母细胞成熟时，配子形成过程中所发生的一种特殊方式的有丝分裂。

性母细胞（2n）连续进行两次核分裂（第一次分裂和第二次分裂），形成四个染色体数目减半的配子(n)。

经过受精，雌雄配子（n）融合为合子，又恢复了体细胞染色体数目（2n）。

确保了亲代与子代间染色体数目的恒定性，从而保证了物种相对的遗传稳定性。

在适当的时候采集植物的花蕾制备染色体标本就可在显微镜下观察到植物细胞的减数分裂。

整个减数分裂可分为下列各个时期：第一次分裂前期Ⅰ减数分裂的特点之一就是前期Ⅰ特别长，而且又较复杂。

通常根据细胞核内结构变化特征又将这一期分成五个时期，即细线期、偶线期、粗线期、双线期和终变期。

细线期（leptotene）：这是减数分裂的开始时期，染色质开始浓缩为细而长的丝状，首尾不分，且细线局部可见到念珠状颗粒，即染色粒。

实验四减数分裂标本的制作与观察一、实验目的通过本实验，掌握减数分裂标本的制作方法，观察减数分裂过程中染色体的动态变化。

了解减数分裂在遗传学中的意义和重要性。

二、实验原理减数分裂是配子形成过程中所特有的细胞分裂方式。

减数分裂过程中，染色体只复制一次，核分裂两次，形成的配子中染色体的数目变为原来的一半，雌、雄配子的结合就保证了染色体数目的恒定。

在分裂过程中可以辨认染色体形态和数量上的动态变化，从而为遗传学研究中远缘杂中的分析、染色体工程中的异系鉴别，常规的组型分析以及三个基本归路的论证，提出了直接与间接的依据。

三、实验材料、用具和药品1. 材料植物花及花序，性成熟的蝗虫2．用具显微镜、剪刀、镊子、单面刀片、载玻片、盖玻片等3．药品卡诺氏固定液、醋酸洋红染色液四、实验步骤（一）花药涂压法1. 取材：选取适当大小的花蕾，是观察花粉母细胞减数分裂的关键步骤，减数分裂时的植株形态和花蕾的大小，依植物种类和品种不同，须经过实践记录，以备后来参考。

通常应从最小的花蕾起试行观察，在花冠现色和花药变黄（或红、紫）之前为好。

凡是白天开花的，可在上午7—10时固定。

2. 固定：卡诺固定液中固定2-24h。

固定后，保存在70%的酒精中，放入冰箱中冷藏供用。

3. 染色与压片：1）取固定好的花蕾置载玻片上，吸去多余的保存液，用解剖刀及刀片解剖出一个花药，视花药大小横切为3—4段（纵切）。

2）加一滴染液，用解剖针轻压花药，使花粉母细胞从切口出来，静置染色5~10分钟，此时可从不同大小的花中连续取出几个花药，进行同样的染色处理。

3）依次将载玻片在酒精灯上来回移动几次轻微加热，同时用解剖针轻微拨动花药以促进着色，进一步去除残存的花药壁，滤纸吸去多余染液。

4)加盖玻片，在盖玻片上覆以滤纸，用拇指均匀用力压下，勿使盖玻片移动或压破。

4. 镜检。

先在低倍镜下寻找花粉母细胞，一般花粉母细胞较大，圆形或扁圆形，细胞核大，着色较浅。

而一些形状较小，整齐一致着色较深的细胞是药壁体细胞，一些形状处于中间略呈扇形的细胞是从四分体脱开后的小孢子或幼小花粉粒。

实验二.植物花蕾减数分裂制片及观察实验目的：通过植物花蕾的减数分裂制片和观察，了解减数分裂的过程和规律。

实验原理：植物花蕾的生长过程中，花蕾内的细胞发生减数分裂，形成雌、雄配子体。

减数分裂是生殖细胞分裂的一种，其特点是染色体数目减半。

在减数分裂的过程中，先经过一次有丝分裂，产生两个相同染色体数目的间期细胞。

然后，再进入第二次分裂，其中染色体在核质中自由排列并分离，最终形成四个单倍体的生殖细胞。

实验材料：1. 茄子或百合等植物花蕾。

2. 75%酒精。

3. 1%苏丹红染液。

4. 光学显微镜。

5. 盖玻片。

实验步骤：1. 取一颗开花前的茄子或百合的花蕾，用剪刀将花瓣、花药等植物细胞切除，只留下花蕾的基部。

2. 将花蕾浸泡在75%酒精中，静置24h以上，使花蕾内的细胞中的液体充分挥发。

3. 用镊子将花蕾基部剪下，用小刀将其切成纵平面。

4. 将切好的花蕾放入1%苏丹红染液中，静置3min，然后去除余染。

5. 用移液管将少量蒸馏水滴在切片上，覆盖盖玻片。

6. 在显微镜下观察制片，寻找减数分裂过程中的染色体纹理和细胞形态等。

实验注意事项：1. 制片时要注意操作技巧，避免受伤。

2. 操作前要对刀具进行消毒处理，避免污染。

3. 在苏丹红染液中染色时，要避免过染或不均匀染色，影响观察结果。

4. 在显微镜下观察时，要注意调节放大倍数和光线，以便更清晰地观察到细胞结构和染色体的纹理等。

实验结论：通过本次实验，可以深入地了解到植物花蕾减数分裂的过程和规律。

在实验过程中，观察到同一细胞中的染色体形态各异、数目减半等现象，进一步说明减数分裂是生殖细胞分裂中的重要过程。

同时，实验让我们对植物细胞结构和染色体的形态等有了更加深刻的认识，为生物学知识的深入学习和研究提供了基础知识。

观察果蝇细胞减数分裂的制片的关键步骤观察果蝇细胞减数分裂的制片是一种重要的实验技术，它可以帮助研究人员了解细胞减数分裂的过程和机制。

下面将详细介绍观察果蝇细胞减数分裂的制片的关键步骤。

一、实验材料准备1. 果蝇标本：选择成熟的果蝇个体，最好是雌性果蝇，因为它们的卵巢中含有丰富的卵母细胞。

2. 生理盐水：用于洗涤果蝇标本，保持其活力。

3. 乙酸酒精固定液：用于固定果蝇细胞，使其保持形态完整。

4. 高渗透溶液：用于处理标本，使其质地变软以便切片。

二、制备果蝇卵巢组织1. 取出成熟果蝇个体，并将其放入生理盐水中洗涤，去除表面污物。

2. 使用显微镜和显微镊将果蝇个体放置在玻璃刀片上。

3. 使用显微镊轻轻撕开果蝇个体的腹部，暴露出卵巢组织。

4. 使用显微镊将卵巢组织取出，并放入含有高渗透溶液的培养皿中。

三、制片1. 取出一块玻璃刀片，并在其上滴上一滴高渗透溶液。

2. 使用显微镊将卵巢组织从培养皿中取出，并放置在玻璃刀片上。

3. 使用另一块玻璃刀片将卵巢组织压扁，使其变薄。

4. 将压扁后的卵巢组织迅速移至乙酸酒精固定液中固定，固定时间为10-15分钟。

四、染色1. 从乙酸酒精固定液中取出固定的卵巢组织，并用生理盐水洗涤3次，每次5分钟。

2. 取出一滴染色剂（如格里姆染色剂）滴在固定的卵巢组织上，静置10-15分钟，使细胞核染色。

3. 用生理盐水洗涤染色后的卵巢组织3次，每次5分钟。

五、制片封片1. 取出一块玻璃刀片，并在其上滴上一滴适量的甘油胶。

2. 使用显微镊将染色后的卵巢组织取出，并放置在甘油胶滴上。

3. 将另一块玻璃刀片贴在卵巢组织上，轻轻压平。

4. 将制成的封片放置在干燥器中，待其干燥。

六、观察和记录1. 将制成的封片放置在显微镜下，使用高倍镜观察细胞核的形态和染色情况。

2. 使用显微镜下的摄像系统或相机拍摄所观察到的细胞核图像。

3. 根据所观察到的图像，记录并分析果蝇细胞减数分裂的特征和变化。

以上就是观察果蝇细胞减数分裂的制片的关键步骤。

实验2 植物减数分裂染色体制片与观察一、实验目的1.掌握花粉母细胞染色体制片技术；2.了解减数分裂过程中染色体的变化特征。

3.增强对植物细胞减数分裂的感性认识，进一步加深对减数分裂的理解。

二、实验原理1.减数分裂的概念理解。

2.减数分裂过程中的染色体变化的特点。

3.减数分裂的遗传学意义。

4.由于植物花药取材容易，操作方便，一般作为减数分裂制片材料，在发育的适宜时期取样、固定、压片等程序，便可在显微镜下观察到减数分裂时染色体的行为变化。

三、实验材料、器具及试剂黑麦幼穗镊子、载玻片、盖片、解剖针、吸水纸醋酸洋红、改良卡诺固定液（95%乙醇∶冰醋酸=3∶1）四、实验步骤（本实验从第3步骤进行）1．取材：选取适宜的小花或小穗，是实验的关键。

不同材料鉴别方法不同。

一般在9－11时固定，不需预处理。

黑麦：在旗叶挑出后，旗叶与倒二叶的叶耳间距为3-4cm左右时，花药黄绿色，即处于减数分裂时期。

如花药为绿色时则为时过早，花药为黄色，则已过时。

一般上午8-10点为取材最佳时间。

2．固定：将所取的幼花序立即放入改良卡诺固定液中固定2－24小时。

经95％、80％酒精冲洗后，保存于70％酒精中保存备用。

(1) 迅速防止细胞死亡后的变化,防止自溶、腐败，尽量保持生长状态结构。

(2) 使细胞中的蛋白质、脂肪、糖、酶等成分转变为不溶性物质，以保持生前的形态。

(3) 使组织内各种物质成分产生不同的折光率，便于观察和鉴定。

(4) 使不同组织成分对染料有不同的亲和力，便于染色。

(5) 防止细胞过度收缩或膨胀，失去原有的形态结构。

3．制片：取一小穗置载片上，用解剖针取出花药，根据花药大小横切3-4段(或加以纵切)，加1滴醋酸洋红（或改良苯酚品红）染液。

用解剖针轻压花药，使花粉母细胞从切口出来。

静置染色5-10分钟。

去除残存的花药壁，加盖玻片，使染色液刚好布满，在盖玻片与载玻片之间成一薄层(不能过多，以防止花粉母细胞溢出盖玻片的边缘)。