人单纯疱疹病毒抗体(HSV Ab)试剂盒实验原理

优生四项检测标准操作规程1.检验原理：本品系用抗人IgM抗体固相的硝酸纤维素膜和胶体金标记的巨细胞病毒抗原、弓形体抗原、风疹病毒抗原、单纯疱疹病毒Ⅱ型抗原及其他试剂制成，应用层析式捕获法的原理检测人血清或血浆中巨细胞病毒抗体（IgM）、弓形虫抗体（IgM）、风疹病毒抗体（IgM）、单纯疱疹病毒Ⅱ型抗体（IgM），用于巨细胞病毒感染、弓形体感染、风疹病毒感染、单纯疱疹病毒Ⅱ型感染的临床辅助诊断。

2.试剂主要组成成分：巨细胞病毒抗体（IgM）、弓形虫抗体（IgM）、风疹病毒抗体（IgM）、单纯疱疹病毒Ⅱ型抗体（IgM）联合检测卡；每一个检测卡组成为独立的检测单元，含有巨细胞病毒抗体（IgM）、弓形虫抗体（IgM）、风疹病毒抗体（IgM）、单纯疱疹病毒Ⅱ型抗体（IgM）检测条各一条。

每一个检测条由吸水纸、纤维素膜、金标垫、样品垫、PVC衬板和包装塑料卡组成。

纤维素膜上喷有鼠抗人IgM单克隆抗体，金标垫上喷有胶体金标记的相应的巨细胞病毒、弓形体、风疹病毒、单纯疱疹病毒Ⅱ型基因工程抗原。

3.样本要求：待测样本为血清或血浆，应在2-8℃保存。

样本若需保存时间较长（超过2天），则应冰冻保存。

抗凝剂如EDTA钠盐、枸橼酸钠、肝素等对试验结果没有影响。

避免使用长菌或被污染的血清或血浆，避免使用溶血、混浊或脂血样本及反复冻融样本，否则可能会造成假阳性。

4.检验方法：将检测卡水平放置，在检测孔中加入10ul标本，再加1滴（或50ul）标本稀释液。

15—20分钟内观察结果，超过20分钟判读结果无效。

5.阳性判断值在20分钟内观察结果，超过20分钟判读结果无效。

只显示对照线为阴性；对照线和检测线均出现为阳性；对照线不显示，本次实验无效。

弓形虫抗体（IgM）、风疹病毒抗体（IgM）、单纯疱疹病毒Ⅱ型抗体（IgM），表明近期没有感染巨细胞病毒或弓形体或风疹病毒或单纯疱疹病毒Ⅱ，但标本取样太早，也可能得出阴性结果。

因此阴性结果并不是结论性的6.2阳性结果代表标本中检测出巨细胞病毒，或弓形体，或风疹病毒，或单纯疱疹病毒Ⅱ型抗体（IgM），表示患者急性感染了巨细胞病毒，或弓形体，或风疹病毒，或单纯疱疹病毒Ⅱ型，检测线颜色越浓，表示相应病原体IgM含量越高。

单纯疱疹病毒Ⅱ型IgG抗体检测试剂盒（酶联免疫法）使用说明书【产品名称】通用名称：单纯疱疹病毒Ⅱ型IgG抗体检测试剂盒（酶联免疫法）英文名称：Diagnostic Kit for IgG Antibody to Herpes Simplex Virus TypeⅡ（ELISA）【包装规格】48人份/盒，96人份/盒【预期用途】单纯疱疹是单纯疱疹病毒所引起的一种急性疱疹性皮肤病，人类单纯疱疹病毒分为两型，即单纯疱疹病毒I型(HSV-I)和单纯疱疹病毒Ⅱ型(HSV-Ⅱ)。

I型主要引起生殖器以外的皮肤、粘膜(口腔粘膜)和器官(脑)的感染。

Ⅱ型主要引起生殖器部位皮肤粘膜感染。

病毒经呼吸道、口腔、生殖器粘膜以及破损皮肤进入体内，潜居于人体正常粘膜、血液、唾液及感觉神经节细胞内。

当机体抵抗力下降时，如发热、胃肠功能紊乱、月经、妊娠、病灶感染和情绪改变时，体内潜伏的HSV被激活而发病。

本试剂盒用于检测血清或血浆中的单纯疱疹病毒Ⅱ型IgG抗体，用于辅助诊断单纯疱疹病毒Ⅱ型感染和单纯疱疹病毒Ⅱ型感染者的流行病学调查。

【检验原理】本试剂盒采用基因工程表达的重组HSV-Ⅱ型抗原包被反应板，酶标记的鼠抗人IgG为示踪物，四甲基联苯胺显色系统，ELISA间接法检测人血清或血浆中的单纯疱疹病毒Ⅱ型IgG抗体。

【主要组成成份】半成品名称主要组分规格半成品名称主要组分规格1 HSV-Ⅱ-IgG反应板HSV重组抗原4×12孔/ 8×12孔8 底物液A 过氧化氢溶液1瓶(4ml / 8.5ml)2 HSV-Ⅱ-IgG酶结合物鼠抗人IgG-HRP1瓶(6.5ml/13ml) 9 底物液B TMB 1瓶(4ml / 8.5ml)3 HSV-Ⅱ-IgG阴性对照山羊血清1瓶(1ml) 10 终止液硫酸1瓶(4ml / 8.5ml)4 HSV-Ⅱ-IgG阳性对照HSV-Ⅱ-IgG阳性血清1瓶(1ml) 11 封板膜3贴5 HSV-Ⅱ-IgG Cut-off对照 HSV-Ⅱ-IgG阳性血清1瓶(1ml) 12 说明书1份6 浓缩洗涤液（20×）磷酸盐1瓶(25ml / 50ml) 13 自封袋1个7 HSV-Ⅱ-IgG标本稀释液NaCl 1瓶(6.5/13ml)【储存条件及有效期】试剂盒置2～8℃避光贮存，有效期12个月。

病毒性感染的血清学诊断检查受微生物感染的机体有无特异性抗体，称为血清学诊断。

利用抗原与抗体能发生特异性结合的特点，用已知的病毒抗原检测患者血清中相应抗体，是病毒血清学诊断的基本原理。

对病毒性感染的血清学诊断最常用的办法是中和实验、补体结合实验、血凝抑制实验等，其中中和实验最为常用。

用动物、鸡胚和细胞培养均可举行。

中和实验多采纳细胞培养办法举行测定，其原理是将系列稀释的血清与病毒液混合后，再分离感染细胞，测定病毒的感染性，观看血清对细胞的庇护作用。

假如细胞不浮现病变，则证实血清中有病毒特异抗体存在。

效价凹凸是以能庇护半数细胞不产生CPE的血清最高稀释倍数来表示。

用此实验可检测患者血清中抗体的消长状况，常用于病毒感染的流行病学调查；也可用来鉴定未知病毒或讨论病毒的抗原结构。

下面以单纯疱疹病毒（herpes simplex virus, HSV）为例，介绍细胞培养法中和实验来测定抗中和抗体，包括蚀斑削减法和细胞病变法。

一、蚀斑削减法测定中和抗体【材料】 1．待测血清无菌采集受检者末梢血5m1置离心管中，凝固后2000r/min离心5分钟，吸血清，经56℃灭活30分钟后冰箱冻存。

2. HSV-1型病毒（预测定PFU)。

3. Vero单层细胞培养皿（60mm）或培养瓶14支。

4. PBS、培养基A液、B液和C液等，配制办法同空斑定量法。

5．无菌试管、各种吸管（2ml,lml,5ml)、无菌注射器及离心管（10ml)。

【办法】 1．待测血清稀释取7支小试管，按表8-5倍比稀释血清。

2．病毒稀释将HSV-1型病毒稀释，使其浓度为1000PFU/ml, 3．取各稀释度血清0.5 ml加入试管中，各管中分离再加入0.5 ml病毒液（1000PFU/ml)，混匀后37℃作用1小时。

4．取各管血清与病毒混合物0.2m1，分离加入单层培养Vero细胞培养皿（瓶）中，每稀释度接种2支平皿（瓶），加预温A,B混合培养液4m1，凝固后反转培养3～4天后，再加C液(1％中性红琼脂培养基）2m1，凝固后培养数小时或过夜，测定各平皿（瓶）的空斑数。

单纯疱疹1型病毒(HSV1)IgM抗体ELISA试剂盒的研制邓　文1,江　敏2(1.泰山医学院基础部,山东泰安　271000;2.济南市儿童医院,山东济南　250052)摘要:目的　建立快速、敏感、特异性好的抗单纯疱疹1型病毒(HSV1)IgM的检测方法。

方法　制备纯化抗原及单抗,对间接EL ISA法检测人单纯疱疹1型病毒(HSV1)IgM抗体方法进行了优化改良,并对随机选择的331份临床孕妇血清标本进行了检测,用德国DIM A HSV1-I gM ELISA试剂与本试剂同时比较。

结果　本试剂盒的敏感性、特异性和诊断指数分别为82.1%,93.5%和175.6%,与德国试剂的符合率为92.1%。

结论　本试剂的质量与国外商品试剂相似,具有较好的特异性和敏感性,可广泛应用于临床优生优育检测。

关键词:HSV1;IgM;ELISA中图分类号:R392-33　文献标识码:A　文章编号:1004-7115(2005)02-0123-03An indirect ELISA method for HSV1-IgMDENG Wen1,J IAN G Min2(1.Taishan M edical College,Taian271000,China;2.Jinan Children Hospital,Jinan250052,China)A bstract:Objective:To improve the efficiency of the HSV1-IgM indirect EL ISA kit.Methods:T he HSV1-Ig M test kit w as developed by using material of our lab by indirect EL ISA.T he serum of331preg nant wo men w ere assayed in g ood condition with this new kit.The results were analy zed and compared w ith those of the D IM A HSV1-IgM ELISA kit produced by Germany.Results:T he sensitivity,specificity and diag nostic indexes were82.1%,93.5%and175.6%re-spectively.T he consistent results of tw o kits were at the rate of92.1%.Co nclusion:The quality of the new kit is as good as that of G enmany and this new kit can be used in clinical test of prepo tency for its hig h quality in specificity and sensitiv-ity.Key words:HSV1;I gM;EL ISA 单纯疱疹病毒(HSV)是To RCH中的一种,有两个血清型,单纯疱疹病毒1型(HSV-1)和单纯疱疹病毒2型(HSV-2)。

PCR法检测HSV介绍聚合酶链反应（PCR）是一种常用的基因分析技术，可以对人类疾病进行快速、灵敏的检测。

HSV（单纯疱疹病毒）是一种常见的病毒，PCR法可以用于检测HSV感染。

检测原理PCR法通过扩增病毒DNA的特定区域来检测HSV感染。

具体步骤如下：1. 提取样本中的DNA。

2. 根据已知的HSV基因序列设计引物，引物应与HSV特定区域的DNA序列互补。

3. 将引物与样本中的DNA结合，形成DNA引物复合物。

4. 在PCR反应中，通过加热和冷却循环，使DNA引物复合物得以扩增。

5. 扩增后的DNA片段可以通过凝胶电泳等方法进行可视化。

优点PCR法检测HSV具有以下优点：1. 灵敏度高：PCR法可以扩增少量的病毒DNA，使得低浓度的HSV也能被检测到。

2. 特异性好：通过设计特异性引物，可以排除其他病毒的干扰，使检测结果更准确。

3. 快速方便：PCR法在短时间内完成，适用于快速诊断和筛查。

注意事项在使用PCR法检测HSV时，需要注意以下事项：1. 严格控制实验条件：避免外源性污染和误结果的产生。

2. 合理选择引物：确保引物与HSV特定区域的DNA序列互补，避免假阳性或假阴性结果。

3. 建立阳性对照组和阴性对照组：通过与已知HSV阳性样本和无HSV感染的阴性样本对比，验证检测结果的准确性。

结论PCR法是一种快速、灵敏、特异性好的方法，可以用于HSV 感染的检测。

合理操作和严格控制实验条件，可以获得可靠的检测结果。

该方法在临床诊断和病毒筛查中具有重要意义。

参考文献：1. Smith, J. et al. (2005). Polymerase Chain Reaction. Methods in molecular biology (Clifton, N.J.), 288, 107-27.2. Corey, L. (2007). The current trend in genital herpes. Progress in molecular biology and translational science, 90, 17-30.。

单纯疱疹病毒igg阳性单纯疱疹病毒（HSV）是一种常见的病毒感染，它可以引起单纯疱疹。

通常情况下，HSV感染会导致患者身体不适，但大多数人的免疫系统可以有效控制并阻止病毒的进一步传播。

然而，在某些情况下，单纯疱疹病毒的IgG抗体水平可能会升高，这被称为单纯疱疹病毒IgG阳性。

HSV IgG阳性意味着你曾经感染过HSV并产生了IgG抗体。

IgG 抗体是一种免疫系统产生的抗体，能够帮助身体抵抗病毒感染。

一旦感染了HSV，你的免疫系统就会产生IgG抗体来对抗病毒。

这些抗体可以持续存在体内，并提供对HSV的保护。

HSV分为HSV-1和HSV-2两种类型。

HSV-1通常引起口唇周围的疱疹，并可以通过接触和飞沫传播。

HSV-2通常引起生殖器周围的疱疹，并通过性接触传播。

然而，这两种病毒可以在不同部位引起感染，而被另一种类型的病毒感染的风险也存在。

HSV IgG阳性的结果很常见，尤其是在成年人中。

根据研究，全球约有67％的人口感染了HSV-1，而11％的人口感染了HSV-2。

这意味着大多数人在某个时候都可能感染HSV，并产生了IgG抗体。

HSV IgG阳性的结果通常是通过血液检测获得。

这种检测方法通过检测体内特定的HSV抗体来确定感染状态。

IgG抗体检测是确定过去是否感染了HSV的可靠方法，但不能确定感染的具体时间。

对于大多数人来说，HSV感染是无症状的，或者只会有轻微的症状。

然而，少数人可能会出现严重的症状，如疼痛，瘙痒，溃疡和水泡。

HSV感染也可以在某些情况下导致其他严重的并发症，如脑膜炎和结膜炎。

HSV感染通常可以通过药物治疗控制。

抗病毒药物，如阿昔洛韦，可以帮助缩短症状的持续时间和减少病毒的传播。

然而，即使症状缓解或消失，病毒仍然可能保持在体内，并在以后的时间里再次激活。

这也是为什么HSV IgG阳性的结果不能用于确定当前是否感染的原因之一。

对于怀孕的妇女来说，HSV感染尤其需要关注。

HSV感染可以通过产道传给新生儿，并引发严重的传染性疾病。

单纯疱疹病毒Ⅱ型抗体室内质控血清制备及临床应用评价作者：马晓东石怀玉张旭阳等来源：《医学信息》2014年第07期摘要：目的探讨自制外部弱阳性质控血清在检测血清单纯疱疹病毒Ⅱ型（HSVⅡ）试剂盒中应用的可行性，并与康润公司质控血清进行结果比对。

方法试验采用对比检测研究，使用美国Trinity Biotech Plc公司提供抗HSVⅡIgG型和IgM型试剂盒分别检测自制和康润公司质控血清，采用SPSS16.0进行数据处理。

不同月份和不同批号试剂盒间质控血清精密度和稳定性的比较采用均数的t检验，P0.05。

自制血清抗HSVⅡIgG型的S/CO值（3.57±0.98），CV值13.78%；康润公司抗HSVⅡIgG型质控血清S/CO值为（3.275±0.822），CV值为12.55%，两种质控血清CV值比较无统计学差异P>0.05。

结论自制外部弱阳性质控血清在实际检测中精密度、稳定性符合国家对质控物的要求，基层医院检验科有能力制备，值得推广应用。

关键词：质控血清；单纯疱疹病毒；生殖器疱疹生殖器疱疹（GH）是皮肤性病科常见的一种由单纯疱疹病毒Ⅱ型（HSVⅡ）感染引起的性传播疾病，常与生殖道致病微生物如淋球菌，支原体，衣原体，梅毒螺旋体混合感染或其他性病治愈后而发病；此病典型临床表现为生殖器部位的密集水泡，临床诊断相对容易；部分病例由于临床症状不典型或临床医师认识不足常漏诊，因此检测血清HSVⅡ抗体（IgG型和IgM 型）可辅助临床确诊此病；尤其是 IgM型抗-HSVⅡ在血清中出现早，上升快，但在血液中存在时间短，可协助临床早期诊断。

为了保证检测结果准确性，精密度和可靠性，每次实验均须有内部对照质控血清（阳性及阴性血清）和外部对照质控血清，以外部对照质控血清进行室内质量控制。

为了避免商品化质控血清可能存在的基质效应，我们利用检测病例中抗 HSVⅡ阳性标本分别制备了IgG和IgM型弱阳性外部对照质控血清，结果如下。

产品注册证号：3400298赛润ELISA classic单纯疱疹病毒2型IgG抗体定量检测试剂盒（酶联免疫法）说明书德国维润赛润研发有限公司北京代表处北京建国门北大街8号华润大厦2503B邮编：100005电话：+86.(0) 10.85 19 20 70传真：+86.(0) 10.85 19 20 71电子邮件：dialog@网址：单纯疱疹病毒2型IgG抗体定量检测试剂盒（酶联免疫法）说明书赛润ELISA classic目录1.名称2.用途3.诊断意义4.说明5.赛润ELISA classic - 检测原理6.试剂盒组成7..检测所需物质，试剂盒未提供8.储存和稳定性9.赛润ELISA classic的检验步骤9.1注意事项9.2样品准备和储存9.3试剂盒反应试剂的准备9.4检测程序概要9.5检测过程10.检测结果评估10.1 4PL单点定量法10.2检验有效性标准10.3计算赛润ELISA classic单纯疱疹病毒2型IgG（定量）10.4检测结果分析11.性能特性11.1重复性11.2 敏感性和特异性12.有效期13.警告13.1警告和安全措施13.2废料处理14.参考文献15.制造商名称、地址及联系方式单纯疱疹病毒2型IgG抗体定量检测试剂盒（酶联免疫法）赛润ELISA classic酶联免疫法测定人体抗体IgG- 只限用于体外诊断-1. 名称通用名：单纯疱疹病毒2型IgG 试剂盒(定量)英文名：Herpes simplex Virus 2 IgG (quant.)商品名：赛润ELISA classic单纯疱疹病毒2型IgG抗体定量检测试剂盒（酶联免疫法）汉语拼音：Serion ELISA classic danchun paozhen 2xing IgG kangti dingliang jiance shijihe (meilian mianyifa)产品编号: ESR1052G检测评估标准: Dade Behring BEP ® III / BEP ® 2000, DSX, 手动操作2.用途用于定量检测人血清或血浆中产生的对抗单纯疱疹病毒2型IgG的抗体。