原位杂交和免疫组化双标记技术在大鼠全脑脑片培养中的应用

神经生物学研究，尼氏染色、免疫组化、原位杂交...神经生物学是生物学中研究神经系统的解剖，生理，神经生物学病理方面内容的一个分支。

神经科学是专门研究神经系统的构造、功能、发育、遗传学、生物化学、生理学、药理学及病理学的一门科学。

对行为及学习的研究都是神经科学的分支。

对人脑研究是个跨领域的范畴，当中涉及分子层面、细胞层面、神经小组、大型神经系统，如视觉神经系统、脑干、脑皮层。

神经科学致力于科学地研究神经系统。

尽管神经科学学会成立于1969年，但是对于大脑的研究很早就已经开场。

其研究范围包括对神经系统的构造，功能，进化史，发育，遗传，生物化学，生理学，药理学，生物信息学，计算神经生物学和病理学研究。

作为生命科学的一个分支学科，神经生物学是比拟特殊的。

首先，它的研究离不开生命科学的一些根本研究材料与方法。

神经生物学的材料与生物学的其它学科一样，是动物，从低等的果蝇到高等的小鼠、人。

神经生物学的研究方法同样离不开核酸的分析与蛋白质的分析，分子生物学的PCR、免疫组化、western blot也是神经生物学的主要研究方法。

但除此之外，神经生物学有它自身的特点，那就是神经科学所要重点研究器官——脑是高等生物最复杂的，同时神经元几乎是最难培养的细胞，所以神经生物学研究更需要一些特殊的研究方法。

说到神经生物学研究，大家都会想到尼氏染色、免疫组化、原位杂交、彗星实验、动物行为学实验。

说到尼氏染色，不得不想起曾经在实验室里染出来的精巧图片：科普一下：尼氏染色方法是德国病理学家Nissl于1892年创立，其主要根据是神经元胞体内含有大量嗜碱性的尼氏小体。

当组织与某些碱性染料(甲粉紫、硫茧、焦油紫等)作用时，细胞中的尼氏体能够选择性与其结合而着色。

Lin-droos对尼氏染色方法进展了改进，并应用于颅脑组织切片的病理研究。

改进后的方法大大缩短了染色时间，且胞内细胞核，尼氏体均能清晰可见。

尼氏染色的方法虽然简单易行，但是染色的范围比拟广泛，无法标记特定的神经元蛋白，因此今天，小编要带大家深入Abbkine的神经元蛋白抗体的世界，用抗体来深入研究蛋白。

用免疫组织化学方法显示电生理记录部位神经元的化学性质——离体脑片法研究韩中胜;段晓勤;鞠躬【期刊名称】《神经解剖学杂志》【年(卷),期】1990(6)2【摘要】500μm厚的冠状脑片取自新鲜大鼠下丘脑前部。

在人工孵育条件下进行电生理观察,看到前连合核和第三脑室前部室周区部分神经元的电活动可被人工脑脊液中加入血管紧张素Ⅱ所兴奋,被提高人工脑脊液中的Ca^(++)浓度所抑制。

这些电生理反应与大细胞内分泌神经元的电生理特性一致。

记录结束时,记录部位用记录电极中的染料标记,脑片浸泡固定4—8h,恒冷箱切片,用抗催产素和抗加压素抗体孵育,ABC反应。

结果在记录电极尖端所在部位看到数量不等的催产素或加压素免疫阳性神经元。

上述电生理和免疫组化结果表明,研记录到的部分神经元可能含催产素或加压素免疫反应物质。

本文报告了用免疫组织化学方法显示离体电生理标本,特别是记录部位神经元的免疫化学特性的实验结果。

【总页数】4页(P238-241)【关键词】免疫组织化学;电生理;脑片【作者】韩中胜;段晓勤;鞠躬【作者单位】第四军医大学神经科学研究所神经生物学研究室【正文语种】中文【中图分类】R338【相关文献】1.可视法脑片膜片钳技术观察大鼠前庭内侧核神经元毒蕈碱样胆碱能受体的电生理特性 [J], 张宇;孔维佳;刘邦华;郭长凯;孙大为;夏交;朱云;张建2.神经甾体激素PGN对大鼠脑片SCN神经元电生理学的影响 [J], 袁海波;黄民;张昌明;丛延丽;赵华;华树成3.应用红外可视脑片膜片钳技术研究大鼠海马CA1神经元的电生理特性 [J], 雷革胜;万业宏;王玉英;朱俊玲;胡三觉4.胞内记录猫体感皮层内脏伤害性感受神经元的电生理特性 [J], 陈京红;滕国玺5.大鼠前连合核神经元对渗透压和血管紧张素Ⅱ刺激的神经性反应——脑片电生理研究 [J], 韩中胜;段晓勤;鞠躬因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

优化整体原位杂交方法检测基因在幼鼠大脑中的表达刘安军;麻献华;杨瑞;章卫平;谢志芳【摘要】目的优化整体原位杂交方法,用于检测基因在幼鼠大脑中的时空表达分布.方法通过摸索最佳蛋白酶K的消化时间,改良杂交缓冲液成分,并延长杂交时间和漂洗时间,对整体原位杂交方法进行优化,并用优化的方法检测了Cdh6、Bhlhb5和Lmo4 mRNA在出生后7天的小鼠大脑中的整体表达分布.结果采用优化的整体原位杂交方法成功地检测了3种mRNA在幼鼠全脑的区域性表达特征,特异性杂交信号强,非特异性背景低.结论成功优化了幼鼠全脑原位杂交方法,为开展后续的研究打下基础.【期刊名称】《医学研究杂志》【年(卷),期】2016(045)005【总页数】4页(P50-53)【关键词】整体原位杂交;小鼠;大脑;基因表达【作者】刘安军;麻献华;杨瑞;章卫平;谢志芳【作者单位】200433上海,中国人民解放军第二军医大学基础部;250031 中国人民解放军济南军区总医院麻醉科;200433上海,中国人民解放军第二军医大学基础部;200433上海,中国人民解放军第二军医大学基础部;200433上海,中国人民解放军第二军医大学基础部;200433上海,中国人民解放军第二军医大学基础部【正文语种】中文【中图分类】R34整体原位杂交(whole mount in situ hybridization)是运用cRNA或寡核苷酸等探针检测完整组织中mRNA表达的一种技术。

该技术方法的最大优势是在保留器官甚至整个个体结构基本完整的基础上，从整体上观察mRNA表达的时空分布特征[1]。

而在组织切片上进行的原位杂交虽然具有更高的敏感度，但只能观察某个特定切面上的分子表达，因此具有一定的局限性[2]。

整体原位杂交特别适用于研究小动物胚胎发育早期的整体分子表达特征，这是由于胚胎发育早期组织结构相对松散，而且个体和器官体积较小，有利于探针和抗体的渗透 [3, 4]。

文章编号:100025404(2001)1221425203论著大鼠神经干细胞分离培养及基因转染研究李　巍,蔡文琴,姚忠祥 (第三军医大学基础医学部组织学与胚胎学教研室,重庆400038) 提　要:目的　建立基因工程化神经干细胞以便为生物医学应用提供材料。

方法　①分离、培养胚鼠端脑神经干细胞,并用巢素(Nestin)免疫组化染色鉴定;诱导神经干细胞分化,用神经丝2200(NF2200)、胶质纤维酸性蛋白(G FAP)免疫组化染色鉴定分化细胞。

②用含有脑源性神经营养因子(BDNF)的复制缺陷型腺病毒感染神经干细胞,并用原位杂交检测。

结果　①获得了大量未分化、呈巢状悬浮生长的神经干细胞团,且能分化为神经元和神经胶质细胞。

②约80%～90%神经干细胞能被腺病毒感染,且经传代培养12代后仍具干细胞特性。

结论　从胚鼠端脑分离培养的细胞具有自我更新能力和多潜能分化能力,为中枢神经系统的干细胞。

经基因工程化及传代后,仍具干细胞特性,可作为基础研究及神经移植供体,具有广阔应用前景。

关键词:神经干细胞;基因工程;细胞培养 中图法分类号:R322.8;R2332 文献标识码:AIsolation,culture and transfection of neural stem cells from fetal rat telencephalonLI Wei,C AI Wen2qin,Y AO Zhong2xiang(Department of H istology and Embry ology,Third M ilitary M edical University,Chongqing400038,China) Abstract:Objective　T o establish the genetically engineered neural stem cells(NSCs)for further biomedical applications.Methods　①A f2 ter is olated from fetal rat telencephalon and identified with nestin immunocytochemical staining,NSCs were induced to differentiate.The differentiated cells were detected respectively with neurofinament(NF2200)and glial fibrillary acidic protein(G FAP)immunocytochemical staining.②Recombi2 nant brain-derived neurotrophic factor(BDNF)2adenovirus was used to in fect the obtained cells and the results were identified with in situ hybridiza2 tion.Re sults　①Nest2like clusters of neural stem cells were obtained in the suspension and the cells could be differentiated into neurons and astro2 cytes.②About80%-90%of NSCs were in fected by recombinant BDNF2adenovirus,which retaining the main characteristics of NSCs after12 passages of culture.Conclusion　The cells from fetal rat telencephalon possess multipotency and self2renew ability and is believed to be BSCs of the central nerv ous system.S ince they retain their characteristics and differentiation ability after passages and genetic engineering,they can be applied widely in basic research and as grafts in neural transplantation. K ey w ords:neural stem cells;genetic engineering;cell culture 自从90年代初科学家们分离、培养出神经干细胞以来,人们相继从各种动物及人的中枢神经系统内分离、培养了神经干细胞[1,2],因其具有很强的分裂、增殖及自我更新能力,打破了传统观点认为中枢神经系统细胞不能再生的观念,为中枢神经系统损伤修复及某些疾病的治疗带了新的希望。

脑片免疫荧光和免疫组化实验步骤一、脑片免疫荧光实验步骤1. 选择适当的脑片：根据实验目的，选择适当的脑组织样本，并将其切片，厚度通常为20-50微米。

2. 取样品：将脑片放置在玻璃载玻片上，用磨刀机或刮片仪取出样品。

将脑片固定在载玻片上，并确保其平整。

3. 抗体处理：用适当的抗体针对感兴趣的分子进行标记。

可以使用一种或多种特异性抗体来检测不同的分子。

4. 渗透：将抗体溶液加入载玻片上的脑片样品上，并确保完全渗透。

根据实验需要，可以进行不同时间的渗透，通常为1-2小时。

5. 洗涤：用洗涤缓冲液洗涤样品，去除未结合的抗体。

洗涤次数和时间根据实验需求而定，通常进行3-5次洗涤，每次洗涤5-10分钟。

6. 荧光染色：加入适当的荧光染料，与抗体结合的目标分子将发出荧光信号。

根据荧光染料的性质和实验需求，可以选择单一染色或多重染色。

7. 透明化：使用适当的透明化剂，如甘油或聚乙烯醇，使样品透明，以利于观察和成像。

8. 成像和分析：将样品放置在荧光显微镜下进行观察和成像。

可以使用适当的成像软件对图像进行分析和处理，以获取所需的数据。

二、脑片免疫组化实验步骤1. 取样品：选择适当的脑组织样本，并将其切片，厚度通常为20-50微米。

将脑片放置在载玻片上。

2. 固定：用适当的固定剂固定脑片样本，以便后续的处理。

常用的固定剂包括乙醇、甲醛等。

3. 脱脂和脱水：将脑片样本依次浸入不同浓度的醇溶液中，使其逐渐脱脂和脱水。

常用的醇溶液包括乙醇和丙酮。

4. 抗体处理：用适当的抗体针对感兴趣的分子进行标记。

可以使用一种或多种特异性抗体来检测不同的分子。

5. 渗透和洗涤：将抗体溶液加入载玻片上的脑片样品上，并确保完全渗透。

根据实验需要，可以进行不同时间的渗透，通常为1-2小时。

然后用洗涤缓冲液洗涤样品，去除未结合的抗体。

6. 染色：使用适当的染色剂，如DAB（二氨基联苯胺）或HRP（辣根过氧化物酶），与抗体结合的目标分子将呈现棕黑色或其他颜色。

观察大鼠全脑缺血后脑组织Bcl-2 Fas基因表达相关性的进展全脑缺血在临床上多发生于心律失常、心肌梗死以及休克等造成的脑部血液灌流量低,缺血范围广。

大鼠全脑缺血动物模型与临床上脑缺血虽不完全相同,但全脑缺血后Bcl-2、Fas蛋白表达情况的研究对于临床上在脑缺血后的治疗方面具有指导意义。

同时研究Bcl-2和Fas蛋白在缺血损伤细胞中的表达,并发现二者在表达上存在的内在相互关系,目前在国内还是首例,如果能将研究结果运用到临床实践工作中,在损伤细胞中促进Bcl-2蛋白表达,阻止Fas蛋白在损伤细胞中的表达,那么就能够挽救“半暗带”中的细胞生命,使缺血损伤细胞数量减少在最小范围内,这正是本实验的价值和临床意义所在。

1材料与方法1.1实验材料1.1.1实验动物健康成年雄性Wistar大鼠77只,体重 280～340g。

1.1.2主要试剂麻醉剂、光镜灌注液及固定液、染色剂、免疫组化试剂:兔抗大鼠Bcl-2抗体、兔抗大鼠Fas抗体、SABC试剂盒。

1.2实验方法1.2.1分组将77只大鼠随机分为:正常组、假手术组、单次缺血8min组,分别于缺血后2h、6h、14h、24h、2天、3天、5天、7天、14天,于不同时间点处死大鼠,每组7只,总共分组11组。

1.2.2手术称重、麻醉、暴露并分离颈总动脉和迷走神经、电凝椎动脉、夹闭缺血:24h后夹闭双侧颈总动脉,造成4血管闭塞全脑缺血,缺血8min。

处死:在缝合后2h、6h、14h、24h、2天、3天、5天、7天、14天,不同时间点处死大鼠,取脑进行48h外固定。

正常组7只大鼠不做任何处理。

假手术组7只,手术操作程序与实验组相同,电凝椎动脉后,不做颈总动脉夹闭,亦于不同时间点处死大鼠。

1.3免疫组化标本制备取材、脱水、透明、浸蜡、包埋粘块、切片、免疫组化采用SABC法,Bcl-2单克隆抗体,Fas单克隆抗体,Ⅰ抗和Ⅱ抗工作液均购于武汉博士德公司。

1.4光镜下观测2结果2.1免疫组化结果Bcl-2和Fas蛋白表达,在放大400倍的显微镜下,观察同一位的皮层、海马的神经细胞及神经胶质细胞的阳性细胞情况,表示结果的方法是:(-)表示:几乎没有Bcl-2和Fas蛋白表达,阳性细胞数≤10%;(+)表示:少量Bcl-2和Fas蛋白表达,阳性细胞数在10%～40%之间;(++)表示:中等度、较多Bcl-2和Fas蛋白表达,阳性细胞数在40%～70%之间;(+++)表示:最强烈Bcl-2和Fas蛋白表达,阳性细胞在70%～100%之间。

大鼠中脑切片的酪氨酸羟化酶和谷氨酸双重免疫荧光染色下载提示：该文档是本店铺精心编制而成的，希望大家下载后，能够帮助大家解决实际问题。

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细胞生物学中的免疫组化和原位杂交技术细胞生物学是研究细胞结构、功能和特性的学科，其中免疫组化和原位杂交技术是重要的实验手段和研究工具。

本文将介绍免疫组化和原位杂交技术的原理、应用以及未来的发展方向。

一、免疫组化技术免疫组化技术是通过特异性抗体与目标分子结合来检测细胞内或组织内的特定蛋白质的方法。

免疫组化技术的原理是利用抗体与抗原之间的亲和性，通过特异性结合实现对蛋白质的检测和定位。

1. 原理免疫组化技术主要包括以下步骤：取材、固定、切片、抗原恢复、阻断、抗体标记、显色和观察。

首先，将需要检测的组织固定并制作切片。

然后，对切片进行抗原恢复处理，以破坏固定过程中引起的抗原和抗体的交联反应。

接下来，进行阻断步骤，防止非特异性抗体的结合。

随后，使用特异性抗体标记目标蛋白质。

最后，通过显色反应观察标记的抗体的位置和数量。

2. 应用免疫组化技术在细胞生物学领域有多种应用。

它可以用于检测特定蛋白质的存在和定位，从而研究细胞内各种生物分子的分布。

此外，免疫组化技术还可以用于诊断疾病，例如通过检测肿瘤标志物的表达来判断肿瘤的类型和分级。

此外，免疫组化技术还能够评估细胞的增殖、分化和凋亡等生理过程。

二、原位杂交技术原位杂交技术是通过标记的探针与靶RNA或DNA结合，从而在组织或细胞水平上检测靶分子的方法。

原位杂交技术可以提供靶RNA和DNA的空间分布和细胞定位信息。

1. 原理原位杂交技术主要包括以下步骤：制备探针、固定组织、加氢解固、杂交反应、洗涤和检测。

首先，制备标记的探针，通常使用放射性同位素或荧光标记。

然后，将组织固定，以防止RNA或DNA降解。

接着，进行加氢解固步骤，以使靶分子的结构恢复。

随后，进行杂交反应，将探针与靶RNA或DNA结合。

最后，通过洗涤和检测步骤，确定探针的结合位置和数量。

2. 应用原位杂交技术在细胞生物学和遗传学领域有广泛的应用。

它可以用于研究基因表达和功能的调控机制，例如通过检测特定RNA的存在来研究基因的转录水平。

用免疫组化ABC法的漂片法做好脑片实验的体会巴迎春;王廷华;李明【期刊名称】《四川解剖学杂志》【年(卷),期】2006(14)1【摘要】ABC法是将亲和素作为桥，把生物素化的抗体与生物素结合的酶连接起来。

首先，以Ⅰ抗与组织切片共孵育，使特异性Ⅰ抗与组织中的相应抗原结合，之后加上生物素标记的Ⅱ抗，Ⅱ抗与Ⅰ抗通过抗原一抗体反应结合，最后加人ABC 复合物，Ⅱ抗上的生物素则与ABC复合物中的亲和素上空下的位点结合。

用ABC 法中的漂片法做脊髓冰冻切片的染色比较容易做出结果，但如果是用此法做大鼠脑的冰冻切片染色则较难做出结果，特别是做出漂亮的脑片更难。

作者在用ABC漂片法做脑组织冰冻切片的免疫组织化学实验的过程中，通过改变常规的操作步骤环节，使做出的脑片质量大为提高。

以下实验技术介绍的是将免疫组化ABC法的漂片法用于脑组织冰冻切片中的几点体会。

【总页数】2页(P58-59)【作者】巴迎春;王廷华;李明【作者单位】昆明医学院解剖教研室,昆明,650031;昆明医学院神经研究所,昆明,650031;昆明医学院解剖教研室,昆明,650031【正文语种】中文【中图分类】R3【相关文献】1.如何用免疫组化ABC法做好脑组织冰冻切片 [J], 王冬梅;徐红;徐静;孙艺平;田余祥2.大鼠脑组织冰冻切片免疫组化漂片法的实验研究 [J], 邵敏峰;章正祥;陈强;邓玉;程静;侯群3.脑组织切片免疫组化技术中漂片法与贴片法效果比较 [J], 詹合琴;李生营;尹志奎;吴蓝鸥4.脑组织冰冻切片漂片法与石蜡切片贴片法的免疫组化效果比较 [J], 钟琴;张燕翔;钱锋;杨波;任伯绪5.提高石蜡切片ABC法免疫组化染色质量的改进方法 [J], 刘育艳因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

原位杂交与免疫组化双染法在淋巴瘤诊断中的应用
滕孝静;王卫东;谢建兰;周小鸽
【期刊名称】《临床和实验医学杂志》
【年(卷),期】2013(12)14
【摘要】目的在淋巴瘤病例中建立EB病毒编码小RNA(EBER)原位杂交与免疫组化双重染色法.方法使用双染试剂盒在石蜡切片上先做原位杂交再做免疫组化.结果双染成功后细胞和组织结构完整.原位杂交阳性细胞的胞核呈蓝黑色,免疫组化阳性细胞的胞膜呈红色,双阳性细胞的核与膜蓝红对比鲜明,背景清晰.结论此方法可直观地判断感染EB病毒的细胞属于B细胞还是T细胞,有助于淋巴瘤的诊断.
【总页数】3页(P1106-1107,封3)
【作者】滕孝静;王卫东;谢建兰;周小鸽
【作者单位】首都医科大学附属北京友谊医院病理科,北京,100050;首都医科大学附属北京友谊医院病理科,北京,100050;首都医科大学附属北京友谊医院病理科,北京,100050;首都医科大学附属北京友谊医院病理科,北京,100050
【正文语种】中文
【相关文献】
1.免疫组化双染技术在淋巴瘤亚型检测中的应用 [J], 司成;曾智;占承志
2.免疫组化结合原位杂交双标记检测套细胞淋巴瘤中免疫球蛋白κ、λ限制性 [J], 万红萍;涂露霞;盛以芸;熊振芳;陶雪勤;梅金红
3.免疫组化双染技术在淋巴瘤亚型检测中的应用 [J], 刘洪博;刘艳彩;张新丽;侯素平;邱雷;张晓娟
4.T/B(CD3+CD20)淋巴细胞免疫组化双染技术在淋巴瘤诊断中的应用 [J], 周航波;马恒辉;饶秋;周晓军
5.EBER原位杂交和免疫组化双染中酶消化和抗原修复的优化 [J], 何娇;罗陆侨;廖集琴
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大鼠全脑照射后早期大脑皮质中TNF-α及其受体表达的免疫组化研究张泉;杨劲松;邓翀;田野【期刊名称】《苏州大学学报（医学版）》【年(卷),期】2006(26)6【摘要】目的观察大鼠大脑全脑照射后早期放射性脑损伤大脑皮质区TNF-α、TNFR1和TNFR2的动态表达,探讨TNF-α、TNFR1和TNFR2在早期放射性脑损伤发病机制中可能的作用.方法在大鼠早期放射性脑损伤模型基础上,应用免疫组织化学方法染色标本,运用计算机图像技术计算并分析大鼠大脑放射性损伤后大脑皮质区在不同剂量、不同时间点TNF-α、TNFR1和TNFR2的动态表达.结果 0 Gy 组大鼠各时间点大脑皮质区TNF-α、TNFR1和TNFR2均是低水平表达,与正常组表达无显著差别(P＞0.05).在光镜下观察2 Gy组、10 Gy组及30Gy组照射后12 h到1月不同时间点大脑皮层内TNF-α的免疫组化表达,发现抗体阳性细胞表达均在12 h达高峰(P＜0 05),并可见30 Gy组数值最高(P＜0.001),但10 Gy组与30 Gy组之间无显著差异(P＞0.05),在24 h以后各照射组基本恢复到基础水平.同样方法观察发现2 Gy组、10 Gy组和30 Gy组的TNFR1和TNFR2的动态表达类似于TNF-α的免疫表达.结论大鼠大脑全脑照射后大脑皮质区TNF-α、TNFR1和TNFR2在24 h内快速上升快速下降,提示它们可能在放射性脑损伤中起重要作用.【总页数】4页(P915-918)【作者】张泉;杨劲松;邓翀;田野【作者单位】淮安市第一人民医院放疗科;苏州大学附属第二医院放疗科,江苏苏州,215004;苏州大学附属第二医院放疗科,江苏苏州,215004;苏州大学附属第二医院放疗科,江苏苏州,215004【正文语种】中文【中图分类】R815【相关文献】1.NBQX对大鼠全脑照射后早期脑MyT1阳性细胞的保护作用 [J], 李华杰;包仕尧;田野2.大鼠全脑照射后早期海马水通道蛋白4mRNA水平的变化 [J], 丁维军;梁晓东;于长辉;朱敏3.大鼠全脑照射后早期大脑皮质MyT1表达及意义 [J], 李华杰;包仕尧;田野;张志琳;陈列松4.全脑照射后大鼠早期大脑皮质髓鞘转录因子1基因表达的变化 [J], 张志琳;李华杰;田野;包仕尧5.大鼠全脑照射后早期放射性脑损伤的磁共振波谱与病理对照研究 [J], 沈海林;沈纪芳;秦颂兵;芮春朵;唐健;许昌韶;周菊英;刘国强因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

应用半定量原位杂交组化和免疫组化观察老年大鼠下丘脑室周
核生长…
向正华;周洪堂
【期刊名称】《解剖学杂志》
【年(卷),期】1993(016)003
【总页数】5页(P242-246)
【作者】向正华;周洪堂
【作者单位】不详;不详
【正文语种】中文
【中图分类】R329.26
【相关文献】
1.心理应激对大鼠下丘脑室周核生长抑素mRNA神经元的影响 [J], 贺新红;孙钰
2.党参和维生素E对大鼠下丘脑室周核生长抑素神经元增龄变化的影响 [J], 王绍坤;刘荣建
3.下丘脑室周核内生长抑素神经元的衰老变化及牛膝抗衰老作用… [J], 张志英;王绍坤
4.生后雌性小鼠下丘脑室旁核内ER-β表达的免疫组化研究 [J], 张吉强;吕彦
5.大鼠下丘脑室旁核和室周核生长抑素神经元与加压素或神经降压素的共存——PAP与胶体金双标记免疫电镜观察 [J], 秦英;刘淑琴;张俐;钱国桢
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荧光原位杂交(FISH)技术在转基因小鼠检测中的应用谢建云;邵伟娟;潘漪清;高诚【期刊名称】《上海交通大学学报（农业科学版）》【年(卷),期】2002(020)004【摘要】制备转基因小鼠特有的DIG标记探针,应用染色体荧光原位杂交(FISH)技术,对转基因小鼠外周血细胞的遗传性状进行分析,检测其合子类型,以挑选纯合子小鼠用于保种.结果杂合型小鼠61%的细胞有一个荧光信号,而纯合型小鼠约24%的细胞有两个荧光信号,48%的细胞有一个荧光信号,野生型小鼠无荧光信号.因此染色体荧光原位杂交技术可作为检测转基因小鼠遗传特性的一种方法.【总页数】4页(P288-290,311)【作者】谢建云;邵伟娟;潘漪清;高诚【作者单位】上海市实验动物质量监督检验站,上海200032;上海市实验动物质量监督检验站,上海200032;上海市实验动物质量监督检验站,上海200032;上海市实验动物质量监督检验站,上海200032【正文语种】中文【中图分类】S865.1;Q78【相关文献】1.荧光原位杂交(FISH)技术与免疫组织化学(IHC)技术应用于乳腺癌患者Her2基因检测的评价 [J], 黄俊;邓明凤;郭华雄;陈登峰;王昌富2.国产探针在荧光原位杂交FISH检测未培养羊水细胞性染色体中的应用 [J], 周荣生;丛林3.应用荧光原位杂交技术检测人βE珠蛋白基因在转基因小鼠染色体上的整合状态[J], 夏薇;刘德培;董文吉;李斌;郭志晨;王晶;李铁昌;梁植权4.基于荧光原位杂交(FISH)与免疫组化技术(IHC)在非小细胞肺癌中的应用探究 [J], 鞠学萍5.应用荧光原位杂交技术检测人类APP_(SWE)基因在转基因小鼠染色体上的定位及位置效应 [J], 刘薇;卢光琇因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

博尔纳病病毒接种Wistar大鼠脑组织中病毒基因组的原位检测刘爱平;李玉军;李小光;宋武琦;李爱梅;周淑如;张凤民【摘要】本文旨在用原位杂交法探讨博尔纳病病毒(BDV)接种Wistar大鼠脑组织中BDV基因组的分布情况.DIG RNA labeling kit标记BDV p24正链探针后,用斑点实验检测该探针的标记效率,斑点杂交法检测该探针的特异性.在其标记效率与特异性均达到实验要求后,用该探针对颅内接种BDV(H1766株)的Wistar大鼠脑组织中BDV基因组进行原位杂交检测.结果发现,接种3周后,BDV感染主要发生在皮质和海马,仅少量发生在丘脑和下丘脑;接种6周后,皮质和海马的BDV感染仍然存在,且丘脑和下丘脑的BDV感染明显增强,说明BDV在大鼠脑组织中的分布范围随着感染时间的延长而逐步扩大.本文建立的原位杂交法可用于检测BDV在Wistar 大鼠脑组织内的分布与迁移情况.【期刊名称】《微生物与感染》【年(卷),期】2009(004)003【总页数】4页(P152-155)【关键词】博尔纳病病毒;大鼠;原位杂交;斑点杂交【作者】刘爱平;李玉军;李小光;宋武琦;李爱梅;周淑如;张凤民【作者单位】哈尔滨医科大学微生物学教研室、黑龙江省感染与免疫重点实验室,哈尔滨150086;哈尔滨医科大学微生物学教研室、黑龙江省感染与免疫重点实验室,哈尔滨150086;哈尔滨医科大学微生物学教研室、黑龙江省感染与免疫重点实验室,哈尔滨150086;哈尔滨医科大学微生物学教研室、黑龙江省感染与免疫重点实验室,哈尔滨150086;哈尔滨医科大学微生物学教研室、黑龙江省感染与免疫重点实验室,哈尔滨150086;哈尔滨医科大学微生物学教研室、黑龙江省感染与免疫重点实验室,哈尔滨150086;哈尔滨医科大学微生物学教研室、黑龙江省感染与免疫重点实验室,哈尔滨150086【正文语种】中文博尔纳病病毒(Borna disease virus，BDV)是一种嗜神经性的单股负链RNA病毒，属于单股负链RNA病毒目(Mononegavirales)。

免疫组化与原位杂交双标记技术的方法学研究杨春青;张炜明;李百周【期刊名称】《南京医科大学学报（自然科学版）》【年(卷),期】2004(024)003【摘要】双标记技术是在同一张组织切片上标记两种不同的抗体或同时应用两种不同的检测手段，如免疫组化和原位杂交技术，在不同层次来检测同一细胞上某些物质的表达是否有相关性的一种实验方法。

与传统的单项检测相比，双标记具有无可比拟的优越性，可以克服由于切片间各种差异而引起的时间或空间的样本误差。

由于两项操作过程较复杂，互相影响因素多，不易取得理想结果。

此实验在国内也仅见于科研报道，还未能在绝大多数病理科常规开展。

我科经过反复实验摸索，总结出适合的操作方法，现介绍如下。

【总页数】1页(P316-316)【作者】杨春青;张炜明;李百周【作者单位】南京医科大学第一附属医院病理科,江苏,南京,210029;南京医科大学第一附属医院病理科,江苏,南京,210029;南京医科大学第一附属医院病理科,江苏,南京,210029【正文语种】中文【中图分类】R446.62【相关文献】1.免疫组化与原位杂交双标记技术检测EB病毒用于诊断鼻咽癌 [J], 罗俭权;曾秀英;吕镜雄;陈春梅;程思锐;冯天斌2.原位杂交和免疫组化双标记技术 [J], 刘华庆3.原位杂交和免疫组化双标记技术在大鼠全脑脑片培养中的应用 [J], 杨丽君;韩伟娟;崔红;黄德庄4.免疫组化与原位杂交双标记技术在鼻咽癌诊断中的应用 [J], 刘泳冬;梁英杰;刘妮;李淑华;董愉;韩安家;宗永生5.免疫组化与原位杂交双标记技术检测EB病毒用于诊断鼻咽癌的效果观察 [J], 古建雄;刘彬因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

原位杂交和免疫组化双标记技术在大鼠全脑脑片培养中的应用杨丽君;韩伟娟;崔红;黄德庄【期刊名称】《首都医科大学学报》【年(卷),期】2009(30)6【摘要】目的探讨联合应用原位杂交(in situ hybridization,ISH) 和免疫组化(immunohistochemistry,IHC)技术检测全脑脑片特定核酸和蛋白的表达.方法在静态全脑脑片培养的基础上,将培养的脑片进行冰冻切片,然后联合应用原位杂交和免疫组化技术检测特定基因的表达情况.结果脑片冰冻切片的质量可以进行后续的实验;与单纯应用一种方法相比,联合应用两种技术可同时在核酸水平和蛋白水平检测待测基因,两种显色方法不相互冲突,且可以更直观地显示核酸和蛋白的表达模式.结论原位杂交和免疫组化双染技术明显优于单纯的原位杂交技术或免疫组化;该双染技术可用于脑片培养中的基因和蛋白检测.【总页数】4页(P817-820)【作者】杨丽君;韩伟娟;崔红;黄德庄【作者单位】首都医科大学附属北京友谊医院儿科;首都医科大学附属北京友谊医院儿科;首都医科大学附属北京友谊医院儿科;首都医科大学附属北京佑安医院肝炎研究所【正文语种】中文【中图分类】R72【相关文献】1.免疫化学染色和放射自显影双标记技术在培养的大鼠垂体前叶细胞中的应用 [J], 胡玉珍2.原位杂交与免疫组化双染法在淋巴瘤诊断中的应用 [J], 滕孝静;王卫东;谢建兰;周小鸽3.大鼠全脑照射后早期大脑皮质中TNF-α及其受体表达的免疫组化研究 [J], 张泉;杨劲松;邓翀;田野4.大鼠全脑脑片培养及缺氧缺糖模型的建立 [J], 杨丽君;崔红;杨爱君;黄德庄;崔雁;魏田力5.免疫组化与原位杂交双标记技术在鼻咽癌诊断中的应用 [J], 刘泳冬;梁英杰;刘妮;李淑华;董愉;韩安家;宗永生因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

大鼠脑组织原位杂交染色的几点体会
张丽红;李玉林;李一雷;李伟
【期刊名称】《临床与实验病理学杂志》
【年(卷),期】2004(020)004
【摘要】近年来，原位杂交技术的发展和方法的不断改进，已广泛地应用于组织内的靶RNA定量定位分析。

但由于组织的来源不同，进行原位杂交染色组织的各期处理也不尽相同，尤其是脑组织中其含大量磷脂成分，质地柔软，原位杂交染色一直难以取得令人满意的结果。

本实验室采用大鼠脑缺血模型进行caspas-3原位杂交染色，结果较为理想。

【总页数】2页(P490-491)
【作者】张丽红;李玉林;李一雷;李伟
【作者单位】吉林大学病理生物学教育部重点实验室,长春,130021;吉林大学病理生物学教育部重点实验室,长春,130021;吉林大学病理生物学教育部重点实验室,长春,130021;吉林大学病理生物学教育部重点实验室,长春,130021
【正文语种】中文
【中图分类】R446.8
【相关文献】
1.免疫组化染色在检验大鼠脑组织病变中的优势探讨 [J], 武均宜;田芳露
2.阳性神经元面积百分比和染色灰度相对强度值的结合在大鼠脑组织免疫组化图像定量分析中的应用 [J], 曾志刚;邱红;朱梅菊;朱洪竹;萧建华
3.大鼠脑组织高尔基染色三种制备方法的比较 [J], 王蕾;张芳;汤仁仙;张冠群;牛海晨
4.微波加热修复和盐酸水解修复方法对大鼠脑组织免疫组化染色结果的影响 [J], 刘海洋;王效军;张海宇;王登科;孙征;韩金利;车鹏;秦毅
5.冰冻切片和苏木精-伊红染色在大鼠脑组织中的应用 [J], 郭海波;全睿;王慧因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

大鼠脑内脑钠素mRNA分布的原位杂交
刘兢;马咏;李菁;张爱民;刘宏;徐洵
【期刊名称】《生理学报》
【年(卷),期】1994(46)2
【摘要】本工作以特异性的放射磷标记的鼠脑钠肽（ｒＢＮＰ）基因片段为探针，利用高灵敏度的原位杂交分析方法，对大鼠脑组织切片中脑钠肽的ｍＲＮＡ分布进行测定。

结果表明，大鼠脑中存在脑钠肽基因的表达，其中下丘脑以及丘脑的边缘部分脑钠肽的ｍＲＮＡ浓度最高，杏仁核簇中浓度较高，嗅区其次，海马回和大脑皮层中浓度较低，小脑和延髓中几乎没有基因表达。

【总页数】6页(P135-140)
【关键词】脑钠肽;原位杂交;鼠;脑;mRNA
【作者】刘兢;马咏;李菁;张爱民;刘宏;徐洵
【作者单位】中国科学技术大学生物系
【正文语种】中文
【中图分类】Q959.837
【相关文献】
1.大鼠脑内白细胞介素1I型受体mRNA的分布 [J], 刘国法;吕证宝
2.急性热应激与热惊厥幼龄大鼠脑内Fos的免疫反应性及ZnT3 mRNA原位杂交
研究 [J], 倪宏;陶陆阳;水泉祥
3.电针可增强大鼠脑内前脑啡肽原mRNA的表达：原位杂交组织化学研究 [J], 朱
崇斌;李晓艳
4.原位杂交技术用于老年大鼠脑m1受体mRNA分布及知母作用的研究 [J], 胡雅儿;夏宗勤
5.生长抑素mRNA与神经肽Y，催产素在大鼠前脑内的分布及其共存现象──地高辛标记c－RNA探针原位杂交与免疫组化联合法 [J], 向正华;蔡文琴;孟璘;钱国桢;王代学
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原位杂交技术用于老年大鼠脑m1受体mRNA分布及知母作
用的研究
胡雅儿;夏宗勤
【期刊名称】《中华核医学杂志》
【年(卷),期】1996(016)003
【摘要】为探讨衰老大鼠脑Ｍ受体基因表达的变化和滋阴药知母及其有效成分ＺＭＳ的作用，用原位杂交技术和图像分析仪进行了ｍ１和ｍ２受体ｍＲＮＡ的定量分布研究。

结果：老年在鼠脑纹状体部位的ｍ１ｍＲＮＡ明显减少（灰度值降低１２．２６±３．６０）；长期口服ＺＭＳ的老年大鼠，该部位ｍ１ｍＲＮＡ显著高于对照老年鼠（灰度值提高１５．７１±３．２７），长期口服知母者平均灰度值也略有提高。

老年大鼠大脑皮层和海马部位未见ｍ１ｍＲ
【总页数】3页(P152-154)
【作者】胡雅儿;夏宗勤
【作者单位】不详;不详
【正文语种】中文
【中图分类】R339.38
【相关文献】
1.老年大鼠脑M1胆碱受体分布的放射自显影研究 [J], 胡雅儿;何路明
2.知母活性成分ZMS对老年大鼠脑M受体的调节作用 [J], 胡梅;胡雅儿;张蔚;夏宗勤
3.知母皂苷元及其异构体对老年大鼠学习记忆和脑内M1受体密度的影响 [J], 陈勤;曹炎贵;林义明;夏宗勤;胡雅儿
4.老年大鼠脑M1亚型受体的变化及黄芪的调节作用 [J], 石瑞如;胡天勇;张学宪
5.老年大鼠脑M受体亚型的变化及知母的调整作用 [J], 胡雅儿;赵爱红;胡贤洪;高汝协;易宁育;夏宗勤
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