变色龙软件的培训教材chromeleon

Ultimate 3000型高效液相色谱仪自主操作培训教材福州大学测试中心2018年9月第一部分Ultimate 3000型高效液相色谱原理和仪器配置一、液相色谱原理简介1、色谱法起源色谱法最早是由俄国植物学家茨维特（Tswett）在1906 年研究用碳酸钙分离植物色素时发现的，色谱法(Chromatography)因之得名。

后来在此基础上发展出纸色谱法、薄层色谱法、气相色谱法、液相色谱法。

2、液相色谱法的分离原理溶于流动相(mobile phase)中的各组分经过固定相(stationary phase)时，由于与固定相发生作用（吸附、分配、离子交换、排阻、亲和）的大小、强弱不同，在固定相中滞留时间不同，从而先后从固定相中流出。

又称为色层法、层析法。

英文为High Performance Liquid Chromatography，简称为HPLC。

3、HPLC分离模式包括反相模式 (RP-LC)；正相模式 (NP-LC)；离子对色谱 (IPC)；离子交换色谱 (IEC)；体积排阻色谱 (GPC/GFC)；亲和色谱（AC）等。

其中，反相和正相模式又属于液液分配色谱。

•流动相的极性小于固定液的极性（正相 normal phase），反之，流动相的极性大于固定液的极性（反相 reverse phase）。

正相与反相的出峰顺序相反；化学键合固定相：（将各种不同基团通过化学反应键合到硅胶（担体）表面的游离羟基上。

C-18柱（常用反相柱）。

4、HPLC与经典液相色谱方法以及气相色谱（GC）方法的比较4.1 HPLC与经典液相色谱方法比较高速：HPLC采用高压输液设备，流速大增加，分析速度极快，只需数分钟；而经典方法靠重力加料，完成一次分析需时数小时。

高效：填充物颗粒极细且规则，固定相涂渍均匀、传质阻力小，因而柱效很高。

可以在数分钟内完成数百种物质的分离。

高灵敏度：检测器灵敏度极高：UV——10-9g, 荧光检测器——10-11g。

U-3000液相色谱使用手册之三Chromeleon 中文版U-3000样品表的建立2012.TMO戴安产品培训中心.★服务热线：800-810-5118, 400-650-5118★客服邮箱：★市场培训：0(电话) 0 (传真)(邮箱)目录说明 (3)一．色谱仪器控制区(Console) (4)二．建立一个仪器方法 (5)1．采集时间和采集通道设置 (5)2．LPG-3400SD泵常规设置 (6)3．泵流速梯度的设定 (6)4．WPS-3000自动进样器的常规设置 (7)5．进样模式 (8)6．TCC-3100柱温箱常规设置 (10)7．UV(DAD-3000RS)紫外二极管阵列检测器通道设定 (12)8．新建立仪器方法的预览与修改 (13)9．保存新建并修改过的仪器方法 (15)三．创建一个处理方法 (16) (18)202021 4．输入待测样品个数225. 输入每个待测样品进样次数 (22)6．设置自动进样器开始位置 (22)7．输入待测样品进样体积 (22)8．建好待测样品表 (23)9．为新建序列指定所用方法和报告 (23)10．保存新建序列表 (23)六、修改样品序列表 (25)1. 修改样品名称 (25)2．修改样品类型 (25)3．修改样品瓶位置 (27)4．修改进样体积 (27)5．选择所用仪器方法 (27)6．选择所用处理方法 (28)7．状态 (28)8．样品重量 (28)9．稀释因子 (28)10．内标量 (28)11．保存经修改后的样品序列表 (28)说明利用液相色谱来分析一批样品，一般需要五个文件来完成。

1、需要一个控制面板（e panel）控制面板是实验人员通过计算机与仪器交流的直接界面。

而且在通讯连接正常时，仪器的所有参数都在面板上反应并被记录。

2、需要一个仪器方法(Instrument Method)规定测定这些样品时所用到的系统的条件：比如泵的流速，压力上下限；自动进样器/手动进样阀的进样持续时间；检测器波长；柱温箱的温度；测每个样品需要的时间等等。

Chromeleon色谱工作站操作指南戴安中国有限公司技术服务中心2003.2注意：以下操作步骤以ICS-1500，手动进样为例。

“”为单击鼠标左键；“”为双击鼠标左键；“”为单击鼠标右键。

* 建立控制面板1. 从“开始”处依次选择Programs, Chromeleon和Chromeleon；2. 点击计算机代码，双击与实际情况一致的控制面板；3. 确认各模块的“Connected”图标均为绿色后，设置淋洗液的液位开泵，设定流速；5. 点击兰色圆形图标（Acquisition On/Off）；6. 进入Pump_ECD – ECD_1；7. 设置电导池和柱温箱的温度，选择抑制器类型， 输入淋洗液浓度，点击“确定”开始采集基线。

* 设定运行程序1. 依次点击File和New，选择Program File；2. 点击“下一步”；3. 设置高/低压极限和流速，点击“下一步”；4. 设置手动进样，进样时间为60秒；5. 将Acquisition t ime调整至0～15分钟，点击“下一步”；6. 设置电导池和柱温箱的温度，选择抑制器类型， 输入淋洗液浓度，点击“下一步”；7. 点击“下一步”；8. 选择“Review the program in a new window”，点击“完成”；注意：绿色字体为注释信息，不起作用。

10. 存盘退出（推荐存入独立的“program”子目录中）。

* 建立方法文件1.依次点击File和New，选择Method File；2. 依次点击File和Save as，存盘退出（推荐存入独立的“method”子目录中）。

* 建立样品表1.依次点击File和New，选择Sequence(using Wizard)；2.点击“下一步”（连续四次）；3. 选择正确的程序文件，点击“Open”；4.选择正确的方法文件，点击“Open”；5. 选择正确的报告文件，点击“Open”；6. 存盘退出；5.修改标准点的名称、类型和数量。

Chromeleon色谱工作站操作指南戴安中国有限公司技术服务中心2005.2注意：以下操作步骤以阴离子分析，手动进样为例。

“”为单击鼠标左键；“”为双击鼠标左键；“”为单击鼠标右键。

* 建立控制面板1. 从“开始”处依次选择Programs, Chromeleon和Chromeleon；2. 点击计算机代码，双击与实际情况一致的控制面板；flow）和绿色三角形图标（Continue），开泵；4. 点击兰色圆形图标（Acquisition On/Off）；5. 点击“确定”开始采集基线。

* 设定运行程序1. 依次点击File和New，选择Program File；2. 点击“下一步”；3. 设置高/低压极限和流速，选择“Manual”（手动进样）,点击“下一步”；4. 将Acquisition t ime调整至0～15分钟，点击“下一步”；5.点击“下一步”；6. 选择“Review the program in a new window”，点击“完成”；7. 将引号中的内容修改为中文（例如：请进样）后，存盘退出（推荐存入独立的“program”子目录中）。

* 建立方法文件1.依次点击File和New，选择Method File；2. 依次点击File和Save as，存盘退出（推荐存入独立的“method”子目录中）。

* 建立样品表1.依次点击File和New，选择Sequence(using Wizard)；2.点击“下一步”（连续四次）；3. 选择正确的程序文件，点击“Open”；4.选择正确的方法文件，点击“Open”；5. 选择正确的报告文件，点击“Open”；6. 存盘退出；5.修改标准点的名称、类型和数量。

* 运行标准样品1. 点击兰色圆形图标（Acquisition On/Off），选择“Yes”，停止采集基线；2. 依次点击Batch和Start；3. 点击“Add”，打开需要运行的样品表；4. 点击“Start”；注意：使用AS40自动进样器时，开始进样。

变色龙工作站使用说明书1. 开机及设定：打开仪器电源，启动电脑在电脑右下脚，出现灰色变色龙图标，如下图：如果没出现上图灰色变色龙图标则按如下操作，点开电脑左下脚“开始”、点“程序”选择“chromleon”下的“Server monitor”出现如下对话框：点上图中“start”键启动后关闭，则电脑右下脚托盘区，出现灰色变色龙图标，如下图：即可双击桌面上快捷方式“”进入工作站：点击上述图中绿色变色龙图标（即根目录）：右边即出现根目录的容，最下面为仪器的控制面板，双击打开：左边为泵的控制区，在“Flow”下输入流速，在“%B”“%C”“%D”输入比例，右边为检测器控制区，点击“Lamp on”前的方框，开灯，三分钟后可以采集基线，点击快捷栏蓝色圆点出现如下对话框：在需要采集的通道前打勾，分别点“UV＿VIS＿1”、“UV＿VIS＿２”、“UV＿VIS＿３”、“UV＿VIS＿４”在“Wavelength”输入波长：即可采集。

2.单针进样：待基线平稳后，点停止采集，点击快捷栏的，输入进样体积，“OK”，再点击采集，进样即可，待所有峰出完后，在再点击如果需要保存，在“Save to sequence”前打勾，选择保存路径保存。

3.批进样：a.新建文件夹：点击快捷栏的“Browser”，回到根目录，点击绿色根目录，点“File”选择“New directory”：输入文件夹名称，如为“XXX”。

注：可输中文。

“OK”。

B．新建程序文件：左击文件夹“XXX”，点“File”选择“New”：出现如下对话框：选择“Program File”,“OK”：“下一步”，分别输入A、B、C、D的比例和总的流速。

“下一步”，设定采集时间和所需采集的信号通道，“下一步”，输入波长，“下一步”，“下一步”，分别输入波长，直至：下一步，完成：在此可以更改各项参数，然后点右键，选择“Check”，确定，后点快捷键保存：选择路径“XXX”，输入名称，如：“XXX”保存后关闭，C．建方法文件：左击文件夹“XXX”，点“File”选择“New”：出现如下对话框：选择“Method File”,“OK”，点“File”，点“Save As”：出现如下对话框：选择路径“XXX”，输入名称，如：“XXX”保存后关闭，D．建进样序列：左击文件夹“XXX”，点“File”选择“New”：出现如下对话框：选择“Sequence (using wizard)”,“OK”，下一步，下一步，未知样品设定，如果没有未知样品如下图，选择“No unknows”然后只能“下一步”，有则选“Use template（用模板）”，在“Template for Sample Name：”下输入样品名，如“测试”，后缀进样序号“＃n”、样品位置“＃p”、每个样品重复进样次数“＃r”，以下依次是“样品数量”、“每个样品进样次数”、“开始位置”、“进样体积”，点“Apply”，下一步，标准样品设定同未知样品，下一步，由上至下点击“Browse...”:找到文件夹，双击，如“XXX”，如下：选择程序文件，如“XXX”，“Open”，下一个“Browse...”,选择方法文件，如“XXX”，“Open”，下一步，在“Seqence Name”下输入名称如“测试”，点“Browse...”选择保存路径。

CHROMLETEON 6色谱工作站操作指南戴安中国有限公司技术服务中心2003.1目 录1. 安装软件 (Installation & Configuring Components)2 建立控制面板 (Select Control Panel)3. 设定运行程序 (Edit PGM File)4. 建立方法文件（Edit Method File）5．建立样品表 (Edit Sequence)6．运行标准样品 (Automatic Batch Operation)7．数据处理方法（Quantification Method）（以多点校正为例）附件一、梯度程序的编辑附件二、EG40的编程附件三、AS50自动进样器的编程注意：以下操作步骤以紫外检测，手动进样为例。

“”为单击鼠标左键；“”为双击鼠标左键；“”为单击鼠标右键。

1．安装软件(Installation & Configuring Components)1. 选择“Launch CHROMELEON Setup”，根据提示安装软件；2. Server Monitor”；3. 点击“Start”，等待变色龙图标变成灰色，关闭“Server Monitor”；4. Server Configuration”；5. 双击计算机名称；6. 选择“Dongle”，在“Key Code”处输入软件密码；点击“确定”；7. 点击“Add Sharable device”；8. 选择“Dionex LAN Card”，点击“OK”；9. 选择网卡，点击“Bind to DX-LAN”；10. 点击“是（Y）”；11. 点击“确定”；12. 关闭“Server Configuration”，保存设置，接通仪器电源，重新启动计算机；13. 再次进入“Server Configuration”，点击“Add timebase”；14. 为新建立的“timebase”命名；15. 点击“Add device”；16. 选择需要添加的设备，点击“OK”；17. 取消“Demo Mode”，打开“Device ID”，选择“GP50：xxxxxx”，点击“确定”，此时GP50面板左下角的“LOCAL”变成“LOCKED RMT”；17-1. 如果安装EG40，点击“Eluent Generator”，选择“Installed”，打开“ID”，选择“EG40：xxxxxx”，将“Offset V olume”改为0µl，在“Cartridge Information”的“Serial”处输入KOH/MSA淋洗液储罐的序列号（S/N），点击“确定”；18. 重复“15”和“16”的操作，选择CD25A，点击“OK”；19. 关闭“Demo Mode”，打开“Device ID”，选择“CD25A：xxxxxx”，点击“确定”，此时CD25A面板左下角的“LOCAL”变成“LOCKED RMT”；20. 重复“15”和“16”的操作，选择“Remote Inject”，点击“OK”；21. 如图所示进行选择后，点击“确定”；22. 关闭“Server Configuration”，保存设置。

变色龙 Chromeleon 色谱工作站软件功能模块添加方法通过一段时间对变色龙软件的使用，发现有些控制面板中的功能模块需要调整或增加，通过读帮助文件和向工程师请教，自己尝试着练习了一下。

下面就以增加“流动相剩余量监控模块”为例说明变色龙软件自定义功能模块的设置方法。

希望能对各位使用变色龙软件的朋友有所帮助，不涉及商业活动。

文中所涉及软件均为戴安公司产品。

1、点击“文件”----“新建”选择“控制面板”点击“确定”。

2、在弹出窗口中选择合适的Timebase第一版3、在“视图”中选择“布局”则可以在工具栏中显示出相应的工具条。

4、在工具条中选择“量计/滑块”，在工作区拉出相应形状区域，在区域中点击右键，选择“属性”依次设定选项卡中内容。

其中“链接”是关键，需要从命令集中选择需要功能模块可以对应的软件功能。

（每种模块可对应的功能是一定的，不是全能的）。

版一第版一第5、在工具条中选择“组框”，在工作区拉出相应形状区域，在区域中点击右键，选择“属性”依次设定选项卡中设置文字字体和字号。

并以此类推完成所需功能模块的编辑工作。

6、在浏览器中红圈所对应区域中找到所使用仪器对应的默认控制面板，打开。

第一版6、将该控制面板另存于一自定义文件夹中，以免更改失败后源面板损坏，或者因源文件夹上锁而不能保存。

以后将编辑另存后的面板而不是默认的源面板。

此图中红色框所示即为布局模式工具条。

7、在另存后的控制面板空白处点击右键，选择 “布局模式”。

第一版8、将此前已编辑好的模块框选后点击右键选择“复制”。

9、将复制后的模块粘贴入处于布局模式的控制面板中，拖动到合适的位置。

并将控制面板进行保存。

版一第10、打开一个已经配制好的面板集，在空白处点击右键选择添加面板。

11、找到此前添加过功能模块的控制面板。

12、移除原有面板集中的相应的未添加模块的面板。

如需调整面板顺序，则可以先删除预定位置后面的几个模块，然后依次重新添加模块即可。

Chromeleon7.1色谱工作站操作指南戴安中国有限公司技术服务中心2011.4平衡系统1 打开变色龙软件Chromeleon 7。

2 在左侧选择仪器(Instrument)，右侧出现仪器控制面板。

3 设定流速，点击On开泵。

若需要排气泡,则打开废液阀后，点prime排气泡。

4 开泵后，设定抑制器（Suppressor）电流值，打开抑制器开关。

点击采集基线（Monitor Baseline），当基线平稳后，再点击采集基线（Monitor Baseline），停止采集。

准备进样分析。

开泵开抑制器设定电流值采集基线设定流速建立仪器方法1 点击建立(Create)，选择仪器方法(Instrument Method)。

2 进入向导，输入运行时间（Run Time），点击下一步（Next）。

3 设置泵流速（Start），设置低压限（Lower Limit）和高压限（Upper Limit）。

建议低压限设为200psi，高压限设为3000psi，点击下一步（Next）。

4 选择进样方式（Injection Type），AS40自动进样器进样（AS40 Automated Sampler）或手动进样（Manual）。

选择进样时间（Injection Duration），建议设成60 seconds。

点击下一步（Next）。

5 选择采集通道（Channels），设定电导池温度（Cell Temperature）和柱温（Column Temperature），建议分别设为35℃和30℃，点击下一步（Next）。

6 选择抑制器类型（Suppressor Type），输入淋洗液浓度（Eluent Concentration），电流值（Current）自动计算出来。

点击下一步（Next）。

7 点完成（Finish）。

8 点保存（Save），选择保存路径，输入方法名称（Object），点保存（Save）。

建立处理方法1 点击建立(Create)，选择处理方法(Processing Method)。

高效液相色谱仪操作规程1目的制定高效液相色谱仪的标准操作规程，减少误操作，使其规范化，保证检验电子数据的完整性，可追溯性及安全性。

2适用范围本规程适用于高效液相色谱仪的使用与管理。

3组成3.1Chromeleon数据库基于局域网的色谱类仪器控制和色谱数据处理，提供具有访问控制和审计跟踪功能的安全数据存储，通过对数据文件执行版本控制，可以确保数据的完整性、可追溯性和安全性。

3.2局域网组成1)液相色谱仪：泵、进样器、柱温箱、检测器等组件。

2)ECD服务器：数据的存储与备份，3)PC客户端：人机连接端。

4)控制器：连接服务器、高效液相色谱仪及PC端。

5)Chromeleon:是一款可升级的，功能全面的色谱工作站。

软件分三个部分，左下角为类别栏，包含仪器，数据，固定的工作流程；左上角为导航栏，此处对应显示类别栏选中后的相关信息；右侧为工作区。

上侧为菜单栏。

4程序4.1开机4.1.1开机前准备1)流动相的配制：根据待检样品的检验方法准备所需的流动相（应足够；流动相必须用至少0.45um滤膜过滤；流动相必须充分脱气，流动相配制所用的有机相必须是色谱级的，所用的水必须是双重蒸馏水。

）2)样品的处理：称取或量取适量的对照品或供试品、用适当的溶剂（最好采用流动相或流动相的主成份）进行充分溶解（或超声溶解），根据检测结果再适当调节溶液浓度，样品应过滤（0.45um有机膜或水膜）3)更换合适的色谱柱（柱进出口位置应与流动相流向一致）。

4)请确认：清洗泵头密封圈的10%异丙醇或甲醇水溶液是否走空，是否清洁，洗针通道或洗针液瓶没有走空。

5)依次打开泵、自动进样器、柱温箱、检测器的电源。

4.1.2Chromeleon登陆与液相连接1)登录PC客户端：输入用户和密码登陆PC客户端。

2)登录Chromeleon：双击变色龙图标，进入Chromeleon7界面，输入账号和密码，登陆Chromeleon工作站。

3)连接控制器：关闭仪器控制，变色龙图标显示为，表示客户端链接断开。

软件安装说明第一步：安装软件。

1)安装条件:① 必须有功率2KVA 以上的稳压电源.② 必须要接地线③ CPU-P III 600 以上④ 内存至少128 M（最低）⑤ 操作系统－ WinXP⑥ 3 个 USB，1 个COM 接口；⑦ CD-ROM；2)安装将安装光盘放入光驱，跳出上面界面，点击“Launch CHROMELEON Setup”, 即可安装。

按提示完成安装，最好将软件放在非系统盘的分区上。

如上图E：/chromel。

点确认。

继续按提示完成后面各项步骤，其中不需要改动任何设置。

软件安装完成后，关闭计算机。

重新启动。

删除安装软件E：/chromel/Bin目录下一文件cmserver（约80KB ）第二步：连接仪器各信号线，打开仪器电源。

将仪器后边的各个信息线（USB 接口、网线、com 口等）接在电脑后面板的接口上。

注意:因为检测器需向电脑传输的数据量较大，所以一定不要将检测器的数据线接到泵上，再由泵上的USB 线接到电脑上。

而是要直接接到电脑上.接好各信号线后,打开仪器各部分电源。

按电脑提示安装新硬件驱动程序。

将控制仪器用的密码狗（dongle）也插在电脑后面板的USB 接口上。

按电脑提示安装新硬件驱动程序。

第三步：启动服务监视器。

然后重新打开电脑。

如下图，双击电脑右下角的变色龙软件的服务监视器（Chromeleon server monitor）将跳出如下图所示界面：鼠标左键单击“start”，激活监视器，方能 进行以后的各项操作(包括以后用软件控制仪器也需要先激活监视 器)。

如下图：“start”将变虚，表明监视器已经启动。

第四步：软件中的硬件设置。

1) 进入界面如下图，从电脑的“程序”中打开软件的服备配置器。

即用鼠标左键单击“server configuration”将跳出如下窗口：2）进入仪器根目录左上方为本台电脑的名字，即根目录“USER-ED1WD82ES4”，点击 一下“+”号，将根目录下的文件或文件夹展开。

Chromeleon色谱工作站(HPLC)操作指南第一章打开Chromeleon变色龙软件1．打开“Server Monitor”（工程师已设定好，一般不必做这一步）在桌面右下角的变色龙小图标上，单击鼠标右键，选择“Open”弹出Server Monitor框，点击“Start”，等待变色龙图标变成灰色，显示Serial号 ****，单击“Close”关闭“Server Monitor”2．双击桌面上Chromeleon图标，进入Chromeleon变色龙软件操作系统；3．单击Local计算机代码，双击与仪器配置实际情况一致的控制面板；注意：以下操作步骤以四元泵/紫外检测器/自动进样器/柱箱为例：下图显示四元泵/自动进样器/柱箱/紫外检测器的操作面板,如果显示灰色，可依次让软件与泵，自动进样器，柱箱，UV检测器连机；3．1 泵的设置：点击泵模块下的“Settings”键;弹出泵的设定窗口;在“Status”框中选上connect3．2自动进样器的设置：点击自动进样器模块下的“Settings”键，弹出进样器的设定窗口：在“Status”框中选上connect设置完成后，按右下方的“Close”关键该画面。

3．3点击柱温箱模块下的“Settings”键，弹出柱温箱的设定窗口：在“Status”框中选上connect设置完成后，按右下方的“Close”关键该画面。

3．4 检测器的设置：①UVD 170US检测器点击检测器模块下的“Settings”键，跳出一个检测器的设置窗口：②PDA-100检测器设置完成后，按右下方的“Close”关键该画面。

第二章设定分析运行的程序方法和样品表说明：要分析一批样品，需要三个文件来完成。

1、需要一个程序文件规定测定这些样品时所用到的系统的条件。

比如泵的流速、各通道的比例；自动进样器/手动进样阀的进样体积；柱温箱的温度；检测器的波长、测每个样品需要的时间等等，都得在程序文件里指定。