关于生物技术综合实验报告
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一、实验背景随着科技的不断发展,生物技术已成为当今世界重要的研究领域之一。
生物技术涉及基因工程、细胞工程、酶工程等多个方面,旨在利用生物体或其组成部分进行技术创新和产品开发。
本实验旨在通过学习生物技术的基本原理和实验操作,掌握相关技术,提高学生的实验技能和创新能力。
二、实验目的1. 了解生物技术的基本原理和实验操作。
2. 掌握分子克隆、蛋白质纯化等生物技术实验方法。
3. 提高学生的实验技能和创新能力。
三、实验内容1. 分子克隆实验(1)目的:学习DNA的提取、连接、转化等分子克隆技术。
(2)原理:利用DNA连接酶将目的基因与载体连接,并通过转化将重组质粒导入宿主细胞。
(3)操作步骤:①DNA提取:取适量细胞,加入裂解缓冲液,进行细胞裂解。
②DNA纯化:利用离心柱纯化DNA。
③连接:将纯化后的目的基因与载体连接。
④转化:将连接产物转化至宿主细胞。
⑤筛选:通过PCR、酶切等手段筛选阳性克隆。
2. 蛋白质纯化实验(1)目的:学习蛋白质纯化的原理和实验操作。
(2)原理:利用蛋白质的物理化学性质,如分子量、电荷、亲和力等,通过层析、离心等方法进行纯化。
(3)操作步骤:①样品制备:取适量蛋白质样品,加入适当缓冲液。
②离心:通过离心去除细胞碎片和杂质。
③层析:利用层析柱进行蛋白质分离纯化。
④收集:收集纯化后的蛋白质样品。
四、实验结果与分析1. 分子克隆实验结果:通过PCR、酶切等手段筛选出阳性克隆,证实了目的基因已成功克隆。
2. 蛋白质纯化实验结果:通过层析、离心等方法,成功分离纯化了目标蛋白质。
五、实验讨论1. 分子克隆实验中,DNA提取和纯化是关键步骤。
实验过程中,应严格控制操作条件,确保DNA质量。
2. 在蛋白质纯化实验中,层析柱的选择和操作对实验结果有很大影响。
应选择合适的层析柱,并严格按照操作规程进行实验。
3. 实验过程中,要注意实验操作的安全性,如使用生物安全柜、穿戴防护用品等。
六、实验总结通过本次生物技术实验,我们掌握了分子克隆、蛋白质纯化等基本实验操作,提高了实验技能和创新能力。
实验名称:现代生物技术综合实验实验目的:1. 理解并掌握现代生物技术的基本原理和方法。
2. 学习和运用PCR技术、DNA测序和基因克隆等现代生物技术。
3. 培养团队协作能力和科学实验操作技能。
实验时间:2023年3月15日实验地点:生物技术实验室实验器材:1. 实验仪器:PCR仪、凝胶成像系统、DNA测序仪、离心机、恒温培养箱等。
2. 实验试剂:DNA模板、引物、PCR试剂、DNA测序试剂、质粒提取试剂盒等。
3. 实验材料:大肠杆菌、酵母菌、植物组织等。
实验步骤:一、PCR扩增1. 设计引物:根据目的基因序列,设计一对特异性引物。
2. PCR反应:将DNA模板、引物、PCR试剂混合,进行PCR反应。
3. PCR产物检测:将PCR产物进行琼脂糖凝胶电泳,观察扩增结果。
二、DNA测序1. DNA提取:从实验材料中提取DNA。
2. DNA纯化:使用DNA纯化试剂盒进行DNA纯化。
3. DNA测序:将纯化的DNA进行测序,得到目的基因序列。
三、基因克隆1. 质粒提取:从大肠杆菌中提取质粒。
2. 质粒纯化:使用质粒纯化试剂盒进行质粒纯化。
3. 酶切连接:将目的基因和载体进行酶切连接。
4. 转化:将连接产物转化到大肠杆菌中。
5. 阳性克隆筛选:通过PCR或DNA测序筛选出含有目的基因的阳性克隆。
实验结果与分析:一、PCR扩增结果通过PCR扩增,成功得到目的基因片段,大小与预期相符。
二、DNA测序结果通过DNA测序,得到目的基因的核苷酸序列,与预期序列一致。
三、基因克隆结果通过阳性克隆筛选,成功克隆出目的基因,并将其表达在酵母菌中。
实验讨论:1. PCR技术在基因克隆和基因分析中具有广泛的应用,其灵敏度、特异性和快速性使其成为现代生物技术中的重要工具。
2. DNA测序技术可以精确地测定目的基因的核苷酸序列,为基因功能研究和基因工程提供重要信息。
3. 基因克隆技术是实现基因表达和蛋白质纯化的关键步骤,为生物制药、基因治疗等领域提供了有力支持。
生物技术综合实验报告(第一部分)实验一工作液的配制、培养基配制、器皿洗涤及灭菌一、实验目的掌握各种工作液配制方法;了解植物培养基的构成及配制方法;掌握高温高压灭菌的方法。
二、原理培养基是植物组织培养的基本条件,同时也是关键因素。
湿热条件(121℃的蒸汽,10分钟)能够有效地杀灭附着在玻璃器皿、器具以及溶液和培养基中的微生物达到灭菌的目的。
三、器具和试剂灭菌锅,天平,电炉,微波炉,三角瓶,封口膜,移液管,移液器,量筒,烧杯,pH试纸,培养皿,滤纸,Parafilm封口膜。
琼脂,MS培养基大量元素,无菌水,葡萄糖,2, 4-D,IBA,KT (激动素),1M NaOH及HCl,卡那霉素,头孢霉素,乙酰丁香酮。
四、实验内容PH调节剂的配制、培养基母液的配制、培养基的配制、各种相关物品的准备(一)培养基的配制步骤1、取个干净烧杯,加入1/3-2/3左右的蒸馏水,用移液管取所需的母液加入烧杯。
2、称取定量的蔗糖加入烧杯中并不断搅拌,直到完全溶解,定容。
3、用NaOH或者稀HCL调剂酸碱值。
4、称取定量琼脂糖加入烧杯中,加热煮沸搅拌,待琼脂完全溶解,分装。
5、高压灭菌(121℃,15min-20min)。
6、冷却,取出,备用。
(二)棉花无菌苗培养基的制备1、取25 ml MS大量元素母液,称取葡萄糖15g、于1升的烧杯中,定容后调pH值为6.0,加入7.5g/l 琼脂煮沸。
2、然后将其分装到100毫升的三角瓶中,每瓶40毫升。
3、用封口膜封口后在灭菌锅中灭菌15分钟。
4、灭菌后臵于水平的工作台上冷却即可。
要求:配制1L(三)拟南芥无菌苗培养基的制备1、拟南芥无菌苗培养基:1/2 MS大量元素+蔗糖10g/L,PH值6.0;加入7.5g琼脂高温高压灭菌。
2、0.1%琼脂糖:0.1g琼脂糖/100ml 蒸馏水;无菌苗培养基和0.1%琼脂糖均121°高压灭菌15分钟。
3、另准备20套9cm培养皿,灭菌。
生物技术实习报告生物技术实习报告11篇在学习、工作生活中,报告的用途越来越大,报告中提到的所有信息应该是准确无误的。
在写之前,可以先参考范文,下面是小编精心整理的生物技术实习报告,欢迎阅读与收藏。
生物技术实习报告1实习单位安徽省出入境检验检疫局一、实习目的根据学院对11级动植物检疫及应用班的授课要求,我在院校安排的安徽省出入境检验检实习日期6月20日~8月15日疫局进行了为期2个月(6月20日到8月15日)的顶岗实习。
接触事实,巩固所学的理论获取本专业的实际知识,培养初步的实践工作能力和专业技能。
二、实习单位简介安徽出入境检验检疫技术中心,是经原国家出入境检验检疫局批准设立,经中编办批准独立注册,安徽检验检疫局直属的事业单位。
是安徽省唯一为出入境检验检疫行政执法工作提供技术保障的部门,属于非营利性质的技术单位。
安徽检验检疫技术中心在安徽检验检疫局的领导下,对外独立承担民事行为。
主要承担出入境检验检疫的实验室检测、隔离检疫、研究咨询与检疫风险分析,承担科研与技术开发、服务,提供技术指导,开展有关检验检疫方法标准的制修订。
按照有关规定,承担委托检验、鉴定和非法定检验检疫、鉴定的检测实验。
下设生物实验室、化学实验室、纺织实验室等3个专业实验室。
上述专业实验室均获得中国实验室国家认可委员会(CNAL)的认可。
在国际贸易中,代表中国官方检测机构,行使相关职能,出具的实验室检测报告在国际实验室认可组织范围内得到互认,具有公证性、权威性。
在安徽,法定检验检疫的出入境商品中,凡是需要实验室检测的,安徽检验检疫技术中心既是必经之路,又是方便快捷的“绿色通道”。
安徽检验检疫技术中心拥有国际国内先进的检测技术设备,围绕涉及安全、卫生、环保、反欺诈和国家经济安全的检测项目,设置了门类齐全的检验学科。
适应地方经济建设、外贸发展,跟踪国际贸易中最新技术法规、标准和合格评定程序的要求,为检验检疫行政执法和外贸关系人提供技术咨询、技术转让、技术培训和检测技术服务。
生物技术实习报告4篇本文是关于生物技术实习报告4篇,仅供参考,希望对您有所帮助,感谢阅读。
生物学是一门实践性很强的学科,我们在经过了将近一年对动物学和植物学的理论学习后,野外实习也至关重要,它可以使我们更加有效地掌握和巩固课堂教学的基本理论知识和基本实验技能,而且还可以学到许多在课堂上学不到的知识,开阔视野,认识人与自然的关系,增强环境保护意识和社会责任感。
实习目的;(1)复习、巩固和验证所学的生物学基本理论和基本知识,同时进一步丰富所学的生物学知识;(2)用辩证唯物主义观点观察丰富多彩的生物世界,了解植物和动物的形态、习性、种类、用途的多样性以及它们与环境的关系,激发学习的积极性;(3)理论联系实际,通过自主学习和研究性学习培养独立工作能力和创新意识;(4)培养不怕困难,吃苦耐劳的好作风热爱祖国的山山水水,珍惜大自然一草一木的良好素质与情感;(5)增强集体主义观念弘扬团队精神,促进同学,师生之间的了解与沟通。
实习意义;(1)通过野外实习,我们不仅巩固了书本上学到的知识,而且还学到许多在书本上学不到得知识;(2)通过野外综合学习,我们更加热爱自然,热爱专业,团结合作,吃苦耐劳,同时也提高了独立观察、思考、分析、解决问题的能力和探索创新的新能力;(3)通过野外实习,增强了我们对植物界生物的认识,认识了人与自然的关系,增强环境保护意识和社会责任感。
主要内容:5月29日,早晨五点集合,出发赶往青岛,下午一点左右到达参观青岛市中山公园的动、植物园,下午2点10分集合,晚上进入北九水风景区。
5月30日,上午在山里采集标本,下山后按小组制作标本,下午去樱桃园采摘樱桃。
5月31日,挑战崂顶,6点40出发,中午12点左右到达崂顶,围山顶走了一圈后开始下山,下山时由于方向性错误我们在深山里迷路了,还遇上了大雨,幸亏遇上了几名野外登山队员,才得以走出这座鬼斧神工的大山,到达营地时已经晚上7点多了。
6月1日,早上8点多,在青岛栈桥看风景,9点到下午2点在海底世界参观标本及各种海洋生物(标本馆、海底世界、海兽馆、梦幻水母宫)下午两点多向日照出发,来到李家湾赶海园,住在海边,心情无比激动。
第1篇一、实验背景随着科技的飞速发展,生物学作为一门基础科学,其重要性日益凸显。
实验教学是生物学科教学的重要组成部分,通过实验,学生可以加深对生物学知识的理解和掌握,培养科学探究能力和实践操作技能。
本实验报告旨在记录和总结在一次生物实验教学过程中的实践经验和收获。
二、实验目的1. 理解并掌握实验原理和方法。
2. 培养学生的实验操作技能和科学思维。
3. 通过实验,加深对生物学知识的理解和应用。
4. 提高团队合作意识和沟通能力。
三、实验内容本次实验选择了“观察植物细胞有丝分裂”和“DNA的粗提取与鉴定”两个实验。
四、实验原理1. 植物细胞有丝分裂:有丝分裂是细胞分裂的一种形式,通过观察有丝分裂过程,可以了解细胞周期和染色体的行为。
2. DNA的粗提取与鉴定:DNA是生物体内的遗传物质,通过提取和鉴定DNA,可以了解DNA的结构和功能。
五、实验步骤1. 观察植物细胞有丝分裂:- 制备洋葱根尖细胞切片。
- 使用显微镜观察细胞有丝分裂过程。
- 记录染色体的行为和细胞分裂阶段。
2. DNA的粗提取与鉴定:- 制备植物细胞匀浆。
- 使用氯化钠溶液提取DNA。
- 使用二苯胺试剂鉴定DNA。
六、实验结果与分析1. 观察植物细胞有丝分裂:- 成功观察到洋葱根尖细胞的有丝分裂过程,包括前期、中期、后期和末期。
- 观察到染色体的排列、分离和移向细胞两极。
2. DNA的粗提取与鉴定:- 成功提取出植物细胞的DNA。
- 使用二苯胺试剂,观察到DNA与试剂反应后的颜色变化,证明DNA的提取成功。
七、实验讨论1. 实验过程中,注意了实验操作的正确性和规范性,保证了实验结果的准确性。
2. 通过实验,加深了对有丝分裂和DNA结构及功能的理解。
3. 实验过程中,遇到了一些问题,如染色质着色不均匀、DNA提取量不足等,通过查阅资料和与同学讨论,找到了解决方法。
八、实验总结1. 通过本次实验,提高了自己的实验操作技能和科学思维。
2. 加深了对生物学知识的理解和应用,为今后的学习打下了坚实的基础。
关于生物技术综合实验报告生物技术综合实验甘薯γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶(γ-GCS)基因的克隆和原核表达学生:学号:同实验者:谷胱甘肽(glutathione, GSH) GSH具有多种重要生理功能, 抗自由基和抗氧化应激作用, 保护细胞膜的完整性等。
γ-GCS是植物细胞中GSH生物合成的限速酶, 可以调控GSH 的生物合成量。
GSH在生物体抵御冷害、干旱、重金属、真菌等胁迫过程中起着重要作用, 说明γ-GCS也与植物抗逆过程密切相关。
实验一甘薯叶片RNA提取一、实验目的1. 了解真核生物RNA提取的原理;2. 掌握Trizol提取的方法和步骤。
二、实验原理Trizol 试剂是由苯酚和硫氰酸胍配制而成的单相的快速抽提总RNA的试剂,在匀浆和裂解过程中,能在破碎细胞、降解细胞其它成分的同时保持RNA的完整性。
TRIzol的主要成分是苯酚。
苯酚的主要作用是裂解细胞,使细胞中的蛋白,核酸物质解聚得到释放。
苯酚虽可有效地变性蛋白质,但不能完全抑制RNA酶活性,因此TRIzol中还加入了8-羟基喹啉、异硫氰酸胍、β-巯基乙醇等来抑制内源和外源RNase。
%的8-羟基喹啉可以抑制RNase,与氯仿联合使用可增强抑制作用。
异硫氰酸胍属于解偶剂,是一类强力的蛋白质变性剂,可溶解蛋白质并使蛋白质二级结构消失,导致细胞结构降解,核蛋白迅速与核酸分离。
β-巯基乙醇的主要作用是破坏RNase蛋白质中的二硫键。
在氯仿抽提、离心分离后,RNA处于水相中,将水相转管后用异丙醇沉淀RNA。
用这种方法得到的总 RNA中蛋白质和DNA污染很少。
三、实验材料1. 材料甘薯叶片,品种为徐薯182. 试剂①无RNA酶灭菌水:加入%的DEPC,处理过夜后高压灭菌;② Trizol试剂;③氯仿;④异丙醇、75%乙醇;⑤ TBE缓冲液;⑥上样缓冲液3. 仪器高压灭菌锅、微量移液器、台式离心机、超净工作台、电泳仪、电泳槽、凝胶成像系统、塑料离心管、枪头和EP 管架四、实验方法1. 将叶片取出放入研钵中,加入适量液氮,迅速研磨成粉末,每50-100 mg植物叶片加入1 mL Trizol试剂,室温放置5 min,使样品充分裂解;2. 每1 mL Trizol试剂加入200 μL氯仿,用手剧烈振荡混匀后室温放置3-5 min使其自然分相;3. 4℃ 12,000 rpm 离心15 min,吸取上层水相转移到新管中;在上清中加入等体积冰冷的异丙醇,室温放置15 min;4. 4℃ 12,000 rpm 离心10 min,弃上清,RNA沉淀于管底;5. RNA沉淀中加入1 mL 75%的乙醇,温和震荡离心管,悬浮沉淀; 4℃ 8,000 rpm离心2 min,弃上清;6. 室温放置10 min晾干沉淀;7. 沉淀中加入20μL RNase-free ddH2O,轻弹管壁,以充分溶解RNA,-70℃保存;8. 用1%的琼脂糖凝胶电泳进行检测,用EB染色并照相。
2024 生物技术专业实习报告范文12024 生物技术专业实习报告范文1精选5篇(一)2024年生物技术专业实习报告一、引言生物技术作为一门新兴的学科,涵盖了生物学、化学、数学和计算机科学等多个领域。
本次实习是我对生物技术知识的实践运用,旨在提升自己的实践能力和掌握先进的生物技术实验技能。
本报告将详细描述我在实习期间所参与的项目及所学到的知识与经验。
二、实习项目1. 实习单位:XX生物技术有限公司2. 项目内容:基因工程方面的研究与应用3. 实习时间:2024年6月1日-2024年8月31日三、实习经历1. 实习内容在实习期间,我主要负责参与公司正在进行的基因工程项目。
我在导师的指导下,学习了基因工程的基本理论知识以及实验操作技能。
我主要参与了以下几个方面的工作:(1)基因克隆:学习了基因的克隆原理和操作方法,通过PCR扩增目标基因,然后将其插入到载体中。
(2)蛋白表达和纯化:学习了蛋白表达系统的构建和操作技巧,对目标蛋白进行表达和纯化。
(3)基因编辑:学习了CRISPR-Cas9系统的原理和应用,通过设计合适的引物和控制条件,对目标基因进行编辑。
(4)转基因植物培育:学习了转基因植物的培育原理和方法,参与了转基因植物的构建和扩增工作。
2. 实习收获通过本次实习,我获得了以下收获:(1)对基因工程领域有了更深入的了解:在实习期间,我学到了许多基因工程的理论知识和实验技巧,对基因工程的原理和应用有了更深入的了解。
(2)培养了实验操作能力:通过参与实验项目,我掌握了许多实验操作和技巧,提高了自己的实验操作能力。
(3)锻炼了团队合作能力:在项目中,我与其他实习生和导师一起工作,学会了与他人合作、协调和沟通,培养了团队合作能力。
(4)增强了问题解决能力:在实习过程中,我遇到了许多实验操作中的困难和问题,通过积极探索和与导师交流,我学会了解决问题的方法和策略。
四、实习总结与展望通过本次实习,我不仅学到了许多实践知识和实验技能,还通过工作与导师和其他实习生的交流,认识到了自身的不足和需要提高的地方。
生物技术专业实践报告5篇【导语】生物技术专业实践报告怎么写好?本为精选了5篇优秀的生物技术专业实践报告范文,都是标准的书写参考模板。
以下是我为大家收集的生物技术专业实践报告,仅供参考,希望您能喜欢。
目录第1篇生物技术专业暑期社会实践报告范文第2篇2022年8月生物技术专业大学生社会实践报告第3篇生物技术专业暑期社会实践报告第4篇最新生物技术专业暑期社会实践报告第5篇生物技术专业寒假社会实践报告范文【第1篇】生物技术专业暑期社会实践报告范文[实习目的]1通过深入各实习岗位进行综合性的实习,将所学的基础理论、基础知识和基本技能运用于实践之中,将所学的知识转化为能力,培养实际工作能力、科研能力。
2掌握现代生物技术手段与运用能力,训练实际操作技能。
3了解校外科研机构的实际工作情况,尤其是与所学专业相关的学科如生物学、化学、医学、药学等学科的研究情况和前沿状况。
4从实际出发,检验自己在态度、知识、能力、技能等四项指标方面所达到的程度。
[实习时间]2022[实习地点]中国科学院xx植物研究所[实习内容]1、植物组织培养技术---------组培室2、标本的采集、制作、鉴定、保藏技术---------标本馆内3、植物分类、引种、栽培、鉴定、管理---------植物园内的苗圃基地4、植物化学方面的研究-------------植物化学实验室5、专业讲座、科普训练、学术报告----------专家指导[实习人员]xxxxxx化学与生物技术学院05级生物技术专业[实习方式]1以小组为单位轮转到各个点实习,根据指导教师的安排及要求完成各项实习任务。
2积极主动,充分发挥个人能动性和团队合作精神。
[正文]实习,是一种期待,是对自己成长的期待,是对自己角色开始转换的期待,更是对自己梦想的期待;实习,也有一份惶恐,有对自己缺乏信心的不安,有对自己无法适应新环境的担忧,更有怕自己会无所适从的焦虑.带着一份希望和一份茫然来到了来到隶属中国科学院的昆明植物研究所,开始我的实习生涯。
关于生物技术实习报告三篇关于生物技术实习报告三篇在现实生活中,需要使用报告的情况越来越多,报告根据用途的不同也有着不同的类型。
你所见过的报告是什么样的呢?下面是为大家的生物技术实习报告4篇,欢迎阅读与收藏。
使学生了解和掌握根本业务知识,印证、稳固和丰富已学过地专业课程内容,培养学生理论联系实际,在实际中调查研究、观察问题、分析问题,以及解决问题地能力和方法,为后续专业课程地学习打下根底.正阳河酱油厂原理:以大豆、小麦为主要原料,采用传统天然发酵工艺,经十余道工序精酿而成,内含多种人体必需地氨基酸、复原糖等营养成份.色泽鲜艳、质纯味正、酱香浓郁、咸甜适口,-是烹任各式菜肴、冷拌、餐桌盛宴地佐餐调味佳品.分特级、特鲜、精制佳酿优级等1有瓶装及复全薄膜软包装,计14个品种.工艺流程:制作方法1、种曲制造①菌种②培养:试管菌种→锥形瓶菌种→曲盒种曲(或曲池、曲匾)逐级扩大培养.试管菌种应定期进展纯化、复壮.③质量要求:感官指标——孢子丛生,黄绿色,无异味,无污染.理化指标——每克菌种(干基)含孢子数510**9个以上.孢子发芽率在90以上.2、原料处理①脱脂大豆地破碎脱脂大豆破碎程度,以粗细均匀为宜.要求颗粒直径2~3mm,2mm 以下地粉未量不超过20.②润水脱脂大豆与麸皮混合蒸料时,脱脂大豆应先从80℃左右热水进展浸润适当时间后,再混入麸皮,拌匀,蒸料.3、制曲①接种入池熟料冷却到45℃以下,接入种曲2‰~4‰,混合均匀后,移入曲池制曲②制曲工艺条件曲层厚度25~30cm,曲料应保持松散,厚度一致,制曲过程中应操纵品温28~32℃,最高不得超过35℃室温28~30℃,曲室相对湿度在90以上,制曲时间24h以上.在制曲过程中应进展2~3次翻曲.4、发酵①盐水地配制:食盐加水溶解,澄清后使用.②拌曲盐水盐水地温度:夏季45~50℃,冬季:50~55℃;操纵:成曲拌盐水量使酱醅水分为50~53(移池浸出法)55~58(原池浸出法).③拌曲操作在成曲拌入盐水时,应当使盐水与成曲拌和均匀,不得有过湿过干现象.为防止酱醅表层形成氧化层,影响酱醅质量,可采取:5、浸出6、酱油地加热灭菌生酱油加热灭菌温度视方法不同而异.间歇式加热65~70℃维持30min;连续式加热热交换器出口温度操纵在85℃.7、配兑将头油及二油按酱油质量标准进展配兑.8、澄清将经过加热灭菌及配兑合格地酱油成品进展静置澄清.静置澄清地时间一般应不少于七天.产量瓶装地每天生产1500箱,软包装机器有16台,每台生产20袋/分,日产量为4000箱,每箱30袋,每袋400ml.哈尔滨美华生物技术股份1、企业简介哈尔滨美华生物技术股份创立于XX年2月,是以研发、生产乳糖酶等生物制品为主地民营股份制高新技术企业,严格按gmp要求组织生产,已通过iso9001:XX质量管理体系认证,现已形成“生产一代、储藏一代、研发一代”地良性开展模式.XX年初被国家发改委列入“振兴东北老工业基地高技术产业化示范工程开展专项方案”.2、主要产品介绍中性乳糖酶系统名称:β-d-半乳糖苷乳糖水解酶(常用名称:乳糖酶)外观:黄色至浅褐色粉末状作用原理:水解乳糖分子中地β-半乳糖苷键,使乳糖水解生成葡萄糖、半乳糖并合成少量低聚乳糖.稳定性能:①热稳定性—ph在6.6~7.0条件下,40℃以下比较稳定,2小时酶存活率90,超过45℃酶活力呈现不稳定,50℃以上很快失活;②ph稳定性—ph在6.2~8.6之间稳定,低于或高于很快失活.最适温度:39℃最适ph值:ph6.8金属离子对酶活力地影响:被mn2、mg2激活,被ca2、zn2、cu2、fe2所抑制.家用直投式酸奶发酵剂家用直投式酸奶发酵剂系利用分子生物技术将精选出地酸奶专用菌种——嗜热链球菌和保加利亚乳杆菌进展混合纯培养,经浓缩、真空冷冻枯燥制得.具有菌种纯度高、菌体性能稳定、使用方便等特点.低乳糖奶粉哈尔滨美华生物技术股份生产地低乳糖奶粉是将鲜牛奶经中性乳糖酶水解后,高温杀菌、真空浓缩、喷雾枯燥地科学方法制成.3、生产工艺流程配料罐——→种子罐——→发酵——→管式离心机——→无菌室——→冻干——→产品检验生物学是一门实践性很强的学科,我们在经过了将近一年对动物学和植物学的理论学习后,野外实习也至关重要,它可以使我们更加有效地掌握和稳固课堂教学的根本理论知识和根本实验技能,而且还可以学到许多在课堂上学不到的知识,开阔视野,认识人与自然的关系,增强环境保护意识和社会责任感。
关于生物技术综合实验报告生物技术综合实验甘薯γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶(γ-GCS)基因的克隆和原核表达学生:学号:同实验者:谷胱甘肽(glutathione, GSH) GSH具有多种重要生理功能, 抗自由基和抗氧化应激作用, 保护细胞膜的完整性等。
γ-GCS是植物细胞中GSH生物合成的限速酶, 可以调控GSH 的生物合成量。
GSH在生物体抵御冷害、干旱、重金属、真菌等胁迫过程中起着重要作用, 说明γ-GCS也与植物抗逆过程密切相关。
实验一甘薯叶片RNA提取一、实验目的1. 了解真核生物RNA提取的原理;2. 掌握Trizol提取的方法和步骤。
二、实验原理Trizol 试剂是由苯酚和硫氰酸胍配制而成的单相的快速抽提总RNA的试剂,在匀浆和裂解过程中,能在破碎细胞、降解细胞其它成分的同时保持RNA的完整性。
TRIzol的主要成分是苯酚。
苯酚的主要作用是裂解细胞,使细胞中的蛋白,核酸物质解聚得到释放。
苯酚虽可有效地变性蛋白质,但不能完全抑制RNA酶活性,因此TRIzol中还加入了8-羟基喹啉、异硫氰酸胍、β-巯基乙醇等来抑制内源和外源RNase。
%的8-羟基喹啉可以抑制RNase,与氯仿联合使用可增强抑制作用。
异硫氰酸胍属于解偶剂,是一类强力的蛋白质变性剂,可溶解蛋白质并使蛋白质二级结构消失,导致细胞结构降解,核蛋白迅速与核酸分离。
β-巯基乙醇的主要作用是破坏RNase蛋白质中的二硫键。
在氯仿抽提、离心分离后,RNA处于水相中,将水相转管后用异丙醇沉淀RNA。
用这种方法得到的总 RNA中蛋白质和DNA污染很少。
三、实验材料1. 材料甘薯叶片,品种为徐薯182. 试剂①无RNA酶灭菌水:加入%的DEPC,处理过夜后高压灭菌;② Trizol试剂;③氯仿;④异丙醇、75%乙醇;⑤ TBE缓冲液;⑥上样缓冲液3. 仪器高压灭菌锅、微量移液器、台式离心机、超净工作台、电泳仪、电泳槽、凝胶成像系统、塑料离心管、枪头和EP 管架四、实验方法1. 将叶片取出放入研钵中,加入适量液氮,迅速研磨成粉末,每50-100 mg植物叶片加入1 mL Trizol试剂,室温放置5 min,使样品充分裂解;2. 每1 mL Trizol试剂加入200 μL氯仿,用手剧烈振荡混匀后室温放置3-5 min使其自然分相;3. 4℃ 12,000 rpm 离心15 min,吸取上层水相转移到新管中;在上清中加入等体积冰冷的异丙醇,室温放置15 min;4. 4℃ 12,000 rpm 离心10 min,弃上清,RNA沉淀于管底;5. RNA沉淀中加入1 mL 75%的乙醇,温和震荡离心管,悬浮沉淀; 4℃ 8,000 rpm离心2 min,弃上清;6. 室温放置10 min晾干沉淀;7. 沉淀中加入20μL RNase-free ddH2O,轻弹管壁,以充分溶解RNA,-70℃保存;8. 用1%的琼脂糖凝胶电泳进行检测,用EB染色并照相。
五、实验结果1. RNA提取结果依照Trizol 试剂盒方法,提出的RNA较少,此部分未以图或数据显示。
2. RNA后电泳结果如图1. 其中9a为本组实验结果。
由图可知RNA条带非常模糊,拖尾现象严重,几乎无法分清具体条带,亮度较大。
点样孔附近的红色部分为杂质,在提取过程中并未很好除去。
图1. RNA提取跑胶结果。
其中1泳道为样品Marker,9a泳道为本小组RNA样品。
与标准对照可见条带模糊,拖尾现象严重。
六、分析与讨论1. RNA的提取产量并不多,可能是因裂解样品不充分或RNA沉淀未完全溶解所致。
在实验过程中,由于对操作时间的掌握不熟练、操作技巧不完善,留上清与弃上清时令RNA损失了部分,使最终RNA产量不理想。
2. RNA电泳结果有EB存在时,电泳后28S rRNA和18S rRNA在紫外灯下应看得很清楚,另出现条由tRNA, rRNA和5S rRNA组成的较模糊、迁移较快的带。
如果RNA没有降解,则28S rRNA的亮度应为18S rRNA的2倍,且这两条带都无弥散现象发生。
由图1. 9a可知,RNA 拖尾现象严重,说明RNA已大部分被降解;此外点样孔附近出现红色部分杂质,分析可能有并未除尽的蛋白质,同样影响RNA电泳结果。
在进行实验时,本小组成员未严格戴上口罩并勤换手套,这可能使外源RNAase进入样品,导致其降解严重。
另外,提取出RNA 后本小组未立即将样品放入-70℃保存,也为导致结果不理想的重要原因之一。
在最初用氯仿萃取分层的过程中,由于水相吸取过多,掺杂入部分蛋白质杂质而未于后续纯化步骤除尽,RNA条带拖尾严重可能还受该蛋白质影响。
七、总结:本次试验RNA提取非常失败,从跑胶结果可见其降解严重。
虽然大实验无法避免试剂交叉污染的可能性,且电泳用胶的质量也会影响实验结果,但从图1. 2a,3a,2b等条带较为清晰的小组实验结果可知,琼脂糖凝胶质量以及试剂对结果干扰不大。
那么本小组成员在提取过程中的操作一定出现了很大失误。
首先口罩、手套应该严格按规定佩戴,提取过程对移液枪等仪器使用需谨慎仔细,尽量避免混入杂质。
其次为排除部分杂质影响可对RNA 样品用紫外线分光光度计测定吸光值检验,将有助于结果分析。
最后,细节决定成败,我们应汲取教训避免接下来的实验出现类似问题。
实验二第1链cDNA的合成和模板的验证一、实验目的1. 掌握第1链cDNA的合成方法和步骤二、实验原理真核生物基因多为断裂基因,编码区不连续,需经转录后加工才能成为成熟mRNA。
以真核成熟mRNA为模板合成cDNA,进而获得有连续氨基酸编码的DNA序列,无需转录后加工,即可在原核细胞中表达。
真核生物的mRNA都有PolyA尾巴。
引物:Oligo dT。
莫洛尼氏鼠白血病毒逆转录酶以单链RNA为模板,在引物的引发下合成与模板互补的DNA链。
mRNA 反转录生成的cDNA可作为PCR的模板进行扩增称为RT-PCR,RT-PCR比Northern杂交更灵敏,对RNA的质量要求较低,操作简便,它是在转录水平上检测基因时空表达的常用方法。
三、实验材料1. 材料徐薯18叶片RNA样品2. 试剂① dNTP mixture;② Oligo (dT) Primer (10 μM);③ Total RNA;④ RNase free ddH2O;⑤ M-MLV 反转录酶;⑥ 5×First-strand Buffer;⑦M DTT;⑧ Ribonuclease Inhibitor (40 U/μL)3. 仪器10μL 和100μL 的移液枪、的EP管、PCR仪等四、实验方法1. 在RNase free Microtube 管中配制下列混合液:dNTP mixture1 μL*Oligo (dT) Primer (10 μM) 4 μLTotal RNA2 μL生物技术综合实验报告实验一工作液的配制、培养基配制、器皿洗涤及灭菌一、实验目的掌握各种工作液配制方法;了解植物培养基的构成及配制方法;掌握高温高压灭菌的方法。
二、原理培养基是植物组织培养的基本条件,同时也是关键因素。
湿热条件(121℃的蒸汽,10分钟)能够有效地杀灭附着在玻璃器皿、器具以及溶液和培养基中的微生物达到灭菌的目的。
三、器具和试剂灭菌锅,天平,电炉,微波炉,三角瓶,封口膜,移液管,移液器,量筒,烧杯,pH试纸,培养皿,滤纸,Parafilm 封口膜。
琼脂,MS培养基大量元素,无菌水,葡萄糖,2, 4-D,IBA,KT ,1M NaOH及HCl,卡那霉素,头孢霉素,乙酰丁香酮。
四、实验内容PH调节剂的配制、培养基母液的配制、培养基的配制、各种相关物品的准备培养基的配制步骤1、取个干净烧杯,加入1/3-2/3左右的蒸馏水,用移液管取所需的母液加入烧杯。
2、称取定量的蔗糖加入烧杯中并不断搅拌,直到完全溶解,定容。
3、用NaOH或者稀HCL调剂酸碱值。
4、称取定量琼脂糖加入烧杯中,加热煮沸搅拌,待琼脂完全溶解,分装。
5、高压灭菌棉花无菌苗培养基的制备1、取25 ml MS大量元素母液,称取葡萄糖15g、于1升的烧杯中,定容后调pH值为,加入/l 琼脂煮沸。
2、然后将其分装到100毫升的三角瓶中,每瓶40毫升。
3、用封口膜封口后在灭菌锅中灭菌15分钟。
4、灭菌后臵于水平的工作台上冷却即可。
要求:配制 1L拟南芥无菌苗培养基的制备1、拟南芥无菌苗培养基:1/2 MS大量元素+蔗糖10g/L,PH值;加入琼脂高温高压灭菌。
2、%琼脂糖:琼脂糖/100ml 蒸馏水;无菌苗培养基和%琼脂糖均121°高压灭菌15分钟。
3、另准备20套9cm培养皿,灭菌。
要求:配制,装1瓶灭菌,灭菌后培养基倒皿。
五、注意事项1、为了尽量减少人为的误差,必须严格按实验步骤进行操作,严格按照要求的量来配制工作液、母液及培养基。
2、应当把培养基中的各种成分都写在纸上,加进去一个以后即划掉一个。
3、所有装着培养基的试管、玻璃罐、玻璃瓶和培养皿等都应当清楚地做上标记。
4、每小组的操作的具体事项请参照黑板上贴的任务分组。
5、爱护实验仪器及耗材,小心使用玻璃器皿,合理灭菌,因为灭菌耗时较长。
实验二无菌苗的制备一、原理化学灭菌:%升汞(Hgcl2)溶液浸泡10分钟可以对棉花种子等外植体进行灭菌,84消毒液浸泡3分钟可以对拟南芥等小种子外植体进行消毒。
物理消毒:紫外灯消毒、酒精灯火焰或高温烧灼5min左右可有效杀死镊子、剪刀等不锈钢操作器具的菌类达到消毒的目的。
二、实验材料、器具和试剂棉花品种YZ1;拟南芥col-0野生型灭菌锅,天平,电炉,三角瓶,封口膜,镊子,酒精灯,剪刀,移液管,超净工作台。
%升汞溶液,84消毒液,75%酒精三、实验内容拟南芥无菌苗培养基倒皿1. 取上次灭菌好的拟南芥培养基,稍微拧松瓶盖,微波炉煮沸,边煮边摇动,至全部融化。
2. 将上次灭菌好的9cm培养皿分开放臵超净工作台上。
3. 将融化好的培养基分装于培养皿中,将皿至于超净台上吹干.。
共培养培养基的配制成分数量成分数量MS大量元素 (20倍) 50 ml 2,4-D (/ ml)1 mlNH4NO3 (20倍) 50 ml 甘氨酸(1000倍)1 ml微量元素 (100倍)10 ml KT(/ml)1 ml铁盐 (100倍) 10 ml 葡萄糖 30g/L微生素(1000倍) 1 mlPH值肌醇 (100倍) 1 ml依次加入上述物质,调PH值,然后分装至2个500ml 蓝盖瓶,每瓶加入4g琼脂,灭菌,灭菌后倒皿。
选择培养基的配制共培养培养基 +卡那霉素50mg/L + 头孢霉素400 mg/L 灭菌后,待培养基凉至60度左右加入,混匀,倒皿。
棉花无菌苗的制备1、将棉籽用手术剪刀去壳。
2、用%的升汞灭菌13分钟。