植物生理学实验报告利用电导法监测不良环境对植物的伤害

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实验报告

课程名称:植物生理学及实验实验类型:探索、综合或验证

实验项目名称:利用电导法监测不良环境对植物的伤害

一、实验目的和要求

掌握生物膜受损程度的测定方法,了解生物膜受损原理。

二、实验内容和原理

原理:不良环境条件(高温、低温、干旱等)可导致植物细胞膜受到伤害,使膜的透性增大,细胞内的盐类和小分子有机物外渗。外渗量可反映植物细胞膜受到伤害的程度。

因外渗物中含有大量离子,就可用电导法检测植物细胞膜受到伤害。

三、主要仪器设备

实验材料:云南黄素馨枝条

主要仪器:烧杯、剪刀、量筒、镊子、注射器、电导仪等。

四、操作方法与实验步骤

1.准备实验用具:确保所有用具(烧杯、剪刀、量筒、镊子等)洁净干燥。

2.准备实验材料,做好相应处理:

3.对照——新鲜植物样;

4.处理——根据需要进行,本次-4℃冰冻24 h。

5.方法:

称云南黄素馨枝条(1.00g),清洗后,剪成约0.5cm小段,放入50mL注

射器。

加去离子水30mL,反复抽压至材料完全下沉;

倒去水分,去离子水冲洗3次;再加30mL去离子水在30 ℃恒温置30min

后,测电导率。

记号笔液面刻度做记号,煮沸2min,冷却到室温,并补加去离子水到原

体积,测电导率。

注:小括号内为所测时显示温度

相对电导率(%)=煮前电导率/煮后电导率×100

对照相对电导率(%)=33.6/151×100=22.25(%)

处理相对电导率(%)=83.5/249.3×100=33.49(%)

伤害程度= 处理相对电导率/对照相对电导率

= 33.49/22.25=1.505

六、实验结果与分析

处理经过-4℃冰冻处理后膜的透性增大,细胞内的盐类和小分子有机物外渗,使得电导率大于对照。而经过煮沸后(高温),同样有物质外渗,对照和处理的电导率都大大增加。处理的相对电导率大于对照。

伤害程度1.505可以大致反映植物材料的相对受害程度。

七、讨论、心得

1.从测定结果分析冻害对生物膜的影响

①冻害会使生物膜的透性变大(从富有柔性的液态晶转化为固性的凝胶

态),膜相发生改变。同时,膜收缩,膜体出现破损,破坏了膜的选择透性,引起细胞内物质外渗、离子泄露。

②膜脂固化之后,膜上酶系统受到破坏,酶活性下降,致使原来在膜上

结合的酶系统和膜外游离的酶系统之间的平衡被打破,破坏原有的协调作用,同时积累了有毒的中间产物。

③线粒体膜受到破坏,影响呼吸链电子传递,出现氧化磷酸化偶联作用。

不过虽然低温直接损伤膜结构已为大量的研究结果所证实,但膜脂与蛋白质究竟谁先受害仍在讨论之中1。

2.为什么测定时要用去离子水,用具必须清洁干燥?

因为去离子水不会在过程中引入其他杂质电解质,同理用具干燥不会引入自来水中的其他离子,可以测得较准确的电导率。

心得:

1.煮沸后的溶液应冷却后再测电导率。

1彭昌操,张光华.生物膜与植物抗性关系的研究进展[J].湖北民族学院学报(自然科学版),1998(06):5-10.

2.用电导仪进行测量时,换溶液应用去离子水将电极清洗干净并擦干。