抗肿瘤药物研究及新药筛选

抗肿瘤药物研究及新药筛选提纲一、化疗药物的发展二、肿瘤的药物治疗三、抗肿瘤药物筛选及评价四、体外抗肿瘤活性试验五、体内抗肿瘤活性试验一、化疗药物的发展•近代肿瘤化疗学始于20世纪40年代。

• 50年代通过动物筛选化疗药物发现了5FU、MTX、CTX等，化疗学有了发展。

• 60年代认识到肿瘤细胞动力学及化疗药药代动力学的重要性。

大部分目前所用的抗癌药已发现，有急淋、HD、睾丸癌等可化疗治愈。

• 70年代形成肿瘤内科学，更多肿瘤有了比较成熟的化疗方案。

• 80年代研究以生物反应修饰剂等药物来提高化疗疗效，探索抗药性产生的原因，5%肿瘤患者可治愈。

• 90年代新抗癌药进入临床，多药耐药基因发现，生物治疗，基因治疗辅助治疗改善等，疗效进一步提高。

二、肿瘤的药物治疗1、细胞毒类抗肿瘤药a、拓扑异构酶抑制剂原理：真核细胞DNA拓扑异构酶Ⅰ（Topo Ⅰ)是生物体内及其重要的细胞核内酶，参与DNA复制、转录和修复等所有关键的核内过程。

DNA拓扑异构酶Ⅰ已成为重要的抗肿瘤药物研究新靶点。

拓扑异构酶Ⅰ抑制剂已成为高选择性抗肿瘤药物研究的一个主攻方向。

代表药物：喜树碱类化合物对S期的毒性作用，这一作用需共价TopoI－DNA复合物的形成和DNA复制。

TopoI抑制剂诱导的细胞凋亡而非DNA断裂是引起细胞最终死亡的原因。

b、胸苷酸合成酶抑制剂原理：胸苷酸合成酶（TS）把单磷酸脱氧尿嘧啶（DUMP）转换成单磷酸胸腺嘧啶（TMP），在DNA复制和细胞生长过程中起着关键作用。

是已知抗肿瘤药物的重要有效靶点之一。

胸苷酸合成酶抑制剂导致了DNA断裂从而导致细胞死亡。

代表药物：培美曲塞它是一种结构上含有核心为吡咯嘧啶基团的抗叶酸制剂，通过破坏细胞内叶酸依赖性的正常代谢过程，抑制细胞复制，从而抑制肿瘤的生长。

体外研究显示，培美曲塞能够抑制胸苷酸合成酶、二氢叶酸还原酶和甘氨酰核苷酸甲酰转移酶活性，这些酶都是合成叶酸所必需的酶。

一旦培美曲塞进入细胞内，它就在叶酰多谷氨合成酶的作用下转化为多谷氨酸的形式。

中药抗肿瘤的新药研究选题思路之探讨郎万吉【摘要】本文根据当今中医药治疗肿瘤的"带瘤生存",古人之"邪正相安"的治疗目的,探讨中药治疗肿瘤新药研究的选题定位,基本方的选择和来源作讨论.选题定位,以延长患者生存时间,提高生存质量为主;基本方的选择应以补益脾胃气血为主;选题来源应从古方和当今名中医方中进行选择.【期刊名称】《云南中医中药杂志》【年(卷),期】2006(027)002【总页数】2页(P36-37)【关键词】中药;肿瘤;新药研究;选题【作者】郎万吉【作者单位】云南省肿瘤医院,云南,昆明,650118【正文语种】中文【中图分类】R245-3中医药治疗肿瘤有着悠久的历史，历代医家以“积聚”、“癥瘕”、“乳癌”、“肠覃”、“石瘕”等名之。

中医治疗肿瘤以“虚”立论，治疗方法强调“扶正祛邪”，增强人体精、津、气、血的周流而“邪正相安”[1]，延长病人的生存时间和提高病人的生活质量。

1999年中华中医药学会肿瘤分会贵州会议制定的《中医药治疗常见恶性肿瘤临床诊断与疗效标准(第一部分·讨论稿)》的内容包括“带瘤生存”[2]。

根据在当今中医药治疗肿瘤疗效标准的要求，结合古人治疗肿瘤的思路方法。

笔者对中药治疗肿瘤的新药研究如何选题谈点看法，意在抛砖引玉，与同道一同探讨。

1 中医对肿瘤成因的认识和治疗许多中医古医籍中对肿瘤发病定义为“积聚”、“癥瘕”，记载早至《难经》，其发病机理都以“虚”论之。

隋·巢元方的《诸病源候论》卷三、卷十九对“积聚”的发病机理和临床症状都有论述[3]。

清初的陈歧在他的《医学专灯·积聚癥瘕痃僻痞块》条下详细记录着“血之所积；因名曰积，积久而发也。

气之所聚，因名曰聚，聚散不常之意也。

癥者，坚也，坚则难破。

瘕者，假也，假血成形。

……名色虽多，而痞块二字可以该之”。

“……积者，盖因饮食不消，着于气怒，痰行其处，必裹一层，血流过其处，必裹一层，痰血共裹，则不得不成块矣”。

抗肿瘤药物药效学实验方法及指导原则一、基本原则1. 抗肿瘤药物分类(1) 细胞毒类药物(cytotoxic agent)：包括干扰核酸和蛋白质合成、抑制拓扑异构酶及作用于微管系统的药物等；(2) 生物反应调节剂(biological response modifier)；(3) 肿瘤耐药逆转剂(resistance reversal agent)；(4) 肿瘤治疗增敏剂(oncotherapy sensitizer)；(5) 肿瘤血管生成抑制剂(tumor angiogenesis inhibitor)；（6）分化诱导剂(differentiation inducing agent)；(7) 生长因子抑制剂(growth factor inhibitor)；（8）反义寡核苷酸(antisense oligonucleotide) 。

2. 抗肿瘤药物药效学需研究内容2.1 包括体外抗肿瘤试验，体内抗肿瘤试验。

2.2 评价药物的抗癌活性时，以体内试验结果为主，同时参考体外试验结果以做出正确的结论。

2.3 I类抗肿瘤新药应进行药物作用机制初步研究。

二、体外抗肿瘤活性试验1. 试验目的1.1 对候选化合物进行初步筛选；1.2 了解候选化合物的抗瘤谱；1.3 为随后进行的体内抗肿瘤试验提供参考，如剂量范围、肿瘤类别等。

2. 试验方法选用10-15株人癌细胞株，根据试验目的选择相应细胞系及适量的细胞接种浓度，按常规细胞培养法进行培养；推荐使用四氮唑盐MTT还原法、XTT 还原法、磺酰罗丹明B(SR染色法、或51Cr释放试验、集落形成法等测定药物的抗癌作用。

药物与细胞共培养时间一般为48-72 小时，贴壁细胞需先贴壁24 小时后再给药。

试验应设阳性及阴性对照组，阳性对照用一定浓度的标准抗肿瘤药，阴性对照为溶媒对照。

3. 评价标准以同一样品不同浓度对肿瘤细胞抑制率作图可得到剂量效应曲线，然后采用Logit法计算半数有效浓度(IC50值或EC50值)。

新型抗肿瘤药物研究与开发肿瘤是人类健康难以绕开的疾病，多年来，针对肿瘤的治疗方法呈现出多元化的局面，传统的手术、化疗、放疗等治疗方案被更多新型的抗肿瘤药物逐渐取代，其研究和开发也成为当今科研领域中不可或缺的组成部分。

本文将就新型抗肿瘤药物的研究和开发，以及其技术突破和应用前景进行探讨。

一、新型抗肿瘤药物的研究与开发概述细胞增殖和凋亡失衡是肿瘤发生的主要机制，新型抗肿瘤药物能够抑制、诱导或增强某些分子或信号通路的作用，从而实现对癌细胞的克制。

其中，基因治疗、免疫治疗、靶向治疗等方向成为近年的研究热点。

1. 基因治疗基因治疗是利用基因工程技术改变患者的基因，治疗某些疾病的一种新型治疗方法，对抗肿瘤也提供了新思路。

基因治疗的方法之一就是将修补后的基因整合到载体中，然后输送到人体内部，以改变患者的细胞基因组。

这种方法的优点在于，基因修复的目的高度特异性，能够从根本上解决肿瘤治疗方案中病因的问题。

目前，基因治疗在肿瘤治疗领域已经获得了突破性的进展。

2. 免疫治疗免疫治疗是借助免疫系统抑制或激活人体内的免疫反应过程，来达到清除癌细胞的目的。

免疫治疗具有免疫选择性、毒副作用较小等优点，在肿瘤治疗方案中得到越来越多的重视和应用。

特别是近年来通过基因工程技术开发出来的特异性为T细胞受体（TCR）的CAR-T细胞治疗，在血液疾病如白血病等方面已经取得了显著的疗效，也在其他肿瘤治疗领域展现出巨大的应用潜力。

3. 靶向治疗靶向治疗的最大特点是可以直接针对癌细胞特定的分子靶点，与传统治疗相比，具有更精准、更少的毒副作用的优势。

靶向治疗主要包括小分子靶向药物和单克隆抗体。

小分子靶向药物可以通过与癌细胞中特定的靶点相结合和作用来控制癌细胞的生长，例如靶向酪氨酸激酶的EGFR抑制剂，靶向BRAF的抑制剂等。

单克隆抗体通过与癌细胞表面的特定抗原相结合，发挥细胞毒作用或者抑制作用，例如靶向HER2的Herceptin等，具有极强的专一性，因此是靶向治疗领域中的一种重要方法。

抗肿瘤药物筛选及临床实验责任编辑:luanchaojibing,作者：佚名文章来源：本站原创点击数：更新时间：2005-10-24 14:54:02(—)抗肿瘤药物的筛选1．体内筛选方法体内筛选方法是药物应用于有移植性肿瘤的动物进行实验的方法。

肿瘤模型是进行药物筛选的先决条件。

一个理想的用于药物筛选的肿瘤模型应具备的条件是：①对临床疗效有预告性；②快速、经济；③指标明确、客观；④重现性好，结果可信赖。

常用于鼠类，近年来在体内试验方面，裸鼠被广泛应用于抗肿瘤药物的筛选，目前已成功地将官颈癌、卵巢癌、乳腺癌、结肠癌、肺癌等10余种人体肿瘤移植于裸鼠，国内已成功地建立了卵巢癌裸鼠皮下移植瘤和腹水瘤模型，并已用于科研和临床。

在体内试验方面需注意：①给药途径。

因腹腔给药假阳性较多见，因此要筛选一种药物是否对一种移植肿瘤确实有效，需应用两种以上不同的给药途径，并且三次实验结果均显示标准抗癌活性时才能判定有效。

②在每一种给药途径中，还需观察不同剂量的抗肿瘤活性，以揭示有效抗肿瘤药物的量效关系。

2．体外筛选方法因体内筛选需要的技术条件高，故大批筛选或粗选时多采用体外筛选。

(1)人肿瘤集落形成法：该方法是将单细胞悬液，接种到含软琼脂的培养基中，培养一定时间后一部分肿瘤细胞能够在琼脂中生长，形成集落。

通过药物处理组和对照组的细胞集落生成数量比较，可作为肿瘤化疗的药物敏感试验。

每次可用多个平面筛选8一10种药物，以找出对肿瘤细胞最敏感的药物。

此法快速、经济、选择性高，而且结果可靠，故在临床用药选择和抗肿瘤药物开发上将得到广泛应用。

该方法缺点是活肿瘤组织单细胞悬液的制备比较困难，并且集落形成的成功率不够高，故在方法学上需待完善。

ALberts等以此法指导69例复发转移卵巢癌的治疗，结果临床有效率为54％；经验治疗组的有效率为20％；而以。

HCTA中抗药的药物治疗的有效率为8％。

(2)三磷酸腺苷生物发光法(ATP法)：其基本原理是ATP为细胞内能量的基本来源，其浓度与活细胞量有关。

抗肿瘤细胞凋亡诱导药物的研发现状与未来趋势分析近年来，随着全球癌症发病率和死亡率的不断攀升，抗肿瘤药物的研发成为了医学界关注的焦点。

在众多抗肿瘤策略中，诱导肿瘤细胞凋亡作为一种高效且具有选择性的治疗手段，受到了广泛的重视。

细胞凋亡，又称程序性死亡，是细胞在基因调控下主动结束生命的过程，对于维持生物体的稳态至关重要。

当细胞凋亡机制失控时，可能导致包括癌症在内的多种疾病。

因此，通过药物干预来恢复或增强肿瘤细胞的凋亡过程，成为了抗肿瘤治疗的重要研究方向。

本文将从理论研究的角度，对抗肿瘤细胞凋亡诱导药物的研发现状与未来趋势进行深入分析。

一、抗肿瘤细胞凋亡诱导药物的作用机制1.1 细胞凋亡的基本途径细胞凋亡主要通过两条途径实现：内源性途径（线粒体途径）和外源性途径（死亡受体途径）。

内源性途径主要由线粒体介导，当细胞受到内部损伤信号刺激时，线粒体释放细胞色素c等促凋亡因子，激活caspase家族蛋白酶，进而引发细胞凋亡。

外源性途径则由细胞表面的死亡受体（如Fas、TNF受体等）介导，当这些受体与相应的配体结合后，可以激活caspase8等启动型caspase，进而触发细胞凋亡。

这两条途径最终都汇聚于效应型caspase（如caspase3、6、7），导致细胞结构的解体和凋亡小体的形成。

1.2 抗肿瘤细胞凋亡诱导药物的作用靶点基于上述细胞凋亡途径，抗肿瘤细胞凋亡诱导药物主要针对以下几个靶点发挥作用：一是作用于线粒体，通过改变线粒体膜电位、促进细胞色素c释放等方式激活内源性凋亡途径；二是靶向死亡受体及其配体，通过模拟或增强死亡信号来激活外源性凋亡途径；三是直接激活caspase家族蛋白酶，尤其是启动型和效应型caspase，以加速凋亡进程。

还有一些药物通过调控凋亡相关基因（如Bcl2家族、IAPs等）的表达水平，间接影响细胞凋亡的发生。

二、抗肿瘤细胞凋亡诱导药物的研发现状2.1 现有药物概述目前，已有多款抗肿瘤细胞凋亡诱导药物获批上市或处于临床研究阶段。

抗肿瘤药物临床试验技术指导原则一、概述恶性肿瘤是严重威胁人类生命的一类疾病，尽管现有治疗手段取得了一定疗效，但多数肿瘤患者生存时间有限，缺乏有效的可以治愈的药物，亟需开发新的药物来满足需要。

在抗肿瘤药物的风险效益评估中，医护人员和患者可能愿意承受相对较大的安全性风险，所以抗肿瘤药物的临床研究除遵循一般药物临床研究原则外，还应考虑其特殊性。

由于肿瘤生物学研究的进展，一些新的作用机制、作用靶点的抗肿瘤药物不断涌现，呈现出不同于以往传统细胞毒类药物的安全性和有效性特点；肿瘤疾病的药物治疗也从以往的单纯追求肿瘤缩小向延长患者的生存期、提高生存质量转变，这些改变使抗肿瘤药物临床疗效评价终点指标也出现较大改变。

因此，传统的抗肿瘤药物开发模式已经变得不适宜，需要更多地探索能加快和促进开发进程的临床研究策略。

本指导原则将对抗肿瘤药物临床研究一般考虑进行阐述，重点阐述在不同临床研究阶段中需要重点考虑的问题，旨在为抗肿瘤药物临床研究的设计、实施和评价提供方法学指导。

申请人在进行临床研究时，还应当参照国家食品药品监督管理局（以下简称SFDA）既往发布的相关指导原则和《药物临床试验质量管理规范》（GCP）要求进行，对于一般药物临床研究需要遵从的原则以及与其他指导原则重复内容在本文中不再赘述。

本指导原则主要适用于抗肿瘤新化合物的临床研究，抗肿瘤生物制品也可参考部分内容，不适用于中药制剂。

药物类别上主要针对细胞毒类抗肿瘤药物临床研究，由于非细胞毒类药物（如信号传导抑制剂，生物反应调节剂，激素类等）是目前新药开发的主要方向，本指导原则也将尽可能对此类别药物临床研究的不同之处进行阐述。

本指导原则中的观点仅代表SFDA当前对抗肿瘤药物临床研究的一般性认识，不能涵盖在新药研发中遇到的所有情况，申请人在研究中应始终坚持具体问题具体分析的原则。

尤其应注意的是，抗肿瘤药物研究理论和技术的快速发展，很可能对将来抗肿瘤药物开发模式产生影响，因此申请人可以积极探索更为科学合理的研究方法，并及时寻求SFDA 药品注册部门的建议。