PACE_MDQ毛细管电泳系统操作手册
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毛细管电泳操作手册
毛细管电泳操作手册一.毛细管紫外检测器简介分高压电源（左侧）与毛细管检测主机（右侧）（紫外检测器）。
1.高压电源设置高压电源分离电压范围在0-30 kV，最高设置不能超过25 kV，参考文献中如若提及分离电压在30 kV，务必不要将本高压电源也设置在30 kV。
2.毛细管检测主机主机分毛细管系统、进样系统、和紫外检测系统。
a.毛细管系统主要包括：缓冲池、冲洗器、毛细管、高压电极。
缓冲池是两个高约3.5 cm 的玻璃瓶，用于乘装运行缓冲液。
冲洗器包括弹簧压力器和2.5 mL的医用注射器，注射器中乘装与缓冲池中一样的运行缓冲液，依靠弹簧压力将运行缓冲液推入毛细管中。
毛细管主要用的是未涂层的50 µm口径石英毛细管，有效长度在50 cm左右。
高压电极的作用是将高压电源产生的高压传输到两个缓冲池中形成电回路。
b.进样系统为一可伸缩的高度进样杆，一般进样升到最高点，所产生的高度差提供0.5 psi的进样压力。
c.紫外检测系统提供各个波长的紫外光，可根据所做物质的紫外吸收最大波长进行手动调节。
二.毛细管电泳的日常维护以及注意事项1.毛细管每次使用之前必须检查正负铂丝电极是否断裂——用手指轻轻挑动电极；2.毛细管电泳使用完毕后一定要将干燥硅胶置入主机内，如若变红，须烘箱干燥后再放入；3.毛细管主机内部不能用水清洗，只能在关机状态下用酒精浸泡的脱脂棉擦拭，或用小毛刷扫除主机内部的灰尘；4.非正常情况下不要将紫外检测器的暗池打开，以免损坏紫外光接收器；5.高压电源与主机非正常情况下不要轻易移动位置；6.实验中手法保持轻盈，毛细管较易折断，主机窗门轻开轻关；7.实验结束后一定要将高压电源和主机的插头都拔掉，也不要将试验样品留在主机内部的样品架上，要保持主机内部无任何附加的化学试剂；8.下雨天或者潮湿天气不要开机，高压电源对湿度比较敏感，湿度较大的情况下开机可能会使高压电源击穿，造成仪器损坏；9.寒暑假实验室无人的情况下要将毛细管主机及高压电源用干净的实验服盖住，门窗关好，保持实验室无人的状态下也干燥；10.若仪器长时间不用，须定时在不插电关机状态下将毛细管冲洗一次，以免毛细管堵塞。
毛细管电泳标准操作规程
毛细管电泳仪毛细管电泳标准操作规程开机前准备：如进一个样品，取样品瓶七个，分别用记号笔标号，1.2.4.6.7.8.号，分别用移液枪加入1号：氢氧化钠溶液(PH=9.3纯化、消除杂离子)，加盖2号：水，加盖4号：缓冲溶液，加盖5号：缓冲溶液，加盖6号：缓冲溶液，加盖7号：样品溶液，加盖（加样前过滤净化）8号：空，不加盖（废液瓶）9号：空瓶，加盖（气冲洗）（注意：各个样品瓶加样完成后超声15分钟以上，加盖，瓶盖盖严平整,3号空位，49号空位，11-48号共可装载38个样品）打开仪器电源打开软件，进入instrument,选择inti进行初始化方法编辑进入method，选择eidt entire method ，选择前两项后确认，填写实验名称并确认，设置毛细管两端与瓶底距离为4mm，设置柱温盒温度，选择inlet（进口）为4号，outlet（出口）为5号，确认。
Inlet 换成7号（样品），选择加压时间（即进样时间），再将7号换成5or6号。
进入Preconditioning，选择eidrt,设置1行，inlet为2号，outlet为8号，模式flush，2号，时间1min；2行flrsh，，inlet 换为1号，时间5min，3行wait，时间5min，4行flush，5号，时间20min（同次测定2，3行可省略）。
进样模式，设置进样压力50mbar，时间4sec，确认。
Swith设置为on，正负调节为postive，电压值30kv，确认。
设置检测波长，带宽，确认，收集为off。
确认。
保存方法。
样品注册，选择小瓶图标，选择sample information ,选择样品瓶号，输入样品信息，确认，关机进入instrument,，选择maintenance进行维护。
选择inlet，设置为2号（即水瓶），再点击蓝色气瓶图标，flash（10-20min）。
选择inlet，设置为号9号，（即气冲洗瓶）再点击蓝色气瓶图标，flash（5-20min）。
高效毛细管电泳使用说明
高效毛细管电泳使用说明
1.毛细管的冲洗方法
首先用双手拇指将压力冲洗装置的顶推盘压下，旋转一个角度，使其固定住。
然后将毛细管盖连同毛细管从高压端取出放到装有冲洗液的顶端处，并一同放到下盒盖中，盖上上盒盖后，再用双手拇指将顶推盘旋转回原来角度，使其顶住注射器推杆，即可进行毛细管冲洗。
2.施加高压方法
初次升压时，必须先将电压调节扭6逆时针旋到底后，再按高压启动扭3,并缓慢逆时针旋转高压扭6至所须电压值。
如果发生异常立即按高压关断扭5,排除故障后，再重新升压。
3.电迁移进样的方法
把电压调到所需电压。
掀开上盖，把样品瓶放在样品瓶托盘上,将毛细管的一端从放在样品瓶托盘上的缓冲液瓶里抽出，插进样品瓶里，盖上上盖。
然后立即按高压启动扭，待达到预定时间后，掀开上盖，将毛细管从样品瓶抽出，插入缓冲液瓶里。
立即盖上上盖,把电压上升到工作电压，开始数据采集。
维护与保养
1 .长时间不使用的试剂不得存放于仪器托盘中，特别是盐酸，有可能造
成仪器部件的腐蚀，和仪器内的湿度增加。
2 .未涂层的毛细管长时间不用，要先用水清洗，再用空气吹干。
3 .长时间不使用仪器，在停机之前必须使样品及缓冲溶液托盘处于
Load状态。
4 .仪器要注意防尘和防潮。
毛细管电泳仪安全操作及保养规程
毛细管电泳仪安全操作及保养规程毛细管电泳仪经常用于生物学、化学和医学研究中。
正确的使用和保养对于确保实验准确且安全至关重要。
本文档将详细介绍毛细管电泳仪的操作规程以及保养细节，以便用户能够安全高效地进行实验。
毛细管电泳仪安全操作规程1. 实验前的准备工作1.1 确认所需试剂是否齐全。
在进行实验前，必须确认实验所需试剂均已准备就绪，以免在实验中遇到问题而耽误时间和资源。
1.2 检查毛细管电泳仪是否处于正常状态。
检查毛细管电泳仪的部件是否完好无损、是否固定牢靠，是否与电池或电源连通正常。
1.3 穿戴实验防护装备。
在进行实验前，应穿戴实验室防护服、手套和护目镜等必要的防护装备。
2. 操作流程2.1 设置毛细管电泳仪参数。
根据实验要求，设置电泳仪的电压、温度、电流等参数，确保实验能够顺利进行。
2.2 在毛细管内加入训练缓冲液。
将毛细管放入其所在仪器中，并在毛细管内加入训练缓冲液。
2.3 垂直插入样品。
将样品垂直插入毛细管中，注意不要弯曲样品，否则可能会影响实验结果。
2.4 开启电源并启动操作。
将电泳仪接通电源，启动其操作程序，开始进行毛细管电泳实验。
2.5 监测实验结果。
在实验过程中，应时刻关注电泳结果并注意测量浓度值，以便及时停止实验或调整参数进行实验。
2.6 停止电泳并关闭仪器。
在实验完成后，关闭电泳仪器，并取出毛细管，清除残留缓冲液和样品。
3. 操作注意事项3.1 注意保持洁净状态。
进行实验时，应保证样品、毛细管和仪器都处于干净状态，防止杂质干扰试验结果。
3.2 注意电泳过程中的安全。
在进行实验过程中，注意电泳过程中的高压、高温等安全问题，防止意外事故的发生。
3.3 注意实验数据的准确性。
在进行实验过程中，应注意实时记录实验数据，保证实验参数准确可靠。
毛细管电泳仪保养规程毛细管电泳仪的保养可以提高其寿命和稳定性，并确保实验数据的准确性。
下面是毛细管电泳仪的保养细节。
1. 日常保养1.1 定期清洁仪器。
毛细管电泳仪标准操作规程
BECKMAN P/ACE MDQ毛细管电泳仪标准操作规程一、开机1. 接通电源，打开毛细管电泳仪开关，打开计算机，点击桌面32 Karat操作软件图标，点击DAD检测器图标，进入毛细管电泳仪控制界面。
2. 将分别装有0.1mol/L盐酸水溶液、lmol/L 氢氧化钠水溶液、运行缓冲液A、重蒸水依次放入左边缓冲液托盘（Inlet）并记录对应的位置。
3. 将装有运行缓冲液A及空的缓冲液瓶放入右边缓冲液托盘（Outlet），记录对应的位置。
4. 将装有待检测样品的缓冲液瓶放入左侧样品托盘，记录对应的位置。
5. 检查卡盘和样品托盘是否正确安装。
关好托盘盖，注意直接控制图象屏幕上是否显示卡盘和托盘该已安装好。
此时应能听到制冷剂开始循环的声音。
二、石英毛细管的处理1. 在直接控制屏幕上点击压力区域，出现对话框。
2. 设置Pressure、Duration、Direction、Pressure Type、Tray Positions等参数。
点击OK，瓶子移到指定的位置，开始冲洗。
三、编辑方法1. 先进入32 Karat主窗口，用鼠标右键单击所建立的仪器，选择Open Offline，几秒钟后会打开仪器离机窗口。
2. 从文件菜单选择File Method New，在方法菜单选择Method Instrument Setup进入方法的仪器控制和数据采集模块。
选择其中一个为“Initial Condition”（初始条件）的选项卡，进入初始条件对话框。
在这个对话框中输入用于仪器开始方法运行时的参数。
四、编辑sequence1. 从仪器窗口选择File / Sequence / New，打开序列向导，按要求选择2. 点击Finish，出现新建的序列表。
3.另存Sequence.五、系统运行1. 在系统运行前，检查仪器的状态：检测器配置是否正确；灯是否点着；样品和缓冲液放置是否放置正确。
2. 从菜单选择 Control / Single Run 或点击图标打开单个运行对话框。
毛细管电泳操作规程
BECKMAN P/ACE MDQ毛细管电泳操作规程1、开机1.1 接通电源，打开毛细管电泳仪开关，打开计算机，点击桌面32 Karat操作软件图标，点击DAD检测器图标，进入毛细管电泳仪控制界面。
1.2 将分别装有0.1mol／L 盐酸水溶液、lmol／L 氢氧化钠水溶液、运行缓冲液A、重蒸水依次放入左边缓冲液托盘（Inlet）并记录对应的位置。
1.3 将装有运行缓冲液A及空的缓冲液瓶放入右边缓冲液托盘（Outlet），记录对应的位置。
1.4 将装有待检测样品的缓冲液瓶放入左侧样品托盘，记录对应的位置。
1.5 检查卡盘和样品托盘是否正确安装。
关好托盘盖，注意直接控制图象屏幕上是否显示卡盘和托盘该已安装好。
此时应能听到制冷剂开始循环的声音。
2、石英毛细管的处理2.1 在直接控制屏幕上点击压力区域，出现对话框。
2.2 设置Pressure、Duration、Direction、Pressure Type、Tray Positions等参数。
点击OK，瓶子移到指定的位置，开始冲洗。
按照以下表格的步骤依次进行冲洗。
冲洗完成后，毛细管已处理好，毛细管中充满运行缓冲液。
溶液 Inlet Outlet Pressure Time重蒸水 E1 B1 25 0.50.1 mol/L 盐酸 C1 B1 20 2重蒸水 E1 B1 20 0.5lmol／L 氢氧化钠水溶液 D1 B1 20 2重蒸水 E1 B1 20 0.5运行缓冲液A A1 B1 20 23、方法编辑3.1 先进入32 Karat 主窗口，用鼠标右键单击所建立的仪器，选择Open Offline，几秒钟后会打开仪器离机窗口。
3.2从文件菜单选择File Method New，在方法菜单选择Method Instrument Setup 进入方法的仪器控制和数据采集模块。
选择其中一个为“Initial Condition”（初始条件）的选项卡，进入初始条件对话框。
毛细管电泳仪的使用(原创)电泳仪的使用方法
毛细管电泳仪的使用(原创)电泳仪的使用方法毛细管电泳仪的使用 (原创)引言毛细管电泳是一种常见的分离和检测生物分子的方法。
毛细管电泳仪是用于进行毛细管电泳实验的仪器，它可以实现对生物样品的快速、高效分离和检测。
本文将介绍毛细管电泳仪的使用方法，包括仪器的准备和操作步骤。
仪器准备在开始使用毛细管电泳仪之前，需要对仪器进行一些准备工作。
1. 仪器清洁：确保仪器和使用的毛细管是干净的。
使用一定量的去离子水和实验室级酒精清洗仪器表面和通道。
使用纯净棉布擦拭毛细管，确保其表面干净。
2. 试剂准备：根据实验要求，准备所需的毛细管电泳缓冲液和样品。
确保试剂的质量好，并按照实验方法准确配制。
3. 电解质填充：根据实验设计和毛细管的使用要求，选择合适的电解质填充毛细管。
将电解质溶液注入毛细管两端，确保毛细管内充满电解质溶液。
操作步骤接下来，将详细介绍毛细管电泳仪的使用步骤。
1. 样品制备：根据实验要求，准备样品溶液。
将样品溶解在适当的溶剂中，并进行必要的稀释。
确保样品溶液的浓度适中，以免影响电泳结果。
2. 毛细管安装：，将毛细管插入仪器的毛细管插槽中。
确保毛细管插入的位置正确并且稳定。
然后，将毛细管的两端连接到电泳仪上的电极。
3. 仪器设置：根据实验要求，设置仪器的运行参数，如电压、电流和电泳时间等。
确保设置的参数符合实验要求，并检查仪器的参数显示是否正常。
4. 准备电泳缓冲液：根据实验要求，将正确配制的电泳缓冲液注入仪器的缓冲液槽中。
确保电泳缓冲液的pH值、离子浓度等参数符合实验要求。
5. 样品加载：使用微量注射器或自动进样器，将样品溶液缓慢注入毛细管的一端。
确保样品进入毛细管的位置正确，并注意避免空气泡的进入。
6. 开始电泳：确认样品已经加载完毕后，关闭注射器或自动进样器，将电泳仪的电源打开。
根据设置的参数，开始进行电泳实验。
7. 实验结束：当电泳时间到达设定的时间后，关闭电路，停止电泳实验。
注意关注电泳过程中的实时显示结果，并及时记录实验数据。
毛细管电泳操作手册(英文)
新建一台真实连接的仪器 新建一个能被用于离线数据处理的虚拟仪器 注意 这章假设所有的硬件和接口板都已安装，如果没有安装，请先参考安装和维护手 册进行安装。 新建一台仪器 从一台单个的计算机用 32 Karat 软件最多能控制 4 台 P/ACE MDQ 能创建无 数的虚拟仪器用于离线编辑方法或数据分析。使用下列练习设置一台新机器。选
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配置选项 图 16 P/ACE MDQ 配置选项对话框（分析选项）
分析选项定义重新处理数据时采用的软件功能。 PDA 允许分析 PDA 检测器的多通道数据。 System Suitability 可自动查看结果。未选择的结果可实时更新。 Qualitative Analysis 允许以迁移时间，相对迁移时间或迁移率。 Caesar Integration 用于检测峰的开始和结束。当基线突然跃迁或信噪比较低时非 常有用。如果未选择，峰的开始和结束基于斜率阀值。
在 MECC 中，当把离子型表面活性剂加入缓冲液中，并且其浓度足够大时 这种表面活性剂的单体就结合在一起，形成一个球体我们称其为胶束。目前，以 十二烷基硫酸钠（SDS）使用最为普遍。
在 MECC 的系统中存在两个相：流动的水相和起到固定相作用的胶束相， 被分离物在这两个相之间分配，由于它们在胶束中具有保留能力而产生不同的保 留时间。和区带电泳一样，缓冲液在管别壁处形成正电，使其显示强烈的向负极 移动的电渗流，而 SDS 胶束由于其外壳带负电性具有向正极迁移的倾向。一般 情况下，电渗流的速度大于胶束的迁移速度。因此，迫使胶束最终以较低的速度 向负极移动。我们把这个移动的胶束固定相也称之“准固定相”。
图 6 UV 测器光纤的连接方式示意图
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图 7 PDA 检测器光纤的连接方式示意图
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配置选项 图 16 P/ACE MDQ 配置选项对话框（分析选项）
分析选项定义重新处理数据时采用的软件功能。 PDA 允许分析 PDA 检测器的多通道数据。 System Suitability 可自动查看结果。未选择的结果可实时更新。 Qualitative Analysis 允许以迁移时间，相对迁移时间或迁移率。 Caesar Integration 用于检测峰的开始和结束。当基线突然跃迁或信噪比较低时非 常有用。如果未选择，峰的开始和结束基于斜率阀值。
在 MECC 中，当把离子型表面活性剂加入缓冲液中，并且其浓度足够大时 这种表面活性剂的单体就结合在一起，形成一个球体我们称其为胶束。目前，以 十二烷基硫酸钠（SDS）使用最为普遍。
在 MECC 的系统中存在两个相：流动的水相和起到固定相作用的胶束相， 被分离物在这两个相之间分配，由于它们在胶束中具有保留能力而产生不同的保 留时间。和区带电泳一样，缓冲液在管别壁处形成正电，使其显示强烈的向负极 移动的电渗流，而 SDS 胶束由于其外壳带负电性具有向正极迁移的倾向。一般 情况下，电渗流的速度大于胶束的迁移速度。因此，迫使胶束最终以较低的速度 向负极移动。我们把这个移动的胶束固定相也称之“准固定相”。
图 6 UV 测器光纤的连接方式示意图
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图 7 PDA 检测器光纤的连接方式示意图
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毛细管电泳仪使用说明书
毛细管电泳仪使用说明书尊敬的用户：感谢您选择购买我们的毛细管电泳仪。
为了帮助您更好地使用该仪器，我们特别提供了以下使用说明书，请您仔细阅读，并按照说明进行操作。
一、仪器介绍毛细管电泳仪是一种用于分离和分析化合物的高效液相色谱仪器。
它主要由电泳槽、高压电源、检测器和数据处理系统等部分组成。
1. 电泳槽：电泳槽由两个并列的金属板构成，中间通过绝缘材料隔开。
电泳槽用于保持电场稳定以及支撑毛细管。
2. 高压电源：高压电源为仪器提供电场，使溶液中的化合物在毛细管中移动。
3. 检测器：毛细管电泳仪配备了多种检测器，包括紫外-可见吸收检测器、荧光检测器和电导检测器等，您可以根据实际需要选择使用。
4. 数据处理系统：数据处理系统可以实时监测和记录电泳结果，并提供数据分析和报告功能，便于您的后续研究。
二、使用步骤1. 准备工作在操作前，请确保仪器已正确接通电源，并检查各部分连接是否紧固。
同时，根据实验需要，选择合适的电泳缓冲液，并通过滤器过滤以去除杂质。
最后，准备好待测样品，并稀释至适当的浓度。
2. 将毛细管装入电泳槽首先，将尾端截平的毛细管插入电泳槽的两个极板之间，确保毛细管的两端均能延伸到电泳槽外。
然后，通过调整槽中绝缘材料的位置，使毛细管保持在水平状态。
3. 调整高压电源参数根据实验需要，设置合适的电压和电流值，确保电泳能够正常进行。
注意，过高的电压可能会导致电泳带宽过宽或毛细管损坏，因此请务必谨慎调整参数。
4. 注射样品使用注射器将待测样品缓慢注入毛细管，避免产生气泡。
注射结束后，迅速切断样品进入毛细管的通路，以免影响分离效果。
5. 启动电泳在确认样品已经注入毛细管后，启动电泳，并开始记录数据。
您可以根据实际需要选择自动采集数据或手动记录数据。
6. 数据处理电泳结束后，您可以通过仪器提供的数据处理系统对结果进行处理和分析。
不同的检测器可能需要不同的数据处理方式，请根据实际检测器选择相应的处理方法。
三、注意事项1. 请在使用仪器前仔细阅读使用说明书，并根据说明书进行正确操作。
毛细管电泳仪的操作指南和分离条件设置技巧
毛细管电泳仪的操作指南和分离条件设置技巧毛细管电泳是一种常用于分离和检测生物大分子的技术。
毛细管电泳仪是进行毛细管电泳实验的重要仪器，准确的操作和合理的分离条件设置对于实验的成功和结果的准确性至关重要。
本文将为您介绍毛细管电泳仪的操作指南和分离条件设置的技巧。
I. 毛细管电泳仪操作指南毛细管电泳仪操作指南包括样品准备、仪器预热和校准、样品注入和分离过程等步骤。
1. 样品准备样品的准备是毛细管电泳的第一步，对于不同的样品可以选择不同的处理方法。
常见的样品处理包括蛋白质的脱盐和浓缩、核酸的纯化等。
在样品处理过程中，要注意保证样品的纯度和浓度，以免对后续的分离和检测造成影响。
2. 仪器预热和校准在进行毛细管电泳实验前，需要预热和校准仪器。
预热的目的是使仪器温度达到设定的实验温度，通常在室内使用的毛细管电泳仪温度范围为15-30摄氏度。
校准的目的是确保仪器的稳定性和准确性，包括流速的校准、电场的校准等。
3. 样品注入样品注入是将处理好的样品导入毛细管的过程。
样品注入可以采用手动或自动注射的方式。
在样品注入过程中，要注意使样品均匀注入毛细管内，并避免产生气泡。
4. 分离分离过程是毛细管电泳的关键步骤。
在分离过程中，通过控制电压和电流来实现样品分离。
通常，高电压和电流可以加快分离速度，但也容易产生热量，影响分离结果。
因此，在分离过程中，要根据样品性质和分离要求来选择合适的电压和电流条件。
II. 分离条件设置技巧合理的分离条件的设置对于毛细管电泳实验的成功和结果的准确性至关重要。
以下是一些分离条件设置的技巧。
1. 电压和电流设置电压和电流的设置是影响分离速度和分离效果的重要因素。
一般情况下，较高的电压和电流可以加快分离速度，但也容易产生热量，影响分离结果。
因此，在设置电压和电流时，要根据样品的性质和分离要求来选择合适的数值。
2. 缓冲液选择缓冲液是毛细管电泳中重要的组成部分，可以影响分离效果和样品的稳定性。
在选择缓冲液时，要考虑到样品的性质和分离要求，不同的样品可能需要不同的缓冲液pH值和离子浓度。
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C 迁移。阴极的缓冲液换成盐类后，再加上电压，使末端引起梯度降低，让 已聚焦组分一个一个通过检测器。 Capillary Electrochromatography（CEC）毛细管电色谱
在毛细管中装填了液相色谱的各种填料；相当于固定相，应用电泳中的 EOF 电渗流作为动力，电解质相当于流动相。各种小分子、极性或中性化合物在两相 之间迁移而形成分离。毛细管电色谱尤其适应于小分子（药物）的分离。
质按照这一梯度迁移到它们的等电点的那个位置，并在该点停下，由此产生一条 非常窄的聚焦区带，并使不同的蛋白质聚焦在不同的位置上。 毛细管等电聚焦的运行过程，可分为三个步骤：
A 进样。把样品与两性电解质混合并进样。 B 聚焦。加高电压 3－4 分钟，使整个毛细管长度范围内建立一个 pH 梯度， 以便让样品在毛细管中向各自的等电点聚焦点移动，形成一条由不同组分排列的 带子。
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器。选择和你的硬件配置相对应的检测器类型。 1、在右边的空白处单击鼠标右键，从弹出菜单选择 New / Instrument。
2、一台新仪器将建成，它的图标位于右边的空白处。在加亮的名称域可输入仪 器的名称（在这个例子我们将它命名为 Instrument 1），这个名字将在整个 32 Karat 软件中使用，在仪器窗口、数据报告和仪器记录中。 图 13 32 Karat 软件打开窗口
在胶束电动毛细管色谱中，中性粒子之间的分离是根据其本身的疏水性的不 同而达到的，不同疏水性的粒子和胶束的相互作用不同，疏水性强的作用力就大， 保留时间就长；反之，保留时间就短。
Capillary Gel Electrophoresis（CGE）毛细管凝胶电泳 凝胶电泳是用凝胶物质作为支撑物进行分离的区带电泳。凝胶是一种固态分
4、和计算机相联的每一台 P／ACE MDQ 必须有唯一的设备 ID、设定的缺省植 是 l。如果安装有多台的 MDQ，为每一台 MDQ 选择唯一的 ID（l，2， 3 或 4）
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在选择好 ID 后点击 SET BUS ADDRESS 将该信息传送给仪器。 5、缓冲液托盘和样品托盘的类型在开始时被检测。托盘盖子被打开并且关上后 每次都会检测托盘的类型。仪器能自动检测 3 种类型的托盘：36 位缓冲液托盘， 大容量缓冲液托盘和 48 位置样品托盘。 96 孔样品极不能被自动检测，必须从 该窗口手动设置。托盘类型可以手工地在任何时间被改变。 6、当选择 96 孔样品板时，允许定义样品板的复选框可用，如果这个复选框被选 择，用户可以定义样品板的高度和深度，因此可以使用其他的非标准样品板。如 果这个复选框没被选择，仅能使用标准的 Beckman Coulter96 孔样品板。 7、如果安装了 LIF 检测器，LIF 校准向导可用。这个功能在安装和维护手册中 有详细的描述。 8、滤光片对话框用来定义 UV 检测器安装的特定滤光片。数据必须手工输入并 且和仪器实际安装的滤光片一一对应。如果安装了 PDA 检测器，位置 8 不能安 装滤光片，显示值为“0”。 9、压力单位可定义为 psi（磅每平方英寸）或 mbar（毫巴）。选择的单位将仅仅 在这台仪器被使用。 10、温度控制显示样品冷却装置的安装。如果安装，可从下拉框选择“可用”。 11、单击 OK 回到仪器配置窗口。 图 15 Beckman P/ACE MDQ 仪器配置窗口
并连接到电脑上。 1、单击窗口底部的 Auto Configuration 按钮，可听到 MDQ 的托盘移动的声音， 这表明软件正和仪器通讯。在这一过程中会出现以下窗口。
2、检测器将在已设置的模块窗口中出现。
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3、在新图标上单击鼠标右键并选择 Open。核对仪器被正确的检测和设置。 图 14 P/ACE MDQ UV 检测器配置窗口
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图 2 样品盘示意图
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图 3 图示毛细管卡盒
备注： 1、 内可容纳毛细管的制冷剂管道 2、 毛细管 3、 UV 和 PDA 检测窗口 4、 LIF 检测窗口
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图 4 指示灯的位置
备注： 1、高压指示灯 2、UV 灯亮指示灯 3、仪器电源指示灯
图 5 图示样品盘和卡盒盖板
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第三章 启动 32 Karat 软件
从 Windows 工具条上开始菜单按钮选择 Programs / 32 Karat / 32 Karat Software 启动 32 Karat 软件. 图 11 32 Karat 软件在开始菜单的位置
32 Karat 软件启动后打开列出已设置的仪器的主窗口. 图 12 32 Karat 软件的主窗口
注意 在该手册中的许多练习需要设置一台虚拟的 UV 检测器仪器。按照以下过
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程建立一台虚拟的 UV 检测器仪器，不考虑实际的仪器配置。 1、在主菜单新建一台设备，并命名为“UV for manual”。
2、在这一练习中设置 UV 检测器。选择左边的 UV 检测器图标，
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第一章 毛细管电泳仪的导论
概述 本资料说明毛细管电泳仪的一般原理和以 P/ACETM MDQ 为主机，带有紫
外、二级管阵列和激光诱导荧光检测器的基本操作指导。
一般说明 P/ACETM MDQ 是根据各种电泳的分离机理；在熔融石英玻璃毛细管中进
行实际化合物分离的仪器。 在 P/ACETM MDQ 中，在压力、真空或电压的作用下样品进入毛细管后，
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工具条
工具条在顶部出现并且在一些情况下处于当前窗口的底部。在工具条上的活 跃按钮允许以鼠标单击的方式打开许多普通的命令。以上这些按钮可在打开的窗 口中看到。 菜单条
菜单条包含 32 Karat 软件可得到的所有命令，它能通过鼠标单击或按住 Alt 键和带下划线的字母打开。 新建并且设置一台仪器 在这练习中你将：
P/ACE MDQ 毛细管电泳系统操作指南 (32 Karat 软件 5.0 版本)
BECKMAN COULTER 公司生命科学研究部市场部 2002 年 9 月 15 日
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目录
第一章 毛细管电泳系统导论 第二章 P/ACE MDQ 毛细管电泳系统组成的概述 第三章 启动 32 Karat 软件 第四章 直接控制 第五章 方法编辑 第六章 系统运行 第七章 积分 第八章 校准 第九章 定性分析 第十章 使用迁移率 第十一章 建立报告
在 MECC 中，当把离子型表面活性剂加入缓冲液中，并且其浓度足够大时 这种表面活性剂的单体就结合在一起，形成一个球体我们称其为胶束。目前，以 十二烷基硫酸钠（SDS）使用最为普遍。
在 MECC 的系统中存在两个相：流动的水相和起到固定相作用的胶束相， 被分离物在这两个相之间分配，由于它们在胶束中具有保留能力而产生不同的保 留时间。和区带电泳一样，缓冲液在管壁处形成正电，使其显示强烈的向负极移 动的电渗流，而 SDS 胶束由于其外壳带负电性具有向正极迁移的倾向。一般情 况下，电渗流的速度大于胶束的迁移速度。因此，迫使胶束最终以较低的速度向 负极移动。我们把这个移动的胶束固定相也称之“准固定相”。
散体系，它具有多孔性，具有类似于分子筛的作用。被分离物在通过装入毛细管 的凝胶时，按照各自分子的体积大小逐一分离，分子体积大的首先被分离出来， 其后是较小的分子。
Capillary Isoelectric Focusing ( cIEF)毛细管等点聚焦 两性电解质在分离介质中的迁移形成 pH 梯度，各种具有不同等电点的蛋白
2、在 Instrument type 下拉选框中选择 Beckman P/ACE MDQ；输入名称 Instrument1 标识仪器。
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3、单击 Configure 按钮，在 Beckman P/ACE MDQ 设置窗口可用的模块出现在窗 口的左面。
自动设置 32 Karat 软件可自动设置所有的 P/ACE MDQ 模块。注意要将仪器电源打开
P/ACETM MDQ 可以分离各种不同的样品，包括：肽类、蛋白、核酸、离 子、手性化合物和药物。毛细管电泳比其他分析仪器需要更为少量的样品（5-30 微升，进样的量仅仅 5-50 纳升）。它提供比其他分离技术更为理想的分析手段。
电泳基本模式 Capillary Zone Electrophoresis (CZE)毛细管区带电泳
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备注： 1、样品盘盖板 2、卡盒盖板
图 6 UV 检测器光纤的连接方式示意图
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图 7 PDA 检测器光纤的连接方式示意图
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图 8 带 LIF 检测器的 P/ACE MDQ 仪器示意图 图 9 LIF 检测器的光学系统图解
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图 10 488 nm 激光光源背面
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配置选项 图 16 P/ACE MDQ 配置选项对话框（分析选项）
分析选项定义重新处理数据时采用的软件功能。 PDA 允许分析 PDA 检测器的多通道数据。 System Suitability 可自动查看结果。未选择的结果可实时更新。 Qualitative Analysis 允许以迁移时间，相对迁移时间或迁移率。 Caesar Integration 用于检测峰的开始和结束。当基线突然跃迁或信噪比较低时非 常有用。如果未选择，峰的开始和结束基于斜率阀值。
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设置新仪器 设置仪器是软件准备控制硬件和采集数据的过程，包括：
1、识别 P/ACE MDQ 为唯一的仪器。 2、识别当前的硬件部件。每台物理的仪器至少由 2 个图标代表其中之一将被用 于控制和数据采集；在第一个正在用于采集数据时另一个被用于数据的离线处 理。下面将以 UV 检测器为例。 1、在 Instrument 1 图标上单击鼠标右键，从弹出菜单选择 Configure。
毛细管区带电泳也称为自由溶液毛细管电泳，是毛细管电泳中最简单的一种 形式。其分离机理是各被分离物质的净电荷与质量之间比值的差异，不同离子按 照各自表面电荷密度的差异以不同的速度在电解质中移动，而导致分离。毛细管 区带电冰要求缓冲液具有均一性，毛细管内各处具有恒定的电场强ar ElectroPhoresis Capillary Chromatography（MECC） 胶束电动毛细管色谱
C 迁移。阴极的缓冲液换成盐类后，再加上电压，使末端引起梯度降低，让 已聚焦组分一个一个通过检测器。 Capillary Electrochromatography（CEC）毛细管电色谱
在毛细管中装填了液相色谱的各种填料；相当于固定相，应用电泳中的 EOF 电渗流作为动力，电解质相当于流动相。各种小分子、极性或中性化合物在两相 之间迁移而形成分离。毛细管电色谱尤其适应于小分子（药物）的分离。
质按照这一梯度迁移到它们的等电点的那个位置，并在该点停下，由此产生一条 非常窄的聚焦区带，并使不同的蛋白质聚焦在不同的位置上。 毛细管等电聚焦的运行过程，可分为三个步骤：
A 进样。把样品与两性电解质混合并进样。 B 聚焦。加高电压 3－4 分钟，使整个毛细管长度范围内建立一个 pH 梯度， 以便让样品在毛细管中向各自的等电点聚焦点移动，形成一条由不同组分排列的 带子。
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器。选择和你的硬件配置相对应的检测器类型。 1、在右边的空白处单击鼠标右键，从弹出菜单选择 New / Instrument。
2、一台新仪器将建成，它的图标位于右边的空白处。在加亮的名称域可输入仪 器的名称（在这个例子我们将它命名为 Instrument 1），这个名字将在整个 32 Karat 软件中使用，在仪器窗口、数据报告和仪器记录中。 图 13 32 Karat 软件打开窗口
在胶束电动毛细管色谱中，中性粒子之间的分离是根据其本身的疏水性的不 同而达到的，不同疏水性的粒子和胶束的相互作用不同，疏水性强的作用力就大， 保留时间就长；反之，保留时间就短。
Capillary Gel Electrophoresis（CGE）毛细管凝胶电泳 凝胶电泳是用凝胶物质作为支撑物进行分离的区带电泳。凝胶是一种固态分
4、和计算机相联的每一台 P／ACE MDQ 必须有唯一的设备 ID、设定的缺省植 是 l。如果安装有多台的 MDQ，为每一台 MDQ 选择唯一的 ID（l，2， 3 或 4）
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在选择好 ID 后点击 SET BUS ADDRESS 将该信息传送给仪器。 5、缓冲液托盘和样品托盘的类型在开始时被检测。托盘盖子被打开并且关上后 每次都会检测托盘的类型。仪器能自动检测 3 种类型的托盘：36 位缓冲液托盘， 大容量缓冲液托盘和 48 位置样品托盘。 96 孔样品极不能被自动检测，必须从 该窗口手动设置。托盘类型可以手工地在任何时间被改变。 6、当选择 96 孔样品板时，允许定义样品板的复选框可用，如果这个复选框被选 择，用户可以定义样品板的高度和深度，因此可以使用其他的非标准样品板。如 果这个复选框没被选择，仅能使用标准的 Beckman Coulter96 孔样品板。 7、如果安装了 LIF 检测器，LIF 校准向导可用。这个功能在安装和维护手册中 有详细的描述。 8、滤光片对话框用来定义 UV 检测器安装的特定滤光片。数据必须手工输入并 且和仪器实际安装的滤光片一一对应。如果安装了 PDA 检测器，位置 8 不能安 装滤光片，显示值为“0”。 9、压力单位可定义为 psi（磅每平方英寸）或 mbar（毫巴）。选择的单位将仅仅 在这台仪器被使用。 10、温度控制显示样品冷却装置的安装。如果安装，可从下拉框选择“可用”。 11、单击 OK 回到仪器配置窗口。 图 15 Beckman P/ACE MDQ 仪器配置窗口
并连接到电脑上。 1、单击窗口底部的 Auto Configuration 按钮，可听到 MDQ 的托盘移动的声音， 这表明软件正和仪器通讯。在这一过程中会出现以下窗口。
2、检测器将在已设置的模块窗口中出现。
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3、在新图标上单击鼠标右键并选择 Open。核对仪器被正确的检测和设置。 图 14 P/ACE MDQ UV 检测器配置窗口
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图 2 样品盘示意图
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图 3 图示毛细管卡盒
备注： 1、 内可容纳毛细管的制冷剂管道 2、 毛细管 3、 UV 和 PDA 检测窗口 4、 LIF 检测窗口
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图 4 指示灯的位置
备注： 1、高压指示灯 2、UV 灯亮指示灯 3、仪器电源指示灯
图 5 图示样品盘和卡盒盖板
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第三章 启动 32 Karat 软件
从 Windows 工具条上开始菜单按钮选择 Programs / 32 Karat / 32 Karat Software 启动 32 Karat 软件. 图 11 32 Karat 软件在开始菜单的位置
32 Karat 软件启动后打开列出已设置的仪器的主窗口. 图 12 32 Karat 软件的主窗口
注意 在该手册中的许多练习需要设置一台虚拟的 UV 检测器仪器。按照以下过
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程建立一台虚拟的 UV 检测器仪器，不考虑实际的仪器配置。 1、在主菜单新建一台设备，并命名为“UV for manual”。
2、在这一练习中设置 UV 检测器。选择左边的 UV 检测器图标，
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第一章 毛细管电泳仪的导论
概述 本资料说明毛细管电泳仪的一般原理和以 P/ACETM MDQ 为主机，带有紫
外、二级管阵列和激光诱导荧光检测器的基本操作指导。
一般说明 P/ACETM MDQ 是根据各种电泳的分离机理；在熔融石英玻璃毛细管中进
行实际化合物分离的仪器。 在 P/ACETM MDQ 中，在压力、真空或电压的作用下样品进入毛细管后，
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工具条
工具条在顶部出现并且在一些情况下处于当前窗口的底部。在工具条上的活 跃按钮允许以鼠标单击的方式打开许多普通的命令。以上这些按钮可在打开的窗 口中看到。 菜单条
菜单条包含 32 Karat 软件可得到的所有命令，它能通过鼠标单击或按住 Alt 键和带下划线的字母打开。 新建并且设置一台仪器 在这练习中你将：
P/ACE MDQ 毛细管电泳系统操作指南 (32 Karat 软件 5.0 版本)
BECKMAN COULTER 公司生命科学研究部市场部 2002 年 9 月 15 日
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第一章 毛细管电泳系统导论 第二章 P/ACE MDQ 毛细管电泳系统组成的概述 第三章 启动 32 Karat 软件 第四章 直接控制 第五章 方法编辑 第六章 系统运行 第七章 积分 第八章 校准 第九章 定性分析 第十章 使用迁移率 第十一章 建立报告
在 MECC 中，当把离子型表面活性剂加入缓冲液中，并且其浓度足够大时 这种表面活性剂的单体就结合在一起，形成一个球体我们称其为胶束。目前，以 十二烷基硫酸钠（SDS）使用最为普遍。
在 MECC 的系统中存在两个相：流动的水相和起到固定相作用的胶束相， 被分离物在这两个相之间分配，由于它们在胶束中具有保留能力而产生不同的保 留时间。和区带电泳一样，缓冲液在管壁处形成正电，使其显示强烈的向负极移 动的电渗流，而 SDS 胶束由于其外壳带负电性具有向正极迁移的倾向。一般情 况下，电渗流的速度大于胶束的迁移速度。因此，迫使胶束最终以较低的速度向 负极移动。我们把这个移动的胶束固定相也称之“准固定相”。
散体系，它具有多孔性，具有类似于分子筛的作用。被分离物在通过装入毛细管 的凝胶时，按照各自分子的体积大小逐一分离，分子体积大的首先被分离出来， 其后是较小的分子。
Capillary Isoelectric Focusing ( cIEF)毛细管等点聚焦 两性电解质在分离介质中的迁移形成 pH 梯度，各种具有不同等电点的蛋白
2、在 Instrument type 下拉选框中选择 Beckman P/ACE MDQ；输入名称 Instrument1 标识仪器。
17 / 81
3、单击 Configure 按钮，在 Beckman P/ACE MDQ 设置窗口可用的模块出现在窗 口的左面。
自动设置 32 Karat 软件可自动设置所有的 P/ACE MDQ 模块。注意要将仪器电源打开
P/ACETM MDQ 可以分离各种不同的样品，包括：肽类、蛋白、核酸、离 子、手性化合物和药物。毛细管电泳比其他分析仪器需要更为少量的样品（5-30 微升，进样的量仅仅 5-50 纳升）。它提供比其他分离技术更为理想的分析手段。
电泳基本模式 Capillary Zone Electrophoresis (CZE)毛细管区带电泳
9 / 81
备注： 1、样品盘盖板 2、卡盒盖板
图 6 UV 检测器光纤的连接方式示意图
10 / 81
图 7 PDA 检测器光纤的连接方式示意图
11 / 81
图 8 带 LIF 检测器的 P/ACE MDQ 仪器示意图 图 9 LIF 检测器的光学系统图解
12 / 81
图 10 488 nm 激光光源背面
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配置选项 图 16 P/ACE MDQ 配置选项对话框（分析选项）
分析选项定义重新处理数据时采用的软件功能。 PDA 允许分析 PDA 检测器的多通道数据。 System Suitability 可自动查看结果。未选择的结果可实时更新。 Qualitative Analysis 允许以迁移时间，相对迁移时间或迁移率。 Caesar Integration 用于检测峰的开始和结束。当基线突然跃迁或信噪比较低时非 常有用。如果未选择，峰的开始和结束基于斜率阀值。
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设置新仪器 设置仪器是软件准备控制硬件和采集数据的过程，包括：
1、识别 P/ACE MDQ 为唯一的仪器。 2、识别当前的硬件部件。每台物理的仪器至少由 2 个图标代表其中之一将被用 于控制和数据采集；在第一个正在用于采集数据时另一个被用于数据的离线处 理。下面将以 UV 检测器为例。 1、在 Instrument 1 图标上单击鼠标右键，从弹出菜单选择 Configure。
毛细管区带电泳也称为自由溶液毛细管电泳，是毛细管电泳中最简单的一种 形式。其分离机理是各被分离物质的净电荷与质量之间比值的差异，不同离子按 照各自表面电荷密度的差异以不同的速度在电解质中移动，而导致分离。毛细管 区带电冰要求缓冲液具有均一性，毛细管内各处具有恒定的电场强ar ElectroPhoresis Capillary Chromatography（MECC） 胶束电动毛细管色谱