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结核杆菌真验室死物仄安规程之阳早格格创做1、真验室管造造度（1）真验室出心处必须揭上死物伤害标记，证明伤害果子，死物仄安级别，考查室控造人战相关控造人姓名战电话.（2）真验室应有明隐的天区区分，浑净区，办传染区战传染区.（3）无论加进真验室时间少短，必须挖写处事日志.要庄重按照真验室的十足支配规程.（4）举止结核菌支配时，需有二名处事人员共时加进真验室，尽管防止单独考验天戴网处事.（5）正在对于大批量的痰标本战菌株举止分散培植战药敏考查前，英语核心新主任战真验室主任计划，需要时加强防止步伐.（6）考查室人员应搞结核菌素考查，考查截止为阳性时，应交种卡介苗，并搞佳备案记录.（7）中去进建，瞅赏人员必须教习真验室的十足规定造度战有关支配规程，经考查室主任接受圆可加进真验室.2、标本支集人员仄安央供（1）标本支集人员的防备：痰标本有病人自止留与，支集吐拭子等特殊标本，支集人员应脱防备服，戴一次性心罩，帽子，戴医用脚术脚套.（2）支集标本传染器材的处理：支集标本的痰盒，试管等传染器材军需下压处理.3、标本运支仄安央供痰标本需留置正在特造的痰盒内（曲径4cm，下2cm的光心盖稀关的塑料盒），并搁置正在博用的痰标本运支箱内，运支历程中切勿倒置，宽防痰液中溢.由有博人支至痰检真验室，标本支达后痰标本运支箱考验天戴网即时用乙醇或者是碳酸等化教消毒剂或者下压的办法真足消毒.4、真验支配仄安央供（1）结核病细菌教真验室央供结核病细菌教真验室应为死物仄安Ⅲ级真验室，用于临床诊疗，教教，属中度伤害.应具备仄安设备，慢冲间真验室条件应谦脚处事任务的央供，有完备的考查办法，考查室的环境应浑净，卫死，宁静，无传染，考查室内的管线树坐应整齐，要有仄安管造步伐战报警，应积及慢救办法，房间数量很多于七间，包罗真验室准备室，培植体造备室，隐微镜查看室，图片查看室，交种室，培植室下压消毒室等.具备完备的品量包管体系中应有粗确的分级责任造度，以保证考验的处事品量，包管考验，复核，科研截止等各项报告的准确稳当性.（2）真验室仪器设备及功能的央供结核菌素查看时必须正在二级死物仄安柜内举止，无菌支配内禁搁纯物，并应造定大天，门窗，墙壁，办法等的定期浑净，灭菌规程，支配间不紫中线灯；真验室内应光芒明明.具备本能良佳的Ⅱ型死物仄安柜，恒温培植仪器，单目死物隐微镜，蒸汽凝固灭菌箱，下压蒸汽灭菌锅等仪器设备，并对于百般仪器博人管造，定期喊阎检定，对于分歧格，待建，待检的仪器，要有明隐德状态标记，并应即时举止相映的处理.所有使用人应经考核合格后圆可支配仪器.（3）对于考验人员的仄安央供进止结核菌处事的人员须经训练后圆能介进支配，并庄重依照支配准则战其余国家尺度举止各项考查，准确治疗考查截止.训练尺度由各等第的真验室根据国家尺度战确定自止造订，通过考核后，还须与有资格的处事人员一共处事3个月，才搞赢得支配资格.非博业技师人员，无博业技能职称者不得进止考验的技能处事.（4）加进真验室的规定造度a.非真验室处事人员一律克制加进考查区.b.真验室内克制饮食，吸烟，交待访客战喧哗.c.举止结核菌支配时，需有二名处事人员共时加进真验室.d.处事人员如有皮肤益伤，收热，感冒战妊娠六个月以上者，不克不迭加进读君真验室.e.处事完成，查看各真验室火，电，防火设备，挨启防匪报警拆置.f.进止与毒菌有关的处事后，7日内不可离启真验室天圆都会.如出现身体不适局里，应正在真验室天圆天举止医教瞅察.果处事本果必须离启时，用心服抗结核药物防止.（5）不料事变及处理a.真验历程中，支配台或者大天的传染，如菌液溢出，挨破结核分枝杆菌培植皿战药敏管等，应坐时喷洒消毒液，待消毒液真足浸泡30分钟后，举止浑理.浑理后的东西，下崖灭菌.b.真验历程中，如传染物溅降正在身体表面，或者有割伤，烧伤，烫伤，熏染动物咬伤等情况，应坐时举止慢迫处理：皮肤表面用消毒液荡涤，伤心以碘酒到底消毒，眼睛用无菌死理盐火浑洗.事变的情况应报告真验室主任战上级收袖.c.真验历程中，如爆收气溶胶传染，应坐时关关真验室，用消毒液喷雾战紫中线映照传染的天区，24小时后再举止终终消毒.d.举止毒菌支配后，有疑似症状出现时，应坐时背真验室主任报告，瞅察便医.（6）传染物处理及消毒a.考查用试管，吸管及其余器械，需拆载加盖不漏的容器内，经下压灭菌后，拿出真验室.b.培植物及污物，经下压灭菌后，拿出真验室.c.出真验室的换衣程序：先用消毒液浸泡脚套5分钟，依次与消心罩，眼镜，防备服，三角头巾，鞋，正在浸泡脚套后脱去脚套.d.洗脚后以75%酒粗棉球揩里部裸露部位，用3%硼酸火漱心，离启真验室.e.真验室内，已经消毒的污火克制曲交排进大众排火系统.以消毒的污物集结倒进博用污物坑(污物坑的深度2---3米)，禁绝混进住户死计垃圾.5、死物标本保存仄安央供结核分枝杆菌菌株必须由博人控造，依照卫死部（1985）《华夏医教微死物菌种支躲管造办法》确定真止.应正在4℃博用冰箱内保存，并央供单人单锁，有庄重的菌株收与战销毁造度.。
二级生物安全实验室涉及主要菌种及样本
二级生物安全实验室是研究和操作较高级别生物材料的实验室，拥有更严格的安全措施和操作规范。
在二级生物安全实验室中，主要涉及以下菌种和样本：
1. 流感病毒：包括甲型流感病毒和乙型流感病毒等。
这些病毒是引起流感的主要病原体。
2. 结核分枝杆菌：结核分枝杆菌是引起肺结核的病原体，具有较高的传染性和致病性。
3. 空肠弯曲菌：空肠弯曲菌是引起食物中毒和胃肠炎的主要病原微生物之一。
4. 传染性单核细胞增多症病毒：也称为巨细胞病毒，是一种引起多种感染性疾病的病原体。
5. 慢性乙型肝炎病毒：这是一种引起慢性乙型肝炎的病毒，具有较高的传染性和病原性。
6. 肺炎支原体：肺炎支原体是引起肺炎的主要病原菌之一，可引起呼吸道感染。
在二级生物安全实验室中，使用以上菌种和样本时要严格遵守操作规程，确保实验过程的安全性和有效性。
投稿邮箱：sjzxyx88@·医学检验·（下转第114页）0 引言由于分枝杆菌有较强的传染性，操作结核分枝杆菌的实验室人员结核病发病率比其他人群高3倍，因此在进行分枝杆菌分离培养时实验室安全问题已经成为结核病防治机构实验室必须关注的问题[1]。
就更好地保障实验室的生物安全问题，本人根据多年的工作经验，总结一些粗浅的看法。
分枝杆菌分离培养实验室的生物安全工作的开展，应严格遵循科学合理、安全第一、严格管理、远离病原、预防为主、简便易行的原则[2]，具体实施如下。
1 实验室要配备必须的安全设施（1）有独立的实验室，室内有上下水，分区与布局符合生物安全防护的基本要求；（2）实验室出口处应设专用洗手池，应设紧急洗眼设施；（3）实验室的墙壁、天花板和地面要平整，易清洁、不渗水、耐化学品和消毒剂的腐蚀，地面应防 滑；（4）实验室门应带锁可自动关闭，并有可视窗；（5）实验室应设实验操作间和准备间，具有足够的空间进行实验和放置物品；（6）实验室所在建筑内应配备高压蒸气灭菌器，并按期检查和验证，以保证符合要求；（7）实验室内应配备Ⅱ级生物安全柜，紫外线灯，废物桶，感应水龙头；（8）实验室必需有可靠的电力供应和应急照明，重要设备如生物安全柜、培养箱、冰箱等宜用设备电源；（9）实验室出入口应有在黑暗中明确辨认的标识。
2 要做好个人防护实验室工作人员要配备专用防护服，进入实验室应使用专用防护服，操作时应戴一次性N95口罩、一次性帽子、鞋套和一次性乳胶手套。
3 操作环节中严格遵守相关操作规程实验前首先要用生物安全柜内及实验室内紫外线照射1h，工作人员进入实验室前必须穿好防护服，戴上口罩、帽子、手套、鞋套，并检查有无破损，女检验员头发装束在帽内；操作人员在操作时应严格遵守实验室安全操作规程和标准化操作程序（SOP）；操作过程中警惕分枝杆菌气溶胶的产生，禁止一切与实验无关的活动，保证聚精会神完成操作，实验过程中禁止吸烟、饮食及用嘴湿润铅笔或标签等，也不要以手抚摩头、面部等。
抗酸杆菌痰涂片检验的实验室生物安全抗酸杆菌痰涂片检验作为对传染性肺结核的诊断手段比X线诊断准确性高；作为实验方法，技术相对简单，容易标准化和完成操作；其投入设备少、成本低；从收到标本到报告结果的时间短，能够及时、准确地评价涂阳患者的治疗效果，被我国设为结核病控制项目的主要实验室检验方法。
但结核分枝杆菌（抗酸杆菌）为二类高致病性病原菌，其自身的生物学特性使其容易在实验室造成对工作人员及相关人员的感染和环境的污染，形成对公众的伤害，操作结核分枝杆菌的实验室人员结核病发病率比其他人群高三倍，因此抗酸杆菌痰涂片检验的实验室安全问题已经成为当前结核病防治机构实验室必须关注的问题目前，在市、县、乡级结核病防治机构没有建立BSL-2实验室的情况下，就更好地保障实验室的生物安全问题，本人根据多年的工作经验，谈一些粗浅的看法。
实验室的生物安全工作的开展应遵循科学合理、安全首位、软件在先、严格管理、远离病原、预防为主、使用方便、厉行节约的原则，具体实施如下：实验室首先要配备必须的安全设施：1）有独立的实验室，室内有上下水，通风良好；2）室内设通风柜、高压灭菌器、紫外线灯、废物桶、感应水龙头；3）标本的收集、涂片、染色、镜检、登记和涂片的储存应在各自独立的区域；4）设有独立生物咳痰室，内设紫外线灯（按1.5W每立方米计算），每个病人咳痰后必须打开紫外线灯灭菌，如果没有此设施，要叮嘱病人在远离人群的开放空间留取标本，防止肺结核病人咳漱产生的结核杆菌气溶胶造成对人的传播及对环境的污染。
其次要做好个人防护，实验室工作人员要配备一次性聚氯乙烯手套、一次性帽子、口罩、鞋套和防护服。
第三要使用以下消毒剂：5%的苯酚溶液、75%的酒精、甲醛、2%的戊二醛及2%的乙醛溶液。
在操作环节上，严格遵守以下方法和措施：实验前首先要用紫外线灯将操作台面及室内照射一小时，工作人员进入实验室前必须穿好防护服、戴上口罩、手套、鞋套，病检查有无破损；女检验员长发束在帽内；操作人员在操作时应严格遵守实验室安全操作规程和标准化操作程序（SOP)；在实验过程中，禁止一切与实验无关的活动，保证集中精力完成操作；在操作过程中，要警惕分枝杆菌气溶胶的产生，涂片操作要小心谨慎，动作轻缓，固定和染色操作时产生气溶胶的几率较大，Allen Bw实验结果表明，样品热固定不能杀灭所有涂片标本中的结核杆菌，若涂片长时间暴露在高温中，残留活菌减少，并仅见于涂片厚的部分，从而提高热固定时痰液对细菌的保护作用，新鲜痰液粘滞度越大，加热固定时对细菌的保护作用越强，为避免此风险，操作人员要做到双手伸入操作台操作，面部通过通风柜的玻璃与操作台面隔开（在操作过程只利用通风柜的屏障功能）；完成涂片后立即染色，若不能及时染色涂片，应浸泡在2%乙醛溶液中，不可以将涂片暴露在空气中，涂片在空气中暴露的时间越长，感染的机会越大，这是操作者尤其需要注意的问题；另外涂片不能涂抹太厚尤其是新鲜痰液；经过染色的结核分枝杆菌已不能存活。
微生物安全等级分类四级
微生物安全等级分类四级（Biosafety Level 4, BSL-4）是最高级别的生物安全实验室，用于处理最危险的病原体，包括那些对人类健康和环境造成重大威胁的病原体。
BSL-4实验室通常采用高度密闭的设计和高级别的防护措施，以防止病原体的泄露和传播。
实验室内的工作人员必须穿着特殊的防护服和手套，并在实验室内采取严格的卫生和安全措施，以确保实验室内的安全。
BSL-4实验室通常用于研究和处理以下病原体：
1. 高度传染性的病原体，如埃博拉病毒、马尔堡病毒、拉萨热病毒等。
2. 能够引起严重疾病的病原体，如结核分枝杆菌、鼠疫杆菌等。
3. 其他对人类和环境造成严重威胁的病原体，如霍乱弧菌、沙门氏菌等。
BSL-4实验室的建设和运行需要高度的技术和管理支持，以确保实验室内的安全和有效的生物安全措施。
结核分枝杆菌生物安全三级实验室表面去污染消毒剂杀菌效果的研究韩文东;孙志平;丁悦娜;瞿涤【摘要】在高致病性病原微生物实验活动过程中，选择有效的消毒剂对实验室环境去污染非常重要，这也是避免实验室获得性感染发生的有效途径。
本研究针对结核分枝杆菌 H37Rv ，应用滤膜过滤悬液定量杀菌实验进行消毒剂验证，其中75．0％乙醇、含有效氯1000 mg／L的次氯酸钠及Safespore消毒剂可高效杀灭结核分枝杆菌，37．5％乙醇作用延长至10 min也可有效杀灭结核分枝杆菌，这为选择针对结核分枝杆菌的生物安全三级实验室表面消毒剂提供了依据。
%The application of effective disinfectants during experimental activities of high‐pathogenic microorganism is crucial for decontamination of laboratory environment to prevent laboratory‐acquired infections .In this study , the quantitative germicidal disinfectant validation experiments using membrane filtration suspension were conducted against Mycobacterium tuberculosis (M . tuberculosis) H37Rv .Sodium hypochlorite solution (containing 1 000 mg/L active chlorine ) , 75% ethanol/water , and Safespore disinfectant killed M . tuberculosis efficiently .When the concentration of ethanol decreased to 37 .5% ,it was still able to kill M . tuberculosis by prolonging killing time to 10 min . The results suggest that 75%ethanol/water is suitable as conventional disinfectant and sodium hypochlorite solution (containing 1 000 mg/L active chlorine) is suitable under emergency and accident in biosafety level 3 laboratories (BSL‐3) .【期刊名称】《微生物与感染》【年(卷),期】2015(000)005【总页数】7页(P301-307)【关键词】结核分枝杆菌;生物安全三级实验室;表面去污染;消毒剂【作者】韩文东;孙志平;丁悦娜;瞿涤【作者单位】上海复旦大学三级生物安全防护实验室，复旦大学基础医学院教育部/卫生部医学分子病毒学重点实验室，上海200032;上海复旦大学三级生物安全防护实验室，复旦大学基础医学院教育部/卫生部医学分子病毒学重点实验室，上海200032;上海复旦大学三级生物安全防护实验室，复旦大学基础医学院教育部/卫生部医学分子病毒学重点实验室，上海200032;上海复旦大学三级生物安全防护实验室，复旦大学基础医学院教育部/卫生部医学分子病毒学重点实验室，上海200032【正文语种】中文结核分枝杆菌生物安全三级实验室表面去污染消毒剂杀菌效果的研究韩文东，孙志平，丁悦娜，瞿涤上海复旦大学三级生物安全防护实验室，复旦大学基础医学院教育部／卫生部医学分子病毒学重点实验室，上海200032摘要：在高致病性病原微生物实验活动过程中，选择有效的消毒剂对实验室环境去污染非常重要，这也是避免实验室获得性感染发生的有效途径。
一、实验室生物安全实验室环境安全：根据我国《病原微生物实验室生物安全管理条例》、《实验室生物安全通用要求》、《人间传染的病原微生物名录》和《医疗机构临床实验室管理办法》的规定，结核分枝杆菌大量活菌操作须在符合生物安全三级（Laboratory Biosafety Level 3）的环境中进行；样本检测（包括涂片、显微镜观察、样本的病原菌分离纯化、药物敏感性试验、生化鉴定、免疫学实验、PCR核酸提取等初步检测活动），可以在符合生物安全二级（Laboratory Biosafety Level 2）的环境中进行。
实验室所用设施、设备和材料（含防护屏障）均应符合相关的标准和要求。
实验室操作安全：由具有相关专业知识和操作技能的工作人员进行实验室操作，实验人员应该认真负责，格按照标准化、规化的操作程序进行各项实验室操作。
菌种或样本运输安全：为保障人体健康和公共卫生安全，在运输可感染人类的高致病性病原微生物菌（毒）种或样本时，须按照《可感染人类的高致病性病原微生物菌（毒）种或样本运输管理规定》的要求进行包装、运输、操作、保藏和管理。
废弃物处理安全：为防止疾病传播，保护环境，保障人体健康，医疗废弃物的处理应格按照《中华人民国传染病防治法》和《中华人民国固体废物污染环境防治法》，以及《医疗废物管理条例》的相关规定妥善处理。
（一）痰涂片镜检实验室基本要求1.实验室应分区（痰涂片染色区域和读片镜检区域），布局应符合生物安全二级防护的要求。
2.准入规定，在实验室门上应标有国际通用的生物危害警告标志，未经批准任人不得进入实验室工作区域，实验室的门应随时关闭。
3.个人防护，在实验室工作时，应穿防护服、隔离衣，并佩戴口罩（面具）和手套等。
4.实验室墙壁、天花板和地板应易清洁、不渗液，并耐化学品和消毒剂的腐蚀，地面应防滑。
5.实验操作台面应耐热、防水，耐消毒剂、酸、碱和有机溶剂的腐蚀。
6.实验室应保证操作时的照明，避免不必要的反光和闪光。
