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实验八大分子物质的水解及营养元素对微生物生长的影响杨明轩生物111 1102040128一、实验目的1、通过了解不同细菌对不同的生物大分子及含氮化合物的分解利用情况，认识微生物代谢类型多样性。
2、了解营养元素对微生物生长的影响。
3、学习平板接种法（点接）及穿刺接种法。
二、实验原理某些微生物能产生胞外酶，将大分子的淀粉、蛋自质和脂肪等分解为小分子物质，然后再被微生物吸收利用。
不同的微生物因具有不同的代谢酶系而表现出不同的代谢类型，即当它们作用于相同的底物时可以产生不同的终产物。
这些可以作为微生物鉴定和分类的依据。
本实验通过微生物对碳水化合物（如淀粉）、含氮化合物（蛋白质）和含磷有机物（卵磷脂）的水解，证明微生物对于这些大分子有机化合物的水解作用。
淀粉的水解是由于微生物分泌淀粉酶作用的结果，可用碘液来检测；微生物产生并分泌磷酸酯酶，可水解卵磷脂为脂肪和甘油；蛋白质中的含硫氨基酸被分解产生硫化氢，遇到培养基中的铁盐或铅盐，就形成黑色的硫化铁或硫化铅。
微生物的生长发育需要一定的营养物质和环境条件，只有全面满足以上要求时，微生物才能进行正常的生命活动。
影响微生物生长、繁殖的主要营养元素主要包括碳、氢、氧、氮、磷、硫等，个别微生物还需要某些维生素和微量元素。
本实验通过将黑曲霉接种于缺乏不同营养元素的培养基中，观察它的生长情况，确知几种营养元素对微生物生长的作用。
三、实验材料1、菌种：大肠杆菌（Escherichia coli）、金黄色葡萄球菌（Staphylococcus aureus）、枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）、普通变形杆菌（Proteus vulgaris）、黑曲霉（Aspergillusniger）；2、培养基：淀粉培养基、LB培养基；3、试剂：20%蔗糖溶液、1.5%硝酸铵溶液、0.5%KH2PO4、混合液（1.2%MgSO4、0.05%NaCl、0.005%FeSO4等量混合）、蒸馏水、生理盐水，以上试剂灭菌备用；5、仪器：无菌培养皿、100ml无菌三角瓶、无菌吸管（5ml、10ml）、移液器、接种用具。
实验八_大分子物质水解试验一、实验目的1. 了解大分子物质的水解2. 掌握大分子物质水解的实验原理和操作方法3. 比较不同大分子物质的水解速率二、实验原理大分子物质是由许多重复单元组成的生物高分子或合成高分子，如蛋白质、淀粉、纤维素、聚合物等。
由于其大分子结构，容易难以被生物体吸收直接利用，因此需要经过水解反应，使其分解为一个个低分子化合物，方便生物体吸收利用。
在本实验中，我们将研究3种大分子物质的水解反应，分别为淀粉、聚乳酸和聚酯。
淀粉的水解需要使用酶类，因为淀粉的分子结构中包含α-1,4-糖苷键和α-1,6-糖苷键，这些糖苷键需要在酶的作用下被分解。
聚乳酸和聚酯的水解则需要使用酸，因为它们的分子结构中包含酯键，酸可以在水的存在下水解酯键。
在水解过程中，大分子物质被分解为低分子量的化合物，如单糖、乳酸、酒精、苯甲酸等，这些化合物可以被生物体吸收利用。
三、实验步骤1. 淀粉水解试验步骤一：准备淀粉溶液将2克淀粉粉末加入100毫升蒸馏水中，搅拌至淀粉完全溶解，得到10mg/mL的淀粉溶液。
步骤二：加入淀粉酶将0.1毫升淀粉酶加入淀粉溶液中，搅拌均匀。
步骤三：加热反应将淀粉溶液加热至80℃，反应10分钟。
加入10毫升0.1mol/L NaOH，中和反应。
步骤五：检测还原糖取1毫升反应液，加入1毫升Benedict试液，加热10分钟，观察是否产生红色沉淀。
将2克聚乳酸粉末加入50毫升四氢呋喃中，搅拌至聚乳酸完全溶解。
四、实验结果加入Benedict试液后，反应液产生红色沉淀，说明淀粉水解后生成了还原糖。
聚乳酸水解试验：五、实验分析通过本实验，我们研究了3种大分子物质的水解反应。
淀粉是由多个葡萄糖单元组成的多糖，需要酶的作用才能进行水解，反应生成的还原糖可以被生物体吸收利用。
聚乳酸和聚酯含有酯键结构，在酸的作用下容易进行水解反应，生成的乳酸和苯甲酸也可以被生物体吸收利用。
本实验中，聚乳酸水解后未生成酒精的结果可能是因为聚乳酸的链长和结构不同，导致酯键的水解速率与其他酯键不同。
⼤分⼦物质⽔解实验实验⼋⼤分⼦物质（淀粉）⽔解实验郑州⼤学⽣物⼯程系微⽣物实验⼀、⽬的要求1、了解不同细菌对含碳及含氮化合物的分解和利⽤情况，认识微⽣物代谢类型的多样性2、掌握进⾏微⽣物⼤分⼦⽔解实验的原理和⽅法。
⼆、基本原理微⽣物代谢与其他⽣物代谢有着许多相似之处，也有不同之处。
微⽣物代谢重要特征之⼀，就是代谢类型的多样性，表现在对⽣物⼤分⼦糖类和蛋⽩质分解能⼒以及最终代谢产物的不同，反映出它们具有不同的酶系。
微⽣物在⾃然界的物质循环中起着重要的作⽤，同时也为⼈类开发利⽤微⽣物资源提供更多的机会与途径。
⼈们在微⽣物的分类鉴定⼯作中，常利⽤其⽣理⽣化反应作⽤作为重要依据。
有些细菌具有合成淀粉酶的能⼒，可以分泌胞外淀粉酶。
淀粉酶可以使淀粉⽔解为麦芽糖和葡萄糖，淀粉⽔解后遇碘不再变蓝⾊。
本实验安排微⽣物对⽣物⼤分⼦的分解利⽤（淀粉⽔解实验），让同学们对微⽣物的代谢类型多样性有⼀个初步和感性的了解，同时学习利⽤微⽣物形态、结构以及⽣化反应的特征对某些细菌进⾏初步的分类。
三、实验材料1、菌种⾦黄⾊葡萄球菌、⼤肠杆菌、苏云⾦芽孢杆菌。
2、培养基淀粉⽔解培养基：蛋⽩胨10 g，氯化钠5 g，⽜⾁膏5 g，可溶性淀粉2 g，⽔1000mL，琼脂15-20 g,121 ℃灭菌20 min3、接种⽤具平⽫，试管，移液管，接种环，酒精灯，打⽕机，废物杯，油性笔。
4、试剂卢哥⽒碘液四、实验步骤（1）配制固体淀粉培养基，灭菌冷却⾄50℃左右，⽆菌操作制备平板（2）翻转平板使底⽫背⾯向上，⽤油性笔在其背⾯玻璃上划线均分为三个部分。
（3）在平板底部三个区域分别标注三种供试菌株名称，并⽤接种环以划线⽅式在三个区域分别接上菌种。
（4）将接完种的平板倒置于37℃恒温培养箱，培养24h。
（5）观察结果时，可打开⽫盖，滴加少量的碘液于平板上，轻轻旋转，是碘液均匀铺满整个平板。
如菌苔周围出现⽆⾊透明圈，则说明淀粉已被⽔解，为阳性。
透明圈的⼤⼩，说明该菌⽔解淀粉能⼒的强弱，即产⽣胞外酶活⼒的⾼低。
