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自动生化分析仪参数设置技巧【摘要】随着检验医学的发展，自动化仪器在一些大中小医院都得到了进一步使用，尤其是自动生化分析仪基本普及到了乡镇卫生院一级，正确设置参数是使用好仪器得出可靠结果的重要环节。
【关键词】参数；设置；生化分析仪1 基本原理及主要参数了解生化分析仪基本参数的原理，有利于仪器、试剂的正确使用，有助于正确分析和处理测定数据。
生化分析仪根据自动化程度分半自动和全自动，从目前试剂盒供应情况来看，主要的测定方法为：终点法(包括一点终点法和两点终点法)、速率法(连续检测法)、速率两点法(两点法)，后两种统称动力学法。
2 主要参数设置的技巧2．1 方法类型可根据试剂盒要求或反应原理来设置。
对于半自动生化分析仪终点法只是一点终点法，全自动生化仪单试剂选择一点终点法，而双试剂选择两点终点法。
大多数酶学测定使用速率法，尿素氮、肌酐测定等用两点法。
2．2 测定波长测定波长选择有三个主要条件：(1)待测物质在该波长下的光吸收最大。
(2)其吸收峰宜较宽而钝，(3)常见干扰物在该波长下的光吸收最小。
试剂盒说明一般已提供波长参数。
有些仪器波长选择受滤光片数量限制，应该就近选择为原则。
2．3 测定温度一般全自动生化仪都是37℃ ，而半自动生化仪有室温、25~C、30cc、37~C等，终点法由于反应在机外进行，选择室温可以减少仪器温度调整时间，提高工作效率，而速率法和两点法都选择37℃比较合适。
2．4 样本体积分数样品体积分数即样品体积与反应液总体积的比值(sv／TV)。
酶活力测定中，样品在总体积中的比例应在10％以下。
一般来说，待测物质在样品中含量低的、生理波动范围大的，样品用量较大。
如Trinder反应测定血清葡萄糖、胆固醇等，样品试剂比例多为1：100，测定血尿酸或高密度脂蛋白胆固醇，常增加为1：50；AIJT和AST的样品试剂比例多为1：10至1：20。
方法灵敏、吸光度高的实验方法，样品试剂比例小，如白蛋白BCG法，样品试剂比例常为1：200。
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汇总：全自动生化分析仪的分析参数设置自动生化分析仪是一种把生化分析中的取样、加试剂、去干扰物、混合、恒温反应、自动监测、数据处理以及实验后清洗等步骤进行自动化操作的仪器，它完全模仿并代替了手工操作，目前已经成为医疗机构进行临床诊断所必可不少的仪器之一。
它的应用大大提高了生化检验的准确性、精密度和工作效率，适应了临床医学发展对检验医学的要求，然而这一切不仅需要生化分析仪的技术基础，也需要仪器内每个项目都有一组最优化的分析参数。
并且目前大多数生化分析仪为开放式，封闭式的仪器一般也会另外留一些检测项目的空白通道由用户自己设定分析参数，因此我们有必要了解生化分析仪各个分析参数的基本含义以及设置方法。
1.试验名称常以项目的英文缩写来设置，如总蛋白设置为TP，白蛋白设置为AL等。
2.方法类型生化分析仪常用的方法有终点法、连续监测法、比浊法等，根据被检物质的检测原理等选择其中一种分析方法。
2.1终点法又称为平衡法，是基于反应达到平衡时反应产物的吸收光谱特征及其对光吸收强度的大小对物质进行定量分析的一类方法，有一点终点法和两点终点法两类。
一点终点法的特点是使用一种或两种试剂，当待测物与试剂反应达到终点时，测定混合溶液的吸光度来计算待测物的浓度，该法常用的有总蛋白双缩脲法、白蛋白溴甲酚绿法、葡萄糖氧化酶法等，手工操作的大多数方法都是一点终点法。
两点终点法也称固定时间法，如果是单试剂分析，当测定波长同干扰物质的吸收光谱有重叠时，通过选用两点终点法可消除样品空白引起的干扰，其分析过程是在样品与试剂混合后经过一段延滞期读取一个点A1，一定时间后再读取A2，然后比较标准和测定的ΔA（ΔA=A2-A1）值，求得待测物的浓度。
肌酐苦味酸法就是一个典型的单试剂两点法的例子。
如果是双试剂分析，选用二点终点分析法除了可消除样品空白引起的干扰外，还可消除内源性干扰物质的干扰，其分析过程是加入试剂1后读取A1，加入试剂2后读取A2，A1相当于读出样品空白值，A2才是实际呈色反应，然后比较标准和测定的ΔA（ΔA=A2-A1）值，求得待测物的浓度。
自动生物化学分析仪实验参数设置全自动生化分析仪的参数就是仪器工作的指令，操作者通过设置正确的参数控制仪器完成一系列复杂而且有序的操作程序。
指挥仪器工作的参数很多，有些参数是在生产过程中设置好的，如机械操作、加试样时间、反应时间安排等，只需选择就可进行工作，我们简称为仪器指令。
操作者需进行的参数设置是指进行某个具体检测项目时的具体操作指令，我们简称为客户指令，主要包括样品量、试剂量、测定方法、校正方法、反应时间、测定波长、延迟时间、测定时间、控制因素等。
客户指令和仪器指令结合起来，共同完成整个测试。
各种品牌的仪器由各自的厂商设置了不同的仪器指令，我们在设置客户指令之前必须了解厂商设置的仪器指令，才能根据不同的试剂要求设置客户指令。
一、日立7170、7180、7600 P仪器指令0 5 10 15 0 1 2 3 4 5 6 7 9 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 47 48 49 50S T1 T2 T3 T4二、日立7060、7080仪器指令0 5 10 150 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45S T1 T2 T3 T4三、日立7150、7600 D仪器指令0 5 10 0 1 2 3 4 5 6 7 9 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 47 48 49 50S T1 T2四、奥林帕斯AU600 、AU400、AU640、AU2700、AU5400 仪器指令0 3 100 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27S T1 T2五、奥林帕斯AU800 、AU10000 3 100 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16S R1 R2六、东芝40 FR0 5 100 1 2 3 4 5 6 7 9 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 47 48 49 50 51 52 53 54 55 56 57 58 59 60 61 62S T1 T2七、东芝120 FR仪器指令0 5 100 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33S T1 T2八、贝克曼CX4\5\7\90 320 620 920primary inject rnt SAMPLEsecondary inject rgtreagent blankreaction八、贝克曼LX20-180 0 300 600primary inject rnt SAMPLEsecondary inject rg t Third Inject rgtreagent blankreaction九、客户指令1.样品和试剂量样品和试剂量的确定一般按照实际说明书上的要求比例，并结合仪器特征进行设置。
全自动生化分析仪操作规程
《全自动生化分析仪操作规程》
一、操作前准备
1.1 确认仪器和相关设备处于正常工作状态。
1.2 准备好所需的试剂和标准品。
1.3 充分了解要测试的样本类型和相关信息。
二、开机操作
2.1 按照仪器说明书正确开启仪器。
2.2 确认仪器在开机自检过程中无异常情况。
三、准备样本
3.1 根据实验要求，采用适当的方法准备样本。
3.2 将样本按照仪器规定的方式装入样本架。
四、设置参数
4.1 根据测试要求，在仪器界面上设置相应的测试项目和参数。
4.2 确认参数设置无误。
五、开始测试
5.1 点击“开始测试”按钮，使仪器开始自动测试样本。
5.2 保持仪器在测试过程中不受外界干扰。
六、检查结果
6.1 测试结束后，查看仪器上显示的测试结果。
6.2 确认结果无误后，将结果记录。
七、清洁和关机
7.1 根据仪器说明书，将仪器内部和外部进行清洁。
7.2 关闭仪器，并根据要求进行仪器的维护和保养工作。
八、安全注意事项
8.1 在操作过程中，遵守相关的安全规定，避免造成身体和仪器损坏。
8.2 对于化学试剂的操作，必须做好相应的防护措施。
以上规程是全自动生化分析仪的基本操作流程，操作人员必须按照规程准确操作，以确保测试结果的准确性和安全性。
-=-=-=-=-=>自动生化分析仪基本参数及其应用了解生化分析仪基本参数的原理，有利于仪器、试剂的正确使用，有助于正确分析和处理测定数据。
但是，配套系统的原装分析参数不宜更改；采用非仪器配套的试剂及校准品体系时，参数修改要慎重，对于不同仪器、不同类型的反应分析程序，所显示的人机对话分析参数信息有所不同。
一、反应监测时间对于终点法来说，读取反应达到平衡时的吸光度计算样品中待测物的浓度。
对于连续监测法来说，要注意观察反应进程曲线，从而确定反应的预孵育期，延迟时间、连续监测的时段。
对于一级或伪一级反应来说，连续监测的时间是一级反应的动态期的吸光度；对于基于零级反应的酶催化活性浓度速率法测定，连续监测的是零级线性反应期的吸光度。
对于连续监测法来说，动态反应期的时间越长，越适用于临床应用，对于以酶为工具的代谢物酶促动力测定法，要增加动态反应期，即延长反应达到平衡的时间，可在反应体系中加入竞争性抑制剂，这样还可以提高测定的线性范围，对于酶催化活性浓度连续监测法来说，一定要注意线性反应时间，有的酶，例如，以硫代丁酰胆碱为底物的血清假性胆碱酯酶速率测定法，线性反应时间只有90秒。
对于连续监测法来说，在监测期至少应读4个点(3个△A)。
多数全自动生化分析仪可以在整个测定反应周期连续监测(如HITACHI 7170常规测定周期10分钟、监测34点，OLYMPUS AU 600固定周期8分15秒、监测27点)，但反应监测时间是指该时间内的测定读数要用于结果计算。
它的设置与加样点、加试剂点( 包括R1、R2……)、监测时间(读数点)、读数间隔时间及试剂样品比例等有关，要结合方法学，兼顾权衡。
1．反应时间(Reaction Time) 指仪器的一个分析周期中，试剂和样品混合最末一点测定读数时间。
它对终点法尤其重要，是终点法的瓶颈。
有的仪器多个反应时间可选L如Hl—TACHI 7170)，须预先选定。
多数仪器10分钟左右，这对试剂提出了较高要求。
自动生化分析仪参数设置技巧
盂献荣’丁书亚甘来军。
(1．淮南东方医院集团西部检验中心；2．淮南东方医院集团谢二医院；3．淮南东方医院集团合福医院，安徽，淮南，232052)
【摘要】随着检验医学的发展，自动化仪器在一些大中小医院都得到了进一步使用，尤其是自动生化分析仪基本普及到了乡镇卫生院一级，正确设置参数是使用好仪器得出可靠结果的重要环节。
【关键词】参数；设置；生化分析仪
【中图分类号】R446．6 【文献标识码】A 【文章编号】1007—8517(2009)10—0136一Ol
1 基本原理及主要参数
了解生化分析仪基本参数的原理，有利于仪器、试剂的正确使用，有助于正确分析和处理测定数据。
生化分析仪根据自动化程度分半自动和全自动，从目前试剂盒供应情况来看，主要的测定方法为：终点法(包括一点终点法和两点终点法)、速率法(连续检测法)、速率两点法(两点法)，后两种统称动力学法。
2 主要参数设置的技巧
2．1 方法类型可根据试剂盒要求或反应原理来设置。
对于半自动生化分析仪终点法只是一点终点法，全自动生化仪单试剂选择一点终点法，而双试剂选择两点终点法。
大多数酶学测定使用速率法，尿素氮、肌酐测定等用两点法。
2．2 测定波长测定波长选择有三个主要条件：(1)待测物质在该波长下的光吸收最大。
(2)其吸收峰宜较宽而钝，(3)常见干扰物在该波长下的光吸收最小。
试剂盒说明一般已提供波长参数。
有些仪器波长选择受滤光片数量限制，应该就近选择为原则。
2．3 测定温度一般全自动生化仪都是37℃，而半自动生化仪有室温、25~C、30cc、37~C等，终点法由于反应在机外进行，选择室温可以减少仪器温度调整时间，提高工作效率，而速率法和两点法都选择37℃比较合适。
2．4 样本体积分数样品体积分数即样品体积与反应液总体积的比值(sv／TV)。
酶活力测定中，样品在总体积中的比例应在10％以下。
一般来说，待测物质在样品中含量低的、生理波动范围大的，样品用量较大。
如Trinder反应测定血清葡萄糖、胆固醇等，样品试剂比例多为1：100，测定血尿酸或高密度脂蛋白胆固醇，常增加为1：50；AIJT和AST的样品试剂比例多为1：10至1：20。
方法灵敏、吸光度高的实验方法，样品试剂比例小，如白蛋白BCG法，样品试剂比例常为1：200。
肌酐Jaffe氏法监测时间短、吸光度值较低，样品试剂比例多为l：10。
一般应以试剂说明为准，不宜轻易改动。
可根据最终反应液的量来计算样本量和试剂量。
2．5 吸液量主要是针对流动比色的全自动或半自动仪器的参数，原则是吸人量不得大于或等于反应液总体积，否则会导致吸空形成比色池气泡，最好留100～200ul的余地。
2．6 延迟时间延迟时间(Delay Time)指试剂与样品混合后到监测开始之间的时间。
延迟时间的选择取决于被测物质的浓度(酶的活性)大小、反应速度的快慢、酶促反应的级数、样品中干扰物消除所需的时间等。
比如：CHE活性高仅需20— 30秒，LDH一级反应需30～40秒，AIJT需40～6O秒，AST需60～75秒，CK需90～120秒。
半自动生化仪上酶活性连续监测法的延迟时间设定，由于只能单份样品逐一测定，若延迟时问全部设置在仪器内，每个延迟时间加监测时间至少1分钟以上，守候时间较长。
工作量大时，可以根据仪器控温、加样及读数和试剂特点，以及室温情况，将延迟时问挪一部分到机外，套式操作，但要确保机内延迟时间不要进入线性反应期。
兼顾延迟时间和监测时间反应时间是有限制的。
在速率法和两点法中，延长延迟时间必然缩短线性监测期，减少测定的线性范围，也易发生底物耗尽。
2．7 监测时间酶促反应延迟期后，在过量底物的存在下，反应速率加快并达到一个反应速率稳定的阶段，即酶促反应以恒定的速率进行，不受底物浓度的影响，这段时间称为线性反应期或零级反应期，自动化生化分析仪的监测时间即为此期。
测酶的连续监测法至少90—120s或至少4点(3个AA)，少于3个△A不能称为连续监测法，因为不能计算线性度。
监测时间过长则容易发生底物耗尽，可测范围变窄。
2．8 标准液浓度终点法和两点法必须设置标准，选择合格的标准品很重要。
有些试剂盒配有标准液，但
是部分项目标准液定标偏差太大，我们使用的是干粉复合罗氏校准液，复溶后分装冷冻保存，只要复溶的水质保证，避免反复冻融，校准的结果还是很满意的。
注意校准液靶值获得的方法学，方法不同耙值是有差异的，比较典型的是ALP测定有IFCC和DGKC法，差异比较大，不可简单套用。
2．9 K值速率法测定无需带标准或做标准曲线，首先确定样本量和工作试剂量，再根据被测物质的摩尔消光系数，就
可按速率法计算公式计算出因素K值了。
K=TV×10。
／(8×SV XL)，TV为反应液总体积，sV为样本体积，L为比色杯光径(em)，￡为毫摩尔消光系数，如NADH／NADPH34Onm为6．22，对硝基苯胺405nm 为9．9，5一氨基一2一硝基苯甲酸405rim为9．5，对硝基酚405nm为10．5，5一硫代一2一硝基苯甲酸405nm为13．3。
2．10 试剂吸光度上下限有的生化仪要求设置试剂吸光度上下限，主要是用来监测试剂的质量的，但是试剂吸光度上限和下限不是试剂质量的唯一指针。
因此，一定的校准频率和室内质控是质量保证的必需手段。
我们在实际工作中就遇到酶活力测定的试剂空白数据在规定限值内，但质控物测定结果连续偏低，病人结果因每天标本少而难以判断，最后发现是试剂质量下降。
