电镜技术在临床病理诊断中的应用

光镜和电镜在病理诊断中的应用光学显微镜和电子显微镜是病理诊断中常用的两种显微镜。

光学显微镜（简称光镜）是一种基于光学原理工作的显微镜，能够提供高分辨率的图像，可用于观察组织和细胞的形态和结构。

而电子显微镜（简称电镜）则是一种利用电子束代替光束进行成像的显微镜，具有更高的分辨率和更大的倍率，可用于观察更微小的细胞和组织结构。

下面将分别介绍光镜和电镜在病理诊断中的应用。

光镜在病理诊断中的应用光镜广泛应用于组织学和细胞学的病理诊断中，主要有以下几个方面的应用：1.组织学检查：通过对组织样本进行染色和切片后，使用光镜观察组织的形态和结构，以检测异常变化。

在肿瘤的病理诊断中，光镜能够帮助鉴别肿瘤类型、判断肿瘤的恶性程度以及评估肿瘤的分级和分期。

2.细胞学检查：光镜也被用于观察和分析细胞的形态和结构，以判断细胞的异常变化。

例如，在涂片染色后，光镜可用于检测细胞的形态特征、细胞核的变化、细胞器的变化等。

细胞学检查对于早期癌症的早期诊断和病情监测具有重要意义。

3.免疫组织化学：光镜结合免疫染色技术可以检测组织和细胞中的特定抗原或标记物，以确定特定疾病的诊断和预后。

例如，在肿瘤诊断中，通过免疫组织化学可以检测特定肿瘤标记物的表达情况，有助于区分不同类型的肿瘤。

4.高分辨率成像：光镜的高分辨率成像能力可以提供详细的组织结构信息，帮助病理学家观察微小的病理变化。

这对于病理学家进行病变定位和病变性质评估非常重要，有助于制定最佳的治疗方案。

电镜在病理诊断中的应用相较于光镜，电镜具有更高的分辨率和更大的倍率，能够观察到更细微的结构细节，因此电镜在病理诊断中也发挥着重要作用：1.细胞超微结构的观察：电镜能够观察到细胞和组织的超微结构，如细胞器、细胞核内的核仁、线粒体、内质网等。

通过电镜观察，可以检测细胞内的超微结构变化，判断细胞的功能状态和异常变化。

2.病原微生物的观察：某些病原微生物的大小远小于光限的分辨率，因此光镜很难直接观察到它们。

临床最常用的病理学研究方法
临床最常用的病理学研究方法包括组织学检查、免疫组化、分子病理学和电镜检查等。

组织学检查是病理学中最常用的方法之一。

它通过显微镜观察组织和细胞的形态学变化，以诊断和评估疾病的发生和发展。

组织学检查通常使用染色技术，如常规的血液染色、克罗姆氏染色、偏心染色和免疫组织化学染色等。

免疫组化是在组织学检查的基础上，使用抗体与特定抗原相互作用来检测和定位细胞或组织中的特定分子。

这种方法可以识别特定抗原，例如肿瘤标记物或免疫球蛋白等，从而帮助医生诊断疾病类型和预测疾病的预后。

分子病理学是一种通过分析细胞和组织中的分子改变来诊断疾病的
方法。

它使用一系列的实验技术，如聚合酶链反应（PCR）、核酸杂交和基因测序等，来检测和分析DNA、RNA和蛋白质的变化。

分子病理学在肿瘤学中应用广泛，可以帮助确定肿瘤的分型、预后和治疗方案。

电镜检查是一种高分辨率显微镜技术，可以观察细胞和组织的超微结构。

它可以揭示细胞器的形态和排列，以及细胞内的病理变化。

电镜检查在研究一些罕见的疾病、细胞内的代谢异常以及病毒感染中起着
重要的作用。

除了上述方法，还有许多其他的病理学研究方法，如流式细胞术、细胞遗传学和细胞培养等，这些方法在不同的临床情况下有其特定的应用。

综合利用这些病理学研究方法，可以提供准确的疾病诊断和预后评估，为临床医生制定个体化的治疗方案提供重要依据。

电镜技术不仅成了医学领域中诸多形态学科的不可缺少的丁具，而且在临床病理分析和研究、临床医学检验诊断等方面都发挥着重要的作用。

特别是对病毒学和细胞学的发展起着重要的作用。

(一)在细胞生物学和分子生物学方面的应用电镜具有很高的分辨率和放大倍数，人们已经能够观察和司「究业细胞的超微结构，例如细胞膜、内质网、细胞骨架、细胞器等的结构，并能把形态结构和生理功能联系起来进行动态研究。

大量的组织、细胞和微生物在病理状态下超微结构变异的实验事实，极大地丰富了细胞生物学的内容，促进了基础医学与临床医学的结合。

例如，利用冷冻蚀刻方法观察到细胞膜的内、外表面，揭示了许多过去未见到的生命科学的新现象、新事实。

超高压电镜有希望对活标本的生命状态进行直接观察。

电镜技术在染色体、生物大分子的结构观察研究方面具有广泛应用，为分子遗传学、生物遗传工程的发展提供了形态学研究的有力工具。

日前，主要应用于蛋白质、核酸、氨基酸系列，以及转录和翻译的基因片段的研究上。

(二)在解剖学中的应用目前用电镜可观察研究所有的人体组织和器官、可观察到血管的微细结构、可研究微血管在各种组织和器官中空间分布的形态特征、能看到骨组织表面的超微结构、还能看到骨细胞的超微结构和骨基质中钙盐在胶原纤维间的沉积过程。

电镜在解剖学中的应用，使得对人体组织结构的认识进入超微结构层次，促进了解剖学的深入发展。

电镜不仅为神经纤维的形态学研究同时也为神经生物学的发展贡献力量。

(三)在病毒研究方面的应用病毒是目前人类认识的最小的生命状态，而电镜是对它们进行直接观察的唯一工具。

许多病毒的发现都依赖于电镜的应用。

利用电镜技术对病毒形态结构、发展发育以及对靶细胞的作用的研究，为病毒性疾病的病因分析及防治提供了形态学资料。

对于不会明显引起细胞发生明显病变的病毒如风疹病毒、鼻病毒等，电镜技术是一种可靠的鉴定、诊断手段。

(四)在临床检验方面的应用随着超微结构诊断学的研究发展，电镜对血液病、肿瘤、肝胆、消化、泌尿、皮肤等方面的多种疑难病症的临床诊断都可提供有价值的资料。

电镜技术在肾活检中的应用重庆第三军医大学新桥医院肾内科、全军肾脏病中心重庆市肾脏病研究所（邮编４０００３７）袁发焕一、电镜技术的利・类、特点、及其局限性：目前，常用的电镜技术主要有以下两大类：１、透射Ｉ乜镜（Ｔｒａｎｓ—ｅｌｅｃｔｒｏｎＭｉｃｒｏｓｃｏｐｅ）：是目前临床肾活检汞Ｉ其他生物标本的病理检查使用得最多的一项技术。

其基本工作原理与普通光镜相似，不同的是电镜用电子束代替光镜的光束来作为样品照明的介质，放大倍数大大提高，理论放大倍数可达３０～５０万倍，因此，可以观察到光镜所不能观察到的微细结构及其病变。

伴随着高放大特性，电镜还具有观察范围小的局限性。

ｊＥ因为此原因，在肾活检和其他组织的病理检查中，电镜只能作为光镜的延伸和补充，而不能取代光镜，犹如显微镜能使我们看到微观世界，但不能取代人眼来观察世界。

根据标本处理方法不同，透射电镜又可分为：超薄切片负染色透射也镜技术（看切面超微结构，使用最多，是本文叙述的重点）、冷冻蚀刻透射ＩＩ＝ｌ镜技术（看断裂面超微结构，使用较少）、酶细胞化学染色透射电镜技术（观察特定的酶）、免疫细胞化学染色透射电镜技术（观察特定的抗原）。

２、扫描电镜（Ｓｃａｎ—ｅｌｅｃｔｒｏｎＭｉｃｒｏｓｃｏｐｅ）：扫描电镜的：［作原理与解剖显微镜类似，是通过观察物体表面对电子束的反射，来观察物体的表面结构。

目前，在肾脏病领域，扫描电镜主要用于科研，在肾活检标本的临床病理诊断一ｐ的应用，有待于开发。

二、电镜技术在肾活检中应用的意义：透射电镜下可看到光镜下所不能看到的超微结构，如各种亚细胞器、病毒颗粒、纤维、电子致密物等，电镜技术在肾活检应用中的意义可分为以下３种情况：１、在肾活检的临床病理诊断中起决定性作用。

譬如微小病变性肾病、薄基底膜肾病、早期膜性肾病、早期淀粉样变性、Ａｌｐｏｒｔ综合征、纤维样肾小球病、免疫触须样肾小球病、胶原ＩＩＩ肾小球病、Ｆａｂｒｙ氏病等，ｌ｜ｆｉｉ床病理诊断主要依靠电镜下的有关资料。

病理征的检查方法
病理学是研究疾病发生、发展和变化规律的学科。

在病理学研究中，病理征是指病理学上的一些体征或表现，是疾病诊断的重要依据。

病理征的检查方法有许多种，下面将介绍几种常见的检查方法。

1.组织切片检查法
组织切片检查法是指将患者的组织标本进行切片处理，然后在显微镜下观察切片的组织结构和细胞形态等特征，以确定是否存在病理征。

这种方法常用于病理学诊断和研究中，可以提供较为准确的病理学信息。

2.细胞学检查法
细胞学检查法是指对患者的细胞标本进行检查，以确定是否存在病理征。

细胞学检查法可以通过细胞学技术对细胞形态、结构和功能等进行分析，并对细胞内的病理学改变进行鉴定，从而提供疾病的诊断和治疗方案。

3.免疫组化检查法
免疫组化检查法是指利用抗体与抗原之间的特异性结合来检测组织或细胞中某些特定分子的存在情况。

这种方法对于病理学中的一些特异性标志物的检测具有很高的灵敏度和特异性，可以提供较为准确的诊断信息。

4.电镜检查法
电镜检查法是指利用电镜技术对组织或细胞的形态结构进行分析。

电镜检查法可以观察到细胞的超微结构和细胞内的病理学改变，对于疾病的诊断和治疗提供了很多重要信息。

5.分子生物学检查法
分子生物学检查法是指利用分子生物学技术对病理学上的一些分子进行检测和分析。

这种方法可以检测到基因、蛋白质、核酸等分子的表达和突变情况，对于疾病的诊断和治疗提供了很多有价值的信息。

病理征的检查方法有很多种，每种方法都有其独特的优势和应用范围。

所以在疾病的诊断和治疗中，医生需要根据患者的具体情况选择合适的检查方法，以提供最为准确的病理学信息。

电子显微镜技术在生物学上的应用生物学是一门对生命现象和生命活动进行研究的科学，而电子显微镜技术则是一种强有力的工具，用于观察和研究生物体系的微观结构和过程。

电子显微镜技术已经成为一种极为重要的技术手段，为生物学研究提供了更全面、更精细、更真实的数据和信息。

本文介绍了电子显微镜技术在生物学上的应用，其中包括了电镜的种类、原理、样品制备和应用领域等方面，希望能够使人们进一步了解电子显微镜技术在生物学上的贡献。

电镜的种类和原理电子显微镜主要分为透射电子显微镜(Transmission Electron Microscope, TEM)和扫描电子显微镜(Scanning Electron Microscope, SEM)两种类型。

TEM可将电子束通过样品，使电子束有一部分穿透样品，这些透过样品的电子束会形成一个搭建图像透射电子显微镜使得原电子射线可以充分进入样品。

经过样品的电子束carryovers在样品中散射、穿透、吸收的过程中出现衰弱现象，因此TEM样品的准备和处理非常重要，能够有效地解决这一问题，并将不同部分的细胞和组织中的结构分离开来，进一步研究分子和原子水平上的生物学信息。

SEM该技术可以通过从样品表面反射而来的电子束来制作高分辨率的3D立体图像，并对表面上的形态、形貌和构造研究进行评估。

相比TEM而言，SEM的样品制备和处理要求较低，因而SEM常常被用于骨骼计量分析、实体结构重建和别运行行为研究方面。

样品处理和制备样品制备是电镜技术的关键环节之一，在样品制备阶段，需要用特定工具将组织或细胞融解、固定和悬浮于接受电镜照射的样品载体上。

在样品制备过程中，需要避免任何有可能对样品造成破坏的水分、氧气或污染物，该处理过程的目的是保持样品的真实状态，以获取所需的生物信息。

此外，还需要控制电镜照射的时间和电压，从而保证对样品不会造成位置或形态改变。

应用领域现代科技的快速发展和电子显微镜技术的广泛应用，已经使其在生物学的研究领域中得到了广泛的应用。

走进病理世界--病理诊断病理诊断是诊断准确性最高的检查方式，通常是在显微镜下根据组织学的结构、细胞形态、特征进行诊断，在医疗行业被称为诊断的金标准。

所以，医生多以病理诊断为最终诊断。

患者就诊时，首先要通过有效的诊断明确患者的病情类型，诊断包括临床诊断、影像诊断、病理诊断等，医生则根据这一系列的诊断结果或检查结果断制定治疗计划。

病理诊断的主要功能除了诊断外，还能指导临床治疗、判断疾病的预后疗效。

当然，病理诊断也不是万能的，准确性也不是绝对的，其和其他学科一样，存在一定的固有主观原因。

一般情况下，若是医生病理形态学检查经验丰富，即使诊断结果具有一定的主观性，基本也能保证95%以上的病理报告准确，余下则可能存在漏诊和误诊情况。

因此，提高病理医师的诊断技术水平，加强临床与病理医师之间的沟通，对减少漏诊和误诊是非常必要的。

患者经过病理诊断后，确诊患有某种疾病，则应遵循医生的指导和意见，积极配合治疗，保持心情放松愉快。

一、病理诊断的重要性病理诊断是非常重要的。

首先，病理诊断可以及时准确的对病人的疾病作出诊断，辅助医生采取正确的措施帮助患者治疗疾病。

其次，病人在进行手术的时候，病理诊断可以明确病变性质，协助医生选择手术后的治疗方案。

医生在对病人疾病进行观察和治疗的过程当中，病理诊断也可以让医生及时了解病变的发展情况，从而根据实际情况调整和完善治疗方案。

图1即为病理诊断有关图片。

图1随着影像医学的发展以及临床检验技术水平的不断提升，很多疾病在进行临床检查之后就可以做出临床诊断。

但是，除了以代谢紊乱和功能为主的疾病外，很多存在明确器质性病变的疾病都需要进行病理诊断，临床检查技术再高，病理诊断都无法取代，这是最可靠也是最后的诊断。

所有可以触及的肿块，或是影像学检查出的占位性病变，以及内窥镜观察到的各类病变，都需要在病理活检之后才能确诊，从而准确判断病变的性质、种类和程度。

当然，诊断患者疾病的目的就是治疗，所以治疗是否有效则来源于诊断是否正确，正确的病理诊断非常重要，特别是肿瘤等重大疾病的治疗更加关键。

电镜技术在临床病理诊断中的应用电镜技术在医学里的应用是其它任何领域不能与其相提并论的。

电镜在临床病理诊断中的广泛应用，为临床疑难疾病的诊断和鉴别诊断提供了更可靠地科学依据。

本文拟从临床电镜诊断技术在血液疾病诊断、肿瘤诊断、活检病理诊断等方面阐述其在临床病理诊断中的应用。

从20世纪30年代开始，随着电子显微技术的问世，人们能在原子的尺度上观察研究物质的结构，使人们的对物体的观察由宏观世界进入了原子级的微观世界。

目前的电镜种类很多，有透射电镜（TEM）、扫描电镜（SEM）、扫描隧道电镜、原子力电镜等，但应用于临床病理诊断中的主要是透射电镜和扫描电镜。

前者注重组织核细胞内的超微结构，后者则用于观察组织和细胞内的表面形貌。

经过80余年的发展，电子显微镜技术已成为医学科学领域内不可缺少的研究手段及工具，对医学科学研究起着重要作用。

临床病理诊断为最终诊断，目前电镜诊断技术已广泛应用于现代临床病理诊断中，特别是在传统的临床诊断手段无法确诊的病例，电子显微镜发挥着重大作用。

本文拟就电镜技术在临床病理学诊断中的作用进行综述。

1.电镜在血液疾病诊断中的应用在血液系统疾病的诊断和研究方面，从最初单纯的超微结构观察到成为某些疾病分型和鉴别诊断的重要工具，电镜在血液系统疾病中的运用正不断扩展，并越来越受到认可和重视。

近年来，电镜凭借其自身优势成为相关研究的重要手段，在临床和研究中发挥了巨大作用。

电镜观察白血病已成为研究白血病的重要手段，电镜对白血病的作用主要是对某些分化较差的白血病细胞作出正确判断，可确立诊断及鉴别诊断指标；对于特定细胞采用样品包埋和超薄切片技术，用电镜观察又可充分发挥电镜分辨率高的优点，结构准确，形态清晰，这是光学显微镜无法达到的。

尤其是临床表现不典型时，再结合扫描电镜(表面微绒毛)更加有其诊断价值。

而光镜和电镜结合起来，又可使诊断全面可靠或者对了解同一类型白血病细胞的不同形态表现的意义具有一定的价值，为临床诊断提供较为有效的方法[1]。

电镜技术在病理诊断中的作用随着医学的发展电镜技术在医学中的地位越来越重要，尤其是在临床的病理诊断中更是占有举足轻重的地位，使临床中诊断鉴别疾病有了科学依据和解释。

本文就电镜技术在临床中的病理活检、肿瘤的诊断以及血液疾病的诊断等方面的应用，阐述其在病理诊断中的重要作用。

[关键词]病理诊断；电镜技术；显微结构自发现电子显微技术以来，人们从对物质的宏观观察转入对物质的微观研究，使人们对物质的本质有了进一步的认识。

目前出现了多种功能的电镜，包括扫描电镜、透射电镜、原子力电镜、扫描隧道电镜等，其中扫描电镜、透射电镜被广泛用于临床的病理诊断中。

前者主要用于组织及细胞内表面形貌的观察，后者则主要用于组织及细胞内超微结构的观察。

经过多年的发展，电镜技术在医学领域中已成为极为重要的研究手段和工具，在医学研究中占据重要地位。

病理诊断是许多疾病的最终诊断依据，目前临床中的病理诊断主要依靠电镜技术，尤其是对于应用传统诊断手法无法确诊的疾病。

本文就电镜技术在临床诊断中的应用进行综述。

1电镜技术在病理活检中的应用电镜技术对于肝脏疾病、慢性肾病的诊断具有重要作用，尤其是肾脏活检。

肾活检的病理诊断较其他疾病的病理诊断更加的复杂，电镜检查、免疫荧光、光镜是肾活检中不可或缺的组成部分。

然而目前国内的不少医疗机构单位甚至是部分大医院对于免疫荧光和光镜检查，忽视了电镜观察的重要性，造成部分病例的误诊、漏诊，使临床诊断、治疗存在误区。

一段时间以来的研究发现运用电镜技术诊断的部分肾小球疾病，如纤维素样肾小球病、薄基底膜肾病、Fabry病、免疫触须样肾小球病、Ⅲ型胶原肾小球病等[1]，电镜可以对其组织结构的改变和免疫复合物沉积情况做出判断，运用电镜观察便可基本做出诊断，弥补了取材失误导致无法做出诊断的情况。

国外对电镜的诊断结果十分重视, Haas在1996年分析了228例病人的肾活检，其中大约1／2病例依靠电镜技术提供的信息才能做出诊断，约有22％的病例需要完全依靠电镜做出诊断，约28％的病例由电镜技术提供了可靠依据。

病理征的检查方法病理学是通过观察和研究组织和细胞的变化来诊断疾病的学科。

而病理征的检查方法则是用来观察和评估这些病理变化的手段和技术。

本文将介绍病理征的常见检查方法，并对其原理和应用进行详细阐述。

一、组织切片检查法组织切片检查法是病理学中最常用的方法之一。

其原理是将病理标本切割成薄片，并染色后在显微镜下观察和分析。

常用的染色方法包括血液学染色、免疫组织化学染色和特殊组织染色等。

通过观察切片的细胞结构、细胞核形态、细胞器变化等特征，可以确定疾病的类型、进展程度和预后信息。

二、细胞学检查法细胞学检查法是通过采集和分析病变部位的细胞来诊断疾病。

其中，常见的细胞学检查方法包括细胞涂片法和细胞穿刺法。

细胞涂片法是将细胞标本涂在载玻片上，经过染色后在显微镜下观察和分析。

细胞穿刺法则是通过细针穿刺采集病变组织的细胞，再进行染色和观察。

细胞学检查法可以对肿瘤、炎症和感染等疾病提供快速和准确的诊断。

三、免疫组织化学检查法免疫组织化学检查法是利用特异性抗体与组织标本中的抗原发生特异性反应的原理，通过染色的方法来检测组织中特定蛋白的表达情况。

这种方法可以帮助病理学家确定疾病的类型、起源和分化程度。

常见的免疫组织化学方法包括免疫组织化学染色和免疫荧光染色等。

免疫组织化学检查法在肿瘤诊断和分子病理学研究中有着重要的应用价值。

四、电镜检查法电镜检查法是一种高分辨率的显微镜方法，可以观察到细胞和组织的超微结构。

通过电镜的放大作用，可以观察到细胞器、细胞膜、细胞核和细胞间连接等微观结构的变化。

电镜检查法在病理学中常用于观察细胞内细菌、病毒、肿瘤细胞等微小结构的变化，对于疾病的诊断和研究有着重要的意义。

五、分子病理学检查法分子病理学检查法是通过分析和检测细胞和组织中的分子水平的变化来诊断疾病。

这种方法可以通过检测DNA、RNA、蛋白质和细胞信号通路的变化，揭示疾病的发生机制和分子基础。

常见的分子病理学检查方法包括PCR、DNA测序、蛋白质免疫印记和基因芯片技术等。

病理征五个检查方法病理征是指疾病在人体内所引起的一系列异常变化，通过检查病理征可以帮助医生确定疾病的类型和严重程度。

在临床诊断中，常用的病理征检查方法有五种，包括病理组织学检查、免疫组化检查、分子病理学检查、细胞学检查和电镜检查。

病理组织学检查是通过对患者组织标本的镜下观察，结合组织学染色技术，来观察组织的微观结构和细胞形态的一种检查方法。

这种检查方法能够帮助医生判断组织的形态学特征，对肿瘤、炎症、变性、坏死等病变进行鉴别，从而为疾病的诊断提供重要依据。

免疫组化检查是通过检测组织标本中特定抗原和抗体的特异性结合，来确定组织中某些特定分子的表达情况。

这种检查方法可以帮助医生鉴别肿瘤的来源和类型，评估肿瘤的侵袭性和预后，对于肿瘤的诊断和治疗具有重要的临床意义。

分子病理学检查是通过检测组织标本中的DNA、RNA和蛋白质等分子水平的变化，来确定疾病的分子特征和变化。

这种检查方法可以帮助医生进行个体化治疗的选择，评估肿瘤的预后和预测治疗效果，对于肿瘤的精准治疗具有重要的指导意义。

细胞学检查是通过对细胞标本的镜下观察，来评估细胞的形态学特征和细胞学变化的一种检查方法。

这种检查方法可以帮助医生鉴别炎症、肿瘤和其他病变，对于早期诊断和疾病的鉴别诊断具有重要的临床意义。

电镜检查是通过电镜技术对组织和细胞的超微结构进行观察和分析的一种检查方法。

这种检查方法可以帮助医生观察细胞器的形态和结构，对于一些罕见的疾病和特殊的病变进行诊断具有重要的帮助。

综上所述，病理征的检查方法包括病理组织学检查、免疫组化检查、分子病理学检查、细胞学检查和电镜检查。

这些检查方法可以帮助医生对疾病进行准确的诊断和鉴别诊断，为患者的治疗和预后评估提供重要的依据。

在临床实践中，医生应根据患者的临床表现和检查结果，综合分析，选择合适的检查方法，以提高疾病的诊断准确性和治疗效果。