当前位置：文档之家 › 211植物细胞工程的基本技术PPT课件

211植物细胞工程的基本技术PPT课件

  • 格式：ppt
  • 大小：5.77 MB
  • 文档页数：46

下载文档原格式

  / 46

合集下载

课件11：2.1.1 植物细胞工程的基本技术

课件11：2.1.1 植物细胞工程的基本技术
8．植物体细胞杂交技术完成的标志是什么？ 获得杂种植株
9.植物体细胞杂交的原理是什么？ 细胞膜的流动性、植物细胞的全能性
（一）过程：
融
植物细胞的融合 合 植物组织培养
完
植物细胞A
方法？
成 的
去壁
原生质体A
原生质体B
去壁
标
融合 志 杂
愈
杂
的原
人 工 诱 导
生质 再 体生 AB 出
细
种 细脱 胞分 AB 化
将离体的植物器官、组织、细胞，培养在人工 配制的培养基上，给予适宜的培养条件，诱导 其产生愈伤组织、丛芽，最终形成完整的植株。
2.原理：植物细胞的全能性
二、植物体细胞杂交技术
蕃 茄
马 铃 薯
番茄------马铃薯植株
思考：
1．你认为两个来自不同植物的体细胞完成融合， 遇到的第一个障碍是什么？
植物细胞外面有一层细胞壁，这层细胞壁阻碍 着细胞间的杂交。 2．有没有一种温和的去壁方法呢？
相关概念:
（3）愈伤组织：一些分化的细胞，经过植物激素诱 导可以脱分化为具有分生能力的薄壁细胞组织。
细胞特点：细胞排列疏松无规则，高度液泡化的 薄壁细胞。
（4）外植体：在植物组织培养过程中，从植物体上 被分离下来的，接种在培养基上供培养用的原生质体、 细胞、组织、器官等
一、植物组织培养技术 1、原理：细胞的全能性
3.为什么切取胡萝卜根的形成层，其他部分也能 培养成小植株吗？
胡萝卜根形成层容易诱导成愈伤组织，其他部分 如叶、花也能培养成小植株，只是稍微困难些。
4.为什么诱导愈伤组织的过程中应避光培养？
在有光时，往往容易形成维管组织，而不易形成 愈伤组织。
高根低芽中愈伤

植物细胞工程的基本技术PPT教学课件

植物细胞工程的基本技术PPT教学课件

大陆西侧
大气环流 冬夏季风交替控制 终年受西风控制
地形
气候
植被 水文
矿产资源
日本
英国
地形
紧急大活动1
气候
你能找出一些
要素的相关性
植被
吗？
水文
矿产 资源
• 气候决定植被 • 气候、地形决定水文
2、人类活动的区域差异
经济发展的比较（发展水平很高） 产业部门 产业结构
紧急大活动2
• 自然环境对农业生产发展形成了怎样的制 约？
应用的原理和方法
细胞生物学和 分子生物学
概念 研究的水平 研究的目的
细
细胞整体水平 或细胞器水平
按照人们的意愿来改 变细胞内的遗传物质 或获得细胞产品
胞
工
植物细胞工程 理论基础 细胞的
程
全能性
分类
动物细胞工程
2.1植物细胞工程
§2.1.1植物细胞工程的基本技术
植物组织培养
课标要求：
能力要求
1、理解和掌握植物组织培养的操作过程
个体的潜能的特性。
2、原理：生物体的每一个细胞都包含有该物种所特
有的全套遗传物质，都有发育成为完整个 体所必需的全部基因，从理论上讲，生物 体的每一个活细胞都应该具有全能性。
3、差异：（1）受精卵的全能性最高
（2）受精卵分化后的细胞中，体细胞的 全能性比生殖细胞低。
4、大小：受精卵 ＞ 生殖细胞 ＞ 体细胞
• 你还能对日本和英国进行哪些方面的 比较？
小结
• 自然环境各异，文化传统不同，加上人口 数量悬殊，经济发展起步时间和发展过程 方面的差异，所以两国在产业结构、工业 和城市分布等方面有较大差异。
根据以上的案例比较，归纳出区域差异比较 的一般步骤。

211 植物细胞工程的基本技术PPT课件

211 植物细胞工程的基本技术PPT课件

1972年卡尔森等通过两个烟草品种之间 原生质体的融合，获得了第一个体细胞杂种。
1978年梅尔彻斯(Melchers)等首次获得 了番茄和马铃薯的属间体细胞杂种—— “马铃薯番茄”。
目前，已得到栽培烟草与野生烟草、 栽培大豆与野生大豆、籼稻与野生稻、 籼稻与粳稻、小麦与鹅冠草等细胞杂种 及其后代，获得了有价值的新品系或育 种上有用的新材料。
Ｃ．卵细胞和受精卵一样，细胞未分化，全 能性很高
Ｄ．植物细胞离体培养在一定条件下能表现 出全能性
13
2.在生物体内，细胞没有表现出全能性 ，而是分化为不同的组织、器官，是因
B 为 （ ）
A、细胞的基因丧失了全能性 B、基因在特定时间和空间条件下选择 性表达的结果 C、不同的细胞内基因不完全相同 D、在个体发育的不同时期，细胞内的 基因发生了变化
7
植
5
物
组
再分化
织
培 养
(愈伤组织) 4
6
1 脱分化
3 2
8
思考：
1、为什么植物的一部分就可以培育 出完整的植株呢？
2、如果外植体能长成一个完整的植株 它需要什么条件呢？
9
二、植物组织培养的原理：细胞的全能性
1、定义：
生物体的细胞具有使后代细胞发育成完整 个体的潜能的特性。
2、根本原因：
生物体的每一个细胞都包含有该物种所特 有的全套遗传物质，都有发育成为完整个 体所必需的全部基因。从理论上讲，生物 体的每一个活细胞都应该具有全能性。
专题二 细胞工程
细胞工程是指应用细胞生物学和分子生 物学的原理和方法，通过细胞水平或细胞器 水平上的操作，按照人的意愿来改变细胞内 的遗传物质或获得细胞产品的一门综合科学 技术。

2.1.1植物细胞工程基本技术 PPT课件

2.1.1植物细胞工程基本技术 PPT课件

植物组织培养过程：
二、植物组织培养
1.关键名词：脱分化、再分化、愈伤组织、外植体？
2、植物组织培养的原理和条件是什么？
植物细胞全能性 离体、一定的营养物质、激素和其他外界条件
3、离体的器官、组织或细胞如果不进行脱分化、再分化 处理，能否培养成完整植株？ 4、决定植物细胞脱分化、再分化的关键因素是什么？
4. 诱导融合的方法有哪些？
5. 融合成功的标志是什么？
6. 除形成杂种细胞外，还能形成其他哪些 类型 的融合细胞？ 7. 植物体细胞杂交有什么实际意义？
1. 阻碍植物体细胞的杂交
2. 酶解法：纤维素酶、果胶酶
4.诱导融合方法：
①物理法：离心、振动、电激等
②化学法：聚乙二醇（PEG）
5.诱导产生新的细胞壁 7.意义： 克服远源杂交不亲和的障碍，
C
2（多选）在植物组织培养过程中，会发生的有（ABD ） A DNA复制 B 有丝分裂 C 减数分裂 D 细胞分化
3 、植物组织培养形成的愈伤组织进行培养， 又可以分化形成根、芽等器官， 这一过程称为： （
A、脱分化 C、再分化
C
）
B、去分化 D、脱分化或去分化
4、下列不能作为植物组织培养的材料是（ D ）
杂种细胞
组织培养
杂种植株
意义：克服远缘杂交不亲和的障碍、培育新品种
5、植物体细胞杂交尚未解决的问题有（
）
A、去掉细胞壁,分离出有活力的原生质体 B、将杂种细胞培育成杂种植株 C、让杂种植物按照人们的需要表现出亲代的优良性状 D、尚未培育出属间杂种植物
6、不能人工诱导原生质体融合的方法是（
A、振动 C、PEG试剂、 B、电刺激、 D、重压
专题2

21植物细胞工程 211植物细胞工程的基本技术30页PPT

21植物细胞工程 211植物细胞工程的基本技术30页PPT
P35讨论1.在组织培养实验中，为什么要强调所用器械的 灭菌和实验人员的无菌操作？
植物组织培养中用到的培养基含有丰富的营养成分， 有利于培养物的生长，然而各种杂菌同样也可以在上面迅 速生长，所以植物组织培养过程中污染现象经常发生。培 养基一旦被污染，迅速生长的各种杂菌不但会和培养物争 夺营养，而且这些杂菌生长的过程中会生成大量对培养物 有害的物质，导致培养物迅速死亡。
细胞全能性比较权威的定义是1984年国际组织 培养协会做出的：“细胞全能性为细胞的某种特征， 有这种能力的细胞保留形成有机体所有细胞类型的能 力”。
2.1植物细胞工程2.1.1植物细胞工程的基本技术细胞的全能性及分化
3、细胞的全能性大小： 受精卵>卵细胞>体细胞 分化程度高的细胞>分化程度低的细胞
4、细胞分化后遗传物质是否发生了变化？
遗传物质没有变化，不同组织的细胞都是来源 于受精卵，经有丝分裂产。细胞分化的实质是基 因选择性表达的结果。
2.1植物细胞工程2.1.1植物细胞工程的基本技术细胞的全能性及分化
1、细胞的全能性概念： 已经分化的细胞，仍然具有发育成完整个体的潜能；
2、细胞的全能性原因： 细胞内具有发育成个体的全部遗传物质。
接种到诱导培养基
诱导出愈伤组织
愈伤组织转接到 继代培养基上
直接诱导分化
得到大量的 愈伤组织
愈伤组织接种到 分化培养基上
幼苗接种到 生根培养基上
分化出幼苗 完整植株
移栽到大田
2.1植物细胞工程 2.1.1植物细胞工程的基本技术植物组织培养技术
植物组织培养就是在无__菌__和__人__工___控制条件下，将_离__体___ 的植物器官、组织、细胞，培养在人工配制的_培__养__基__上，

植物细胞工程的基本技术PPT课件(原文)PPT

植物细胞工程的基本技术PPT课件(原文)PPT

分化的体细胞(或细胞核)具有本物种个体发育所需要的全部基因
分化的体细胞(或细胞核)具有本物种个体发育所需要的全部基因
高度分化 脱分化 分化的体细胞(或细胞核)具有本物种个体发育所需要的全部基因 ______________的组织 ――→ 分化的体细胞(或细胞核)具有本物种个体发育所需要的全部基因
形成
(3)适宜的温度等外界条件。 分化的体细胞(或细胞核)具有本物种个体发育所需要的全部基因
分化的体细胞(或细胞核)具有本物种个体发育所需要的全部基因 分化的体细胞(或细胞核)具有本物种个体发育所需要的全部基因 分化的体细胞(或细胞核)具有本物种个体发育所需要的全部基因
专题2 细胞工程
栏目 导引
专题2 细胞工程
栏目 导引
专题2 细胞工程
三、植物组织培养技术(阅读教材 P34～P36)
1．理论基础(原理)：__植__物__细__胞__全__能__性____。
分化的体细胞(或细胞核)具有本物种个体发育所需要的全部基因
2．植物组织培养的基本过程 分化的体细胞(或细胞核)具有本物种个体发育所需要的全部基因
分化的体细胞(或细胞核)具有本物种个体发育所需要的全部基因 分化的体细胞(或细胞核)具有本物种个体发育所需要的全部基因
专题2 细胞工程
二、植物细胞的全能性(阅读教材 P33～P34) 1．含义：具有某种生物__全__部__遗__传__信__息____的任何一个细胞，都 具有发育成__完__整__生__物__体______的潜能。 2．表达过程 (1)脱分化： 让已经分化的细胞经过诱导后，失去其特有的 __结__构__和__功__能____而转变成未分化细胞的过程。
栏目 导引
专题2 细胞工程
植物细胞的全能性

《植物细胞工程基本技术》课件PPT课件


诱变育种的方法与流程
诱变育种概述
诱变育种是通过人工诱变手段，使植物细胞发生突变，再从中选择具有优良性状的个体 进行繁殖和培育的方法。
诱变育种方法
常见的诱变育种方法包括化学诱变、物理诱变和太空诱变等。其中，化学诱变使用化学 诱变剂处理植物材料，物理诱变使用物理手段如射线、激光等处理植物材料。
诱变育种流程
克隆技术的流程
选择适宜的植物材料、进行无菌操作、细胞培养、愈伤组织诱导、 胚状体诱导、植株再生、遗传转化等步骤。
克隆技术的应用实例
1 2
克隆植物
通过克隆技术可以快速繁殖珍稀濒危植物，保护 物种资源；同时也可以生产转基因植物，改良植 物性状。
克隆动物
克隆技术在动物领域的应用主要包括动物模型的 建立、濒危动物的繁殖和优良品种的保存等方面。
利用植物细胞培养技术生产天然药物、生 物制品和疫苗等，具有生产成本低、周期 短、易于控制等优点。
环境保护
能源生产
利用植物细胞培养技术进行生态修复和环 境污染治理，如重金属污染土壤的修复、 水体净化等。
通过转基因技术将植物细胞培养成能源植 物，如生产生物柴油的油菜、藻类等，为 可再生能源的发展提供技术支持。
植物细胞工程的基本原理
植物细胞具有全能性，即任何一个细胞都包含该物种的全套 遗传信息，在适宜的条件下可以发育成一个完整的个体。通 过离体培养，可以大量繁殖植物，并实现植物的遗传改良。
植物细胞工程的发展历程
1902年
德国植物学家哈伯兰特提出植 物细胞具有全能性的假设。
1958年
斯图尔德成功进行烟草离体培 养，获得完整植株，标志着植 物组织培养技术的诞生。
观察与记录
定期观察植物细胞的生长状况， 记录数据，以便进行后续分析 和研究。

植物细胞工程的基本技术ppt课件


使用比例
生长素 > 细胞分裂素 生长素 < 细胞分裂素
生长素 ＝ 细胞分裂素
实验结果
有利于根的分化 有利于芽的分化 促进愈伤体的消毒 外植体的消毒
外植体的切段 接种外植体
流水冲洗 →酒精消毒30s →无菌水清洗2～3次 →次氯酸钠溶液处理30min →无菌水清洗2～3次。
小肠上 皮细胞
血红 细胞
神经 细胞
细胞的再分化：
➢脱分化产生的愈伤组织继续培养， 重新分化成根或芽等器官的过程。
脱分化和再分化是依靠什么手段实现的？
补充：植物激素的作用
生长素和细胞分裂素在植物组织培养中的作用： 生长素主要促进生根，细胞分裂素主要促进发芽， 通过改变二者的比例，可以实现脱分化与再分化。
诱导愈伤组织
移栽
注意：先诱导生芽，再诱导 生根！
诱导生芽生根 移栽
移栽前先打开封口膜或瓶盖，让 试管苗在培养箱内生长几日。用 流水清洗掉根部的培养基后，将 幼苗移植到消过毒的蛭石或珍珠 岩等环境中，待其长壮后再移栽 入土。
【注意】
1. 实验中使用的培养基和所有的器械都要灭菌。接种操 作必须在酒精灯火焰旁进行，并且每次使用后的器械都要 灭菌。 2. 接种时注意外植体的方向，不要倒插。 3. 诱导愈伤组织期间一般不需要光照，有光易形成维管 组织，不易形成愈伤组织。在后续的培养过程中，每日需 要给予适当时间和强度的光照。
特点：分化程度低， 全能性高。
愈伤组织：离体的植 物器官、组织或细胞，
在培养一段时间以后， 通过细胞分裂，形成 一种由排列疏松无规 则、高度液泡化、无 定形态的薄壁细胞组 成的组织。
细胞的脱分化：
➢让已经分化的细胞，经过诱导后，
失去其特有的结构和功能而转变成未

2.1.1植物细胞工程的基本技术 课件(共21张PPT)


【问题导学二】植物组织培养技术
切取 形成层
移栽
无菌 接种
脱分化 诱导愈伤组织的
形成（避光）
需光吗？ 再分化
培养室
试管苗的形成
【问题导学二】植物组织培养技术
1. 脱分化、再分化 ⑴脱分化：就是让已经分化 的细胞，经过
诱导 后，失去其特有的结构和功能而转变成
未分化细胞 的过程。 ⑵脱分化产物： 具有分生能力的薄壁细胞，进而
7．下列有关植物体细胞杂交的叙述，不正确的C( )
A.用酶解法去掉细胞壁，分离出有活力的原生质体 B.诱导两种植物的原生质体融合，进而形成杂种细胞 C.植物体细胞杂交的最终目的是获得细胞代谢产物 D.植物体细胞杂交技术可以克服不同种间远缘杂交不亲 和的障碍
【完全达标训练】
1.植物细胞表现出全能性的必要条件是（ C ）
再分化 根、芽 生长发育 等器官
（或胚状体、丛芽）
完整植株
5.植物细胞表现出全能性的条件有哪些？
离体、一定的营养物质、植物激素、无菌环境
一定的温度、空气、、适合的pH、适时光照等
6.植物组织培养的结果培育出了植物体，能不能 培育出细胞而不是植物体？
7.植物组织培养中，诱导愈伤组织分化使需要用 到的植物激素种类主要有哪些？怎样影响？
生长素＞细胞分裂素：诱导愈伤组织分化为 根 。 生长素＜细胞分裂素：诱导愈伤组织分化为 芽 。
这幅番茄—马铃薯图利 用传统有性杂交方法能 实现吗？为什么？
因为不同种生物之间存 在着生殖隔离，所以用 传统的有性杂交方法是 不可能做到这一点的。
于是，这些科学家试图用这两种植物的体 细胞进行杂交，来实现这一美妙的设想。
生物体的每一个细胞都含本物种的全部遗 传信息，都有发育成完整个体的全套基因。
  1. 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
  2. 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
  3. 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
１、胡萝卜组织培养的实验原理？ ２、具体的方法步骤是什么？ 3、完成P35讨论题。 4、总结出植物组织培养的概念？
分化
2
植物组织培养技术
实验：胡萝卜的组织培养P34
实验原理： 1.根、茎、叶细胞具有全能性，在一定的营 养物质和激素等条件下，可脱分化形成愈伤 组织。 2.将愈伤组织转接到含有不同激素（生长 素和细胞分裂素）的培养基上，就可再分 化成胚状体或丛芽，进而发育成植株。
造成培养基污染的因素有很多，一般包括： 外植体带菌、培养瓶和各种器械灭菌不彻底、操 作人员操作不规范等。所以在组织培养实验中用 到的植物材料和各种器械都要进行彻底地灭菌， 实验人员操作一定要规范，避免带入杂菌。
(2)在本实验中，切取胡萝卜块根时强调要切 取含有形成层部分，原因是这部分容易诱导形 成愈伤组织。请思考一下，胡萝卜的其他部分 （如茎、叶、花），是否也能培养成小植株， 你能用实验的方法进行验证吗？
专题2 细胞工程
1996年7月5日,世界上第一只体细胞克 隆动物-----克隆羊多利诞生于英国.
这样的生物技术属于何种生物工程？ 细胞工程
什么叫细胞工程？包括哪两 大领域？
细胞工程是指应用细胞生物学和分 子生物学的原理和方法，通过细胞水 平或细胞器水平上的操作，按照人们 的意愿来改变细胞内的遗传物质或获 得细胞产品的一门综合科学技术。
１、植物细胞的花瓣怎样长成一株完整植株？
花瓣属于高度分化的组织，利用它培育新植 株，首先要通过细胞的脱分化过程，培养出 愈伤组织，愈伤组织在一定的培养条件下， 又可以再分化出幼根和芽，形成完整的小植 株。
强调几个概念：
愈伤组织：离体的植
物器官、组织或细胞，在培 养一段时间以后，通过细胞 分裂，形成一种高度液泡化、 无定形状态薄壁细胞组成的 排列疏松无规则的组织。
植物细胞的脱分化：
由高度分化的植物器官、组织或细胞产 生愈伤组织的过程，又称去分化。
脱分化的实质和结果分别是什么？
实质是使细胞恢复分裂能力。 结果是形成愈伤组织。
植物细胞的再分化：
脱分化产生的愈伤组织在培养过程中重新 分化根或芽等器官的过程。
2、为什么花瓣这样的离体器官、组 织或细胞培养成完整植物体？
植物细胞＞动物细胞
3、表现全能性的条件有哪些？
离体、提供营养物质、激素 适宜的温度、PH值，无菌等外界条件
4、生物体内的细胞为什么没有表现出全 能性，而是分化成不同的组织器官？
在特定的时间和空间条件下，基因 选择性的表达的结果。
5、已分化的细胞还有全能性吗？
分化的细胞遗传物质没变，仍有发育成 完整个体的全套基因。
实验目的：略 材料用具：略
实验步骤： （1）离体组织块的制备与消毒（制备外植体）
将胡萝卜根洗净、削皮、切段
制备 外植体
消毒（超净工作台或接种箱）： 酒精溶液消毒30秒，无菌水冲洗 次氯酸钠溶液处理30分钟，冲洗
制备外植体： 无菌滤纸吸去水分 无菌解剖刀切片 选取有形成层的部位
实验步骤：
（2）接种：
应用的原理和方法
细胞生物学和 分子生物学
概念 研究的水平 研究的目的
细
细胞整体水平 或细胞器水平
按照人们的意愿来改 变细胞内的遗传物质 或获得细胞产品
胞
工
植物细胞工程 理论基础 细胞的
程
全能性
分类
动物细胞工程
2.1植物细胞工程
§2.1.1植物细胞工程的基本技术
课标要求：
能力要求
1、理解和掌握植物组织培养的操作过程
C 1、有关全能性的表述中，不正确的是
A.受精卵在自然条件下能使后代细胞形成完 整个体，因此全能性最高
Ｂ．生物体内细胞由于分化全能性不能表达 Ｃ．卵细胞和受精卵一样，细胞未分化，全能
性很高 Ｄ．植物细胞离体培养在一定条件下能表现出
全能性
2.下列植物细胞全能性最高的是（ ）
A.形成层细胞 B.韧皮部细胞
C.木质部细胞
D.叶肉细胞 A
3．下列细胞全能性最高的是（ ）
A．植物的卵细胞
B．植物的精子细胞
C
C．被子植物的受精卵
D．被子植物的的叶肉细胞
要把一块组织通过培养得到一 株完整植株, 应该如何操作呢?
这就涉及植物细胞工程中 最基本的技术之一
植物组织培养
任务：阅读教材第34实验-36页第一段 时间：5分钟 问题：
(1)在组织培养实验中，为什么要强调所用 器械的灭菌和实验人员的无菌操作？
植物组织培养中用到的培养基含有丰富的营 养成分，有利于培养物的生长，然而各种杂菌同 样也可以在上面迅速生长，所以植物组织培养过 程中污染现象经常发生。培养基一旦被污染，迅 速生长的各种杂菌不但会和培养物争夺营养，而 且这些杂菌生长的过程中会生成大量对培养物有 害的物质，导致培养物迅速死亡。
内容要求
1、理解植物细胞的全能性 2、了解植物细胞脱分化和再分化的结果 3、掌握植物组织培养的特点
利用菊花花瓣微型繁殖培养的菊花
任务：阅读教材第33第二段-34页第一段
时间：4分钟
问题：
１、植物细胞的花瓣怎样长成一株完整植株？ ２、为什么花瓣可以培养成完整的植株？ 3、什么是细胞的全能性？ 4、全能性的大小关系？ 5、体内细胞为什么不表现全能性？
植物细胞具有全能性。
3、什么是细胞的全能性？
具有某种生物全部遗传信息的任何一个细 胞，都具有发育成完整生物体的潜能，也 就是说每个生物细胞都具有全能性的特点
细胞的全能性
1、原理：
生物体的每一个细胞都包含有该物 种所特有的全套遗传物质，都有发 育成为完整个体所必需的全部基因。
2、大小：
受精卵 ＞ 生殖细胞 ＞ 体细胞
胡萝卜的其他部分（如茎、叶、花）也能 培养再生形成小植株，只是诱导愈伤组织 比较困难。
(3)请根据上面的实验过程，概括出植物组 织培养技术的流程简图。
切取 形成层
移栽
无菌 脱分化 接种
培养室培养
诱导愈伤组织 的形成
再分化 试管苗的形成
植物组织培养技术
将组织块接种到培养基上（培养基成分 见P36“小知识” ），密封，贴标签， 注明材料名称、接种日期等。
（3）脱分化培养 条件：23-26℃恒温、避光
过程：4天后，检查污染情 况，14天后观察愈伤组织生 长状况。继续避光培养。 （4）再分化培养 一段时间后，将生长良好的 愈伤组织转接到分化培养基 上培养 （5）试管苗、移