葛根活性部位提取和纯化的研究_景赛赛
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不同提取方法测定葛根中三种有效成分一、实验目的及意义1. 了解水煮法、醇提法、微波辅助萃取法、超声波法、索氏提取法和溶剂浮选法;2. 熟悉相关仪器的使用操作。
二、研究背景简介葛根为临床常用中药,具有解肌退热、升阳透疹、生津止泻的功效。
葛根的主要活性成分是葛根素、大豆甙、大豆甙元等多种异黄酮类物质。
并含有多糖及多种微量元素,现代药理研究表明,葛根黄酮具有改善心脑血液循环,扩张冠状动脉,降血压,降血糖等作用;大豆甙元有明显抗心律失常作用,一直白血细胞的增殖及黑色素瘤细胞的分化。
民间常用葛根一味退热生津。
近几年临床上应用含葛根的的制剂愈风宁心片、葛根素注射液等治疗偏头痛、高血压、冠心病等疾病。
目前正在研制的还有葛根黄铜生物粘附性缓释片、葛根黄铜缓释胶囊、葛根素微乳、葛根素滴丸、葛根素复合骨架稀释片、配方颗粒等。
由于葛根属于药食同源,也被广泛的应用于保健品和食品中。
本课题对湖南和安徽两个地区的葛根采用水煮法、超声提取法、醇提法、微波辅助萃取法、索氏提取法、溶剂浮选法的提取方法,并针对其三种有效成分葛根素、大豆甙、大豆甙元的HPLC测定结果进行了分析比较。
三、实验内容1. 主要仪器安捷伦液相色谱仪1100系列(美国安捷伦公司)AB204-N电子天平(瑞士梅特勒公司)PHS-3B型pH计(上海精密科学仪器有限公司)MSP-100E微波萃取装置(雷鸣科技仪器公司)2. 主要试剂乙醇、正丁醇(分析纯,北京化工厂);甲醇(色谱纯,天津西华特种试剂厂);去离子水(自制);葛根样品产地分别为安徽和湖南,葛根素、大豆甙和大豆甙元标准品(中国药品生物制品检定所)。
3. 实验步骤(1)水煮法水煮法是用水做溶剂,加热一定时间,能提出较多成分,符合传统用药习惯,时常用的一种提取方法。
此方法生产成本低,适合工业化生产。
(2)醇提法醇提法是葛根提取工艺中最常用的提取方法。
称取适量的葛根加乙醇进行回流,冷却后待测。
(3)微波辅助萃取法称取适量的葛根,用75%乙醇作为溶剂,在一定微波萃取条件下进行萃取,冷却后待测。
文章标题:葛根有效成分提取及分离纯化工艺研究【导言】葛根,又称葛藤、葛蔓,是一种常见的中草药材,具有广泛的药用价值。
其中,葛根有效成分是人们特别关注的焦点之一。
有效成分提取及分离纯化工艺的研究对于充分发挥葛根的药用价值具有重要意义。
在本文中,我们将深入探讨葛根有效成分提取及分离纯化工艺的研究现状,希望能够为相关领域的研究和实践提供一定的借鉴与启发。
【一、葛根有效成分提取的研究现状】1.1 葛根有效成分的定义葛根中含有丰富的有效成分,包括黄酮类、异黄酮类、黄酮丙素和植物甾醇等。
这些有效成分具有多种药理活性,如抗氧化、抗炎、抗肿瘤等,对人体健康有着重要的保健作用。
1.2 葛根有效成分提取技术的发展随着现代科技的进步,葛根有效成分的提取技术得到了长足的发展。
传统的提取方法包括水提取、乙醇提取等,而近年来,超声波提取、微波辅助提取、离子液体萃取等新技术的应用,为提高提取率和有效成分的纯度提供了新思路和新途径。
【二、葛根有效成分分离纯化的研究现状】2.1 葛根有效成分分离纯化的重要性葛根中的有效成分种类繁多,含量不一,因此需要进行分离纯化,以获得单一成分或高纯度的成分,从而更好地发挥其药用效果。
2.2 葛根有效成分分离技术的发展目前,常用的葛根有效成分分离技术包括硅胶柱色谱、逆流色谱、高效液相色谱等。
这些技术能够有效地分离葛根中的有效成分,并且在纯度和分离效率上都有了长足的进步。
【三、对葛根有效成分提取及分离纯化工艺研究的个人观点】从简到繁,由浅入深地探讨葛根有效成分的提取及分离纯化工艺,让我对这一过程有了更深刻的理解。
在我的看来,葛根有效成分的提取及分离纯化工艺研究是一个不断完善和创新的过程,随着科技的进步和实践的不断深入,相信会有更多更高效、更环保的技术应用于葛根的提取及分离纯化过程中。
【总结】葛根有效成分提取及分离纯化工艺的研究,对于发掘和利用葛根的药用价值具有重要意义。
当前,相关研究已取得了一定的进展,但也面临着一些挑战和问题。
三种中药活性成分的提取、分离、纯化和含量测定的开题报告一、选题背景中药具有多种复杂的化学成分,其中包括许多具有生物活性的物质。
根据研究表明,中药的药效作用与其活性成分密切相关。
提取、分离、纯化和含量测定是中药活性成分研究的重要手段,也是中药现代化的必经之路。
本文选取三种常用的中药活性成分(如黄芪中的黄酮类、黄皮中的皂甙和葛根中的黄酮类)作为研究对象,探究其提取、分离、纯化和含量测定的方法和技术。
二、研究内容1. 背景介绍介绍中药活性成分的研究意义以及三种选择的中药活性成分的药理学特性和作用。
2. 提取方法选择水提法、乙醇提法、超声波提取、微波辅助提取等方法,探究其对黄芪中的黄酮类、黄皮中的皂甙和葛根中的黄酮类提取效果的影响。
3. 分离方法选择凝胶过滤色谱、逆相高效液相色谱等方法,对提取到的黄芪中的黄酮类、黄皮中的皂甙和葛根中的黄酮类进行分离,分析其纯度和结构。
4. 含量测定方法选择紫外分光光度法、高效液相色谱法等方法,测定分离纯化后的黄芪中的黄酮类、黄皮中的皂甙和葛根中的黄酮类的含量。
5. 结果分析对所选择的不同提取、分离和含量测定方法的优缺点进行比较,提出建议。
三、预期成果1. 探究选择不同方法对不同药材中的活性成分提取效果的影响。
2. 研究黄芪中的黄酮类、黄皮中的皂甙和葛根中的黄酮类的分离纯化方法,分析其纯度和结构。
3. 测定黄芪中的黄酮类、黄皮中的皂甙和葛根中的黄酮类的含量,为药用中药活性成分的质量控制提供参考。
四、研究意义本研究的结果具有一定的理论意义和实际应用价值。
可以促进中药活性成分的深入研究和现代化,有利于提高中草药药材的药效,进一步推动中草药应用的现代化和科学化。
功效成分与活性部位分离纯化和鉴定技术研究随着人们对健康的关注度不断提高,对药食同源的自然药材需求也日益增长。
然而,对于药材中的有效成分和活性部位的分离纯化和鉴定技术研究十分重要,因为这关系到其药效的提升和使用范围的拓展。
一、什么是功效成分和活性部位?药材中的功效成分是指能够产生药理学效应或达到治疗目的的物质。
而活性部位则是药材中与药效直接相关的部分,其特点是对小分子或蛋白分子具有一定的亲和力,能够与其进行反应。
因此,分离纯化和鉴定这些物质和部位就成为了药物制备和药效提升的重要保障。
二、分离纯化技术1. 薄层层析法薄层层析法是基于色谱分离原理的方法,它是一种快速、简便、经济的物质分离技术。
在对于天然产物的分离上,其优点无可比拟。
但它的分离效果和分离速度会受到实验条件的限制,因此,在实际应用过程中需要搭配其他的纯化方法同时使用。
2. 高效液相色谱法高效液相色谱法是一种在高压下利用固定相快速分离和检测各种可以分离的化合物的分析方法。
该法能快速、准确地分离和鉴定样品中多种成分,也能够对样品进行在线检测和定量测定,因此在药材活性成分纯化与鉴定中被广泛应用。
3. 膜分离技术膜分离技术是一种基于滤膜作为固定相,在压力、电化学势、液体表面张力和表面吸附等力的作用下,筛选分子大小和质量的独立过程。
膜分离技术的优点在于成本低、分离效果好、可以连续操作、适合大规模化生产等特点,广泛应用于工业和生物技术领域中。
三、鉴定技术1. 常见的方法常见的鉴别和鉴定方法包括有各种色谱法、电泳法、超高效液相色谱法、质谱法等。
其中,质谱法由于其准确性和灵敏度等特点,在鉴定药材中的活性成分方面得到了广泛的应用。
2. 基于指纹图谱的鉴定方法基于药材的指纹图谱已经成为了药材研究的重要工具,并已被政府机构和行业标准所接受。
指纹图谱的建立是通过色谱和质谱技术,对药材进行多组分、多角度和多场强下的分析。
通过比较不同批次的指纹,得出药材的特定指纹,可以鉴别和评价药材的质量和来源。
中药葛根的提取研究【摘要】本文首先随本实验的选题意义及选题依据进行简单的介绍,阐述了葛根素的药理作用,进而引入本文的研究内容。
本文的实验部分进行了详细而紧密的探讨,探讨内容包括总黄酮含量的测定方法、提取溶剂的选择、提取方法的选择。
【关键词】葛根提取工艺葛根在我过分分布单位较广,具有较好的药用价值,对各种心血管疾病、糖尿病具有较好的作用。
本课题旨在通过正交实验确定该天然药物主要成分的最佳提取工艺,并对天然提取物的稳定性进行研究。
一、仪器与药品(一)仪器:可见分光光度计,超声提取仪,B204-S型万分之一电子天平,DHG-9075A型电热恒温鼓风干燥箱。
(二)药品:葛根、无水亚硫酸钠、亚硝酸钠、焦性没食子酸、氧化钙(块状)、硫代硫酸钠、氢氧化钠(粒)、氯化钠铁、石油醚、乙醇二、总黄酮含量的测定方法称取5g葛根至于一定量的圆底烧瓶中,添加4倍的乙醇进行回流提取和超声提取,提取的时间均为3h,将溶剂蒸干,得到膏状物。
称取30mg的膏状样品置于量瓶中,量瓶的含量约为50mL,添加25mL乙醇,通过超声分散的方法将膏状物进行溶解,将乙醇添加到25mL刻度线处。
采用吸量管吸收其中的1.0mL的溶液进行实验。
采用去离子水、乙醇作为溶剂提取葛根素进行比较,选择一个较优的溶剂。
粉碎一定量的葛根至于提取瓶中,分别采用4倍、2倍的溶剂进行回流提取,提取的时间分别为1.5 h和1 h,将两次回流提取所得的提取液进行混合,浓缩成膏状物质,测量其中葛根素的含量,进而计算其中葛根素的提取率。
三、提取方法的选择采用回流提取法和超声提取法,在相同条件下进行实验,并予以比较,具体实验步骤为:采用去回流提取、超声提取作为溶剂提取葛根素进行比较,选择一个较优的方法。
所得结果如表1所示。
四、葛根素提取工艺的正交实验研究在整个实验的过程当中以葛根素的提取率为主要参考指标。
具体的实验步骤及方法是:称取10.0g的葛根粉末,加入乙醇200mL,实验过程中回流提取的时间为2h,每个样品提取5次,在1000mL的乙醇中溶解,过滤后测量其中葛根素的含量,发现葛根素的含量为39.9mg/g。
实验一葛根药材的真实性鉴定1.仪器与材料1.1 仪器生物显微镜[BA210、Motic]、镊子、载玻片、盖玻片、酒精灯、单(双)面刀片、紫外分析灯(254nm和365nm)[WFH-203B、上海精科实业有限公司]、硅胶HF254板、层析缸、天平[JH202、上海精密科学仪器有限公司]、锥形瓶、超声振荡仪[SB-5200D、宁波新芝生股份有限公司]、量筒、点样毛细管、水浴[XMTE-8112、上海精宏实验设备有限公司]。
1.2 试剂水合氯醛试液、蒸馏水、稀甘油、甲醇[分析纯AR 批号:20120508 国药集团化学试剂有限公司]、乙酸乙酯[分析纯AR 批号:T20110822 国药集团化学试剂有限公司]、氯仿[分析纯AR 批号:20131227 国药集团化学试剂有限公司]。
1.3 材料待鉴定天然药物及对应药材粉末各5份。
5份未知药材分别为葛根(豆科植物野葛Pueraria lobata(Willd.)Ohwi的干燥根)、粉葛(混乱品种:豆科植物甘葛藤Pueraria thomsonii Benth.的干燥根)、劣质葛根、未知生药1(伪品)、未知生药2(伪品);葛根制剂愈风宁心片;葛根素对照品、葛根对照药材、粉葛对照药材。
2. 实验方法2.1 葛根及粉葛的性状鉴定观察并记录(文字记录及数码采集图像)药材性状特征,鉴定其是否符合2015年版《中华人民共和国药典》相关项下标准。
葛根的性状鉴别:完整的块根呈圆柱形。
表面褐色,具纵皱纹,可见皮孔及须根痕。
质坚实。
饮片呈纵切的长方形厚片或小方块,长5-35cm,厚0.5-1cm。
外皮淡棕色,有纵皱纹,粗糙。
切面黄白色,纹理不明显。
质韧,纤维性强。
气微,味微甜。
粉葛的性状鉴定:呈圆柱形,类纺锤形或半圆柱形,长12-15cm,直径4-8cm;有的为纵切或横切的厚片,大小不一。
表面黄白色或淡棕色,未去外皮的呈灰棕色。
体重,质硬,富粉性,横切面可见由纤维形成的浅棕色同心性环纹,纵切面可见由纤维形成的数条纵纹。
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图1 葛根葛根中含多种黄酮类成分,主要活性成分为大豆素(daidzein)、大豆甙(daidzin)、葛根素(puerarin)、葛根素-7-木糖甙(puerarin-7-xyloside)等。
其主要成分为葛根素,即8-β-D-葡萄吡喃糖-4,7-二羟基异黄酮。
葛根素具有扩张冠脉和脑血管、降低心肌耗氧量、改善心肌收缩功能、促进血液循环等作用。
适用于冠心病、心绞痛、心肌梗死、视网膜动脉静脉阻塞、突发性耳聋等疾病的治疗,效果显著。
1. 萃取萃取(extraction)是利用溶质在互不相溶的两项之间分配系数的不同而使溶质得到纯化或浓缩的方法。
萃取是是工业生产中常用的分离、提取的方法之一。
如果含有目标产物的原料为固体,则称此操作为液固萃取或浸取;如果含有目标产物的原料为液体,则称此操作为液液萃取。
(1)液固萃取液固萃取通称浸取(leaching),是用液体提取固体原料中的有用成分的扩散分离操作。
生物分离过程中经常需要利用液固萃取法从细胞或生物体中提取目标产物或除去有害成分。
例如,从咖啡豆中脱咖啡因,从草莓中提取花色苷色素,从植物组织中提取生物碱、黄酮类皂苷等。
从葛根中提取和纯化药用成分-总黄酮
从葛根中提取和纯化药用成分-总黄酮
采用微波辅助萃取和AB-8型大孔树脂从葛根中提取和纯化总黄酮.分别考察了乙醇浓度、固液比、微波功率和辐射时间对提取率的影响;吸附柱类型、进液浓度、进波量、进液流速和pH值对吸附的影响和洗脱剂乙醇浓度、洗脱剂流速和洗脱剂体积量对脱附的影响,并分别确定了它们适宜的工艺条件.在适宜工艺条件下,微波辅萃总黄酮提取率为83.94%,纯化后产品总黄酮纯度迭70%.建立了AB-8型大孔树脂吸附葛根总黄酮的Freundlich等温吸附方程,模型与实验值基本相符.
作者:李岂凡白兰莉胥永张彬蒋柏泉作者单位:李岂凡,胥永,蒋柏泉(南昌大学环境科学与工程学院,江西南昌,330031)
白兰莉(新疆石河子大学化学化工学院,新疆石河子,832003)
张彬(南昌大学食品工程中心,江西南昌,330029)
刊名:安徽农业科学ISTIC PKU英文刊名:JOURNAL OF ANHUI AGRICULTURAL SCIENCES 年,卷(期):2007 35(27) 分类号:O652.62 关键词:葛根微波萃取总黄酮大孔树脂。
收稿日期:2012-03-30基金项目:浙江省大学生科技创新活动计划(新苗人才计划)资助项目(2010R410005)作者简介:景赛赛(1989-),女,浙江杭州人,学士,研究方向:中药学。
通讯作者:袁强(1965-),男,浙江杭州人,教授,博士研究生导师,博士,研究方向:中药有效成分分离、分析,复方中药有效部位群研究及中药新制剂研究。
静、解痉、抗惊厥等作用;以上化学成分的药理作用与泽兰活血调经、祛瘀消痈的功效相吻合。
经比较,山东产泽兰与本实验泽兰的挥发油均含有α-蒎烯、β-蒎烯、月桂烯、聚伞花素、γ-帖品烯、反式石竹烯、石竹素、橙花叔醇、香橙烯、棕榈酸、植物醇[2];广东产泽兰的挥发油则只有α-蒎烯、β-蒎烯、月桂烯、γ-帖品烯、反式石竹烯这五种化合物与之相同[3]。
本实验测得的泽兰挥发油所含的化合物及其含量与山东产、广东产的泽兰挥发油存在较大的差异,经分析可能为以下方面的原因:首先产地不同、生长环境的差异;其次本实验采用的泽兰是切碎的鲜品,山东产与广东产的泽兰均为干品的粗粉,有可能在干燥过程中,挥发油某些成分流失或发生转化[5]。
参考文献[1]姜良铎,焦扬.泽兰新论[J ].中医杂志,2005,46(2):156.[2]刘莉,刘强,刘怒云.气质联用法分析佩兰和泽兰中挥发油的化学成分[J ].中国实验方剂学杂志,2008,14(5)17-19.[3]李瑞珍,朱志鑫,黄晓兰,等.超临界CO 2萃取与水蒸气蒸馏法研究泽兰中挥发性有机物[J ].分析测试学报,2007,26(4):548-551.[4]侯士良.中药八百种详解[M ].郑州:河南科学技术出版社,1999:602.[5]秦泽平,黄振宇.不同干燥方法对泽兰挥发油含量的影响[J ].基层中药杂志,1995,9(1):30.中华中医药学刊葛根活性部位提取和纯化的研究景赛赛,金淦,沈超炎,袁强(浙江中医药大学第二临床医学院,浙江杭州310053)摘要:目的:提取纯化葛根活性部位。
方法:通过大孔吸附树脂,并以葛根素和葛根总黄酮的提取率为指标,优化提取纯化工艺。
结果:HPD -300型大孔吸附树脂吸附性能最佳,优化的工艺条件为1.5BV 的0.5g ·mL –1上样,流速2mL /min ;4BV 的60%乙醇洗脱,速度1mL /min ;洗脱用水量为4BV 。
结论:葛根活性部位的葛根素纯度可达27.94%,葛根素转移率87.81%;葛根总黄酮纯度可达76.42%,转移率87.29%。
关键词:活性部位;葛根素;葛根总黄酮;大孔吸附树脂;纯化中图分类号:R284.2文献标识码:A文章编号:1673-7717(2012)08-1886-04Study on Extraction and Purification of Puerarin 's Active SiteJING Sai-sai ,JIN Gan ,SHEN Chao-yan ,YUAN Qiang(The Second Clinical Medical College ,Zhejiang Chinese Medicine University ,Hangzhou 310053,Zhejiang ,China )Abstract :Objective :To extract the active site of purified Pueraria lobata .Methods :Based on the extraction yield of puerarin and its total flavones and by means of macro porous resin ,it was to optimize the extraction and purification process.Results :The adsorption of the HPD -300type of macro porous resin came to be the best.The technological con-ditions were arranged as follows :0.5g /mL of 1.5BV was used to sample with the velocity of 2mL /min ;60%ethanol of 4BV was used to wash with the velocity of 1mL /min.The total consumption of elution water was 4BV.Conclusion :The active site purity of Pueraria lobata comes to be 27.94%,and the transfer rate is 87.81%.The purity of Puerarin total flavones comes to be 76.42%,and the transfer rate is 87.29%.Key words :active site ;Puerarin ;Puerarin flavonoids ;macroporous adsorptive resins ;purification葛根为豆科植物甘葛藤(Pueraria thomsonii Benth.)的块根,我国大部分地区均有生产。
葛根是一种传统的中药材[1],在临床上常与山药等配伍使用,含有多种有效成分,如葛根素为代表的异黄酮类成分、三萜类和芳香类成分等。
其中,总黄酮是葛根中主要有效成分,而葛根素又是葛根总黄酮中含量最高的异黄酮类化合物。
药理研究表明,葛根素可降低心肌耗氧量、改善局部微循环障碍,降低血糖,还可提高视觉功能等[2]。
葛根关于葛根提取工艺的研究很多[3-4],但研究葛根活性部位提取和纯化工艺的很少有见报道。
本实验通过大孔吸附树脂,并分别以葛根素和葛根6881中华中医药学刊总黄酮的提取率为指标,优化提取纯化葛根活性部位的方法,作为葛根药理作用的活性部位,以便作进一步与山药等配伍的药理研究。
1仪器与材料1.1仪器LUMTECH 高效液相色谱仪,K -2501紫外检测器(德国Knauer 公司),色谱柱:BDS C 18(4.6mm ˑ250mm ,5μm );紫外可见分光光度计UV -2550(日本岛津公司);Sartorius-BS110S 型分析天平(北京赛多利斯天平有限公司);AB135-型十万分之一电子天平(瑞士METTLER TOLEDO 公司);R -204型旋转蒸发仪(上海申生科技有限公司);KQ5200超声波清洗器(昆山市超声波仪器有限公司);TDL80-2B 型离心机(上海安亭科学仪器厂);S.C.101-2型鼓风电热恒温干燥箱(浙江省嘉兴市新塍电器厂);HH -S 型水浴锅(巩义市英峪予华仪器厂)。
1.2材料D -101大孔吸附树脂(净品型)、HPD -100大孔吸附树脂(净品型)、HPD -300大孔吸附树脂(净品型)、HPD -450大孔吸附树脂(净品型)、D -301、AB -8大孔吸附树脂(净品型)、HPD -600大孔吸附树脂(净品型)(沧洲宝恩吸附材料科技有限公司);树脂柱等。
葛根药材均购自浙江中医药大学中药饮片厂,经浙江中医药大学药学院宋捷民教授鉴定,葛根为豆科植物甘葛藤的干燥根,批号:100601。
葛根素对照品(中国药品生物制品检定所,供含量测定用,批号110752-200912)。
木瓜蛋白酶(批号2437LJ027*******)、活性炭(批号F20100112,国药集团化学试剂有限公司)、牛血清白蛋白(上海神航生物科技有限公司)、考马斯亮蓝-G250(批号WF20090318,国药集团化学试剂有限公司)、乙腈(色谱纯美国TEDIA 公司)、水为过0.2μm 滤膜的超纯水、甲醇、正丁醇、氯仿、冰醋酸、浓硫酸等其他试剂均为分析纯,购自华东化工仪器试剂有限公司。
2方法与结果2.1大孔树脂的预处理试验中所使用的D -101、D -301、AB -8、HPD -100、HPD -300、HPD -450、HPD -600大孔吸附树脂均为净品型,乙醇充分溶胀后装柱,用水洗至无醇味即可使用。
2.2样品溶液的制备称取50g 葛根药材,加8倍量的70%乙醇,提取3次,每次2h ,合并提取液,用旋转蒸发仪回收乙醇,回收乙醇后的药液用蒸馏水定容至500mL ,做为未处理供试品溶液。
量取未处理药液50mL ,离心15min (1500r /min ),沉淀加少量热水混悬,再次离心,合并两次离心液,作为葛根样品液。
2.3含量测定方法2.3.1葛根素的含量测定精密称取葛根素对照品7.79mg ,至25mL 容量瓶中,用30%乙醇定容至刻度,摇匀,制得浓度为0.3116mg ·mL-1的葛根素对照品储备液。
精密吸取一定体积的葛根素对照品溶液,分别配制成浓度为4.87,9.74,19.48,38.95,77.90,155.80μg ·mL -1的葛根素对照品溶液,精密吸取20μL 各浓度葛根素对照品溶液注入液相色谱仪,记录峰面积。
以葛根素对照品浓度为横坐标,峰面积为纵坐标进行线性回归,得回归方程:Y =109.59X -55.715,r =0.9999。
2.3.2总黄酮的含量测定精密称取80ħ干燥至恒重的葛根素对照品7.13mg ,置25mL 容量瓶中,用95%乙醇溶解并稀释至刻度,摇匀,即得浓度为0.2852mg /mL 对照品母液。
精密吸取稀释后的葛根素对照品母液0.4,0.8,1.2,1.6,2.0mL ,分别置10mL 具塞试管中,各试管分别加95%乙醇补足至2.0mL ,再加蒸馏水至10mL ,摇匀,以2.0mL 95%的乙醇加蒸馏水至10mL 的溶液为空白对照,于250nm 测定吸光度。
以葛根素对照品浓度为横坐标(X ),吸光度为纵坐标(Y ),绘制标准曲线,得回归方程:Y =0.0683X +0.034,r =0.9992。
2.4大孔树脂型号的选择2.4.1静态吸附实验研究分别取已处理好的D -101、D -301、AB -8、HPD -100、HPD -300、HPD -450、HPD -600树脂各约2g (湿重),用滤纸吸干表面水分,精密称定,置100mL 磨口具塞锥形瓶中,精密加入葛根上样提取液,每隔5min 超声5s ,持续2h ,然后静置24h 使其达到饱和吸附,过滤,分别测定吸附余液中总黄酮和葛根素浓度,计算饱和吸附量。
表1不同型号树脂静态吸附结果树脂类型C 0(mg ·mL -1)葛根素总黄酮C r (mg ·mL -1)葛根素总黄酮Q (mg ·g -1)葛根素总黄酮HPD60024.0046.6615.0338.2967.2862.61HPD45024.0046.6616.4141.0557.0442.18HPD30024.0046.6611.5831.8092.91111.15HPD10024.0046.6614.3634.6372.3390.21AB -824.0046.6615.5138.0463.6164.55D10124.0046.6614.9733.8167.4596.16D30124.0046.6610.3527.67102.39141.87由表1可以看出:①对于葛根素,大孔树脂的吸附量Q 大小顺序是D -301﹥HPD -300﹥HPD -100﹥D -101﹥HPD -600﹥AB -8﹥HPD -450;②对于葛根总黄酮,大孔树脂的吸附量Q 大小顺序是D -301﹥HPD -300﹥D -101﹥HPD -100﹥AB -8﹥HPD -600﹥HPD -450。