反相高效液相色谱法同时测定甘草酸单铵盐原料药主成分及有关物质含量

高效液相色谱法测定甘草酸及甘草苷的含量摘要】目的：通过对茵兰益肝胶囊中甘草酸及甘草苷含量的测定进而建立对该药质量控制的方法。

方法：采用HPLC法对茵兰益肝胶囊中甘草酸及甘草苷的含量进行测定。

结果：甘草苷在0.0816～1.36 μg范围内具有良好的线性关系；甘草酸单铵盐在0.1342～2.6848μg范围内具有良好的线性关系。

结论：该方法操作简单易行，线性关系良好，有较好的稳定性和重复性。

【关键词】甘草酸；甘草苷；含量测定；HPLC【中图分类号】R927.2 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752（2016）09-0387-02该药是即将报批的六类新药，由丹参、党参、甘草、黄芪、郁金、黄精等中药提取加工而成，具有清热利湿，补裨益血，益气解郁的作用。

用于慢性肝炎、早期肝硬化、脂肪肝、中毒性肝炎等疾病的治疗。

甘草中的甘草酸和甘草苷为两个代表性的指标性成分，通常被做为质量评价的依据[1]。

1.材料1.1 仪器：安捷伦液相色谱仪1100系列，包括：G1310A 四元液相梯度泵，G1313A 自动进样器，G1314 VWD检测器，CO-201柱温箱，安捷伦色谱工作站；电子分析天平（AB204-N）；超声仪（AS3120）；水浴锅1.2 试剂：甲醇（分析纯，色谱纯）、乙腈（色谱纯）、乙醇（分析纯）、正丁醇（分析纯），均为天津市康科德科技有限公司生产（规格为500mL）；磷酸（分析纯），为天津市风船化学试剂科技有限公司生产（规格为500mL）；甲酸（分析纯），为天津化学试剂一厂生产（规格为500mL）；去离子水（娃哈哈纯净水）；微孔滤膜（13×0.45，有机系），为上海密粒膜分离技术有限公司生产1.3 药品：茵兰益肝胶囊（批号：A100587、A100921、A100345）；甘草酸对照品、甘草酸单铵盐对照品，均购自中国药品生物制品检定所；阴性对照品，由实验室根据药方自制2.方法[1~3]2.1 色谱条件色谱柱：Diamonsil C18 (5?m，250×4.6mm) No.8037753；流动相：乙腈-0.05%磷酸溶液，梯度洗脱,条件为0～8min（20:80），8～25min（20:80～50:50），25～30min（50:50～100:0），30～31min（100:0～20:80），31～36min（20:80）；流动相流速：1mL?min-1；检测波长：237nm；进样量：20?L；柱温：30℃2.2 溶液制备2.2.1对照品溶液制备精密称取甘草苷对照品3.40mg置25mL容量瓶内，加70%甲醇定容至刻度，摇匀，制成甘草苷对照品储备液（0.136mg?mL-1）；精密称取甘草酸单铵盐对照品8.39mg置25mL容量瓶内，加70%甲醇定容至刻度，摇匀，制成甘草酸单铵盐对照品储备液（0.3356 mg?mL-1）。

基于高效液相技术的甘草酸释放量测定及其应用甘草酸是一种重要的活性成分，具有抗炎、抗氧化、抗癌、降血糖等多种药理作用。

因此，对甘草酸的释放量进行准确测定及应用研究具有重要的科研和应用价值。

基于高效液相技术的甘草酸释放量测定及其应用成为当前研究的热点。

1. 高效液相技术测定甘草酸释放量的原理和方法高效液相技术（HPLC）是一种高效、高灵敏度的分析技术，被广泛应用于药物分析中。

利用HPLC技术测定甘草酸的释放量，主要包括以下几个步骤：（1）样品制备：将含有甘草酸的样品溶解在适当的溶剂中，并经过适当的处理（如离心、过滤等）得到清晰的样品。

（2）色谱柱选择：根据甘草酸的理化性质选择适合的色谱柱，常用的有C18和C8色谱柱。

（3）流动相制备：根据甘草酸的极性和特性，选择合适的流动相，如甲醇-水体系，并进行适当的梯度洗脱。

（4）检测器选择：根据甘草酸的特性选择合适的检测器，如紫外检测器（UV）。

（5）样品进样和分析：将样品注入色谱柱进行分析，利用HPLC系统的高压泵和流速控制器进行精确的梯度洗脱，利用紫外检测器检测甘草酸的峰面积，并通过对照品建立标准曲线计算甘草酸的释放量。

2. 高效液相技术测定甘草酸释放量的应用（1）药物质量控制：利用HPLC技术测定甘草酸的释放量，可以对药物质量进行控制。

通过检测甘草酸的释放量，可以了解药物的溶解特性和释放速度，为药品的制剂工艺和质量标准的制定提供科学依据。

（2）药物疗效评价：甘草酸作为药物的活性成分，其释放量与药物的疗效密切相关。

通过测定甘草酸的释放量，可以评价药物的疗效和治疗效果，为临床用药提供参考。

（3）药物相互作用研究：许多药物在同时使用时会发生相互作用，影响药物的吸收和代谢。

利用HPLC技术测定甘草酸的释放量，可以研究药物相互作用的机制和影响，为合理应用药物提供指导。

（4）药物开发研究：利用HPLC技术测定甘草酸的释放量，可以评价新药的溶解性和释放动力学，并优化药物的制剂工艺和剂型，提高药物的生物利用度和疗效，为新药的开发提供科学依据。

反相高效液相色谱法测定竺黄复方片中甘草酸的含量(1)【摘要】目的采用反相高效液相色谱（RP??HPLC）法测定竺黄复方片中甘草酸的含量。

方法采用kromasil C18柱（200 mm×4.6 mm,5 μm），以甲醇-0.2 mol?L-1乙酸铵-冰乙酸（65∶35∶1）为流动相，流速1 ml?min-1，柱温30 ℃，检测波长250 nm。

结果在0.402～2.010 μg之间，峰面积与进样量的线性关系为A= 673 028.287 8C -67 302.707 6（r=0.999 8），平均回收率为99.66％。

测得3批样品中甘草酸的含量（以甘草酸铵计）分别为1.034，1.103和1.008 mg/片。

结论所建方法简便、准确、重复性好，可用于竺黄复方片的质量控制。

【关键词】竺黄复方片；甘草酸；反相高效液相色谱法Abstract：ObjectiveTo establish an HPLC method to determine glycyrrhizic acid from prescription of Zhuhuang Tablet.MethodsThe column w as kromasil C18 (200 mm×4.6 mm,5 μm), the mobile phase consisted of Methanol～0.2 mol?L-1Ammonium acetate- Glacial acrtic acid (65:35:1), with the flow rate of 1 ml?min-1 and the UV detector was set at 250 nm.ResultsThe method showed a good range of 0.402～2.010 μg (r=0.999 8).The average recovery was 99.66%.Theglycyrrhizic acid contents of three batch samples were 1.034, 1.103，1.008 mg, respectively.ConclusionThis method is simple, accurate, repeatable and suitable for the determination of glycyrrhizic acid in prescription of Zhuhuang Tablet. Key words：Prescription of Zhuhuang Tablet； Glycyrrhizic acid; RP?CHPLC 竺黄复方片由甘草、力嘎都、牛黄、红花、榜嘎（唐古特乌头）等九味药材组成，具有利肺、消炎、止痛的功效，用于小儿流感引起的肺炎、上呼吸道感染等［1］。

高效液相测甘草酸释放量的可靠性评价及验证方法探索一、引言甘草酸是一种天然的药物成分，具有广泛的药理作用和临床应用价值。

在制药领域中，准确测定甘草酸的释放量对于药物质量控制非常重要。

本文将探索高效液相法测定甘草酸释放量的可靠性评价和验证方法。

二、方法1. 准备样品首先，收集不同批次的含有甘草酸的样品。

将样品粉碎并均匀混合，取样量一致。

2. 高效液相测定采用高效液相色谱仪进行甘草酸的测定。

优化色谱条件，选取适当的柱和流动相。

设置合适的检测波长，并根据样品特性确定合适的进样量和检测时间。

3. 可靠性评价为了评估高效液相测定甘草酸释放量的可靠性，我们可以采取以下措施：- 重复性：在相同的条件下，重复测试同一批次的样品。

重复测定应该具有较小的变异系数，以确保测定结果的稳定性。

- 中间精确度：在不同的实验室和不同的操作员之间进行测试，并计算出不同实验室之间的变异系数，以评估该方法的可重复性和可移植性。

- 限制的可靠性：确定方法的检测限和定量限，并评估测定结果的精确度和准确度。

4. 验证方法对于高效液相测定法，我们还应该进行方法的验证，以确保其可靠性和准确性。

主要的验证参数包括：- 线性范围：确定甘草酸浓度的线性范围，验证方法是否适用于不同浓度的样品。

- 精密度：通过重复测定同一样品的甘草酸含量，评估方法的精密度。

- 准确度：将高效液相测定结果与参考方法进行比较，评估方法的准确度。

- 选择性：测试其他可能存在的干扰物质对甘草酸测定的影响，并评估方法对干扰物质的选择性。

三、结果分析根据可靠性评价和验证方法的结果，我们可以获得高效液相测定甘草酸释放量的可靠性评价和验证结果。

通过重复性和中间精确度的评估，我们可以得到测定结果的稳定性和可重复性。

通过限制的可靠性评价，我们可以判定高效液相测定法的精确度和准确度。

四、结论本研究探索了高效液相测定甘草酸释放量的可靠性评价和验证方法。

通过评估重复性、中间精确度和限制的可靠性，我们可以验证该方法的可靠性。

反相高效液相色谱法同时测定甘草酸单铵盐原料药主成分及有关物质含量赵燕燕;刘丽艳;韩媛媛;李月秋;王艳;石敏健【摘要】建立了同时测定甘草酸单铵盐原料药中主成分18α-甘草酸、18β-甘草酸及其有关物质A、有关物质B含量的高效液相色谱法,并川于其质量标准的建立采用Durashell C18色潜柱(250 mm ×4.6 mm,5μm),以10mmol/L高氯酸铵(氨水调节pH 8.20)-甲醇(48∶52,v/v)为流动相,流速0.80 mL/min,检测波长 254 nm,柱温50℃,进样量10 μL.在优化的色谱条件下,18α-甘草酸、18β-甘草酸、有关物质A、有关物质B在0.50～ 100 mg/L范围内线性关系良好(r＞0.9999),检出限分别为0.15、0.10、0.10、0.15 mg/L,平均回收率在97.32％～99.33％之间(n=3),相对标准偏差(RSD)在0.05％～1.06％之间.本方法检测灵敏、重现性好,结果准确可靠,可川于甘草酸单铵盐原料药主成分及有关物质的检测分析,有利于其原料药的质量控制.【期刊名称】《色谱》【年(卷),期】2013(031)009【总页数】6页(P869-874)【关键词】反相高效液相色谱法;甘草酸单铵盐;主成分;有关物质;原料药【作者】赵燕燕;刘丽艳;韩媛媛;李月秋;王艳;石敏健【作者单位】河北大学医学实验中心,河北保定071000;河北大学化学与环境科学学院,河北省分析科学技术重点实验室,河北省化学生物学重点实验室,河北保定071002;河北大学医学实验中心,河北保定071000;河北大学医学实验中心,河北保定071000;河北大学医学实验中心,河北保定071000;河北大学化学与环境科学学院,河北省分析科学技术重点实验室,河北省化学生物学重点实验室,河北保定071002;河北大学化学与环境科学学院,河北省分析科学技术重点实验室,河北省化学生物学重点实验室,河北保定071002【正文语种】中文【中图分类】O658甘草酸单铵盐1992年被国家卫生部定为治疗慢性肝炎的首选药物，其原料药主成分是18α-甘草酸（18α-glycyrrhizic acid，18α-Gly）和18β-甘草酸（18β-glycyrrhizic acid，18β-Gly），以及2个主要的有关物质，分别命名为有关物质A和有关物质B。

反相高效液相色谱法测定复方甘草甜素片三组分的含量田莉;高晓黎;云琦【期刊名称】《新疆医科大学学报》【年(卷),期】2005(028)001【摘要】目的:建立测定复方甘草甜素片中甘草酸单铵盐及两种氨基酸含量的方法.方法:采用RP-HPLC法测定复方甘草甜素片三组分的含量. 流动相为乙腈∶0.025 mol/L NaAC-DMF(40∶60,v/v),固定相为ZORBAX SB-C18色谱柱(250mm×4.6 mm, 5 μm),双波长检测,检测波长256 nm和360 nm.结果:甘草酸单铵盐在40 ng/ml～300 μg/ml范围和两种氨基酸在20 ng/ml～120 μg/ml范围线性相关良好(r=0.999 6,r=0.999 7,r=0.999 8),回归方程为Y=14 318X+724.64, Y=265 416X, Y=142 768X-5 023,平均回收率分别为98.41%(RSD=1.80%)、101.36%(RSD=1.20%)和101.56%(RSD=2.05%). 结论:HPLC法测定复方甘草甜素片中三组分简便、准确、重现性好,可作为该制剂质量检验的定量方法.【总页数】3页(P27-29)【作者】田莉;高晓黎;云琦【作者单位】新疆医科大学药学院药剂教研室,新疆,乌鲁木齐,830054;新疆医科大学药学院药剂教研室,新疆,乌鲁木齐,830054;新疆特丰药业股份有限公司,新疆,乌鲁木齐,830054【正文语种】中文【中图分类】R927.2;R974.2【相关文献】1.反相高效液相色谱法同时测定洁康舒洗剂中三组分的含量 [J], 刘腊娥;陈立新;魏萍;王绪明2.反相高效液相色谱法测定聚甲酚磺醛溶液中三组分含量 [J], 杨永钢;孙国祥;何佳;万月生3.反相高效液相色谱法测定复方替硝唑栓三组分含量 [J], 郑芳;朱雪松;何婧4.注射用复方甘草甜素三组分的含量测定 [J], 李红菊;张向荣;李三鸣;杨婷媛;5.用反相高效液相色谱法同时测定复方酮康唑软膏中三组分的含量 [J], 吴博;王铁柱;拜年;刘冰;宋洪涛因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

高效液相色谱法测定两种中药颗粒中甘草酸含量【摘要】目的：探讨高效液相色谱法测定两种中药颗粒中甘草酸含量，并且论述了其提取工艺。

方法：应用高效液相色谱法同时测定复方甘草酸苷颗粒和甘草酸二铵颗粒的2份样品中甘草酸的含量，并分析比较了提取方法和测定条件。

结果：甘草酸在276nm处有最大吸收，最佳提取条件为：乙醇用量6倍于样品质量，提取温度为60℃，pH值为12。

同时在测定中，操作简便迅速，准确度和精密度均较理想，重现性好。

结论：高效液相色谱法测定复方甘草酸苷颗粒和甘草酸二铵颗粒中的甘草酸，操作简便迅速，精密度和准确度均较理想，稳定性强，回收含量高，值得推广应用。

【关键词】高效液相色谱法；复方甘草酸苷颗粒；甘草酸二铵颗粒；甘草酸本文建立了一种高效液相色谱分析方法来测定两种中药的甘草酸含量。

结果表明该方法操作简便迅速，精密度和准确度均较理想，稳定性强，回收含量高，可为测定中中药颗粒中甘草酸物质提供方法依据。

现报告如下。

1 材料与仪器试剂：95% 乙醇；无水乙醇；氯仿；正丁醇；丙酮；无水乙醚；盐酸；碳酸钡；；乙酸酐，以上试剂均为分析纯。

仪器：UV-2401P紫外分光光度仪(岛津公司)，TG328B光电分析天平(岛津公司)；CKQ-250DE型数控超声波清洗器(昆山市超声仪器有限公司)。

gilentlloo高效液相色谱仪(岛津公司)；HH-s2系列恒温水浴锅(岛津公司)；FTIR-8400S型红外光谱仪(岛津公司)；GSP-84-02型磁力恒温搅拌器(岛津公司)。

复方甘草酸苷颗粒(万通药业公司，批准文号：国药准字Z23020820/Z23020822)。

甘草酸二铵(北京制药厂，国药准字H20056547)。

2 方法与结果2.1 甘草酸的提取复方甘草酸苷颗粒和甘草酸二铵颗粒各100mg加入6倍体积量(V/V)的60%乙醇，NaOH饱和溶液调节pH至12，温度：60℃，加热回流提取2次，得到提取液200ml，然后进行减压浓缩得到浓缩液约100ml。

高效液相法测定甘草中甘草酸的含量
傅密宁;戴富宝;郑汉臣;傅克治
【期刊名称】《第二军医大学学报》
【年(卷),期】1989(10)3
【摘要】甘草为最常用的中药。

甘草酸(Glyc-yrrhizic acid)是其主要有效成分之一。

傅克治等曾报道用重量法测定黑龙江省野生与实验栽培甘草根中的甘草酸含量。

李荣春等用高效液相色谱(HPLC)法测定过西北地区产的甘草浸膏中甘草酸的含量。

为了探讨制订合理栽培甘草药材的质量标准和最佳采集期,我们用HPLC法测定了
黑龙江省人工栽培1、2、3年生甘草实生根中甘草酸的含量,并与同地野生商品根
作了比较。

【总页数】3页(P257-258)
【关键词】甘草;甘草酸;液相色谱
【作者】傅密宁;戴富宝;郑汉臣;傅克治
【作者单位】黑龙江中医研究院;第二军医大学药学院精密仪器室,生药教研室
【正文语种】中文
【中图分类】R284.1
【相关文献】
1.高效液相色谱法测定复方甘草酸苷氯化钠注射液中的甘草酸单铵含量 [J], 邓岩辉;孟祥军;仲蕊
2.高效液相色谱法测定复方甘草酸单铵S氯化钠注射液中的甘草酸单铵S的含量
[J], 禚旭晶;苑振亭
3.反相高效液相色谱法测定复方甘草酸铵注射液中甘草酸铵含量 [J], 刘淑华因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

高效液相色谱法测定甘草苷和甘草酸含量甘草是蕴藏量大、药用价值高的一种荒漠草原药用植物，其主要有效成分为甘草酸和黄酮类化合物。

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以下是高效液相色谱法测定甘草苷和甘草酸含量介绍：目的建立甘草苷和甘草酸的HPLC含量测定方法。

该方法操作简便、准确，线性相关系数良好，且稳定性和重复性好，适用于甘草黄酮粗提物及纯化物中甘草苷和甘草酸的含量测定。

经典的黄酮含量测定方法，是以芦丁为对照品，采用紫外分光光度法测定，但此方法用于甘草黄酮的测定尚有诸多不足之处。

甘草黄酮的主要成分甘草苷，是反映甘草黄酮内在质量的一个重要指标［6］。

本研究以甘草苷为对照品，采用HPLC法测定甘草黄酮含量的方法，同时研究优化以HPLC测定甘草酸含量的方法，以期为甘草有效成分的综合开发利用和质量监控提供新的方法和思路。

1仪器与材料1.1仪器：高效液相色谱仪；可变紫外检测器；万分之一天平；超声波清洗器。

1.2材料甘草。

甘草苷对照品、甘草酸单铵盐对照品；95%乙醇、冰醋酸、乙酸胺、甲醇（色谱纯）、乙腈（色谱纯）。

2方法与结果2.1色谱分析条件2.1.1甘草苷检测条件色谱柱为KromasiL-C18（4.6mm×200mm，5μm）；流动相为乙腈-0.5%醋酸（20∶80）；紫外检测波长：276nm；流速 1.0ml·min-1；柱温为室温；进样量20μl。

理论塔板数按甘草酸铵峰计算应不低于4000。

对照品和甘草黄酮粗提物的色谱图见图1～2。

2.1.2甘草酸检测条件色谱柱为KromasiL-C18（4.6mm×200mm，5μm）；流动相为甲醇-0.2mol·L-1乙酸铵溶液-冰醋酸（67∶32∶1）；紫外检测波长252nm；流速1.0ml·min-1；柱温为室温；进样量20μl。