免疫功能检查及临床意义
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免疫功能检查及临床意义
一、体液免疫
【SIgA(分泌性免疫球蛋白A)】
分泌液中的IgA称为分泌性IgA(SIgA)。SIgA中的分泌片由粘膜上皮细胞合成,是一种糖蛋白,可抵御外分泌液中蛋白水解酶的作用。SIgA是多种细胞和病菌的中和抗体,主要在粘膜部分起作用。当呼吸道受到感染或接受气雾疫苗免疫时,呼吸道中的分泌性IgA将显著升高。
[检测方法]:RIA法
[参考值]:血清SIgA 13.14±7.60mg/L
[临床意义]:血清SIgA增高
常见于原发性胆汁性肝硬化,胆道阻塞,急性病毒性肝炎,慢性肝实质病变和酒精性肝硬化。
【IgA(免疫球蛋白A)】
免疫球蛋白A的基本结构是由两条重链和两调轻链组成,它可以有不同的聚合形式,从单体到五聚体不等。
[检测方法]:RIA法
[参考值]:正常人血清IgA含量2.500±0.752 g/L
[临床意义]:
1、血清IgA增高
IgA骨髓瘤,慢性炎症,结缔组织疾患及肿瘤。
2、血清IgA降低 选择性IgA缺乏症。
【IgE(免疫球蛋白E)】
正常人血清中IgE含量极低。
[检测方法]:RIA法
[参考值]:男性31~535μg/L(631±128U/L)
女性31~2000μg/L(337±60U/L)
[临床意义]:
血清IgE升高主要见于过敏性疾病及免疫性疾病。常见于特发性喘息,鼻炎,变应性皮炎,寄生虫感染,急、慢性肝炎,肝硬化,原发性肝癌,SLE,IgE骨髓瘤,慢性淋巴细胞性白血病,结节病等。血清IgE可用于类风湿性关节炎和风湿性关节炎的鉴别诊断,类风湿性关节炎患者血清IgE明显增高,而风湿性关节炎患者血清IgE维持低水平。
【IgM(免疫球蛋白M)】
IgM是一种最有效的凝聚抗体,有很强的激活补体的能力。IgM分子在血清中含量不高,只占Ig总量的6%左右。在个体发育中IgM是最早合成的抗体,胚胎后期就能合成。IgM不能通过胎盘,脐血中出现针对某种微生物的IgM,表示胚胎期有相应病原微生物如梅毒螺旋体,风疹病毒或巨细胞病毒感染,称之为胚胎感染或垂直感染。IgM也是免疫最后出现的抗体,机体经细菌感染或是疫苗接种后,最先出现的抗体是IgM,以后是IgG。另外,天然的血型抗体(凝集素)为IgM,血型不符的输血容易造成严重的溶血反应。
[检测方法]:RIA法
[参考值]:正常人血清IgM含量0.812±0.472g/L
[临床意义]: 1、血清IgM升高
常见于急性感染、急性病毒性肝炎、肝硬化、胆汁性肝硬化等。原发性高血压恶性期、原发性巨球蛋白血症、u链病、良性M球蛋白血症(IgM型)时,患者血清中升高的IgM为单克隆性M蛋白。
2、血清IgM降低
常见于乙、丙种球蛋白不全症,Wiskote-Aldieh综合征。
【IgG(免疫球蛋白G)】
IgG在整个免疫球蛋白中含量最多,约占75%左右。血清中80%的抗细菌,抗病毒抗体属于IgG。
[检测方法]:RIA法
[参考值]:正常人血清IgG含量11.20±2.30g/L
[临床意义]:
1、血清IgG水平增高
见于原发性高血压恶性期,IgG型多发性骨髓瘤,淋巴瘤,转移性肿瘤,慢性活动性肝炎,类风湿性关节炎,SLE,肺结核,慢性化脓性感染,骨髓炎,传染性单核细胞增多症,亚急性细菌性心内膜炎。
2、血清IgG水平降低
低丙种球蛋白血症,何杰金氏病,淋巴肉瘤,剥脱性皮炎,肾病综合征,恶性贫血,胃肠道疾病(如消化不良综合征,肠梨形鞭毛虫感染等)。
二、细胞免疫
(一)T细胞亚群测定 利用抗T细胞不同表面抗原的单克隆抗体如抗CD 3,抗CD 4,抗CD 8对外周血单个核细胞进行检测,依CD 3+(T3),CD 4+(T4)和CD 8+(T8)细胞的阳性率,判定人总T细胞,T辅助细胞(TH/TI),T抑制/杀伤细胞(TS/TC)亚群的分布。
[检测方法及参考值]
1、免疫荧光法
参考值:T3细胞(总T3细胞):阳性率71.5±6.2%
T4细胞(TH/TI):阳性率45.5±5.3%
T8细胞(TS/TC):阳性率27.9±5.3%
2、免疫酶法:参考值同免疫荧光法
3、流式细胞术
参考值:CD 3细胞(总T3细胞):阳性率64.60±10.71%
CD 4细胞(TH/TI):阳性率36.88±8.77%
CD 8细胞(TS/TC):阳性率25.69±6.46%
[临床意义]:
1、计数T细胞总数
各细胞亚群绝对计数及百分数,计算各T细胞亚群所占T细胞总数的比例,从而了解机体细胞免疫的情况。
2、研究临床某些疾病的发病机制
健全的细胞免疫功能,对限制和排除与组织结合的传染性及非传染性异物都是必不可少的。从抗感染免疫角度讲,适当的细胞免疫反应能防止和消除病原微生物的感染。如病毒、细胞内寄生菌、真菌、及寄生虫等传染性因子,在诱发特异性细胞免疫中,由活化T细胞释放的淋巴因子,对病原微生物有直接或间接的抑制或杀伤作用,并对该微生物再感染建立起特异性免疫力。细胞免疫缺损者,如T细胞总数(T3)减少,T4亚群比例下降等容易形成慢性持续性感染或病原微生物携带状态。
3、迟发型超敏反应与T细胞亚群的关系
迟发型超敏反应是在抗原致敏的宿主体内由致敏T细胞与抗原接触而激发。本反应的致敏T细胞通常为迟发型超敏反应T细胞(TD),属于辅助性/诱导性T细胞亚群(T4)。TD因受抗原刺激而活化、增殖并产生和释放淋巴因子,引起比较缓慢的严重反应,一般接触抗原后18~72h方出现。如OT试验等。
4、T细胞免疫与肿瘤的关系
一般认为在排斥肿瘤的免疫反应中,细胞毒T细胞(Tc)发挥重要作用。破坏肿瘤细胞的机制是通过期抗原受提识别瘤细胞上的特异性抗原,并与之结合而特异性的杀伤。或通过释放淋巴因子杀伤肿瘤细胞。但如果肿瘤的抗原性较弱,特异性T细胞效应的发挥即受到一定限制。多数检测结果表明,肿瘤晚期患者T细胞总数减少,T4/T8比例失调。
5、T细胞免疫与移植排斥的关系
与一般免疫反应应答一样,移植排斥反应的物质亦包括抗体和致敏淋巴细胞。抑制抗原说现由巨噬细胞摄取、处理,然后递呈给TH细胞,巨噬细胞同时释放IL-1,使TH细胞激活。活化的TH细胞分泌IL-2,使Tc细胞前体分化成熟为Tc细胞,对移植物具有杀伤活性。急性排斥反应的机制,早期以细胞免疫为主。主要的病理变化,一般在早期以单个核细胞(主要是T细胞)为主的细胞浸润,血管损伤,组织变性坏死等。
6、细胞免疫与肿瘤治疗
转输肿瘤患者自身的、经体外增殖、激活的淋巴细胞,使之在体内继续发挥免疫效应是肿瘤过继免疫治疗的一个途径。这些激活的淋巴细胞多为各T细胞亚群。
(二)白细胞介素 【IL-2(白细胞介素2)】
白细胞介素2具有广泛的免疫调节活性和其他生物活性。
IL-2是机体最强有力的T细胞生长因子,是保障机体正常免疫功能的关键因子,IL-2可通过促使某一特定T细胞群体的克隆性扩增,通过T细胞数目及功能的提高来增强机体的免疫功能。IL-2可诱导或促进多种细胞毒性的活性(如NK,CTL,LAK,TIL)。IL-2对B细胞的生长及分化均有一定作用,以证实多种B细胞表面表达IL-2受体。
[检测方法及参考值]
1、RIA法:5.0±1.5μg/L 2、ELISA法:200±50ng/L
[临床意义]
1、血清IL-2水平降低
可见与老年人、肿瘤病人、白血病人和一些免疫功能缺陷的病人。
2、测定血清IL-2水平可以观察肿瘤和白血病人的病情变化,预测治疗的效果,对肿瘤免疫的研究有很大的价值。
【IL-6(白细胞介素6)】
IL-6的来源很广泛,产生细胞主要为单核巨噬细胞、活化T细胞,其次是纤维母细胞、内皮细胞、平滑肌细胞。IL-6化学本质是一种糖蛋白。
[检测方法及参考值]:ELISA法10.8±5.1ng/L
[临床意义]
1、免疫异常性疾病
这些疾病临床较为常见,常有发热、淋巴结肿大、血沉加快、急性期蛋白增高、高γ球蛋白血症、自身抗体阳性等症状,近年来发现这些症状与IL-6的异常表达密切相关,起病因可能是异常增多的IL-6使多克隆或单克隆B细胞功能紊乱或亢进,产生大量的异常Ig,导致机体的一系列兵力过程和临床症状。
2、多克隆B细胞异常及自身免疫疾病
心房内粘液瘤噬最早观察到与IL-6有关的疾病,Hirano等已发现心房粘液瘤细胞培养上清中含有较高浓度的IL-6,Northern印记一证实粘液瘤细胞可表达高水平的IL-mRNA。
类风湿关节炎(RA)为常见的自身免疫系统疾病,IL-6在RA发病中起重要作用。RA患者持续产生IL-6克部分解释患者局部及全身症状,如自体及浆细胞瘤和多发性骨髓瘤的自分泌生长因子,IL-6和IL-6基因表达失调是该类疾病发病的主要机制。
鉴于IL-6的这一病理学效应,提示可利用IL-6或IL-6R拮抗剂治疗这一类疾病。Lennert,St淋巴瘤,该类患者来源的T淋巴瘤细胞在体外呈现M功能,且抗IL-6可抑制该种细胞的生长,表明IL-6是Lennert,St淋巴瘤增值的主要因子。
增生性肾小球肾炎(PGN),已发现IL-6是PGN患者肾小球系膜细胞的自分泌生长因子,在PGN患者尿中可查出高水平的IL-6,且与该疾病的预后有关。
3、IL-6与甲状腺疾病
亚急性甲状腺炎发作期间,患者血中IL-6水平明显升高,当病情缓解后,其浓度则恢复正常;胺碘酮(AMD)所致甲减IL-6正常,Ⅰ型AMD甲亢患者IL-6轻度升高,Ⅱ型AMD甲亢患者IL-6明显高于正常;这些都与甲状腺细胞的破坏有密切关系。
4、其它
IL-6水平增高还与多种临床疾病有关,如急慢性炎症,烧伤,移植排斥等。IL-6水平上升多见于急性期蛋白的出现。因此,IL-6检测可作为炎症反应的早期指标。 【IL-8(白细胞介素8)】
多种细胞如单核-单核巨噬细胞、成纤维细胞、内皮细胞、表皮细胞等受到一定刺激后均可产生IL-8。IL-8的主要生物学活性是趋化并激活中性粒细胞,促进中性粒细胞的溶酶提酶活化和吞噬作用。对嗜碱粒细胞和T细胞也有一定的趋化作用。
[检测方法及参考值]
1、双抗体夹心ELISA法
需先用LPS和PHA诱生受检细胞产生IL-8再行测定,一般可测出每小孔0.1ng含量,用脂多糖刺激人肺巨噬细胞或单个核细胞,其培养上清中IL-8含量为800ng/ml,由抗原或丝裂原刺激人淋巴细胞可得100ng/mlIL-8。若采用ELISA以多克隆包被,酶标记单抗F(ab′)2位二抗,其敏感度可达2.5pg/mlIL-8。
2、放射性核素竞争抑制法
可测生物体液中低浓度的IL-8,检出下限为0.6ng/ml,特异性高。
[临床意义]
在许多感染疾病中,见有IL-8水平增高。如进展期成人呼吸窘迫综合征(ARDS)病人支气管肺泡灌洗液中IL-8水平明显高于非ARDS病人。早期灌洗液中出现IL-8可作为ARDS病情恶化的指标性诊断指标。细菌性尿路感染病人可见有IL-8升高,其水平与中性粒细胞数成高度相关。IL-8还与感染引起的不育有关,据认为IL-8可望成为白细胞精子不育症的诊断指标。
据报道IL-8还参与多种疾病的病理过程,包括类风湿性关节炎,银屑病(牛皮癣),肺纤维化和石棉肺等疾病。因此检测IL-8有临床实际意义。