1.1DNA重组技术的基本工具练习

1.1 DNA重组技术的基本工具学习目标1.解释基因工程的概念2.说明三种基本工具的作用3.认同基因工程的诞生和发展离不开理论研究和技术支持4.运用所学DNA重组技术的知识模拟制作重组DNA模型学习重点DNA重组技术所需的三种基因工具的作用知识回顾1、DNA含有指导生物体生命活动的，每个DNA分子包含着成百上千个基因，基因控制着的合成。

研究证实，遗传密码在动物、植物和微生物之间是的。

2、DNA的基本组成单位是，它包含3部分分别是、、。

在右侧画出由A、T、G、C四种碱基组成的四种核苷酸组成的DNA分子的平面结构图，并说出DNA分子结构的特点：①②③预习导学一、基因工程概念1、概念：基因工程又是指按照人们的意愿，进行严格的设计，并通过体外______________和_________________等技术，赋予生物以新的_______________，从而创造出更符合人们需要的新的_______________和________________。

由于基因工程是在_____________________上进行设计和施工的，因此又叫做_____________。

2、理解：操作环境：；操作对象：；操作水平：；基本过程___________________________________________实质：_______________；结果：__________________。

二、DNA重组技术的基本工具1、“分子手术刀”——__________________________⑴来源：主要是从________________________________来的。

⑵作用：能够识别双链DNA分子的某种____________________________，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的__________________________断开。

⑶结果：经限制酶切割产生的DNA片段末端通常有两种形式：_______________和________。

专题1 基因工程1.1 DNA重组技术的基本工具【知识积累巩固】基因工程的概念:是指按照人们的愿望，进行严格的设计，通过体外DNA重组和转基因等技术，赋予生物以新的遗传特性，从而创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。

基因工程是在DNA分子水平上进行设计和施工的，又叫做DNA重组技术。

强调:操作环境( ),优点（与杂交育种相比：,与诱变育种相比：）,操作水平( ),原理( )。

基因工程的基本工具:1.“分子手术刀”—（1）主要是从生物中分离纯化出来的。

（2）功能：能够识别分子的某种特定的核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的断开，因此具有专一性。

（3）结果：2.“分子缝合针”—:3.“分子运输车”—（1）载体具备的条件：①具有一至多个限制酶切点，②能在受体细胞中复制并稳定保存。

③具有标记基因，（2）最常用的载体是，它是一种裸露的、结构简单的、独立于细菌拟核之外，并具有自我复制能力的很小的双链环状分子。

真正用作载体的都是在天然的基础上进行过人工改造的。

（3）其它载体：注意与细胞膜上载体的区别，两者的化学本质和作用（相同、不同）。

【典题分类精析】考点一、基因工程的概念例1．（2005高考广东）以下有关基因工程的叙述，正确的是（）A、基因工程是细胞水平上的生物工程B、基因工程的产物对人类都是有益的C、基因工程产生的变异属于人工诱变D、基因工程育种的优点之一是目的性强考点二、基因工程的基本工具例2.下列关于限制酶的说法不正确的是A．限制酶广泛存在于各种生物中，微生物中很少分布B．一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列C．不同的限制酶切割DNA的切点不同D．限制酶的作用是用来提取目的基因例3．在基因工程中用来完成基因的剪接的工具是A．限制酶和连接酶B．限制酶和水解酶C．限制酶和运载体D连接酶和运载体例4．有关基因工程的叙述正确的是A．限制酶只在获取目的基因时才用B．重组质粒的形成是在细胞内完成的C．质粒都可以作为运载体D．蛋白质的氨基酸排列顺序可以为合成目的基因提供线索点评：解答本题时要综合考虑基因工程的基本工具的特点、条件、适用范围。

高中生物选修3 教材答案【精心校对、修改版】♫1.1 DNA重组技术的基本工具（一）思考与探究1.限制酶在DNA的任何部位都能将DNA切开吗？以下是四种不同限制酶切割形成的DNA 片段：(1) …CTGCA (2) …AC (3) GC…（4）…G…G …TG CG……CTTAA(5) G… (6) …GC(7) GT…(8)AATTC…ACGTC… …CG C A…G…你是否能用DNA连接酶将它们连接起来？答：2和7能连接形成…ACGT……TGCA…；4和8能连接形成…GAATTC……CTTAAG…；3和6能连接形成…GCGC……CGCG…；1和5能连接形成…CTGCAG……GACGTC…。

2.联系你已有的知识，想一想，为什么细菌中限制酶不剪切细菌本身的DNA？提示：迄今为止，基因工程中使用的限制酶绝大部分都是从细菌或霉菌中提取出来的，它们各自可以识别和切断DNA上特定的碱基序列。

细菌中限制酶之所以不切断自身DNA，是因为微生物在长期的进化过程中形成了一套完善的防御机制，对于外源入侵的DNA可以降解掉。

生物在长期演化过程中，含有某种限制酶的细胞，其DNA分子中或者不具备这种限制酶的识别切割序列，或者通过甲基化酶将甲基转移到所识别序列的碱基上，使限制酶不能将其切开。

这样，尽管细菌中含有某种限制酶也不会使自身的DNA被切断，并且可以防止外源DNA的入侵（本题不要求学生回答的完全，教师可参考教师用书中的提示，根据学生的具体情况，给予指导。

上述原则也应适用于其他章节中有关问题的回答）。

3.天然的DNA分子可以直接用做基因工程载体吗？为什么？提示：基因工程中作为载体使用的DNA分子很多都是质粒（plasmid），即独立于细菌拟核DNA之外的一种可以自我复制、双链闭环的裸露的DNA分子。

是否任何质粒都可以作为基因工程载体使用呢？其实不然，作为基因工程使用的载体必需满足以下条件。

（1）载体DNA必需有一个或多个限制酶的切割位点，以便目的基因可以插入到载体上去。

1.1 DNA重组技术的基本工具1．能有效地打破物种的界限，定向地改造生物的遗传性状，培育新的农作物优良品种的生物技术是()A．基因工程技术B．诱变育种技术C．杂交育种技术D．组织培养技术2．在基因工程中，常用的“剪刀”“针线”和“载体”分别指()A．大肠杆菌病毒、质粒、DNA连接酶B．噬菌体、质粒、DNA连接酶C．限制酶、RNA连接酶、质粒D．限制酶、DNA连接酶、质粒3．下列四个DNA分子，彼此间具有黏性末端的一组是()A．①②B．②③C．③④D．②④4．作为基因的运输工具——载体，必须具备的条件之一及理由是()A．能够在受体细胞中稳定地保存下来并大量复制，以便提供大量的目的基因B．具有多个限制酶切割位点，以便于目的基因的表达C．具有某些标记基因，以便为目的基因的表达提供条件D．能够在受体细胞中复制并稳定保存，以便于进行筛选5．限制酶是一种核酸内切酶，可识别并切割DNA分子上特定的核苷酸序列，下图为四种限制酶Bam HⅠ，Eco R Ⅰ，HindⅢ和BglⅡ的识别序列和切割位点：切割出来的DNA黏性末端可以互补配对的是()A．Bam H Ⅰ和Eco R ⅠB．Bam H Ⅰ和HindⅢC．BamHⅠ和BglⅡD．Eco R Ⅰ和HindⅢ6．如图表示两种限制酶识别DNA分子的特定序列，并在特定位点对DNA分子进行切割的示意图，请回答以下问题：(1)图中甲和乙代表_____________________________________。

(2)Eco RⅠ、HpaⅠ代表_________________________________。

(3)图中甲和乙经过相应操作均形成两个片段，切口的类型分别为________________、________________。

甲中限制酶的切点是________________之间，乙中限制酶的切点是________________之间。

(4)由图解可以看出，限制酶的作用特点是________________________________________________________________________。

1.1DNA重组技术的基本工具一、选择题(每小题2分，共20分)1．下列对基因工程的理解，正确的是()①它是一种按照人们的意愿，定向改造生物遗传特性的工程②对基因进行人为改造③是体外进行的人为的基因重组④主要技术为体外DNA重组技术和转基因技术⑤在DNA 分子水平上进行操作A．①②③④⑤B．①③④⑤C．①②③⑤D．①③⑤2．关于DNA连接酶作用的叙述，正确的是()A．将单个核苷酸加到某DNA片段末端，形成磷酸二酯键B．将断开的两个DNA片段的骨架连接起来，重新形成磷酸二酯键C．连接两条DNA链上碱基之间的氢键D．只能将双链DNA片段互补的黏性末端之间连接起来，而不能将双链DNA片段平末端之间进行连接3．下表关于基因工程中有关基因操作的名词及对应的内容，正确的组合是()4．如下图所示，两个核酸片段在适宜条件下，经X酶的催化作用发生下述变化。

则X酶是()A．DNA连接酶B．RNA聚合酶C．DNA聚合酶D．限制酶5．下列关于载体的叙述，错误的是()A．载体与目的基因结合后，实质上就是一个重组DNA分子B．对某种限制酶而言，载体最好只有一个切点，但还要有其他多种酶的切点C．目前常用的载体有质粒、λ噬菌体的衍生物和动植物病毒D．载体具有某些标记基因，便于对其进行切割6．下图表示限制酶切割DNA分子的过程，从图中可知，该限制酶能识别的碱基序列和切点是()A．CTTAAG，切点在C和T之间B．CTTAAG，切点在G和A之间C．GAA TTC，切点在G和A之间D．GAA TTC，切点在C和T之间7．据图判断，有关工具酶功能的叙述错误的是()A．限制性核酸内切酶可以切断a处B．DNA聚合酶可以连接a处C．解旋酶可以使b处解开D．DNA连接酶可以连接c处8．下图为四种限制酶Bam H Ⅰ、Eco R Ⅰ、HindⅢ以及BglⅡ的辨识序列。

箭头表示每一种限制酶的特定切割部位，其中哪两种限制酶所切割出来的DNA片段末端可以互补黏合？其正确的末端互补序列应该为()A．Bam H Ⅰ和Eco R Ⅰ；末端互补序列—AA TT—B．Bam HⅠ和HindⅢ；末端互补序列—GA TC—C．Eco RⅠ和HindⅢ；末端互补序列—AATT—D．Bam HⅠ和BglⅡ；末端互补序列—GA TC—9．现有一长度为1 000碱基对(bp)的DNA分子，用限制性核酸内切酶EcoRⅠ酶切后得到的DNA分子仍是1 000 bp，用KpnⅠ单独酶切得到400 bp和600 bp两种长度的DNA分子，用Eco RⅠ、KpnⅠ同时酶切后得到200 bp和600 bp两种长度的DNA分子。

1．1 DNA重组技术的基本工具基础巩固1．在基因工程中限制酶是一种重要的工具酶，这种酶( )A．是一种RNA分子B．主要存在于真核生物中C．能识别基因中特定的碱基序列并切割D．本身的合成不受基因控制答案 C解析限制酶的化学成分为蛋白质，由相应的基因编码合成，主要存在于原核生物中。

限制酶能识别特定的碱基序列并进行切割。

2．如图，两个核酸片段在适宜条件下，经X酶的催化作用，发生下述变化，则此酶是( )A．DNA连接酶B．RNA聚合酶C．DNA聚合酶D．限制酶答案 A解析DNA连接酶可以将双链DNA片段互补的黏性末端连接起来。

3．下列不属于质粒被选为基因载体的理由是( )A．能复制B．有多个限制酶切点C．具有标记基因D．它是环状DNA答案 D解析质粒存在于细菌和酵母菌等生物中，含有标记基因，便于受体细胞检测和筛选；有多个限制酶切点，以便与多种外源基因连接；能随着受体细胞DNA的复制而复制，使目的基因在宿主细胞中能保存下来并能大量复制。

4．右图表示限制酶切割基因分子的过程，从图中可知，该限制酶能识别的碱基序列和切点是 ( )A．CTTAAG，切点在C和T之间B．CTTAAG，切点在G和A之间C．GAATTC，切点在G和A之间D．GAATTC，切点在C和T之间答案 C解析由图示可知：该限制酶能识别的碱基序列是GAATTC，切点在G和A之间。

5．切取动物控制合成生长激素的基因，注入鲇鱼受精卵中，与其DNA整合后产生生长激素，从而使鲇鱼比同种正常鱼增大3～4倍。

此项研究遵循的原理是( ) A．基因突变DNA→RNA→蛋白质B．基因重组DNA→RNA→蛋白质C．细胞工程DNA→RNA→蛋白质D．染色体变异DNA→RNA→蛋白质答案 B解析将动物控制合成生长激素的基因注入鲇鱼受精卵中，通过DNA复制、转录、翻译合成特定的蛋白质，表现出特定的性状，此方法依据的原理是基因重组。

6．下图为DNA分子的某一片段，其中①②③分别表示某种酶的作用部位，则相应的酶依次是( )A．DNA连接酶、限制酶、解旋酶B．限制酶、解旋酶、DNA连接酶C．解旋酶、限制酶、DNA连接酶D．限制酶、DNA连接酶、解旋酶答案 C解析限制酶能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断裂，形成黏性末端或平末端。

1.1《DNA重组技术的基本工具》习题基础强化1、下图是基因工程主要技术环节的一个基本步骤，这一步需用到的工具是（）A．DNA连接酶和解旋酶 B．DNA聚合酶和限制性核酸内切酶C．限制性核酸内切酶和DNA连接酶 D．DNA聚合酶和RNA聚合酶2、依右图有关基因工程的工具酶功能的叙述，不．正确的是（）A.切断a处的酶为限制性核酸内切酶B.连接a处的酶为DNA连接酶C.切断b处的酶为解旋酶D.切断b处的酶为限制性核酸内切酶3、以下说法正确的是（）A．所有的限制酶只能识别同一种特定的核苷酸序列B．质粒是基因工程中惟一的载体C．载体必备的条件之一是：具有一个或多个限制酶切点，以便与外源基因连接D．基因治疗主要是对有缺陷的细胞进行修复4、不属于质粒被选为基因运载体的理由是A．能复制 B．有多个限制酶切点C．具有标记基因 D．它是环状DNA5、科学家选用的细菌质粒往往带有一个抗菌素抗性基因，该抗性基因的主要作用是（）A．提高受体细胞在自然环境中的耐热性B．有利于检测目的基因否导入受体细胞C．增加质粒分子的相对分子质量 D．便于与外源基因连接6、限制酶是一种核酸切割酶，可辨识并切割DNA分子上特定的核苷酸碱基序列。

下图为四种限制酶BamH I，EcoR I，HindⅢ以及BglⅡ的辨识序列。

箭头表示每一种限制酶的特定切割部位，其中哪两种限制酶所切割出来的DNA片段末端可以互补黏合？其正确的末端互补序列为何？（）A. BamH I和EcoR I；末端互补序列—AATT—B. BamH I和HindⅢ；末端互补序列—GATC—C. EcoR I和HindⅢ；末端互补序列—AATT—D. BamH I和Bgl II；末端互补序列—GATC—7、在基因工程中，把选出的目的基因（共1000个脱氧核苷酸对，其中腺嘌呤脱氧核苷酸460 个），放入DNA扩增仪中扩增4代，那么，在扩增仪中应放入胞嘧啶脱氧核苷酸的个数是（）A．540 个 B．7560个 C．8100 个 D．17280 个8、基因工程是DNA分子水平的操作，下列有关基因工程的叙述中，错误的是( )A、限制酶只用于切割获取目的基因B、载体与目的基因必须用同一种限制酶处理C、基因工程所用的工具酶是限制酶，DNA连接酶D、带有目的基因的载体是否进入受体细胞需检测9、下列关于DNA连接酶的叙述中，正确的是（）A. DNA连接酶连接的是两条链碱基对之间的氢键B. DNA连接酶连接的是黏性末端两条链主链上的磷酸和脱氧核糖C. DNA连接酶连接的是黏性末端两条链主链上的磷酸和核糖D. 同一种DNA连接酶可以切出不同的黏性末端10、与“限制性内切酶”作用部位完全相同的酶是（）：A．反转录酶B．RNA聚合酶C．DNA连接酶D．解旋酶11、下列有关质粒的叙述，正确的是（）A．质粒是广泛存在于细菌细胞中的一种颗粒状细胞器B．质粒是细菌细胞质中能自主复制的小型环状DNA分子C．质粒只有在侵入宿主细胞后才能在宿主细胞内复制D．细菌质粒的复制过程一定是在宿主细胞外独立进行的12、关于右图DNA分子片段的说法正确的是A．限制性内切酶可作用于①部位，解旋酶作用于③部位B．②处的碱基缺失导致染色体结构的变异C．把此DNA放在含15N的培养液中复制2代，子代中含15N的DNA占3/4①G AT ATGCAT AT15N14N②③………D．该DNA的特异性表现在碱基种类和（A+T）/（G+C）的比例上13、下列有关基因工程的叙述，正确的是（）A．DNA连接酶的作用是将两个黏性末端的碱基连接起来B．目的基因导入受体细胞后，受体细胞即发生基因突变C．目的基因与运载体结合的过程发生在细胞外D．常使用的运载体有大肠杆菌、噬菌体和动植物病毒等14、限制酶在DNA的任何部位都能将DNA切开吗？以下是四种不同限制酶切割形成的DNA 片段：(1) …CTGCA (2) …AC (3) GC……G …TG CG…（4）…G (5) G…(6) …GC…CTTAA ACGTC……CG(7) GT…(8)AATTC…CA…G…请用DNA连接酶将它们连接起来:______和_____能连接成_________________________;______和_____能连接成_________________________;______和_____能连接成_________________________;______和_____能连接成_________________________。

专题1 基因工程1.1 DNA重组技术的基本工具一、学习目标1.说出基因工程的概念。

2.认同基因工程的诞生和发展离不开理论研究和技术创新。

3.说出DNA重组技术所需三种基本工具的作用。

二、学习重点和难点1.学习重点：DNA重组技术所需的三种基本工具的作用。

2.学习难点：基因工程载体需要具备的条件。

三、学习过程考点一：基因工程的诞生1.实例引入，结合章首文字思考什么是基因工程？并填写下列表格：2.基因工程是在哪些学科的基础上发展起来的？3.哪些基础理论知识和相关科学技术的发展催生了基因工程？（1）基础理论：（2）科学技术：【即时训练】下列何种技术能有效地打破物种的界限,定向地改造生物的遗传性状,培育新的农作物优良品种 ( ) A．基因工程技术 B．诱变育种技术 C．杂交育种技术 D．组织培养技术考点二：DNA重组技术的基本工具※限制性核酸内切酶——“分子手术刀”阅读教材P4—5相关内容，思考并讨论：4.DNA重组技术的基本工具有哪些？工具酶是什么？5.限制性核酸内切酶（限制酶）从哪里获得？有什么作用？有何特性？切割后会产生哪些结果？（1）来源：主要从中分离纯化出来的。

（2）特点：具有。

即能识别DNA分子的某种核苷酸序列，使中部位的两个之间的磷酸二酯键断开。

（3）作用位点：（4）作用结果：或【即时训练】下列四条DNA分子，彼此间具有粘性末端的一组是（）A．①②B．②③C．③④D．②④※DNA连接酶——“分子缝合针”阅读教材P5—6相关内容，思考并讨论：6. DNA连接酶的作用对象是什么？作用位点是什么？作用结果是什么（1）作用对象：（2）作用位点：（3）作用结果：将存在的两个DNA片段连接成7.两种DNA连接酶的来源和作用有何不同？（1）E.coliDNA连接酶——只能连接（2）（既能连接黏性末端又能连接）※基因进入受体细胞的载体——“分子运输车”阅读教材P6相关内容，思考并讨论：8.基因工程中使用的载体有哪些？最常用的是哪一种？（1）载体种类：、、等（2）最常用的载体：9.质粒的化学本质是它存在于哪些生物体内？10.作为运载目的基因的载体必须要具备哪些条件？a.能在宿主细胞内并。

1.1DNA 重组技术的基本工具[对点强化]强化点1基因工程的工具酶1.(2019·福建厦门一中高二下月考)某DNA分子中含有某限制酶的一个识别序列，用该限制酶切割该DNA分子，可能形成的两个DNA片段是()A.①②B.③④C.①③D.②④解析限制酶识别序列的中心轴线两侧的双链DNA上的碱基是反向对称重复排列的，若切割形成的是黏性末端，则黏性末端碱基应该互补配对。

分析图中片段可知，③④中的片段可能是由同一种限制酶切割所得，B正确。

答案B2.下列关于DNA连接酶作用的叙述，正确的是()A.将单个核苷酸加到某DNA片段末端，形成磷酸二酯键B.将断开的两个DNA片段连接起来，重新形成磷酸二酯键C.连接两条DNA链上碱基之间的氢键D.只能将双链DNA片段互补的黏性末端之间连接起来，而不能将双链DNA片段平末端之间进行连接解析DNA连接酶的作用是连接两个DNA片段，形成磷酸二酯键；不同的DNA 连接酶，有的能将双链DNA片段互补的黏性末端之间连接起来，有的能将双链DNA片段平末端之间连接起来。

答案B3.下列有关限制酶和DNA连接酶的叙述正确的是()A.用限制酶剪切获得一个目的基因时得到两个切口，有2个磷酸二酯键被断开B.限制酶识别序列越短，则该序列在DNA中出现的概率就越大C.DNA连接酶可以连接两个肽链片段D.T4DNA连接酶和E·coli DNA连接酶都能催化平末端和黏性末端的连接解析用限制酶剪切获得一个目的基因时得到两个切口，有4个磷酸二酯键被断开，A错误；限制酶识别序列越短，则该序列在DNA中出现的概率就越大，B正确；DNA连接酶连接的是两个DNA片段，C错误；T4DNA连接酶和E·coli DNA 连接酶都能催化黏性末端的连接，其中只有T4DNA连接酶还可以催化连接平末端，D错误。

答案B4.限制酶可识别并切割DNA分子上特定的核苷酸序列，如图为四种限制酶Bam HⅠ、Eco RⅠ、Hin dⅢ和BglⅡ的识别序列和切割位点，切割出来的DNA黏性末端可以互补配对的是()A.Bam HⅠ和Eco RⅠB.Bam HⅠ和Hin dⅢC.Bam HⅠ和BglⅡD.Eco RⅠ和Hin dⅢ解析Bam HⅠ酶处理后形成的黏性末端为，BglⅡ酶处理后形成的黏性末端为，可以互补配对。

高中高效课堂 高一生物 训练案一、选择题：1．在基因工程中，科学家所用的“剪刀”、“针线”和“载体”分别是指( )A.大肠杆菌病毒、质粒、DNA 连接酶B.噬菌体、质粒、DNA 连接酶C.DNA 限制酶、RNA 连接酶、质粒D.DNA 限制酶、DNA 连接酶、质粒 2．不属于质粒被选为基因运载体的理由是 （ ）A ．能复制 B.有多个限制酶切点 C ．具有标记基因 D ．它是环状DNA3．下列四条DNA 分子，彼此间能连接在一起的一组粘性末端是 （ ）① ②③ ④A ．①②B ．②③C ．③④D ．②④ ４．质粒是基因工程中最常用的运载体，它的主要特点是①能自主复制 ②不能自主复制 ③结构很小 ④蛋白质 ⑤环状RNA ⑥环状DNA ⑦能“友好”地“借居”A ．①③⑤⑦B ．①④⑥C ．①③⑥⑦D ．②③⑥⑦５．有关基因工程的叙述中，错误的是 （ ）A ．DNA 连接酶将黏性未端的碱基对连接起来B ．限制性内切酶用于目的基因的获得C ．目的基因须由载体导入受体细胞D ．人工合成目的基因不用限制性内切酶６．实施基因工程第一步的一种方法是把所需的基因从供体细胞内分离出来，这要利用限性内切酶。

一种限制性内切酶能识别DNA 子中的GAATTC 顺序，切点在G 和A 之间，这是应用了酶的（ ）A ．高效性 B.专一性 C ．多样性 D.催化活性受外界条件影响７．人们常选用的细菌质粒分子往往带有一个抗菌素抗性基因，该抗性基因的主要作用是A . 提高受体细胞在自然环境中的耐药性 B. 有利于对目的基因是否导入进行检测C. 增加质粒分子的分子量 D ．便于与外源基因连接8．下列属于基因运载体所必须具有的条件是（多选） （ ）A 、具有某些标志基因B 、具有环状的DNA 分子C 、能够在宿主细胞内复制D 、具有多种限制性内切酶9．下列哪些可作为基因工程技术中常用的基因运载工具（多选） （ ）A ．大肠杆菌B ． 质粒C ．动物病毒D ． 线粒体 10．在基因工程中使用的限制性核酸内切酶，其作用是( )A.将目的基因从染色体上切割出来B.识别并切割特定的DNA 核苷酸序列C.将目的基因与运载体结合D.将目的基因导入受体细胞11．多数限制性核酸内切酶切割后的DNA 末端为A 、平头末端B 、3突出末端C 、5突出末端D 、粘性末端 12．在基因工程中通常所使用的质粒是（ ） A 、细菌的染色体DNA B 、细菌拟核外的DNA C 、病毒染色体DNA D 、噬菌体DNA13．下列关于限制酶的说法不正确的是( )A.限制酶广泛存在于各种生物中，在微生物细胞中分布最多B.不同的限制酶识别不同的核苷酸序列C.限制酶能识别不同的核苷酸序列，体现了酶的专一性D.限制酶的作用只是用来提取目的基因 14．（05全国Ⅰ）镰刀型细胞贫血症的病因是血红蛋白基因的碱基序列发生了改变。