1.沙门氏菌及检验
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沙门氏菌检验一、培养基和试剂:1、缓冲蛋白胨水(BP):按GB4789.28中4.12规定2、氯化镁孔雀绿(MM)增菌液:按GB4789.28中4.13规定3、四硫酸钠煌绿(TTB)增菌液:按GB4789.28中4.14、4.15规定4、亚硒酸盐胱氨酸(SC)增菌液:GB4789.28中4.16规定5、亚硫酸铋琼脂(BS):按GB4789.28中4. 19规定6、DHL琼脂:按GB4789.28中4. 20规定7、HE琼脂:按GB4789.28中4.21规定8、WS琼脂:按GB4789.28中4.23规定9、SS琼脂:按GB4789.28中4.22规定10、三糖铁琼脂:按GB4789.28中4.26、27规定11、蛋白胨水靛基质试剂:按GB4789.28中3.13规定12、尿素琼脂(Ph7.2):按GB4789.28中3.15规定13、氰化钾(KCN)培养基:按GB4789.28中3.16规定14、氨基酸脱羧酶试验培养基:按GB4789.28中3.12规定15、糖发酵管:按GB4789.28中3.2规定16、ONPC培养基:按GB4789.28中3.3规定17、半固体脂:按GB4789.28中4.30规定18、丙二酸钠培养基:按GB4789.28中3.7规定19、沙门氏菌因子血清:按26种用于初步分型;57种用于进一步分型;163种用于详细分型。
二、沙门氏菌检验程序:三、操作步骤:(一)、前增菌和增菌冻肉、蛋品、乳品及其他加工食品均应经过前增菌。
各称取检样25g,加在装有255ml缓冲蛋白胨水的500ml广口瓶内。
固体食品可先应用均质器以8000~100000r/min打碎1min,或用乳钵加灭菌砂磨碎,粉状食品用灭菌匙或玻棒研磨使乳化,于36±1℃培养4h(干蛋品培养18~24h)移取10ml,转种于100ml氯化镁孔雀绿增菌液或四硫酸钠煌绿增菌液内,于42℃培养18~24h。
同时,另取10ml,转种于100ml亚硒酸盐胱氨酸增菌液内,于36±1℃培养18~24h.。
沙门氏菌的检验流程及每一步检验过程的作用下载提示:该文档是本店铺精心编制而成的,希望大家下载后,能够帮助大家解决实际问题。
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食品中沙门氏菌测定能力验证和关键控制点分析摘要:沙门氏菌是一种常见的食源性病原菌,能导致食物中毒,对人类健康构成威胁。
为了确保我国食品的卫生安全,本研究对食品中沙门氏菌的检测能力进行了验证,分析了关键控制点,并提出了有关控制方法。
本研究旨在提高检测机构的检测水平,为食品安全监管提供技术支持关键词:食品;沙门氏菌;检测能力;关键控制点0、引言沙门氏菌在全球范围内拥有较高的食源性疾病发生率,我国食品中沙门氏菌污染状况也较为严重。
为了保障食品安全,食品安全监管部门需要加强对食品中沙门氏菌的检测和监控。
本文通过对食品中沙门氏菌检测材料及方法进行验证,并对关键控制点进行深入分析了解,为我国食品安全监管提供技术支持。
1、沙门氏菌检测材料与方法食品中沙门氏菌检测的材料与方法主要包括样品来源、试剂与仪器、检测方法等环节。
通过这些方法和步骤,可以有效地检测食品中的沙门氏菌,为保障食品安全提供依据。
食品中沙门氏菌检测的材料与方法主要包括以下几个方面:1.1样品来源从不同地区、不同品种的食品中进行随机抽取,以此为试验样品。
常见的食品类别包括肉类、禽类、水产制品、蔬菜水果等。
1.2试剂与仪器(1)试剂:①营养琼脂:用于沙门氏菌的培养和分离纯化;②沙门氏菌显色培养基:用于沙门氏菌的分离和初步鉴别;③生化鉴定试剂盒:用于沙门氏菌的生化实验;④缓冲蛋白胨水:用于食品中沙门氏菌和阪崎肠杆菌的前增菌培养;⑤四硫酸盐胱氨酸增菌液:用于沙门氏菌选择性增菌培;⑥亚硫酸铋琼脂:用于沙门氏菌特别是伤寒沙门氏菌的选择性分离培养;⑦HE琼脂培养基:用于肠道致病菌特别是沙门氏菌和志贺氏菌的选择性分离培养;⑧木糖赖氨酸脱氧胆盐琼脂:用于沙门氏菌和志贺氏菌的分离培养。
(2)仪器:①生化培养箱:方便沙门氏菌培养和增菌的场所;②高压蒸汽灭菌锅:用于培养基的灭菌;③显微镜:用于观察沙门氏菌的形态;④离心机:用于样品的分离和纯化。
1.3检测方法(1)前增菌:将食品样品接种到含有营养的非选择性培养基中,使受损伤的沙门氏菌细胞恢复到稳定的生理状态。
沙门氏菌检测操作规程1 原理沙门氏菌的检测需要四个连续的阶段见下图:1.1 用非选择性液体培养基预增菌将试料接种到缓冲蛋白胨水(BPW),在36℃±1℃下培养16~20h。
(样品中可能存在少量的沙门氏菌却含大量的肠杆菌科的其他菌,所以选择性增菌是必须的;为了检测受伤的沙门氏菌,常须进行预增菌。
)1.2 在选择性液体培养基上增菌将1.1中的培养物接种到四硫磺酸钠煌绿(TTB)增菌液和亚硒酸盐胱氨酸(SC)增菌液中。
于TTB增菌液内42℃±1℃培养18h~24h;SC 增菌液内36℃±1℃培养18h~24h。
1.3 初步筛选将1.2的培养物接种到以下两个选择性培养基:亚硫酸铋(BS)琼脂、木糖赖氨酸脱氧胆盐(XLD)琼脂,于36℃±1℃分别培养40h~48h(BS 琼脂平板)或18h~24h(XLD 琼脂平板),根据菌落特性,辨别可疑沙门氏菌菌落。
1.4再次筛选挑出1.3中的可疑沙门氏菌菌落,在沙门氏菌显色培养基中培养再次筛选,再用合适的生化和血清学试剂进行鉴定。
2 试剂与仪器2.1所用器具三角烧瓶、玻璃珠、具塞试管、培养皿、1000μL枪头、5mL枪头、称量勺、接种环、接种针2.2 仪器:分析天平、恒温培养箱、微型振荡器、超净工作台、高压灭菌锅2.3 所用试剂和培养基2.3.1缓冲蛋白胨水培养基(BPW)称取BPW培养基20.1g,加入蒸馏水1L,搅拌加热煮沸至完全溶解,以90mL/瓶分装到各锥形瓶,并于121℃灭菌15 min,冷至常温。
2.3.2 四硫磺酸钠煌绿(TTB)增菌液取TTB增菌液基础93.6g,加入蒸馏水1L,搅拌加热煮沸至完全溶解,分装于锥形瓶中,每瓶100mL。
将锥形瓶放入灭菌锅中,121℃灭菌20min;冷至30℃,每100mL基础培养基中加入TTB配套试剂碘液和煌绿各一支(开启前用75%酒精棉消毒西林瓶表面),混合均匀。
2.3.3 亚硒酸盐胱氨酸(SC)增菌液取SC培养基23g,加入蒸馏水1L,搅拌加热煮沸至完全溶解,分装锥形瓶,冷至常温备用。
沙门氏菌检验国标检验步骤及接种方式沙门氏菌是一种常见的细菌引起的食源性疾病,可能会导致严重的胃肠道感染。
为了保障食品安全,确保公众的健康,我们需要进行沙门氏菌的国标检验。
下面是一份生动、全面且有指导意义的文章,详细介绍了沙门氏菌检验的国标检验步骤和接种方式。
第一步:样品准备在进行沙门氏菌检验之前,我们首先需要准备样品。
常见的样品包括食品、水、动物排泄物等,可能携带沙门氏菌。
样品应该收集自具有代表性的地点,并采取无菌采样容器进行收集。
收集样品时要注意避免污染,并确保样品的数量足够进行检验。
第二步:样品处理样品处理的目的是将潜在的沙门氏菌分离出来,并进行后续的检测。
可以采用不同的方法进行样品处理,常见的方法包括富集培养和选择性培养。
富集培养是将样品放入富集培养基中,利用培养基中的营养物质以及特定条件促使沙门氏菌生长。
选择性培养则是利用培养基中的特殊抑制剂抑制其他细菌的生长,从而使沙门氏菌生长出来。
第三步:菌落鉴定在样品处理后,我们需要对培养基上的菌落进行鉴定,确认是否为沙门氏菌。
常见的鉴定方法包括形态学鉴定、生理生化鉴定和分子生物学鉴定。
形态学鉴定主要通过观察菌落的形状、颜色和大小等特征来判断细菌的种类。
生理生化鉴定则是通过检测菌落对特定物质的代谢情况来确定细菌的种类。
分子生物学鉴定是利用特定的DNA序列来识别沙门氏菌的基因,通常使用PCR技术进行检测。
第四步:抗菌药敏试验沙门氏菌的抗菌药敏性检测是为了确定对何种抗生素具有敏感性。
通过抗菌药敏试验,我们可以选择合适的药物来治疗感染。
可以使用各种常见的抗生素盘进行试验,然后观察沙门氏菌对不同抗生素的反应。
根据抗生素的抑菌效果,可确定沙门氏菌的耐药性情况。
第五步:结果分析与报告最后一步是对检验结果进行分析,并撰写检验报告。
检验结果要结合国家标准进行评估,确定样品是否合格。
如果样品中检测到沙门氏菌,还需要评估其数量以及对公众健康可能造成的风险。
在撰写报告时,需要详细记录样品的来源、处理方法、检验步骤和结果,以及相应的建议和措施。
沙门氏菌的检测方式主要包括血常规检查、便常规检查、ELISA法检查等,能够判断疾病的严重程度。
1、血常规检查:感染沙门氏菌时,多数患者的白细胞、中性粒细胞以及嗜酸性粒细胞计数出现偏低的情况,大儿童的白细胞计数通常出现升高的现象,该项结果可以辅助诊断沙门菌病。
2、便常规检查:感染沙门氏菌以后,部分患者可能会出现黏液样变或血便的情况,通过明确患者急性胃肠炎的症状来辅助诊断沙门菌病。
3、ELISA法检查:检测患者血清中沙门菌抗原、抗体是否出现异常的情况,有助于沙门菌感染的诊断。
除此之外,沙门氏菌的检测方式还包括B超检查、肥达试验等,如果自身的病情比较严重,建议应及时到正规医院的感染病科进行检查并治疗,以免延误病情。
沙门氏菌的检验原理沙门氏菌是一类广泛存在于自然界中的革兰氏阴性杆菌,它是现代医学和食品安全领域中一个备受关注的细菌。
沙门氏菌感染会引起人体的食物中毒和肠道感染等疾病,严重时甚至会危及生命。
因此,沙门氏菌的快速检测和准确诊断显得尤为重要。
沙门氏菌的检验原理主要是通过分离菌株和检测其特异性抗原来进行的。
首先,从样品中分离出可疑的沙门氏菌菌株。
这一步骤通常通过将样品接种在含有沙门氏菌生长所需的富营养培养基上来实现。
沙门氏菌在这种培养基上生长迅速,菌落呈灰白色,有时带有红色或黑色。
接下来,对分离出的沙门氏菌菌株进行鉴定和鉴别。
这一步骤通常使用传统的生化试验和分子生物学技术。
传统的生化试验包括对菌株进行氧化-发酵试验、葡萄糖发酵试验、亚硝酸盐还原试验等。
这些试验通过检测菌株对不同营养物质的利用和代谢产物的生成来确定其是否为沙门氏菌。
分子生物学技术也被广泛应用于沙门氏菌的检验中。
其中最常用的技术是聚合酶链反应(PCR),它可以通过扩增沙门氏菌特异基因片段来识别和检测沙门氏菌。
PCR技术具有高度特异性和敏感性,可以在短时间内检测到沙门氏菌的存在。
除了分离和鉴定菌株外,还可以通过检测沙门氏菌的特异性抗原来进行沙门氏菌的检验。
沙门氏菌的特异性抗原主要包括菌壁脂多糖(LPS)和外膜蛋白等。
通过将样品与特异性抗体结合,然后通过免疫反应来检测是否存在沙门氏菌。
常用的方法包括酶联免疫吸附试验(ELISA)和免疫层析试验(ICA)等。
沙门氏菌的检验原理是基于沙门氏菌的特征和特异性抗原来进行的。
通过分离菌株、鉴定和鉴别以及检测特异性抗原,可以快速准确地诊断沙门氏菌感染。
这对于食品安全和公共卫生至关重要,有助于及时采取措施防止沙门氏菌的传播和感染。
沙门氏菌的检验原理是通过分离菌株和检测其特异性抗原来进行的。
这一检验方法结合了传统的生化试验和分子生物学技术,可以快速准确地诊断沙门氏菌感染,为食品安全和公共卫生提供了重要的支持。
然而,需要注意的是,沙门氏菌的检验方法在实际应用中仍然面临一些挑战,如样品处理和检测灵敏度等方面的问题。
沙门氏菌检验方法,一文带你了解在日常生活中,我们可能经常听说过食物中毒事件,而其中一种常见的细菌,沙门氏菌,常常与这些事件有关。
沙门氏菌是一种微小的细菌,尽管它们很小,却有着重要的影响。
它们广泛存在于自然界中,尤其是在动物、人类及其环境中。
正因如此,了解沙门氏菌及其检验方法变得至关重要。
一、沙门氏菌简介沙门氏菌是一类微小而坚韧的细菌,属于沙门氏菌属。
它们通常呈现出细长的形态,就像细小的杆状微生物,这使它们在显微镜下观察起来很有特点。
这些细菌可以在各种不同的环境中生存,尤其是在温暖、潮湿的地方,比如动物的肠道、水体以及一些食物表面。
沙门氏菌与食品有着潜在的关系,因为它们可以在不正确处理或保存的食物中繁殖。
当食物受到污染,例如接触了受感染的动物粪便,沙门氏菌可能会进入食物中并迅速增殖。
一旦食物被食用,人体可能会暴露在这些细菌中。
一旦进入人体,它们可能导致沙门氏菌感染,也称为沙门氏菌食物中毒。
这种感染可能会导致腹泻、呕吐、发热等症状,严重的情况甚至可能危及生命,特别是对于免疫系统较弱的人群。
二、沙门氏菌检验方法沙门氏菌感染可能对人体健康造成严重影响,特别是对于容易受感染的人群。
食物中的沙门氏菌可能引发食物中毒事件,导致腹泻、呕吐、发热等症状,甚至可能危及生命。
因此,通过定期检测食品中的沙门氏菌,可以确保食品的安全性,避免食品污染事件的发生。
沙门氏菌的检验方法包括传统的培养方法、分子生物学技术以及免疫学方法,这些方法结合使用,提高了检测的速度和准确性。
1.传统的培养方法这种方法涉及将食物样品放入含有特定营养物质的培养基中,然后在控制温度和湿度条件下培养数天。
在沙门氏菌存在的情况下,它们会在培养基上生长形成菌落。
通过观察这些菌落的形态、颜色和其他特征,可以初步确定是否存在沙门氏菌。
虽然这种方法是经典且可靠的,但需要相对较长的时间来得出结果。
2.分子生物学技术这种现代方法通过检测沙门氏菌的DNA或RNA来更快速、准确地识别细菌。
沙门氏菌生化试验判定步骤表1三糖铁琼脂赖氨酸脱羧酶初步判断斜面底层产气硫化氢产碱红产酸黄+(-)+(-)黑+紫可疑沙门氏菌产碱红产酸黄+(-)+(-)黑-黄可疑沙门氏菌产酸黄产酸黄+(-)+(-)黑+紫可疑沙门氏菌三糖铁琼脂原理分析:本培养基适合于肠杆菌科的鉴定。
用于观察细菌对糖的利用和硫化氢(变黑)的产生。
该培养基含有乳糖、蔗糖和葡萄糖的比例为10:10:1,只能利用葡萄糖的细菌,葡萄糖被分解产酸可使斜面先变黄,但因量少,生成的少量酸,因接触空气而氧化,加之细菌利用培养基中含氮物质,生成碱性产物,故使斜面后来又变红,底部由于是在厌氧状态下,酸类不被氧化,所以仍保持黄色。
而发酵乳糖的细菌(e.coli),则产生大量的酸,使整个培养基呈现黄色。
如培养基接种后产生黑色沉淀,是因为某些细菌能分解含硫氨基酸,生成硫化氢,硫化氢和培养基中的铁盐反应,生成黑色的硫化亚铁沉淀。
底层产酸:是因为细菌分解糖类物质使酚红退色变黄。
斜面产碱,低层产酸:是细菌分解葡萄糖(不能分解乳糖和蔗糖),由于量较少进而分解蛋白胨而产碱变红。
因为底层是厌氧环境,葡萄糖分解慢,24小时培养后还没分解蛋白胨产碱;而斜面是需氧环境分解较快,一般8小时左右就把葡萄糖分解完(此时斜面也是酸性),但继而分解蛋白胨产碱,斜面又转为碱性。
2-志贺氏菌:都能分解葡萄糖,产酸不产气,大多不发酵乳糖,不产生H2S。
4-大肠杆菌:能分解葡萄糖产酸产气,大多数能分解乳糖,不产生H2S。
3-沙门氏菌:能分解葡萄糖,不发酵乳糖,大多数产生H2S,多数产气。
赖氨酸脱羧酶试验1、试验管及对照管均要加一层约10mm厚的灭菌石蜡或矿物油以覆盖表面,此可使培养基中的溶解氧通过细菌消耗掉,并控制培养基的pH。
2、阳性试验管培养初期(10—12h)因发酵葡萄糖产酸变黄,继续培养由于氨基酸脱羧产生胺类而使培养基由酸变碱,故又由黄变为紫色。
阴性试验管则始终呈黄色。
氨基酸脱羧酶试验(1)原理:某些细菌可产生氨基酸脱羧酶使氨基酸脱羧生成胺和二氧化碳。