腐烂苹果中的细菌分离以及理化性质的检测
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第1篇一、实验目的1. 探究苹果表面霉菌的生长情况。
2. 学习霉菌的培养、分离和纯化方法。
3. 观察霉菌的形态特征,并进行初步鉴定。
二、实验材料与试剂1. 实验材料:- 新鲜苹果若干个- 无菌水- 无菌棉签- 灭菌的培养基(如沙堡琼脂培养基)- 灭菌的接种环- 灭菌的玻璃器皿(如培养皿、试管等)2. 实验试剂:- 酒精- 碘酒- 水合氯醛- 水解乳糖三、实验方法与步骤1. 样品处理:- 取新鲜苹果,用无菌水清洗表面,用无菌棉签擦拭表面,收集擦拭液。
- 将擦拭液进行梯度稀释,以便后续分离和纯化。
2. 霉菌分离:- 将稀释后的样品分别接种于沙堡琼脂培养基上。
- 将接种后的培养基置于恒温培养箱中,37℃培养2-3天。
3. 霉菌纯化:- 观察培养基上生长的菌落,选取单菌落进行纯化。
- 使用接种环挑取单菌落,接种于新的沙堡琼脂培养基上。
- 重复上述步骤,直至获得纯化的霉菌菌株。
4. 霉菌形态特征观察:- 将纯化的霉菌菌株接种于沙堡琼脂培养基上,37℃培养2-3天。
- 观察菌落形态,包括菌落大小、颜色、边缘、表面等特征。
5. 霉菌鉴定:- 对纯化的霉菌菌株进行形态学观察,包括菌丝形态、孢子形态等。
- 根据形态特征,对霉菌进行初步鉴定。
四、实验结果与分析1. 霉菌分离:- 在沙堡琼脂培养基上,观察到多种形态的菌落,表明苹果表面存在多种霉菌。
2. 霉菌纯化:- 通过纯化操作,获得纯化的霉菌菌株。
3. 霉菌形态特征观察:- 纯化的霉菌菌株在沙堡琼脂培养基上形成圆形、表面光滑、边缘整齐的菌落。
- 菌丝呈白色,有横隔,无色或略带黄色。
- 孢子呈椭圆形,无色。
4. 霉菌鉴定:- 根据形态特征,初步鉴定纯化的霉菌菌株为青霉属。
五、实验结论1. 苹果表面存在多种霉菌,其中青霉属较为常见。
2. 通过培养、分离和纯化操作,可以有效地从苹果表面分离出霉菌。
3. 霉菌的形态特征可以用于初步鉴定霉菌种类。
六、实验注意事项1. 实验过程中要注意无菌操作,避免污染。
苹果腐败霉菌的拮抗酵母菌筛选鉴定及拮抗机理初探刘程惠;吴祎男;胡文忠;王艳颖;田密霞【摘要】从苹果果皮中筛选出对引起苹果采后病害的扩展青霉(Penicillium expansum)、互隔交链格孢霉(Alternariaalternata)和黑曲霉(Aspergillus niger)具有拮抗作用的酵母菌,并初步研究其拮抗机理.结果表明:筛选得到两株可以同时拮抗三种腐败霉菌的拮抗酵母菌Y4和Y9,根据酵母菌菌落性状、生理生化特征并结合分子生物学的分析结果,鉴定为Candida railenensis和Aureobasidium pullulans,其中A.pullulans为类酵母真菌.C.railenensis的最佳拮抗浓度为109 CFU/mL,对P.expansum、A.alternata和A.niger的菌丝生长、孢子萌发和芽管生长均有显著(p<0.05)的抑制作用.扫描电镜观察到C.railenensis能够包围和吸附腐败霉菌孢子,与它们竞争营养与空间,此外还能够吸附P.expansum 菌丝体与其直接作用.C.railenensis的主要抑病机理是营养与空间竞争,并且其生防效果的发挥是多种方式共同作用的综合结果.%In order to control postharvest disease of apples,Penicillium expansum,Alternaria alternata and Aspergillus niger were used as indicator strains to screen antagonistic yeasts isolated from apple peel.The antagonistic mechanism of yeast was also preliminarily studied.Based on its morphological characteristics,physiological and biochemical characteristics and ITS sequences,the antagonistic yeast strains Y4 and Y9 were identified as Candida railenensis and Aureobasidium pullulans,in which A.pullulans was a fungus likeyeast.Optimal concentration of C.railenensis was 109 CFU/mL,and it could significantly inhibit the mycelia growth,spore germination and germ tube growth of P.expansum,A.alternata and A.niger.Scanning electronmicroscopy showed that C.railenensis was able to surround and adsorb the spore of spoilage fungi,compete with them for nutrition and space,and also adsorb P.expansum mycelia and thus interact directly withpetition nutrition and competition space were the main mechanisms of C.railenensis,and its biocontrol effect was a combined result of many ways.【期刊名称】《食品工业科技》【年(卷),期】2018(039)012【总页数】6页(P132-136,163)【关键词】苹果;腐败霉菌;拮抗酵母菌;拮抗机理【作者】刘程惠;吴祎男;胡文忠;王艳颖;田密霞【作者单位】大连民族大学生命科学学院,辽宁大连116600;辽宁省大连海洋渔业集团公司,辽宁大连116113;大连民族大学生命科学学院,辽宁大连116600;大连民族大学生命科学学院,辽宁大连116600;大连民族大学生命科学学院,辽宁大连116600【正文语种】中文【中图分类】TS255.3苹果颜色鲜艳、甜脆多汁且营养丰富,深受广大消费者的喜爱。
实验目的:通过解剖变质蔬果,观察其内部结构的变化,了解变质蔬果的生理变化过程,以及变质过程中微生物的繁殖情况,为食品安全和食品储存提供参考。
实验时间:2023年X月X日实验地点:实验室实验材料:苹果、香蕉、西红柿、黄瓜各2个(新鲜)、已变质的苹果、香蕉、西红柿、黄瓜各2个实验工具:解剖刀、镊子、放大镜、显微镜、无菌水、酒精、试管、试管架、记录本实验步骤:1. 准备工作将新鲜和变质的蔬果分别洗净,用酒精消毒解剖刀和镊子,确保实验的准确性。
2. 新鲜蔬果解剖将新鲜蔬果分别进行解剖,观察其内部结构。
具体步骤如下:(1)用解剖刀切开苹果,观察其内部颜色、质地和结构;(2)用解剖刀切开香蕉,观察其内部颜色、质地和结构;(3)用解剖刀切开西红柿,观察其内部颜色、质地和结构;(4)用解剖刀切开黄瓜,观察其内部颜色、质地和结构。
3. 变质蔬果解剖将变质蔬果分别进行解剖,观察其内部结构的变化。
具体步骤如下:(1)用解剖刀切开变质的苹果,观察其内部颜色、质地和结构;(2)用解剖刀切开变质的香蕉,观察其内部颜色、质地和结构;(3)用解剖刀切开变质的西红柿,观察其内部颜色、质地和结构;(4)用解剖刀切开变质的黄瓜,观察其内部颜色、质地和结构。
4. 微生物观察取新鲜和变质的蔬果内部组织,用无菌水冲洗,制成涂片,在显微镜下观察微生物的繁殖情况。
5. 数据记录与分析将观察到的结果记录在记录本上,并对数据进行整理和分析。
实验结果:1. 新鲜蔬果解剖结果(1)苹果:新鲜苹果内部为白色,质地紧密,无异味;(2)香蕉:新鲜香蕉内部为黄色,质地柔软,无异味;(3)西红柿:新鲜西红柿内部为红色,质地坚硬,无异味;(4)黄瓜:新鲜黄瓜内部为绿色,质地脆嫩,无异味。
2. 变质蔬果解剖结果(1)变质的苹果:内部颜色变暗,质地松软,有异味;(2)变质的香蕉:内部颜色变黑,质地变硬,有异味;(3)变质的西红柿:内部颜色变黑,质地变软,有异味;(4)变质的黄瓜:内部颜色变黑,质地变软,有异味。
植物腐烂实验报告模板实验目的本实验旨在研究植物腐烂的过程,了解腐烂的原因和机制。
实验材料- 10个新鲜的苹果- 少量的泥土和营养土- 10个装有苹果的密封罐- 密封袋- 实验记录表格实验步骤1. 将10个苹果洗净并晾干。
2. 准备好10个密封罐,将泥土和营养土均匀地铺在罐底,然后将一个苹果放入每个密封罐中。
3. 将每个密封罐都用密封袋密封好,确保罐内环境封闭。
4. 将密封罐放置在室温下,最好放置在通风良好的地方。
5. 每天观察密封罐中苹果的腐烂情况,并记录在实验记录表格中。
6. 实验持续一周后,将罐中腐烂的苹果清理掉,其他苹果继续观察。
实验结果与分析通过实验观察,我们记录了每天密封罐中苹果的腐烂情况。
根据实验数据,我们可以得出以下结论:1. 在实验开始的第一天,苹果表面没有明显腐烂现象。
2. 在第二天,苹果表面开始出现细小的黑斑。
3. 第三天,黑斑扩散范围逐渐增大,苹果表面出现凹陷。
4. 第四天到第五天,苹果开始出现软烂的现象,表面开始渗出液体。
5. 第五天以后,苹果表面完全腐烂,变得软腐,散发出难闻的气味。
通过分析实验结果,我们可以得出植物腐烂的原因和机制:1. 植物腐烂主要是由于细菌和真菌的作用。
这些微生物在植物表面生长繁殖,并分解植物组织,产生酶和酸等物质,导致植物腐烂。
2. 植物腐烂还与环境因素有关。
高温、湿度和氧气充裕的条件会加速植物腐烂的过程。
实验结论通过本次实验,我们深入了解了植物腐烂的过程、原因和机制。
植物腐烂是细菌和真菌等微生物的分解作用以及环境因素的共同作用结果。
植物腐烂是自然界中重要的生物降解过程,也提醒我们在储存和运输水果蔬菜等植物性食品时要注意防止腐烂和保持其新鲜。
实验改进和展望在今后的实验中,我们可以进一步探究不同温度、湿度条件下植物腐烂速度的变化,以及微生物种类和分解产物的分析,从而更全面地了解植物腐烂的过程。
此外,还可以与其他因素如光照等进行结合研究,以获取更多关于植物腐烂的数据和理解。
苹果果实中真菌毒素的检测、分布及控制苹果果实中真菌毒素的检测、分布及控制苹果是世界上最常见和广泛种植的水果之一,但是它也容易受到真菌感染并产生毒素。
这些真菌毒素对人体健康产生潜在威胁,因此对苹果果实中真菌毒素的检测、分布及控制成为了一项重要的研究内容和农业管理方向。
首先,我们来了解一下真菌毒素的检测方法。
目前,主要采用的方法是高效液相色谱法(HPLC)和气相色谱法(GC)。
HPLC法可以通过分离和测定样品中的真菌毒素,是一种准确、灵敏和可靠的检测方法。
而GC法则适用于检测一些挥发性真菌毒素,尤其是一些化学结构简单的毒素。
这些现代检测方法为真菌毒素的检测提供了重要的工具和技术。
接下来,我们来看一下真菌毒素在苹果果实中的分布情况。
根据研究,苹果果实受到的真菌感染主要来自于果实受伤处,如虫咬或机械划伤等。
真菌会侵入果实并在其中繁殖,产生毒素。
不同地区、不同品种的苹果果实中真菌毒素的分布情况各有不同,但主要包括黄曲霉素、赤霉素和玉米赤霉酸等。
最后,我们来讨论一下控制真菌毒素的方法。
为了降低苹果果实中真菌毒素的含量,可以采取以下几种措施:1. 种植抗病品种:选用抗病性强的苹果品种种植,通过遗传抗性来减少真菌感染;2. 农药防治:使用合适的农药来防治果实感染真菌的情况,但要注意使用方法和剂量;3. 控制果实受伤:需加强果实保护,避免果实受伤,从源头上降低真菌感染的机会;4. 贮藏条件控制:在贮藏和运输过程中,注意温度和湿度的控制,减少真菌的繁殖和毒素的产生。
总结一下,苹果果实中真菌毒素的检测、分布及控制是一项重要的研究内容。
通过现代检测方法,可以准确检测苹果果实中的真菌毒素。
真菌毒素主要分布在果实受伤处,但不同地区、不同品种的苹果果实中真菌毒素的分布情况各有不同。
为了降低真菌毒素的含量,可以种植抗病品种、采取农药防治、控制果实受伤以及注意贮藏条件的控制等措施。
这些方法可以有效降低苹果果实中真菌毒素的含量,确保食品的安全与健康综上所述,苹果果实中真菌毒素的检测、分布和控制是一项重要的研究内容。
腐烂阿克苏红富士苹果中毒素的检测方法与迁移规律的研究吴思雅;姜楠;韦迪哲;庞学群;朱璇【期刊名称】《农产品加工》【年(卷),期】2024()1【摘要】为了明确腐烂苹果中的6种真菌毒素的含量及其迁移规律。
采用超高效液相色谱-质谱技术(UPLC-MS/MS)结合超高效液相色谱(HPLC),通过对腐烂的阿克苏红富士苹果中交链孢酚-AOH(Alternariol)、交链孢酚单甲醚-AME(Alternariol monamethyl ether)、细交链格孢酮酸-TEA(Tenuazonic acid)、交链孢烯-ALT(Altenuene)、腾毒素-TEN(Tentoxin)、展青霉素-PAT(Patulin)6种毒素的产毒范围、产毒条件、检测方法及迁移规律等方面进行了相关研究。
结果表明,交链孢毒素广泛存在于霉变的苹果中,且随着贮藏时间的延长毒素不断累积;扩展青霉产生展青霉素的最适温度为20~25℃,且随着培养时间的延长,产毒量呈现增加的单峰性变化趋势,同时高湿条件有利于展青霉素的产生。
【总页数】6页(P70-75)【作者】吴思雅;姜楠;韦迪哲;庞学群;朱璇【作者单位】新疆轻工职业技术学院食品与生物技术分院;北京市农林科学院农业质量标准与检测技术研究中心;华南农业大学生命科学学院;新疆农业大学食品科学与药学学院【正文语种】中文【中图分类】TS255【相关文献】1.油茶籽油中邻苯二甲酸酯类塑化剂的检测方法及迁移规律的研究2.聚氨酯泡沫中3种有机磷阻燃剂检测方法及其迁移规律研究3.葡萄酒酿造过程中赭曲霉毒素A 迁移规律的研究4.花椒和生姜及其提取物中邻苯二甲酸酯类检测方法及迁移规律的研究5.镰刀菌对太子参品质影响及DON毒素在其煎煮过程中迁移规律研究因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
一、实验目的1. 掌握果皮细菌的分离纯化技术。
2. 了解果皮细菌的形态观察和初步鉴定方法。
3. 探讨果皮细菌的种类及可能来源。
二、实验原理果皮是水果与外界环境接触的部位,容易受到细菌污染。
本实验通过平板划线法分离纯化果皮细菌,利用显微镜观察其形态,并对其进行初步鉴定。
三、实验材料与仪器1. 实验材料:苹果、梨、香蕉等水果的果皮。
2. 仪器:高压蒸汽灭菌器、电子天平、恒温培养箱、显微镜、无菌操作台、无菌镊子、无菌移液器、无菌试管、牛肉膏蛋白胨培养基、无菌生理盐水、酒精灯、棉签等。
四、实验方法1. 分离纯化(1)将水果果皮用无菌水冲洗干净,用无菌剪刀剪成小块。
(2)将果皮块放入无菌生理盐水中浸泡5分钟,取出后用无菌吸水纸吸干。
(3)将果皮块接种于牛肉膏蛋白胨培养基平板上,用无菌镊子轻轻划线。
(4)将平板倒置于恒温培养箱中培养24小时。
2. 形态观察(1)将分离纯化的菌落涂布于载玻片上,晾干。
(2)用火焰固定菌落,滴加适量结晶紫染液。
(3)用显微镜观察菌落形态,记录结果。
3. 初步鉴定(1)根据菌落形态、颜色、大小等特征,初步判断细菌种类。
(2)查阅相关文献,对细菌进行初步鉴定。
五、实验结果与分析1. 分离纯化结果实验共分离纯化出30个菌落,菌落形态各异,有球形、椭圆形、杆状等。
2. 形态观察结果观察到的菌落形态主要为杆状、球状和螺旋状,部分菌落具有荚膜。
3. 初步鉴定结果根据菌落形态,初步鉴定为以下几种细菌:(1)球形菌:可能为乳酸菌属。
(2)杆状菌:可能为肠杆菌科细菌。
(3)螺旋状菌:可能为弧菌属。
六、讨论与分析1. 实验结果表明,水果果皮上存在多种细菌,这可能与水果在采摘、储存、运输等过程中受到污染有关。
2. 分离纯化过程中,采用平板划线法可以有效分离纯化果皮细菌,为后续形态观察和鉴定提供基础。
3. 通过形态观察和初步鉴定,可以对果皮细菌进行分类,为研究其生物学特性提供依据。
4. 在实际应用中,了解果皮细菌的种类和数量,有助于制定合理的保鲜措施,降低水果的腐烂率。
果树病毒病的病原体分离和鉴定果树病毒病是一种危害果树产量和品质的严重病害,其主要症状包括叶片发黄、萎缩、凋谢,果实畸形、变形、腐烂等。
为了防治果树病毒病,首先需要对其病原体进行分离和鉴定。
一、病原体分离病原体分离是通过分离植物体内的病原体,减少混杂杂质,从而方便进一步鉴定。
具体步骤如下:1. 病部样品的采集:选择病变程度较严重的部位,如叶片、茎和果实,用锋利无菌工具在病部表面刮取一定量的样品。
2. 样品的处理:将采集到的样品剪成小碎片,去掉显微镜下可见的杂质,将样品洗净去掉表面的脏物。
用双倍体芽孢杆菌涂覆样品上,避免细菌和真菌感染病原体。
3. 植物材料的共接:将处理好的植物材料共接于适宜的寄主植物,培养在适宜的温度和湿度条件下,等到出现新症状后再进行病原体分离。
4. 病原体的分离:从培养的病株上,割取病部组织并进行后续病原体鉴定。
二、病原体鉴定病原体鉴定是通过对分离的病原体进行形态、生理、生化、分子等特性分析,确定其种属、亚种和血统等信息。
具体步骤如下:1. 病原体形态学鉴定:观察病原体的大小、形状、颜色、纹理等形态学特征,进行初步分类。
2. 病原体生理学鉴定:针对病原体的生长速度、生长温度等生理特性,进行进一步分类。
3. 病原体生物化学鉴定:对病原体进行代谢物分析、酶促反应等实验,确定病原体的代谢途径和能力等信息。
4. 病原体分子鉴定:通过分子生物学技术,如PCR、基因测序等,对病原体核酸序列进行分析,确定其分子特征和亲缘关系。
综上所述,果树病毒病的病原体分离和鉴定是果树病害防治的重要手段之一。
对于果树病毒病防治工作而言,不仅需要对病原体进行分离和鉴定,还需要建立有效的防治措施,如生物防治、化学防治等。
只有在病原体分离鉴定的基础上,才能制定针对性的防治策略,为果树生产提供可靠的保障。