甜菊糖苷的制备提纯以及定量测定研究

高效液相色谱法测定甜叶菊中甜菊糖总苷的含量关键词：利用高效液相色谱法对甜叶菊干叶中甜菊糖总苷含量开发出一种新的检测方法，通过单因素试验，确立了检测方法，即样品经30%乙腈超声提取、孔径为0.45μm的有机滤膜过滤后，选择C18（250mm×4.6mm，5μm）色谱柱；以78%的0.1%磷酸水溶液+22%乙腈（体积比）为流动相，1.0mL/min的流速进行洗脱。

在210nm 波长及40℃柱温下利用DAD检测器检测，用外标法定量。

得出的图谱峰形尖锐，结果回收率高、检测结果准确、精密度高、重复性良好。

说明此方法开发具有较强的可行性。

关键词：高效液相色谱法；甜叶菊；甜菊糖总苷Determination of stevioside in stevia rebaudiana byhigh performance liquid chromatographyAuthor:Siqiao XieInstructor:Bingbing ChenAbsrtact:a new detection method for stevioside content in stevia rebaudiana dry leaves was developed by high performance liquid chromatography. through single factor test, the detection method was established, in other words,C18(250mm×4.6mm, 5μm) chromatographic column was selected after the sample was ultrasonically extracted with 30% acetonitrile and filtered by 0.45μm organic filter membrane. Elution was carried out at a flow rate of 1.0mL/min with 78% 0.1% phosphoric acid aqueous solution +22% acetonitrile (volume ratio) as mobile phase. At 210nm wavelength and 40℃ column temperature, DAD detector was used for detection and external standard method was used for quantification. The obtained chromatogram has sharp peak shape, high recovery rate, accurate test results, pinpoint accuracy and beautiful repeatability. This shows that the development of this method is feasible.Key words:high performance liquid chromatography; Stevia rebaudiana; Stevioside total glycoside1 前言食物是人类得以生存的必备保障，食物的主要成分与构成人体的基本物质相同，人类可从食物中获取人体生长的营养物质及能量。

甜菊糖苷提取法生产
甜菊糖苷（stevioside）是一种天然甜味剂，可从甜菊叶（Stevia rebaudiana）中提取得到。

以下是一种常用的甜菊糖
苷提取法生产过程：
1. 采收和处理：甜菊叶在生长季节采收后，先进行预处理，包括去除杂质、洗涤等。

2. 提取：将经过预处理的甜菊叶加入适量的溶剂（如水）中，常用的提取方法有水蒸气蒸馏法和水提法。

其中，水蒸气蒸馏法是将甜菊叶加入蒸馏器中，用水蒸汽进行蒸馏提取，收集蒸馏物，然后进行浓缩和干燥；水提法是将甜菊叶浸泡在水中，经过一段时间后，将浸出液进行过滤和浓缩。

3. 回收和精制：收集到的甜菊糖苷提取物经过浓缩后，使用酶或活性炭对溶液进行处理，去除杂质和色素成分。

4. 结晶和干燥：将精制的甜菊糖苷溶液进行结晶，通常采用结晶法或离心浓缩法。

结晶后得到的甜菊糖苷颗粒进行干燥，以得到最终的甜菊糖苷产品。

5. 包装和贮存：将干燥的甜菊糖苷产品进行包装，储存在干燥、避光、低温的环境中，以保持其甜味和营养成分的稳定性。

以上是一种通用的甜菊糖苷提取法生产过程，不同厂商和工厂可能会有一些差异和改进。

提取法的选择和操作条件的优化对提高产品的纯度和产量都具有重要意义。

从甜菊叶中提取和精制甜菊苷的工艺研究张丽娜,于涛,高冷摘要:实验采用乙醚先对甜菊叶进行脱脂,再用70%乙醇提取,Ca(O H)2和KAl(SO4)2作沉淀剂,在80℃下去除提取液中的杂质和色素,再经AB28大孔吸附树脂处理,99%乙醇重结晶,制得含量可达10.85%、纯度可达91.7%的甜菊苷。

关键词:甜菊苷;提取;分离;重结晶 甜菊苷是从菊科植物—甜菊叶的叶和茎中提取出来的,是一种高甜度、低热值的天然甜味剂,其甜度约为蔗糖的200～300倍。

甜菊苷作为一种新型甜味剂,在食品、医药等方面已有广泛应用[1]。

据报道,在甜菊叶的水提取液中,除含有甜菊苷外,尚有大量有机酸、蛋白质、色素、无机盐等杂质,大量杂质的存在使提取液的色泽很深,给分离和精制甜菊苷的工作带来很大的困难[2]。

实验主要探讨提取和精制甜菊苷的工艺,从而获得纯度较高的甜菊苷。

1　实验部分111　材料、试剂与主要设备11111　实验材料菊甜叶,由黑龙江海林甜菊甙厂提供。

11112　实验试剂Ca(O H)2,KAl(SO4)2,FeSO4,Na HCO3, SPFS,H2SO4,99%乙醇,乙醚,蒽酮,甲醇,正丁醇,试剂均为分析纯。

11113　主要设备AB28型大孔吸附树脂;UV21600型紫外可见分光光度计;GT22Z真空冷冻干燥机;RE25298型旋转蒸发仪;WSZ2133265型电热恒温水浴锅。

112　实验方法11211　工艺流程甜菊叶→粉碎→乙醚脱脂→70%乙醇提取→Ca(O H)2和KAl(SO4)2沉淀絮凝→离心、过滤→AB28大孔吸附树脂处理→烘干→重结晶→甜菊苷11212　方法1121211　乙醚脱脂 称取粉碎的甜菊叶10g,用纱布包好放在索氏提取器中,安装冷凝管,注入乙醚,提取至索氏提取器浸提筒中的乙醚显无色,一般提取6～8h即可,取出,放在通风橱中使乙醚挥发,弃取乙醚液。

1121212　甜菊苷的提取取100g已用乙醚脱脂的甜菊叶,放在2000mL烧杯中,加入600mL溶剂,在80℃水浴上回流提取3h,残渣再分别用300mL溶剂如前反复提取3次,将4次滤液合并,得深棕色提取液约1500mL。

甜叶菊中甜菊糖苷的分离纯化工艺研究甜叶菊中甜菊糖苷的分离纯化工艺研究摘要：甜叶菊（Stevia rebaudiana Bertoni）是一种植物，其叶片含有丰富的甜菊糖苷。

甜菊糖苷是一类天然甜味剂，具有低热值、不导致血糖升高等特点，在食品、饮料以及药品中得到广泛应用。

本研究旨在探索甜叶菊中甜菊糖苷的分离纯化工艺，以提高甜菊糖苷的提取效率和纯度。

1. 引言甜菊糖苷是一类具有甜味的天然产物，被广泛应用于食品和饮料中作为替代糖的甜味剂。

在甜菊糖苷中，主要含有甜菊糖苷A、甜菊糖苷B、甜菊糖苷C等成分。

甜叶菊是一种世界性分布的植物，栽培简单，叶片中所含甜菊糖苷的含量较高。

因此，研究甜菊糖苷的提取分离纯化工艺，在提高甜菊糖苷的产量和纯度方面具有重要意义。

2. 材料与方法2.1 微波辅助提取将鲜甜叶菊叶片研磨成粉末状，加入乙醇作为提取剂，使用微波辅助提取的方法进行提取。

设置不同的提取温度、提取时间以及提取液的固液比进行实验，以寻找最佳的提取条件。

2.2 甜菊糖苷的粗提液处理将提取得到的甜菊糖苷粗提液经过蒸发浓缩，去除大部分的乙醇。

然后，在低温下进行超滤处理，将小分子化合物和部分杂质去除。

2.3 柱层析分离将超滤得到的样品溶液经过过硅酸镓柱层析进行分离，用不同的溶剂进行洗脱，收集不同组分。

然后，对各组分进行比较，选择含有较高甜菊糖苷的洗脱液进行进一步纯化。

2.4 再结晶与干燥将纯化得到的洗脱液进行再结晶，得到结晶物。

再通过真空干燥等方法，将结晶物干燥至恒定重量，得到最终的甜菊糖苷产品。

3. 结果与讨论3.1 微波辅助提取实验结果经过对微波辅助提取实验的优化，最佳提取温度为60℃，提取时间为30分钟，提取液固液比为20:1。

在此条件下，甜菊糖苷的提取率最高。

3.2 柱层析分离结果通过柱层析分离，最终得到甜叶菊中甜菊糖苷A、甜菊糖苷B 和甜菊糖苷C三种组分。

进一步比较分析发现，甜菊糖苷A的含量最高，可以选择该组分进行纯化。