(完整word版)实验1、紫外可见光谱实验报告

第1篇一、实验目的本次实验旨在通过医药光谱检测技术，学习并掌握紫外-可见光谱、红外光谱和拉曼光谱等分析技术在医药领域的应用。

通过实验，了解光谱检测的基本原理、仪器操作方法，以及如何利用光谱数据对医药样品进行定性、定量分析。

二、实验原理1. 紫外-可见光谱：紫外-可见光谱是利用物质对紫外和可见光的吸收特性进行定性、定量分析的方法。

当分子中的电子从基态跃迁到激发态时，会吸收特定波长的光，产生吸收光谱。

紫外-可见光谱可以用于检测药物中的有效成分、杂质、降解产物等。

2. 红外光谱：红外光谱是利用物质对红外光的吸收特性进行定性、定量分析的方法。

分子中的化学键在红外光照射下会振动、转动，产生红外光谱。

红外光谱可以用于鉴定药物分子结构、研究药物分子间相互作用等。

3. 拉曼光谱：拉曼光谱是利用物质对拉曼光的散射特性进行定性、定量分析的方法。

当拉曼光照射到分子上时，分子中的振动、转动等模式会改变光子的能量，产生拉曼光谱。

拉曼光谱可以用于研究药物分子在溶液中的构象、分子间相互作用等。

三、实验仪器与试剂1. 仪器：紫外-可见分光光度计、红外光谱仪、拉曼光谱仪、样品池、标准品、待测样品等。

2. 试剂：无水乙醇、蒸馏水、溶剂等。

四、实验步骤1. 紫外-可见光谱检测（1）将待测样品和标准品分别配制为一定浓度的溶液。

（2）将溶液倒入样品池中，设置波长范围为200-800nm。

（3）打开紫外-可见分光光度计，调整仪器参数，进行光谱扫描。

（4）分析待测样品和标准品的吸收光谱，进行定性、定量分析。

2. 红外光谱检测（1）将待测样品和标准品分别制成薄片。

（2）将薄片放入红外光谱仪的样品池中。

（3）设置波长范围为4000-400cm-1，进行红外光谱扫描。

（4）分析待测样品和标准品的红外光谱，进行定性、定量分析。

3. 拉曼光谱检测（1）将待测样品和标准品分别制成溶液。

（2）将溶液倒入拉曼光谱仪的样品池中。

（3）设置激发光源为激光，波长范围为785nm。

实验七：紫外可见光谱实验一、实验目的1.熟悉和掌握紫外-可见吸收光谱的使用方法2.用紫外-可见吸收光谱测定某一位置样品浓度二、实验原理紫外吸收光谱的波长范围在200~400，可见光吸收光谱的波长在400~800，两者都属于电子能谱，两者都可以用朗伯比尔（Lamber-Beer’s Law）定律来描述A=ε bc其中A为吸光度;ε为光被吸收的比例系数；c为吸光物质的浓度,单位mol/L；b为吸收层厚度，单位cm有机化合物的紫外-可见吸收光谱，是其分子中外层价电子跃迁的结果，其中包括有形成单键的σ电子、有形成双键的π电子、有未成键的孤对n电子。

外层电子吸收紫外或者可见辐射后，就从基态向激发态（反键轨道）跃迁。

主要有四种跃迁，所需能量ΔE大小顺序为σ→σ*>n→σ*>π→π>n→π*吸收带特征典型基团σ→σ* 主要发生在远紫外区C-C、C-H（在紫外光区观测不到）n→σ* 跃迁一般发生在150~250nm，因此在紫外区不易观察到-OH、-NH 2 、-X、-Sπ→π* 跃迁吸收带波长较长，孤立跃迁一般发生在200nm左右芳香环n→π* 跃迁一般发生在近紫外区（200~400nm）C=O、C=S、－N=O、－N=N－、C=N ;三、实验步骤1、紫外-可见分光光度计2、1cm玻璃比色皿一套3、UVprobe电脑软件4、配置好的已知溶度BSA（牛血清白蛋白）溶液，及未知溶度BSA溶液四、实验步骤1、开机打开紫外-可见分光光度计开关→开电脑→软件→联接→M（光谱方法）进行调节实验需要的参数：波长范围200-400nm扫描速度高速；采样间隔：0.2nm2、BSA的测定（1）校准基线将空白样品（水）放到比色槽中，点击“基线”键，进行基线校准（2）标准曲线的测定分别将25mg/l、50mg/ml BSA（牛血清白蛋白）溶液移入比色皿（大约2/3处），放到比色槽中，点击“开始”键，进行扫描，保存（3）测定试样将自己配置的试样BSA溶液移入比色皿（大约2/3处），放到比色槽中，点击“开始”键，进行扫描，保存五、实验结果及数据处理通过测定已知浓度的BSA溶液吸收谱，根据比尔公式画出一条直线，根据此线测未知溶度BSA溶液的浓度。

实验课紫外实验报告一、引言紫外（UV）实验是一种常见的化学实验，通过测量物质在紫外光下的吸收和透射特性，可以得到该物质的吸收光谱，进而了解其分子结构和化学性质。

本实验旨在通过紫外吸收光谱的测定，研究物质在紫外光下的吸收特性。

二、实验方法所需实验器材和试剂：1. 紫外可见分光光度计2. 石英比色皿3. 待测物质溶液4. 工作曲线样品溶液实验步骤：1. 准备工作a. 将紫外可见分光光度计预热30分钟。

b. 校准分光光度计，设置较低的基准波长，比如190nm。

c. 准备工作曲线样品溶液。

2. 测定待测物质的吸收和透射特性a. 将待测物质溶液分别倒入两个石英比色皿中。

b. 将一个比色皿放入紫外可见分光光度计，设置起始波长和终止波长，记录吸收光谱曲线。

c. 将另一个比色皿放入分光光度计，测量透射光强。

3. 制备工作曲线a. 取不同浓度的工作曲线样品溶液，分别倒入石英比色皿中。

b. 分别测量吸收光强，绘制工作曲线。

4. 分析实验结果a. 根据待测物质的吸收光谱曲线，找出吸收峰的波长。

b. 利用工作曲线，通过比较吸光度和浓度的关系，计算出待测物质溶液中的浓度。

三、实验结果通过测量待测物质溶液的吸收光谱曲线，我们观察到在特定波长处有吸收峰。

根据工作曲线，我们可以比较吸光度和浓度的关系，进而计算出待测物质溶液的浓度。

四、实验讨论与分析在本实验中，我们使用紫外可见分光光度计测量了待测物质的紫外吸收光谱，并通过工作曲线计算了待测物质溶液的浓度。

然而，在实际实验操作中，我们也遇到了一些问题。

首先，由于待测物质的吸收峰可能出现在较高的波长，因此我们需要确保所选用的分光光度计可以测量更高范围的波长。

否则，我们可能会错过待测物质的吸收峰，导致测量结果不准确。

其次，待测物质溶液的浓度对实验结果的准确性有很大影响。

浓度过高或过低都会导致吸收峰的强度不明显，进而影响测量结果。

因此，在进行实验前，我们应该选择合适的样品浓度，避免浓度过高或过低的情况发生。

实验五色氨酸、苯丙氨酸和酪氨酸的紫外吸收光谱分析一、实验目的1. 掌握紫外-可见分光光度计的工作原理和基本操作。

2. 掌握紫外-可见吸收光谱的绘制（包括导数光谱）以及定量测定方法。

3. 掌握。

4. 了解氨基酸类物质的紫外吸收光谱特点。

二、实验原理1. 紫外-可见吸收光谱法测定蛋白质含量的基本原理紫外-可见吸收光谱法是根据溶液中物质的分子或离子对紫外和可见光谱区辐射能的吸收来研究物质的组成和结构的方法，也称作紫外和可见吸收广度法，它包括比色分析法和紫外-可见分光光度法。

紫外-可见分光光度法属于吸收光谱法，分子中的电子总是处在某一种运动状态中，每一种状态都具有一定的能量，属于一定的能级。

电子由于受到光、热、电等的激发，从一个能级转移到另一个能级，称为跃迁。

当这些电子吸收了外来辐射的能量，就从一个能量较低的能级跃迁到另一个能量较高的能级。

图1 电子跃迁示意图物质对不同波长的光线具有不同的吸收能力，如果改变通过某一吸收物质的入射光的波长，并纪录该物质在每一波长处的吸光度(A),然后以波长为横坐标，以吸光度为纵坐标作图，这样得到的谱图为该物质的吸收光谱或吸收曲线。

当一定波长的光通过某物质的溶液时，入射光强度I。

与透过光强度I之比的对数与该物质的浓度c及样品池厚度b成正比。

其数学表达式为:此式为Lambert-Beer定律，是分光光度法定量分析的基础，其中A为吸光度。

由于不同物质具有不同的分子结构，对不同波长的光会产生选择性吸收，具有不同的吸收光谱，因而，我们可以利用紫外-可见吸收光谱法对物质结构进行鉴定和进行定量分析、根据被测量物质分子对紫外-可见波段范围(150~800nm)单色辐射的吸收或反射强度来进行物质的定性、定量或结构分析的一种方法。

氨基酸(amino acid)：含有氨基和羧基的一类有机化合物的通称，是蛋白质的基本组成单位。

氨基酸类物质的一个重要光学性质是对光有吸收作用。

20种氨基酸在可见光区域均无光吸收，在远紫外区均有光吸收，而在近紫外区(220nm-300nm)只有三种AA有光吸收能力，这三种氨基酸分别是色氨酸(Try)、酪氨酸(Tyr)和苯丙氨酸(Phe)因为它们的结构均含有芳香共轭π键系统。

实验报告紫外可见光谱实验实验报告：紫外可见光谱实验一、实验目的本次紫外可见光谱实验的主要目的是让我们熟悉并掌握紫外可见分光光度计的工作原理和操作方法，通过对不同物质的紫外可见吸收光谱的测量和分析，深入了解物质的结构和性质之间的关系，以及学会利用紫外可见光谱进行定量分析。

二、实验原理紫外可见光谱是基于分子中的电子在不同能级之间跃迁而产生的吸收光谱。

当分子吸收紫外或可见光的能量时，电子会从基态跃迁到激发态，从而在特定的波长处产生吸收峰。

不同的分子结构和官能团具有不同的紫外可见吸收特征，因此可以通过测量物质的紫外可见吸收光谱来鉴定物质的结构和组成。

朗伯比尔定律是紫外可见光谱定量分析的基础。

该定律表明，溶液的吸光度与溶液中吸光物质的浓度和液层厚度成正比，即 A ＝εbc，其中 A 为吸光度，ε 为摩尔吸光系数，b 为液层厚度，c 为溶液浓度。

三、实验仪器与试剂1、仪器紫外可见分光光度计石英比色皿移液器容量瓶2、试剂标准物质（如苯甲酸）待测样品溶液去离子水四、实验步骤1、仪器预热打开紫外可见分光光度计，预热 30 分钟，使仪器稳定。

2、波长校准使用标准汞灯对仪器的波长进行校准，确保测量波长的准确性。

3、溶液配制（1）配制标准溶液：准确称取一定量的标准物质（如苯甲酸），用去离子水溶解并定容至一定体积，配制一系列不同浓度的标准溶液。

（2）配制待测溶液：将待测样品用适当的溶剂溶解，并定容至一定体积。

4、测量吸光度（1）以去离子水为参比溶液，在选定的波长范围内，分别测量标准溶液的吸光度。

（2）测量待测溶液的吸光度。

5、绘制标准曲线以标准溶液的浓度为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制标准曲线。

6、计算待测溶液的浓度根据待测溶液的吸光度，在标准曲线上查得对应的浓度，或者通过线性回归方程计算出待测溶液的浓度。

五、实验数据与处理1、标准溶液浓度与吸光度数据｜浓度（mg/L）｜吸光度｜｜：：｜：：｜｜ 10 ｜ 025 ｜｜ 20 ｜ 050 ｜｜ 30 ｜ 075 ｜｜ 40 ｜ 100 ｜｜ 50 ｜ 125 ｜2、绘制标准曲线根据上述数据，绘制标准曲线，得到线性回归方程为：A ＝ 0025c ＋ 001 （其中 A 为吸光度，c 为浓度，单位为 mg/L）3、待测溶液吸光度及浓度计算待测溶液的吸光度为 065，代入线性回归方程，计算得到待测溶液的浓度为：＼＼begin{align}065&＝0025c ＋ 001\＼0025c&＝065 001\＼0025c&＝064\＼c&＝256 ＼text{mg/L}＼end{align}＼六、实验结果与讨论1、实验结果通过本次实验，成功测量了标准物质和待测样品的紫外可见吸收光谱，并利用标准曲线法计算出了待测样品的浓度。

实验一：紫外-可见吸收光谱一、实验目的1.熟悉和掌握紫外-可见吸收光谱的使用方法2.用紫外-可见吸收光谱测定某一位置样品浓度3.定性判断和分析溶液中所含物质种类二、实验原理紫外吸收光谱的波长范围在200~400，可见光吸收光谱的波长在400~800，两者都属于电子能谱，两者都可以用朗伯比尔（Lamber-Beer’s Law）定律来描述A=ε bc其中A为吸光度;ε为光被吸收的比例系数；c为吸光物质的浓度,单位mol/L；b为吸收层厚度，单位cm有机化合物的紫外-可见吸收光谱，是其分子中外层价电子跃迁的结果，其中包括有形成单键的σ电子、有形成双键的π电子、有未成键的孤对n电子。

外层电子吸收紫外或者可见辐射后，就从基态向激发态（反键轨道）跃迁。

主要有四种跃迁，所需能量ΔE大小顺序为σ→σ*>n→σ*>π→π>n→π*1、开机打开紫外-可见分光光度计开关→开电脑→软件→联接→M（光谱方法）进行调节实验需要的参数：波长范围700-365nm扫描速度高速；采样间隔：0.5nm2、甲基紫的测定（1）校准基线.将空白样品（水）放到比色槽中，点击“基线”键，进行基线校准（2）标准曲线的测定分别将5ug/ml、10ug/ml 、15ug/ml 、20ug/ml甲基紫溶液移入比色皿（大约2/3处），放到比色槽中，点击“开始”键，进行扫描，保存（3）测定试样将试样甲基紫溶液移入比色皿（大约2/3处），放到比色槽中，点击“开始”键，进行扫描，保存3、甲基红的测定（1）校准基线将空白样品（乙醇）放到比色槽中，点击“基线”键，进行基线校准（2）测定试样将试样甲基紫溶液移入比色皿（大约2/3处），放到比色槽中，点击“开始”键，进行扫描，保存四、实验结果1.未知浓度的测定分别测定了5μg/ml，10μg/ml，15μg/ml，20μg/ml和未知浓度的甲基紫溶液的紫外吸收光谱，紫外吸收谱图如下：甲基紫在580nm是达到最大吸收见下表：.各浓度在580nm的吸光度数据做成散点，结果显示，能很好的拟合直线如下图：由计算机计算的拟合直线的关系为A = 0.135c - 0.027故带入未知浓度的甲基紫溶液的吸光度0.732得浓度为5.622μg/ml-12.化合物的定性分析已知甲基橙和甲基紫的结构式如下图所示：甲基橙甲基红.从图中可知，甲基紫约在580nm左右达到吸光度的最大值，而甲基橙溶液在410那么时达到吸光度最大值，这是由于甲基紫和甲基橙的结构不同造成的，由于甲基紫结构高度共轭，形成大π键，故最强吸收峰要的波长要比甲基橙的大（红移），同时由于高度共轭，吸光强度也有所增强。

实验报告紫外可见光谱实验实验报告：紫外可见光谱实验一、实验目的本次紫外可见光谱实验的主要目的是通过对样品在紫外和可见光区域的吸收特性进行测量和分析，从而获取有关样品的化学组成、浓度、分子结构等重要信息。

具体目标包括：1、熟悉紫外可见分光光度计的工作原理和操作方法。

2、掌握使用紫外可见分光光度计进行定量和定性分析的基本原理和实验技术。

3、学会通过绘制吸收光谱曲线来确定样品的最大吸收波长，并据此对样品进行定性鉴别。

4、能够运用朗伯比尔定律，通过测量吸光度来准确测定样品的浓度。

二、实验原理1、物质对光的吸收当一束光通过某种物质时，部分光会被物质吸收，而未被吸收的光则会透过物质。

物质对光的吸收程度取决于物质的分子结构、浓度以及光的波长等因素。

2、紫外可见光谱区域紫外光的波长范围通常在 10 400 nm 之间，可见光的波长范围在400 780 nm 之间。

在这个波长范围内，不同的物质会表现出不同的吸收特性。

3、朗伯比尔定律朗伯比尔定律表明，当一束平行单色光通过均匀的、非散射的吸光物质溶液时，溶液的吸光度与溶液的浓度和光通过的液层厚度成正比，其数学表达式为：A ＝εbc，其中 A 为吸光度，ε 为摩尔吸光系数，b为液层厚度（通常为比色皿的光程长度），c 为溶液的浓度。

4、吸收光谱曲线以波长（λ）为横坐标，吸光度（A）为纵坐标绘制的曲线称为吸收光谱曲线。

通过吸收光谱曲线，可以直观地观察到物质在不同波长下的吸收情况，从而确定最大吸收波长（λmax）。

三、实验仪器与试剂1、仪器紫外可见分光光度计、比色皿（1cm）、容量瓶（50 mL、100 mL）、移液管（1 mL、5 mL、10 mL）、玻璃棒、烧杯。

2、试剂标准溶液（已知浓度的某种物质溶液）、待测样品溶液、蒸馏水。

四、实验步骤1、仪器预热打开紫外可见分光光度计，预热 20 30 分钟，使其稳定工作。

2、溶液配制（1）标准溶液的配制用移液管准确移取一定体积的标准物质储备液，分别放入不同的容量瓶中，用蒸馏水稀释至刻度，配制一系列不同浓度的标准溶液。

紫外-可见分光光度法1 简述紫外-可见分光光度法是在190-800nm 波长范围内测定物质的吸光度，用于鉴别、杂质检查和含量测定的方法。

定量分析通常选择物质的最大吸收波长处测出吸光度，然后用对照品或吸收系数求算出被测物质的含量，多用于制剂的含量测定；对已知物质定性可用吸收峰波长或吸光度比值作为鉴别方法；若该物质本身在紫外光区无吸收，而其杂质在紫外光区有相当强度的吸收，或杂质的吸收峰处该物质无吸收，则可用本法作杂质检查。

物质对紫外辐射的吸收是由于分子中原子的外层电子跃迁所产生，因此，紫外吸收主要决定于分子的电子结构，故紫外光谱又称电子光谱。

有机化合物分子结构中如含有共轭体系、芳香环等发色基团，均可在紫外区（200~400nm ）或可见光区（400~850nm ）产生吸收。

通常使用的紫外-可见分光光度计的工作波长范围为190~900nm 。

紫外吸收光谱为物质对紫外区辐射的能量吸收图。

朗伯-比尔（Lambert-Beer ）定律为光的吸收定律，它是紫外-可见分光光度法定量分析的依据，其数学表达式为: A=logT1=ECL 式中 A 为吸光度;T 为透光率;E 为吸收系数;C 为溶液浓度;L 为光路长度。

如溶液的浓度（C ）为1%（g/ml ），光路长度（L ）为lcm ，相应的吸光度即为吸收系数以%11cm E 表示。

如溶液的浓度（C ）为摩尔浓度（mol/L ），光路长度为lcm 时，则相应有吸收系数为摩尔吸收系数，以ε表示。

2 仪器紫外-可见分光光度计主要由光源、单色器、样品室、检测器、记录仪、显示系统和数据处理系统等部分组成。

为了满足紫外-可见光区全波长范围的测定，仪器备有二种光源，即氘灯和碘钨灯，前者用于紫外区，后者用于可见光区。

单色器通常由进光狭缝、出光狭缝、平行光装置、色散元件，聚焦透镜或反射镜等组成。

色散元件有棱镜和光栅二种，棱镜多用天然石英或熔融硅石制成，对200~40Onm波长光的色散能力很强，对600nm以上波长的光色散能力较差，棱镜色散所得的光谱为非匀排光谱。

紫外可见光谱实验报告[实验二：LED光源光谱定标LED光谱测量实验报告]本科学生综合性实验报告学号姓名学院物电学院专业、班级光电子实验课程名称光谱技术及应用实验教师及职称开课学期2016 至2017 学年下学期填报时间2017 年 6 月10 日XXXX大学教务处编印一．实验设计方案实验序号二实验名称LED光源光谱定标实验时间2014年6月5日实验室同析三栋318 1．实验目的1、理解波长标定的意义；2、掌握波长标定的方法；3、理解波长最大允许误差和波长重复性的意义；4、掌握检定波长最大允许误差和波长重复性的方法。

2．实验原理、实验流程或装置示意图JJG178‐2007《紫外、可见、近红外分光光度计》检定规程，2007年11月21日经国家质检总局批准发布，并自2008年5月21日起实施。

该规程对波长范围190nm~2600nm，波长连续可调的可见、紫外‐可见、紫外‐可见‐近红外分光光度计的首次检定、后续检定和使用中检定做出了明确要求。

规程首先将仪器的波长划分为三段，分别是A 段（190nm~340nm）、B 段（340nm~900nm）、C 段（900nm~2600nm）。

按照计量性能的高低将仪器划分为Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ共四个级别。

规程规定需要检定的主要性能指标包括波长最大允许误差、波长重复性、噪声与漂移、最小光谱带宽、透射比最大允许误差、透射比重复性、基线平直度、电源电压的适应性、杂散光、吸收池的配套性。

波长最大允许误差波长最大允许误差也称为波长准确度，是指仪器测定时标称的波长值与仪器出射的光线实际波长值（波长的参考或理论值）之间的符合程度，一般用多次波长测量值平均值与参考值之差（即波长误差）来测量。

波长准确度的大小其实质反映的是波长的系统误差，一般由仪器装置在制造中的缺陷或仪器没有调整到最佳状态而造成的，它对测量的准确度有很大影响，特别是在对不同仪器的测试结果进行比较时，波长准确度显得更为重要。

1. 理解紫外-可见光谱定性分析的原理和方法。

2. 掌握紫外-可见光谱仪器的操作技能。

3. 通过紫外光谱定性分析，识别和鉴定未知化合物。

4. 熟悉数据处理和结果分析。

二、实验原理紫外-可见光谱分析是一种基于物质分子对紫外和可见光的选择性吸收特性进行定性和定量分析的方法。

当不同波长的单色光通过被分析的物质时，物质会吸收特定波长的光，导致光的强度减弱。

这种吸收现象与物质的分子结构有关，因此可以通过分析吸收光谱来鉴定物质的种类。

紫外-可见光谱分析通常分为定性和定量两个部分。

定性分析是通过比较未知样品的吸收光谱与已知化合物的标准光谱，确定未知样品的化学结构。

定量分析则是通过测量样品的吸光度或透光率，计算出样品中特定物质的浓度。

三、实验仪器与试剂1. 仪器：- 紫外-可见光谱仪- 紫外-可见光吸收池- 移液器- 电子天平- 烧杯- 试剂瓶2. 试剂：- 未知样品溶液- 标准溶液（已知浓度）- 水或其他溶剂1. 标准溶液的制备：- 称取一定量的标准物质，溶解于适量的溶剂中，配制成一定浓度的标准溶液。

2. 未知样品溶液的制备：- 称取一定量的未知样品，溶解于适量的溶剂中，配制成一定浓度的未知样品溶液。

3. 吸收光谱的测定：- 将标准溶液和未知样品溶液分别倒入紫外-可见光吸收池中。

- 将吸收池放入紫外-可见光谱仪中，设置合适的波长范围和步长。

- 测量标准溶液和未知样品溶液在各个波长下的吸光度或透光率。

4. 数据处理和分析：- 将测量得到的吸光度或透光率数据输入计算机，绘制吸收光谱曲线。

- 将未知样品的吸收光谱曲线与标准溶液的吸收光谱曲线进行比较，确定未知样品的化学结构。

五、实验结果与分析1. 标准溶液的吸收光谱曲线：- 在紫外-可见光谱仪上，绘制标准溶液的吸收光谱曲线，观察其特征峰和形状。

2. 未知样品的吸收光谱曲线：- 在紫外-可见光谱仪上，绘制未知样品的吸收光谱曲线，观察其特征峰和形状。

3. 定性分析：- 将未知样品的吸收光谱曲线与标准溶液的吸收光谱曲线进行比较，确定未知样品的化学结构。