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- - word.zl- 常见化学发光免疫分析技术比拟
1、化学发光免疫分析
化学发光免疫分析(chemiluminescence immunoassay，CLIA)，
英音：[,kemi,lju:mi'nesəns][,imju:nəuə'sei]
是将具有高灵敏度的化学发光测定技术与高特异性的免疫反响相结合，用于各种抗原、半抗原、抗体、激素、酶、脂肪酸、维生素和药物等的检测分析技术。是继放免分析、酶免分析、荧光免疫分析和时间分辨荧光免疫分析之后开展起来的一项最新免疫测定技术。
CLIA是将具有高灵敏度的化学发光测定技术与高特异性的免疫反响相结合，用于各种抗原、半抗原、抗体、激素、酶、脂肪酸、维生素和药物等的检测分析技术。是继放免分析、酶免分析、荧光免疫分析和时间分辨荧光免疫分析之后开展起来的一项最新免疫测定技术。
1.1、化学发光免疫分析原理
化学发光免疫分析包含两个局部, 即免疫反响系统和化学发光分析系统。化学发光分析系统是利用化学发光物质经催化剂的催化和氧化剂的氧化, 形成一个激发态的中间体, 当这种激发态中间体回到稳定的基态时, 同时发射出光子(hv) , 利用发光信号测量仪器测量光量子产额。免疫反响系统是将发光物质(在反响剂激发下生成激发态中间体) 直接标记在抗原(化学发光免疫分析) 或抗体(免疫化学发光分析) 上, 或酶作用于发光底物。
1.2、化学发光免疫分析类型 -
常见发光免疫分析技术的比较
更多相关文章 时间:2010-5-20 9:58:00,点击:953
免疫学技术的迅速发展对精度的要求越来越高，一般的酶免检测技术已逐渐无法适应这种形势的需要。现今发展的主流已不再是用放射性同位素标记的测定方法(避免污染环境及对人体损害)，而是转向于能在任何地方操作的快速均相和固相测定，最终趋向于能够枪测到皮克或10负18摩尔级的、非同位素的、自动或半自动的实验室测定技术，发光免疫分析技术顺应了这一潮流，开创了免疫诊断的新纪元。
发光免疫分析是一种灵敏度高、特异性强、检测快速及无放射危害的分析技术。70年代末以来得到了迅速发展，目前在国际上已经实现商品化和产业化的发光免疫分析产品，基本上可以分为：化学发光、时间分辨荧光(也称时间延迟光致发光)、电化学发光(也称场致发光和电致发光)几种。
1、化学发光
化学发光是指在化学反应过程中发出可见光的现象。通常是指有些化合物不经紫外光或可见光照射，通过吸收化学能(主要为氧化还原反应)，从基态激发至激发态。退激时通过跃迁(或将激发能转移至受体分子上)，释放能量产生光子，以光形式放出能量从而导致的发光现象。其主要特点为消耗发光剂。同时量子效率相对较低。
1.1 按化学反应类型分类：可分为酶促化学发光和非酶促化学发光两类。其中酶促化学发光主要包括辣根过氧化物酶(HRP)系统、碱性磷酸酶 (ALP)系统、黄嘌呤氧化酶系统等。酶促发光的共同特点为发光过程中作为标记物的酶基本不被消耗，而反应体系中发光剂充分过最，因此发光信号强而稳定，且发光时间较长。因此可采用速率法测量，故检测方式简单、成本较低。酶促反应的主要缺点为工作曲线可能随时间漂移，而且低端斜率容易呈非线性下移。而非酶促化学发光包括吖啶酯系统、草酸酯系统、三价铁一鲁米诺系统等。非酶促发光的共同特点为发光过程中标记物被消耗，同时作为标记物的发光剂是发光反应的瓶颈，即含量总是相对不足，因此发光信号持续时间较短；如果直接在免疫反应杯中启动发光反应，由于发光剂被很快消耗，故只能进行一次性测量。所以重复性较差。为降低检测成本并实现重复测量，目前普遍采用原位进样加流动池的时间积分测量方式。因此仪器成本及维护费用较高，而且反复使用的流动池可能导致交叉污染；并目冲洗或进样中产生的气泡也会干扰测定；同时繁琐冗长的冲洗过程也会成为提高检测效率的瓶颈。另外，使用磁性或非磁性微粒时，强烈的散射吸收作用也会降低灵敏度。
免疫学技术的迅速开展对精度的要求越来越高，一般的酶免检测技术已逐渐无法适应这种形势的需要。现今开展的主流已不再是用放射性同位素标记的测定方法(防止污染环境及对人体损害)，而是转向于能在任何地方操作的快速均相和固相测定，最终趋向于能够枪测到皮克或10负18摩尔级的、非同位素的、自动或半自动的实验室测定技术，发光免疫分析技术顺应了这一潮流，开创了免疫诊断的新纪元。
发光免疫分析是一种灵敏度高、特异性强、检测快速及无放射危害的分析技术。70年代末以来得到了迅速开展，目前在国际上已经实现商品化和产业化的发光免疫分析产品，根本上可以分为：化学发光、时间分辨荧光(也称时间延迟光致发光)、电化学发光(也称场致发光和电致发光)几种。
1、化学发光
化学发光是指在化学反响过程中发出可见光的现象。通常是指有些化合物不经紫外光或可见光照射，通过吸收化学能(主要为氧化复原反响)，从基态激发至激发态。退激时通过跃迁(或将激发能转移至受体分子上)，释放能量产生光子，以光形式放出能量从而导致的发光现象。其主要特点为消耗发光剂。同时量子效率相对较低。
1.1 按化学反响类型分类：可分为酶促化学发光和非酶促化学发光两类。其中酶促化学发光主要包括辣根过氧化物酶(HRP)系统、碱性磷酸酶 (ALP)系统、黄嘌呤氧化酶系统等。酶促发光的共同特点为发光过程中作为标记物的酶根本不被消耗，而反响体系中发光剂充分过最，因此发光信号强而稳定，且发光时间较长。因此可采用速率法测量，故检测方式简单、本钱较低。酶促反响的主要缺点为工作曲线可能随时间漂移，而且低端斜率容易呈非线性下移。而非酶促化学发光包括吖啶酯系统、草酸酯系统、三价铁一鲁米诺系统等。非酶促发光的共同特点为发光过程中标记物被消耗，同时作为标记物的发光剂是发光反响的瓶颈，即含量总是相对缺乏，因此发光信号持续时间较短；如果直接在免疫反响杯中启动发光反响，由于发光剂被很快消耗，故只能进行一次性测量。所以重复性较差。为降低检测本钱并实现重复测量，目前普遍采用原位进样加流动池的时间积分测量方式。因此仪器本钱及维护费用较高，而且反复使用的流动池可能导致交叉污染；并目冲洗或进样中产生的气泡也会干扰测定；同时繁琐冗长的冲洗过程也会成为提高检测效率的瓶颈。另外，使用磁性或非磁性微粒时，强烈的散射吸收作用也会降低灵敏度。
ACCESS化学发光常见问题
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免疫分析系统
常见问题及答疑
ACCESS化学发光常见问题
目录
第一部分：化学发光基础知识 第1--17问
第二部分：仪器应用部分 第18--76问
第三部分：项目应用部分 第77—109问
ACCESS化学发光常见问题
第一部分：化学发光基础知识
1 什么是化学发光，与放免、酶免比较有何不同？
化学发光免疫分析（Chemiluminescence Immunoassay，CLIA）是将化学发光与免疫反应相
结合，用于检测微量抗原或抗体的一种新型标记免疫测定技术。
化学发光免疫分析比放射免疫，酶联免疫具有更高灵敏度，具备操作简便、快速的特点，
易于标准化操作。且测试中不使用有害的试剂，试剂保存期长，应用于生物学、医学研究和临床
实验诊断工作，成为非放射性免疫分析法中最有前途的方法之一。
（1）与放免（RIA）产品比较
与放射免疫试剂（RIA）比较，化学发光避免了放射性核素的污染以及对操作人员的伤害，
大大缩短了反应时间，同时兼具高灵敏度的优势。
（2）与酶免（ELISA）产品比较
灵敏度与可测范围远远高于酶免产品，兼具ELISA法简便的操作方法与较短的反应时间。
2 什么是标记免疫技术，它的三大要素是什么？
将Ag或Ab用标记物(如荧光素、酶、放射性同位素、化学发光物质等)进行标记，在与标本
中的相应Ab或Ag反应后，可以不必测定Ag-Ab复合物本身，而测定复合物中的标记物，通过标
记物的放大作用，进一步提高了免疫技术的敏感性。
三要素：通常在检测系统中会使用到一种叫标记物（labeling）的物质,常标记在抗体上
通常会有一个分离（separation）的过程在最后读取信号前
需要去仔细关注一下分析的模式（format）
3 标记免疫技术主要有哪几种？
主要经历了四种标记免疫技术的发展：荧光素(Fluorophores) – FIA
