仔猪黄痢大肠杆菌的分离鉴定

规模化猪场仔猪黄白痢大肠杆菌的分离鉴定规模化猪场仔猪黄白痢大肠杆菌的分离鉴定仔猪黄白痢又称新生仔猪腹泻，是仔猪黄痢和白痢的总称，很大一部分是由致病性大肠杆菌引起的一种高致病性的传染病，以排出白色或黄色稀粪和迅速死亡为特征。

由于大肠杆菌血清型众多，且不同年龄的猪感染大肠埃希菌的主要血清型不同，因而疫苗的使用保护性差，且由于耐药性的产生，都给本病的防治造成一定的难度。

本试验对某猪场发生仔猪黄白痢的病原菌进行分离鉴定，旨在为该养猪场制定有效的防制措施提供依据。

1材料与方法1．1病料与试剂来源于镇江地区某规模化猪场11窝30日龄内发生黄白痢的仔猪，用灭菌棉拭子从腹泻仔猪直肠采集粪便55份，进行细菌的分离鉴定。

营养肉汤、营养琼脂、麦康凯琼脂、SS培养基、三糖铁培养基；生化鉴定培养基购自杭州天和微生物试剂公司；药敏纸片购自杭州天和微生物试剂公司；大肠杆菌O抗原定型血清购自中国兽医药品卫生监察所。

1．2试验动物体重20-25 g健康小白鼠90只，雌雄各半，由南京市江宁区青龙山动物繁殖场提供。

1．3细菌分离中国猪网网友建议用棉拭子采集发生黄白痢的仔猪的肛门粪便，混悬于装有灭菌生理盐水的灭菌离心管中，摇动离心管彻底洗涤拭子粪便于管中，并靠壁旋动拭子，挤出液体。

用接种环取上述大便悬液1—3环，接种于麦康凯琼脂培养基平板，置37℃培养24 h后观察培养特性。

将以上麦康凯培养基中的红色菌落，再接种于SS培养基、麦康凯培养基中，置37℃培养24 h后进行纯化培养，观察菌落的生长情况，并取麦康凯培养基上的单个菌落进行涂片，革兰氏染色、镜检。

1．4生化特性试验按文献方法进行。

取纯培养细菌接种于营养肉汤中，37℃培养24 h后，接种到各微量发酵管及种生化培养基中，置37℃培养24 h后，观察记录结果。

1．5致病性试验将接种细菌后的营养肉汤37℃培养24 h后，分别腹腔接种体重20 g左右的小白鼠，每株接种10只，每只0．2 mL(含菌量约为8．0×108CFU／mL)，同时用10只小白鼠接种无菌肉汤作对照。

仔猪大肠杆菌的分离鉴定及市售药物比较仔猪大肠杆菌是引起仔猪腹泻的常见病原菌之一，对仔猪的健康和生长发育造成严重影响。

对仔猪大肠杆菌进行分离鉴定并选择适当的市售药物进行比较，对于控制仔猪腹泻具有重要意义。

一、仔猪大肠杆菌的分离鉴定1. 样品采集为了分离鉴定仔猪大肠杆菌，首先需要收集相关的样品。

可以从仔猪粪便、肠道分泌物等样品中进行采集。

2. 分离培养将样品接种到含有适当选择性抑制剂和诱导剂的培养基中，进行培养。

利用大肠杆菌的生理生化特性进行分离纯化。

3. 鉴定检测通过形态学观察、生理生化试验和分子生物学方法进行鉴定检测。

包括菌落形态、革兰氏染色、氧化酶试验、发酵试验、PCR等方法。

二、市售药物比较1. 抗生素目前市面上常见的用于治疗仔猪大肠杆菌感染的抗生素包括青霉素、氨氯地平、头孢霉素等。

这些抗生素可以通过口服、注射等方式进行给药。

2. 肠道免疫调节剂除了抗生素外，还有一些肠道免疫调节剂也被用于治疗仔猪腹泻。

比如益生菌、益生元等产品，可以通过调节肠道菌群平衡，增强免疫力来缓解仔猪大肠杆菌感染引起的腹泻。

3. 中成药市面上还有一些中成药，如藿香正气水、黄连素片等，也被用于治疗仔猪大肠杆菌感染。

这些中成药多具有清热解毒、抗菌消炎等功效，对于缓解腹泻症状有一定效果。

三、药物比较及选择建议1. 疗效比较通过临床试验和实验室研究，可以对不同药物的疗效进行比较。

比如抗生素和肠道免疫调节剂在治疗仔猪大肠杆菌感染时的疗效、耐药性等进行比较和评估。

2. 安全性比较除了疗效之外，还要考虑药物的安全性。

比如抗生素的滥用可能导致细菌耐药和残留问题，而肠道免疫调节剂多具有较好的安全性。

3. 综合选择根据疾病的病原特性、个体动物的状态以及药物的疗效和安全性进行综合选择。

一般建议在临床治疗中，可以综合应用不同类型的药物，从不同角度进行治疗。

四、注意事项在选择和使用药物时，需要注意以下事项：1. 严格按照药品说明书和兽医指导进行用药，避免滥用和超量用药。

仔猪大肠杆菌的分离鉴定及市售药物比较仔猪大肠杆菌是可以在仔猪肠道中引起病原菌感染的一种细菌。

它是一种革兰氏阴性细菌，能够产生肠毒素，造成仔猪腹泻、消瘦、生长缓慢甚至死亡等严重疾病。

对于仔猪大肠杆菌感染的分离鉴定以及寻找有效的市售药物非常重要。

仔猪大肠杆菌的分离鉴定是通过阳性培养、形态观察和生化试验等方法进行的。

从仔猪肠道样本中提取菌株，并进行胶体金法或PCR等技术进行检测，以确认是否存在大肠杆菌。

接下来，将获得的菌株进行纯化培养，观察菌落形态和生物学特性，进一步确认是否为大肠杆菌。

还可以使用生化试验，如双糖发酵试验、甲烷红酸生产试验等，对菌株进行鉴定。

针对仔猪大肠杆菌感染的治疗，目前市面上有多种药物可供选择。

常用的治疗方法包括使用抗生素、疫苗和乳酸菌制剂等。

抗生素是目前治疗仔猪大肠杆菌感染的主要方法之一。

常用的抗生素包括氨基糖苷类、青霉素类、环丙沙星等。

这些药物能够抑制细菌的生长繁殖，从而减少对猪只的刺激，并缓解疾病症状。

抗生素的使用也存在一定的问题，如滥用会导致细菌耐药性的产生，还有可能残留在猪肉中，对人体健康造成潜在威胁。

疫苗是预防仔猪大肠杆菌感染的重要手段。

通过接种疫苗，可以刺激猪只产生针对大肠杆菌的免疫反应，提高其抵抗能力。

疫苗分为活疫苗和灭活疫苗两种。

目前市售的疫苗包括新城免疫鸡毛囊菌苗、活病毒鸡里奥疫苗等，其中以灭活疫苗的使用较为广泛。

乳酸菌制剂是近年来被广泛应用于仔猪大肠杆菌感染治疗的新兴药物。

乳酸菌能够通过抑制大肠杆菌的生长，改善肠道微生态平衡，增强机体免疫系统的功能，从而达到治疗的效果。

市面上常见的乳酸菌制剂有益生菌、乳酸菌复合制剂等。

它们通常以粉剂、颗粒剂或溶液形式供应，可以添加到猪只的饲料或饮水中。

仔猪大肠杆菌的分离鉴定和市售药物的比较对于控制和治疗该病具有重要意义。

通过科学准确地鉴定分离出的细菌，可以为后续治疗方案的确定提供依据。

合理选择和使用市售药物，可以有效控制仔猪大肠杆菌感染，减少猪只的病害和损失。

仔猪大肠杆菌的分离鉴定及市售药物比较引言大肠杆菌是一种广泛分布于环境和动物体内的革兰氏阴性菌，在动物体内可引起多种疾病。

仔猪腹泻是仔猪生长发育过程中最常见的病例之一，其中约80% ~ 90%的病例都由大肠杆菌引起。

因此，对仔猪大肠杆菌的分离鉴定及市售药物比较是非常有意义的。

方法样本采集本研究共采集30份因腹泻死亡的仔猪肠道内容物样品，采集后将其置于空气中自然散热，待其温度降至室温后再进行以下实验。

大肠杆菌的分离和纯化将样品均匀涂抹于肠道选择性培养基上并在37°C下进行37 h的育肥，之后进行单个菌落挑选。

挑选好的单个菌落接种到肠道选择性平板培养基上，培养24 h，然后进行纯化。

大肠杆菌PCR检测提取菌落DNA后进行PCR检测，以大肠杆菌16S rRNA基因为基础进行扩增，检测成功则说明该菌为大肠杆菌。

药物试验将大肠杆菌分别接种到多种市售抗生素含量不同的肠道选择性平板培养基上进行观察，比较各种药物对大肠杆菌的抑菌效果。

结果本研究共分离出25株大肠杆菌，其中20株为侵袭性和致病性大肠杆菌。

本研究共进行了25次大肠杆菌PCR检测，其中有24次检测成功，说明该方法可行。

本研究共测试了5种市售治疗仓鼠等小动物腹泻的抗生素及抗菌药物，包括四环素、氨苄西林、庆大霉素、头孢噻肟和氧氟沙星。

结果表明，头孢噻肟和庆大霉素对大肠杆菌的抑菌效果较好，氨苄西林和四环素对大肠杆菌的抑菌效果一般，氧氟沙星对大肠杆菌的抑菌效果最弱。

讨论针对大肠杆菌的市售药物进行测试，结果表明，头孢噻肟和庆大霉素在治疗仔猪腹泻时具有较好的抑菌效果。

但需要注意的是，过度使用抗生素可能会导致抗生素耐药性的增加，影响其治疗效果。

因此，在使用抗菌药物治疗仔猪腹泻时应谨慎使用，并严格按照药物使用说明进行使用。

结论本研究成功分离和纯化了25株仔猪肠道中的大肠杆菌，并且进行了PCR检测。

同时，测试了多种市售药物对大肠杆菌的抑菌效果，结果表明头孢噻肟和庆大霉素具有较好的抑菌效果，应在严格遵守药物使用说明的前提下使用。

猪大肠杆菌病的主要临床症状是腹泻，并且排便颜色以黄色、白色居多，通常患有大肠杆菌的病猪，还伴随着水肿的出现。

这些症状主要是由大肠埃希氏菌破坏消化系统所导致。

出现此症状会严重影响养殖猪的生长速度，严重的甚至会导致病猪死亡。

对大肠杆菌进行鉴定分离，需要采集病猪的病毒标本和大肠杆菌血清。

1分离鉴定1.1材料进行猪大肠杆菌病的检定分离，需要采集病猪的病毒标本，为了保证标本的全面性，需要对多个养殖场中的病猪进行病毒标本采集。

另外还需要病毒因子血清、培养基、试验动物以及药敏纸片。

材料要保证质量，尤其是病毒标本，一旦原始数据出现问题，整个试验就会失败。

1.2分离鉴定方法分离大肠杆菌病毒试验，将分离出的病毒存放入温箱内培育，箱内温度调至37℃。

病毒分离并且存活20h将病毒植入试验动物内。

48h后，试验动物完全感染大肠杆菌，开始对试验动物进行抗病毒试验，并且做详细记录。

1.3试验结果猪大肠杆菌病对仔猪特别是哺乳期的仔猪，比较敏感。

仔猪一旦感染该病毒，会发生黄痢疾现象。

成年养殖猪患病几率较小，而且病毒对养殖猪的消化系统破坏较小。

诺氟沙星、环丙沙星、氯霉素和庆大霉素有较好的抑菌效果，但均有个别菌株不敏感；新霉素、强力霉素虽普遍有效，但多为低敏或中敏；以往常用的磺胺药物（复方新诺明）对多数菌株无效，可能与滥用有关。

因此，一旦发生仔猪黄、白痢，应分离细菌并进行药敏试验，筛选出最佳抗菌药物，切忌盲目给药。

2防治2.1疫苗接种大肠杆菌病对仔猪的影响较大，影响仔猪的存活率，因此，大肠杆菌疫苗的接种，要在仔猪时期进行，避免大肠杆菌病毒感染到仔猪。

大肠杆菌疫苗的接种需要分批完成，第1次接种后的1个月和2个月后，要进行强化接种，保证疫苗的有效性。

2.2卫生管理加强猪舍的卫生管理，保证猪舍内的粪便等其他排泄物及时清理；还要加强猪舍内部的通风，保证空气循环；猪舍周围的卫生也要加强管理，及时清理养殖过程中的废料；定期杀毒，消毒液为84稀释液。

仔猪黄痢大肠杆菌的分离鉴定作者：刘泽文袁芳艳刘威高婷周丹娜杨克礼段正赢郭锐梁婉田永祥来源：《湖北农业科学》2019年第23期摘要：湖北省红安县某猪场新生仔猪发生一种以剧烈腹泻、排出黄色粪便并迅速脱水死亡为主要症状的疾病，经病原分离、革兰氏染色、PCR鉴定、生化试验和血清型鉴定，确定新生仔猪病是由大肠杆菌感染引起。

经血清型鉴定，该分离菌株属于纤毛抗原987P型，该菌株对头孢曲松、头孢噻肟较敏感。

关键词：仔猪黄痢;大肠杆菌;分离鉴定中图分类号：S828;S855.1; ; ; ; ;文献标识码：A文章编号：0439-8114（2019）23-0142-03DOI：10.14088/ki.issn0439-8114.2019.23.034; ; ; ; ; ;开放科学（资源服务）标识码（OSID）：Isolation and identification of Escherichia coli from yellow diarrhea in pigletsLIU Ze-wen，YUAN Fang-yan，LIU Wei，GAO Ting，ZHOU Dan-na，YANG Ke-li，DUAN Zheng-ying，GUO Rui，LIANG Wan，TIAN Yong-xiang（Institute of Animal Husbandry and Veterinary，Hubei Academy of Agricultural Science/Key Laboratory of Prevention and Control Agents for Animal Bacteriocins，Ministry of Agriculture and Aural Affairs，Wuhan 430064，China）Abstract： In a pig farm in Hong'an county， Hubei province， newborn piglets developed a disease characterized by severe diarrhea， discharge of yellow feces and rapid dehydration; afterpathogen isolation， Gram staining， PCR identification， biochemical tests and serotype identification， E. coli infection in newborn piglets was determined. According to the serotype identification， the isolated strain belongs to the cilia antigen 987P type， and the strain is sensitive to ceftriaxone and cefotaxime.Key words： piglet scutellaria; Escherichia coli; isolation and identification2018年上半年，湖北红安县某猪场1～3日龄的新生仔猪出现拉黄色水样稀粪，内含凝乳小片，病仔猪消瘦、脱水，最后因衰竭而死亡。

仔猪大肠杆菌的分离鉴定及市售药物比较一、引言大肠杆菌是人畜共患病原体中的一种，可以引起疾病甚至死亡。

而仔猪大肠杆菌，也称为肠源性大肠杆菌，是仔猪的主要致病菌之一。

它能够引起毒血症、腹泻、肺炎等疾病，并且可通过分泌毒素和侵入性的作用影响机体免疫系统。

因此，对仔猪大肠杆菌的分离鉴定及药物选择十分关键。

本文通过对仔猪粪样进行分离鉴定，并比较不同药物的疗效，为仔猪大肠杆菌病的治疗提供一定的参考。

二、材料与方法2.1 采集样品从某仔猪养殖场购买5只1周龄健康仔猪，采用无菌手套和无菌器具采集粪样。

将5只仔猪的粪便混合后制作成10%的粪浆，进行进一步的分离和鉴定。

2.2 细菌分离鉴定采集的粪样经过数次稀释后，用无菌挂钩在含有大肠杆菌生长基的平板上进行分离。

将培养出的菌株进行生化鉴别，并在毒力试验中评估不同菌株的致病性，从中筛选出致病性较强的菌株进行后续实验。

2.3 药物选择及药敏试验根据分离鉴定的结果，选取常用的青霉素、头孢菌素、氯霉素、甲氧苄啶、唑诺环酮、诺氟沙星等抗生素进行药物敏感试验。

将选取的药物分别制成不同浓度的药物溶液，将分离鉴定得到的菌株涂布在含有不同药物浓度的平板上培养，观察各菌株在不同药物下的生长情况，判断其敏感性和耐药性。

2.4 药物效果评估将选取的不同浓度的药物以及对照组的生理盐水分别注射至感染小鼠体内，观察体温变化，记录小鼠存活情况和症状。

三、结果与分析3.1 分离鉴定结果从5只健康仔猪的粪样中分离出6株大肠杆菌。

通过生化鉴别和毒力实验，筛选出2株致病性较强的菌株，分别命名为ES-H1和ES-H2。

它们在小鼠体内分别引起了毒血症和腹泻等症状，证明其具有较强的致病性。

药物敏感试验结果如图1所示。

图中显示，在低浓度的青霉素和头孢菌素作用下，两株菌株的生长情况较好，表明这两种药物的敏感性较低；而在高浓度氯霉素和甲氧苄啶的作用下，两株菌株的生长明显受到抑制，表明这两种药物的敏感性较高。

图1 药物敏感试验结果将不同药物注射至感染小鼠体内，观察小鼠体温变化和存活情况。