微生物学

Ｑ ３ 微生物学 ９
Ｑ３ ９ ２ ０ ０ ２ ９ ０ ７７ ８ ３
苏云金芽孢杆菌两株溶 原性噬菌体的生物学特性 ＝ － Ｂｉ
ｏ ｏ ｙ ｏ ｗｏ ｌ ｓ ｇ ｎ ｃ ｐ ａ ｅ ｒ ｍ ｃ ｌ ｓ ｔ ｕ ｉ ｇ ｅ ｓ ｓ ｌ ｇ ｆｔ ｏ ｅ ｉ ｈ ｇ ｓ ｆ ｏ Ｂａ ｉ ｕ ｈ ｒ ｎ ｉ ｎ ｉ ｙ ｌ
步 表 明 了探 索微 生物 混 合 培 养获 得 生物 活性代 谢产物 的 可 能 性 。表 ４参 ２ ０
Ｑ３ ９
＝
２ ００ ２９ ０ ７７ ８ ５
ＭＺ ／ １廖威（ 中山大学生命科学院有害生物控制与资源利 用国家重点实验室． 广东， 广州 ５ ７） ２ ５， １ ０ 孙钒…／微生物学 ／
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活性 。 图 ２表 １ １ 参 ０
Ｑ ２ ９２ ２ ０ ０ ２ ９ ０７ ７ ８２
人单 个 中性 粒 细 胞 ｌ 一 Ｒ［ ｍＲ Ａ 丰 度的 相 对 半 定量 Ｌ ８ ３ Ｎ 研 究 ＝ ｎ ｅｔ ａｉｎｏ 一 Ｒ［ｍＲＮ ｅ ｐ ｅｓｏ ｒ ｆ ｅ １ｖ ｓｉ ｔ ｆ ８ ３ ｇ ｏ Ｉ Ｌ Ａ ｘ ｒ ｓｉｎｐ ｏｉ ｌ ｉ ｓ ｇ ｕ ｎｎｕｒｐ ｉ 吴航 宇（ 方 医科 大 学公 共卫 ｎ ｉ ｌ ｈ ｍａ ｅｔ ｈ ／ ｎ ｅ ｏ ｌ 南 生与热 带 医学 学院 ． ， 州 ５ ０ １） 春 青 …∥中 国应 广东 广 １５ ５， 蔡 用 生理学杂 志 ． ０ ７２ （）一９ － ０ 一２ ０ ，３１． ７ １ １ 探讨单个中性粒细胞中自介素 一 ｐ型受体（ 一 Ｒ ） ８ ｉ ８ ｐ Ｌ ｍＲ ＮＡ的表达 丰 度 。采 用倍 比稀 释相 对 定 量 单细胞 Ｒ — Ｔ Ｐ Ｒ方法分离纯化人外周血 中性粒细胞并提取总 Ｒ Ｃ ＮＡ， 针对 Ｉ一Ｒ３ Ｎ Ｌ８［ Ａ设 计 引物 ，进行 Ｒ —Ｃ ｍＲ Ｔ Ｐ Ｒ确认 Ｉ一Ｒ３ Ｌ８ ［ 在 中性 粒 细 胞 中 的基 因表 达 并 优 化 反 应 条 件 。收 集 单
报 ． ０ ７ ７１． ２ ９ 一２ ０ ， （）一９ － ７ ４
异 育银 鲫肠 道 蛭弧 菌 的分 离及 其 生物 学特 性的研 究
Ｉ ｏａ ｉｎ ｏ ｓ ｌ ｔ ｏ ｆ Ｂｄｅ ｌ ｖ ｂ ｉ ｃ ｅ ｉ ｒ ｍ ｈ ｕ ｆ ｌ ｏ ｉ ｒ ｏ ｂａ ｔ ｒ ａ ｆ ｏ ｔ ｅ ｇ ｔｏ Ｃａ ａ ｓ ｕ ｕｒ ｔ ｂ Ｈ ｎ ｈ ｔ ｄｙ ｏ ｔ ｏ ｏ ｉ ａ ｒ ｓ ｉ ｓ ａ ａ ｕｓｇｉ ｅ ｏ ａ ｄ ｔ ｅ ｓ ｕ ｆｉｓｂｉ ｌ ｇ ｃ ｌ
Ｑ９ ３ ２０ ０２ ９ ０７ ７ ８ ４
ｃ ａａｔｒ ｔ ｓ曹海鹏（ ｈｒｃｅｉ ｉ ／ ｓｃ 农业部渔业动植物病原库上海水 产 大学 ． 上海 ２ ０９ ） 先乐 …／ 生物 学通 报． ０ ７ ４ ０ ００， 杨 ／ 微 一２０ ， ３
（）一 ５ － ６ １． ２ ５
以一 株 具 有 致 病 力 的 温 和 气 单 胞 菌 作 为 筛 选 宿 主 菌 ，从 异 育 银 鲫 肠 道 中分 离到 一 株 蛭 弧 菌 ，暂 命 名 为 Ｂ Ｆ Ｈ１ 。通 过 光 学 显微 镜 、相 差 显微 镜 、 电子显 微 Ｄ — ６ 镜对蛭弧菌 Ｂ Ｆ Ｈ 进行形态观察 ，并研究了其部分 Ｄ — １ ６ 生物 学 特性 。结果 表 明 ：蛭弧菌 Ｂ — ＤＦ Ｈ１ ６为革 兰 氏 阴 性 菌 ，杆形或弧杆形 ，端生一 根鞭毛 ，菌体大小多为 ０２ ｍ～ ０５ ｉ ．ｇ ．ｇ ．ｇ ｘ ０８ ｍ一 １２ ｉ ；蛭 弧菌 Ｂ Ｆ Ｈ１ ｎ ．ｇ ｎ Ｄ — ６对 实验 所选 用 的 革兰 氏 阴性 菌 和 部分 革兰 氏阳性 菌均 有裂 解 作 用 ； 以 大肠 杆 菌 为 宿 主菌 ，其 最 佳 生 长 条件 为宿 主 菌 浓度 ６７ ０ｃｕｍＬ Ｈ７０— ７５ 温度 ２ ℃； ．５ｘ １ 。ｆ／ 、ｐ ． ．、 ８ 在 Ｎ Ｃ 含量 ０８ ％一 ．０ ａＩ ．５ ５ｏ ％的培养基 中能够 生长 ；恩诺 沙星 、诺氟 沙星对其有 抑制作用ａ ｉｕ ｕｉｇｅｓｓ的溶 原 Ｂ ｃ ｌ ｔ ｒ ｉｎｉ ｌｓｈ ｎ ） 性及 其 噬 菌体 的 生物 学 特 性 ，从 生 产 菌株 Ｍ ｚ 中分 离 Ｉ 了两株 溶原性 噬 菌体 。ＭＺ 经诱 导 后产 生直 径 约为 ３ ｍ Ｉ ａ ｒ 和１ ｍｍ 的噬 斑 ，分 离 获 得 属 长 尾 噬 菌 体 科 的 噬 菌 体 ＭＺ Ｐ １ ＭＺ Ｐ ２ Ｔ０ 和 Ｔ ０ 两株 ；分 别 对 ６ 和 ７ 不 同亚 种 株 株 的 Ｂ 菌 株 具 有侵 染力 ；免 疫 血 清 与相 应 噬菌 体 的 中和 ｔ 反应 Ｋ值分别 为 ４ ５和 ３ ６，且 两者无 相关 抗原性 。 ２ ＭＺ Ｐ １ 抗 酸 、碱 、 紫 外 线 和 热 的能 力 比 ＭＺ Ｐ ２ Ｔ０ 抵 Ｔ ０ 强 ，但抵 抗 有机 溶 剂 的程 度 比 Ｍ ｚ Ｐ ２ 。ＭＺ Ｐ １ Ｔ ０ 弱 Ｔ ０ 的潜伏 期为 ８ｍｉ，裂解 量 为 ５ ；ＭＺ Ｐ ２的潜伏 期为 ０ ｎ ５ Ｔ０ ４ ｍｉ ，裂解 量 为 】 。核 酸 结 构 分 析 均 表 明 为 线 性 ０ ｎ ７ ５ ｄ ＤＮＡ分 子 。两基 因组 ＤＮＡ 的凝 胶 电泳 表 明分 子 量均 ｓ 在 ９４ ２ ｋ 之 间 ，并 被 ＨｉｄⅢ酶 切分 别 产 生 ８ 和 ．～ ３ ｂ ｎ 条 ９条 清 晰条 带 。 该菌 株 被 证 明 为 二 元 溶 原 菌 ，可 能 是 造成生产损失的主要原因；为防治溶原性噬菌体提供了 生 物学 信 息 。 图 ４表 ６参 １ ９
个 中性粒细胞胞 内容 物或完整细 胞 ，以相 同引物进行 Ｒ Ｔ反应 ，再将后者所得 的 ｃ Ａ倍比稀释后，与前者 ＤＮ 共 同经 过 两轮 Ｐ ＣＲ扩 增 ，并 将 最终 产 物 以 Ｂ ｍ 内切 ａ Ｈ１ 酶 酶切 鉴 定产 物 的特 异性 。Ｉ一 Ｒ Ｒ Ａ在 人 中性粒 Ｌ ８ ｐｍ Ｎ 细 胞 中有 大 量 表 达 ，单 个 中性 粒 细 胞 中亦 能 扩 增 出特 异性 的 Ｉ 一 Ｒ３ Ｌ ８ ［目的条 带 ，并 且将 单 个细 胞 内 ｍＲ Ａ稀 Ｎ 释 １０ 后仍 可扩 增 出 目的条 带 ，Ｂ ｍＨ 内切酶 酶切反 ｏ倍 ａ ｌ 应 证实 为 目的 产物 。人 中性 粒 细 胞 表达 Ｉ ８ Ｌ一 ｐ Ｒ ｍＲ Ａ，ｍＲ Ａ倍比稀释单细胞 Ｒ — Ｃ Ｎ Ｎ Ｔ Ｐ Ｒ方法确认其丰 度 远高 于 一 般 ｔＲ ｕ ＮＡ含 量 ，且 此 方法 可 在 单 细胞 水 平 比 较细 胞 内 ｍＲ ＮＡ 的丰 度 。 图 ４ ６ 参