浅谈布鲁氏菌病的检测技术

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浅谈 布鲁 氏菌病 的检测技术
张 艳
（ 青海省畜牧兽 医科学院， 西宁，１０６ ８０ １）
中图分类号 ：８２ ６ ４ ｓ５ ．１ 文献标识码 ： Ｂ 文章编号 ：０３７ ５ （０ ６０ － ４．２ １０．９０２ ０ ）６０ １ ０ ０
布鲁氏菌病（ 以下简称布病） 是由布氏杆菌引起的 １３ 变态反应（ｙ 法 Ｄ Ｈ试验操作简便， 断直 ． 【Ｈ） Ｉ Ｔ 以动物为传染源的人畜共患类传染病。到 目前为止有 观 ， 标准易于掌握。但 山羊 的变态反应 不如绵羊容易 的地区布病传播处于流行上升趋势 ， 对人类健康构成 读取 和判断结果 ， 此种反应作 为一种 畜群试验方法可 严重威胁 ， 也对畜牧业经济发展造成严重危害 ， 因此布 能有价值…。一般用 Ｄ Ｈ结合 Ｃ 诊断猪布病。 Ｔ Ｆ 病的检测工作也是预防布病发生的重要组成部分。 以上这些方法在敏感性 、 特异性 、 和操作程序等方 ｌ 布 病 的常规 检 测方 法 面各 有优 劣。因此 人 们把 以上 这些 技 术 和 Ｅ Ｉ 、 Ｌ Ａ Ｓ 家畜布病的检测方法主要依靠细菌学和血清学技 Ｐ Ｒ ＇速诊断试剂纸等技术在 多种试验 中进行 比较 、 Ｃ， 陕 术， 长期以来布病检测仅限于常规的几种方法， 有的已 筛选 ， 研究出更准确更快 的方法用以推广 。 形成 标准 化操 作 。虽然 细 菌学 培养 和血 清学 凝集 试验 ２ 酶 联免疫 吸附试验 （ＬＳ Ｅ ＬＡ） 被广泛用于人类和动物的布病诊断 ， 但是 ， 随着畜牧业 ＥＩ Ｌ Ａ是近年来研制出的一种新型 的快速检测技 Ｓ 经济的飞速发展 ， 有些检测方法对大批 的 阳性样 品检 术， 常用方法有 ：Ｊ间接法 ： （） 多用于检测抗体 ， 的本 它 测既费时又费力， 而且也存在人为因素的影响， 为了能 质是抗球蛋白试验；２ 双抗体夹心法 ： （） 多用 于检测大 更快 、 更准 确地 检测 布病 ， 免人 为 因素 的干 扰 ， 年 分子抗原；３ 竞争法 ： 避 近 （） 多用于检测小分子抗原。 来 国内外研 究 很多 ， 着分 子生 物学 技术 的不 断发 展 ， 随 ＥＪＡ最 早 是 Ｇｓ ｌ Ｓ ａｉ ＇ ｎ～Ｒｓ ｊＢ（９６ （ 用 来 检 测 ａｔｉ １７ ）Ｊ ｕ ２ 些新 的快 速 、 准确 的检 测技 术 不断 出现 ， 酶联免 疫 布鲁 氏菌抗体 ， 如 其敏 感性 比试 管凝集反应 要高 ｌ 一 Ｏ 分 析技 术 、Ｃ Ｐ Ｒ以及 快 速 诊 断 试 剂 纸等 技 术 都 已用 于 １０ 。有些学者认为 Ｅ Ｉ ０倍 Ｌ Ａ作为一种新型 的检测方 Ｓ 布病的诊断 。 法 鉴于 它有较 好 的敏 感 性 和 特 异性 ， 议 将 此 方 法作 建 由于布病在临床症状 和病理解剖学变化方面没有 为一种标准检测法加以推广。陈昌海等（０４ ｂ对农 ２０ ） 明显的特征 ， 本病又多以隐性感染为主， 因此主要靠实 业部动物检疫所诊断液制备中心研制的 Ｅ Ｌ ＬＳ Ａ快速诊 验室综合诊断来检测病凶。实验室诊断有细菌学 、 血 断 试剂 盒在 牛布 氏杆 菌病检 测 中与 Ｓ Ｔ Ｒ Ｔ Ｂ Ａ Ａ 、Ｂ 、Ｐ Ｔ三 清学和变态反应三种诊断法。 种方法进行 比较 ， 结果表 明 ＥＪＡ与其他三种方法检 Ｉ Ｓ １１ 细菌学 方法 细菌学操 作复杂 ， ． 首先要收集 病 测结 果 阳性 、 阴性 符 合 率均 为 １０ ， 明 Ｅ ＩＡ方 法 ０％ 说 ＬＳ 料， 制备 特定 及 选 择性 培 养 基 ， 然后 进 行 接种 培 养 ，ｃ ３ｌ 特异性 好 ， 的 样 品 需 要 量 仅 ２ ｌ整 个 反 应 只 需 要 它 ， 后才能鉴定结果 ， 由于细菌学操作所需时间长， 检测结 １５ 。 昌海 等认 为 由于 Ｒ Ｔ、Ｐ Ｔ特 异性 不 高 ， ．ｈ 陈 Ｂ ＢＡ 主要 果误差大 ， 以用血清学试 验诊 断布病在兽 医临床上 用 于初筛 ， Ｆ试 验 由于 条 件 要 求 高 ， 般 基 层 兽 医 站 所 Ｃ 一 显 得 尤为重 要 。 难 以进行 ，Ａ Ｓ Ｔ试 验用 于大 批 阳性 样 品 时 费时 费力 ， 结 １２ 血清学常规检测法 目前我 国常用 的血清学检 果需要 ２ｈ因此建议用 Ｅ Ｉ ． ４， Ｌ Ａ方法来诊断家畜布病 。 Ｓ 测方法有 ： 试管凝 集试 验 （Ａ ） 虎红平 板 凝集试 验 ＳＴ 、 把提 纯 的牛种 布 氏杆菌抗 原 被 动 吸附在 聚苯 乙烯 （Ｂ ） 缓 冲平 板 凝 集 试 验 （ Ｐ Ｔ 、 体 结 合 试 验 板 ， 间接 ＥＺＡ可 以鉴 别 接 种 Ｓ９牛 和 自然感 染 牛 ＲＴ、 ＢＡ ）补 用 ＩＳ １ （ｖ、 ｃ ）乳汁环状试验（ Ｋ ） Ｍ Ｔ 等方法。 种布氏杆菌的抗体。Ｒｆ （０２Ｈ用斑点 Ｅ 检 ｅ ｉ ２ｏ ） ａＭ Ｌ ＳＴ Ａ 试验是布病诊断 中应用最广 的一种试验 ， 该 在牛布鲁氏病抗体 ， 此法可迅速完成 ， 如使用预先包被 试验已实现了标准化。由于该试验有时出现前带及封 好 的抗 原并 已封 闭 的浸 润条 ， 全 过 程 只 需 ４ｒｎ这 则 ５ ｉ， ａ 闭现象 ， 易出现假 阳性 ， 要时应与其他 方法结合使 种简便和快速意味着在根除布病牛中可用于大规模检 必 用 。Ｒ Ｔ及 Ｂ Ａ Ｂ Ｒ Ｔ试 验是 以布 氏平 板 凝 集 和酸 性 抗 查牛群。该实验只需 Ｐ Ｓ稀释剂和洗液 ， Ｂ 阳性反应 的 试 验 为基 础发 展起 来 的一 种 反 应 ， 具 有 克 服 非 特 异 色斑 易 于观察 ， 它 不需 使用 任何 仪 器 。 性反应的特点， 对小分子抗体较为敏感 ， 操作简便反应 此方法判定时用酶联免疫仪 ， 避免 了人为因素干 迅速 。由于该法受制备抗原时条件影响较大 ， 所以每 扰 ， 使结果更加快速 、 准确。由于酶标记结合物制备容 批制备的抗原应予 以检查 、 标准化后方可使用。ｃ 试 易 ， Ｆ 稳定 ， 有效期长， 敏感性高等优点 ， 同时可 以用肉眼 验虽然特异性较好但敏感性较差 ， 故不适于 ： 面积检 观 察或 光学 显 微镜 观察 ， 所得 的结果 客观 可靠 ， 主要 最 疫采用。同时也因为操作复杂 。 所需 试剂较多影响了 的特 ｔ 是快 速 、 异 、 敏 ， 特 灵 因此 Ｅ Ａ方 法 是 国 际 贸 ＭＳ 更广泛的应用 。此方法对注苗后和 自 然感染所引起的 易指定的诊断方法。 ３ 多聚酶 联反应 （ Ｃ ） Ｐ Ｒ 血清反应的鉴别很有价值 。Ｍ Ｔ试验在检查个体母 Ｋ 牛 不稀 释 的奶 样 时 ， 分 娩 之后 不 久 或 接 近 泌 乳 的 后 在 ｔ Ｒ技 术是 一项 体外 酶促 扩 增 Ｄ Ａ新 技 术 ， 有 ＇ Ｃ Ｎ 具 期， 可出现假阳性反应…。 特异性 和敏感性高 ， 操作 简便， 快速 高效等特点 ， 已广
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青海 畜牧 曾医杂志
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