磷锑钼蓝分光光度法测定大米和面粉中磷

磷锑钼蓝分光光度法测定大米和面粉中磷李晓东【摘要】该文采用酸度为0.10 mol/L的硫酸作为介质,磷(V)与钼酸铵发生显色反应生成淡黄色络合物,在抗坏血酸和酒石酸锑钾的还原下变成蓝色络合物.在磷锑钼蓝分光光度法的基础上,研究加入铋(III)之后对测定磷的影响,发现铋(III)的引入,使测定磷的灵敏度提高54.6%.体系最大吸收波长在708 nm,磷含量在0.040~0.90μg/mL范围内与吸光度呈现良好的线性关系,其线性回归方程为A=1.859C+0.079,线性相关系数r=0.9995,其表观摩尔吸光系数ε708nm=6.19×104L/mol/cm,方法检出限为0.023 μg/mL.该法可成功地测定食物大米和面粉中磷的含量.%In this paper, sulfuric acid with acidity of 0.10 mol/L is adopted as medium, and the chromogenic reaction takes place between phosphorus(V)and ammonium molybdate with light yellow complex produced, and then it turns into blue complex under the reduction effect of ascorbic acid and antimony potassium tartrate. Bismuth(III)is added on the base of phosphorus antimony molybdenum blue spectrophotometric method and the effect of bismuth(III)on the determination of phosphorus is studied. It is found that the introduction of bismuth(III)has increased the sensitivity of determination for phosphorus by 54.6% and the maximum absorption wavelength of the complex is 708 nm and the absorbance is linearly related to the concentration of phosphorus(V)within the range of 0.040-0.90 μg/mL. The linear regression equation is A=1.859C+0.079, with a correlation coefficient of r is 0.999 5. Its apparent molar absorption coefficient ε708nm is 6.19×104L/mol/cm and the detection limit of themethod is 0.023 μg/mL. The method has been successfully used to determine phosphorus content in foodstuff rice and flour.【期刊名称】《中国测试》【年(卷),期】2018(044)002【总页数】4页(P48-50,112)【关键词】磷;分光光度法;磷锑钼蓝;铋;大米;面粉【作者】李晓东【作者单位】吉林建筑大学松辽流域水环境教育部重点实验室基础科学部,吉林长春130118【正文语种】中文0 引言磷广泛存在于动植物组织中，也是人体含量较多的元素之一。

一、实验目的1. 了解饲料中总磷的测定原理和方法。

2. 掌握饲料中总磷的测定步骤和注意事项。

3. 培养实验操作技能和数据分析能力。

二、实验原理饲料中总磷的测定采用钼锑抗光度法。

该法基于磷与钼酸铵、抗坏血酸和锑酸铵在酸性条件下反应生成磷钼蓝复合物，其颜色强度与磷含量成正比。

通过测定吸光度，可以计算出饲料中总磷的含量。

三、实验材料与仪器1. 实验材料：饲料样品、钼酸铵、抗坏血酸、锑酸铵、硫酸、氢氧化钠、盐酸、蒸馏水等。

2. 实验仪器：分光光度计、容量瓶、移液管、烧杯、比色皿、电子天平等。

四、实验步骤1. 样品前处理：称取适量饲料样品（精确至0.0002g），置于烧杯中，加入少量蒸馏水，用玻璃棒搅拌溶解，转移至容量瓶中，定容至刻度线。

2. 标准溶液的配制：按照GB/T 6437-2002《饲料中总磷的测定》的规定，配制一定浓度的磷标准溶液。

3. 样品溶液的制备：取适量样品溶液（按照实验要求稀释），转移至比色皿中。

4. 标准曲线的绘制：分别取不同浓度的磷标准溶液，按照实验步骤进行显色反应，在分光光度计上测定吸光度，以磷浓度为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制标准曲线。

5. 样品溶液的测定：按照实验步骤进行显色反应，在分光光度计上测定吸光度。

6. 结果计算：根据样品溶液的吸光度，从标准曲线上查得相应的磷含量，计算饲料中总磷的含量。

五、实验结果与分析1. 标准曲线的绘制：按照实验步骤绘制标准曲线，得到标准曲线方程为：A=0.0325C+0.0156，相关系数R²=0.9988。

2. 样品溶液的测定：按照实验步骤测定样品溶液的吸光度，得到吸光度为0.605。

3. 结果计算：根据标准曲线方程，查得样品溶液中磷含量为1.96mg/g。

4. 结果分析：本次实验测得饲料中总磷含量为1.96mg/g，符合饲料中总磷含量要求。

六、实验总结与讨论1. 实验总结：本次实验通过钼锑抗光度法测定了饲料中总磷的含量，实验操作规范，结果准确可靠。

磷钼兰光度法测定磷的含量2.1 方法提要试样用硝酸、氟氢酸、高氯酸溶解。

在0.9N H2SO4介质中，以抗坏血酸还原磷钼杂多酸为兰色络合物，分光光度法测定硅铁中磷。

2.2 试剂2.2.1 HNO3（AR）2.2.2 氟氢酸（AR）2.2.3 高氯酸（GR）2.2.4 HCl（GR）2.2.5 H2SO41+12.2.6 钼酸铵5%水溶液2.2.7 抗坏血酸（Vc）2%，现用现配2.2.8 磷标准溶液ρ（p）=5μg/mL2.3 分析手续：2.3.1 母液的制备准确称取0.2 g试样于聚四氟乙烯烧杯中，少量水润湿，加入5 mL HNO3，慢慢加入10mL HF，待反应平静后加入高氯酸4mL，电热板上加热，至高氯酸冒烟除Si，取下稍冷，继续加HF 5mL，电热板加热冒烟，反复3次，取下，稍冷用水冲洗杯加入1+1 HCl 8mL，电热板加入溶解盐类，移入100mL容量瓶中稀至刻度摇匀。

2.3.2 显色吸取母液5 mL ，于50 mL 量瓶中，加入1+1 H 2SO 4 2.5mL ，H 2O 稀至20 mL ，加入5%钼酸铵，3 mL 摇匀，放置20 min ，加入2%抗坏血酸5 mL ，稀至刻度，摇匀，电热板上水浴15 min ，冷却，显色完全后冷却。

720 nm ，2Cm 比色杯，测其吸光度。

2.4 工作曲线取5、10、15、20μg 于50mL 量瓶中，加入1+1 H 2SO 4 3mL ，H 2O 稀至20mL ，加入5%钼酸铵3mL ，摇匀放置10′加入2%Vc 5mL ，以下同上。

2.5 计算ω（p ）/10-2=10010100/601⋅⋅⋅--x m m m 2.6 注意2.6.1 硅铁合金中砷含量，很低，如较高时（>1%）可加入氢溴酸或H 2O 2除去。

2.6.2 在显色过程中所用容量瓶，一定要洗涤干净，否则会出现不明原因的兰色，使显色失败。

© 1994-2010 China Academic Journal Electronic Publishing House. All rights reserved. 钼蓝法测定面粉及其制品中的磷酸盐欧剑丞　郑　红(广东省顺德市卫生防疫站　顺德　528300) [关键词]　钼蓝法;磷酸盐;测定 [中图分类号]　R 155.51　[文献标识码]　B [文章编号]　100826633(2001)0620711201 粮食部门生产加工的膨松面粉(自发面粉)在添加磷酸盐作膨松剂后,可不经发酵直接制成各种面制品。

国家卫生标准规定食品中添加的磷酸盐(以磷酸计)不得超过4g Kg ,为检测膨松面粉及其制品中磷酸盐的含量,我们用钼蓝法进行测定,报告如下。

1　原理 样品经有机破坏,在酸性溶液中,磷酸盐与钼酸铵作用生成淡黄色的磷钼酸铵,遇氯化亚锡还原剂,生成亮兰色的络合物钼蓝,根据颜色的深浅可以比色测定。

2　仪器 ①高温电阻炉。

②可见分光光度计3　试剂配制 钼酸铵硫酸液:钼酸铵2.5g 溶于100m l 的30%硫酸溶液中即成。

氯化亚锡溶液:氯化亚锡0.25g ,溶于10m l 的盐酸中,临用时新配。

磷标准溶液:精确称取经105℃干燥2h 的磷酸二氢钾(KH 2PO 4,)0.1389g ,置于100m l 容量瓶内,加去离子水溶解,并稀释至刻度混匀。

此溶液1m l 相当于1.0m g 磷酸(H 3PO 4)。

吸此溶液1.00m l 移入100m l 容量瓶中,用去离子水稀释至刻度,此溶液1.0m l 相当于10.0Λg 磷酸。

4　操作方法4.1　样品处理　准确称取均匀样品1.0g ,置于瓷坩埚中,在电炉上小火炭化至无烟,移入550℃高温炉中灰化3～4h ,直至灰分呈白色为止(必要时可在样品中加入浓硝酸湿润后再灰化)。

取出,待冷却后加入1+1盐酸1.0m l ,加热溶解灰分,然后用水移入100m l 容量瓶中,加水至刻度,摇匀。

钼蓝分光光度法测定食品中磷的研究及改进作者：向晓黎等来源：《安徽农业科学》2015年第08期摘要：[目的]分析研究并改进食品中磷的测定方法。

[方法] 对钼蓝分光光度法测定食品中磷的测定方法进行改进，对消解液酸度的调节，显色剂进行了改进，并与国标方法钼蓝分光光度法测定食品中磷的测定方法进行对比分析。

[结果]试验表明，该试验改进的方法不仅简化了操作过程，显色明显，而且标准曲线线性良好，得到了较好的准确度，测定结果与国标方法的测定结果比较无显著统计学差别。

[结论]研究得出的改进的钼蓝分光光度法可用于食品中磷的测定。

关键词：钼蓝分光光度法；食品；磷；测定方法；研究及改进中图分类号：S121 文献标识码 A 文章编号 0517-6611（2015）08-244-02磷是人体含量较多元素之一，占体重的1%左右。

磷是构成骨骼和牙齿的重要成分，是构成生命物质和酶的组成成分，参与能量代谢，体液内的磷酸盐还负责调节酸碱平衡[1]，因此检测食品中磷的含量有重要意义。

实际工作中发现，GB/T5009.87-2003钼蓝分光光度法测定食品中磷含量显色时间长，所用试剂不够稳定，方法不够灵敏[2]。

为此，笔者通过对消解液酸度的调节，并对显色剂进行了改进，不仅简化了操作过程，得到了较好的精密度和准确度，而且避免了有毒试剂对试验人员的危害及对环境的污染。

1 材料与方法1.1 材料1.1.1 主要仪器。

TU-1901紫外可见分光光度计及可调式电热板等实验室常用设备。

1.1.2 主要试剂。

氢氧化钠溶液（2 mol/L）：80.0 g氢氧化钠（分析纯）溶于水，用水定容到1 L。

硫酸溶液（4.52 mol/L）：吸取28.0 ml浓硫酸（分析纯），缓缓注入水中，并用水定容到1 L。

2，4-二硝基酚（或2，6-二硝基酚）指示剂：溶解0.20 g 2，4-二硝基酚溶于100 ml水中。

钼锑贮存液：153 ml浓硫酸（分析纯，密度1.84 g/ml），缓慢地倒入约400 ml水中，搅拌，冷却。

浅析钮磷钮蓝分光光度法测定上壤中磷含量磷在生物圈内的分布很广泛，在地壳中含量丰富，列元素含虽的前10位，并广泛存在于动、植物组织中，也是人体含量较多的元素之一，稍次于钙列第6位。

磷存在于人体所有细胞中，是维持件骼和牙齿健康的必要物质，几乎参与所有生理上的化学反应。

磷还是使心脏有规律跳动、维持肾脏正常机能和传达神经刺激的重要物质。

缺少磷，烟酸不能被吸收。

磷的正常机能需要维生素D(维生素食品)和钙(钙食品)来维持。

环境污染源中的磷主要来自化肥、冶炼、合成洗涤剂等行业，生活污水中也常含有较大量磷。

磷对上壤的污染主要是人为污染，来源于人类过量施用农药、化肥及污水灌溉等。

土壤污染具有隐蔽性，即从开始污染到导致后果有一个长期、间接、逐步积累的过程。

了解上壤中磷含量，对土壤的科学利用有一定的参考价值。

1方法原理将上壤环境样品用硝酸、氢氟酸分解，以髙氯酸、硫酸氧化磷。

硫酸冒烟处理后，以盐酸溶解盐类，用氨水使氢氧化铁和磷酸铁共沉淀而与基体中大部分铝分离。

以硫酸溶解沉淀，在硫酸介质中，用硫代硫酸钠还原高价碎，磷与硝酸钮、铝酸彼形成三元配合物，用抗坏血酸还原后，生成钮磷铝彼蓝，用分光光度计于波长700nm处测量貝吸光度。

2试剂(1)氢氟酸:二1. 15g/mLo(2)高氯酸:=1.67g/mL0(3)氨水:二0. 90g/mL o(4)硫酸:=1.84g/mLo(5)硝酸:=1.51g/mLo(6)盐酸:=1.19g/mLo(7)抗坏血酸溶液:称取抗坏血酸10g,用100mL蒸餾水溶解，混匀。

用时现配。

(8)硫酸铁彼溶液:称取硫酸铁披90g,用lOOmL蒸餾水溶解，混匀。

(9)硫代硫酸钠溶液:1L水中含20g无水硫代硫酸钠，用时现配。

(10)硝酸钮溶液:称取30g硝酸钮，加入lOOmL浓硝酸，待完全溶解后，加入900mL蒸懈水、4g尿素，混匀。

(11)铝酸彼溶液:称取15g铝酸鞍，置于400mL烧杯中，加入200mL蒸镭水，温热溶解, 过滤后加入800mL蒸镭水，混匀。

铋磷钼兰光度法快速测定样品中的磷含量一、试验部分1.仪器及试剂722N 型分光光度计。

磷混合显色剂①取110 mL 1+1H2SO4于500 mL烧杯中。

②称取7.5克钼酸铵溶于100 mL水中，加热至60-70度③称取1.16克硝酸铋加3 mL硝酸，加水约50 mL，煮沸驱除氮氧化物，冷却④将②、③倒入①中，用水定容于1000 mL容量瓶中。

1.5%硫代硫酸钠：称取1.5 g硫代硫酸钠于100 mL烧杯中，加热溶解，取冷却后，用水稀释至100 mL。

3%抗坏血酸：称取3 g 抗坏血酸，溶于100 mL 水中，混匀（现用现配）。

磷标准贮备溶液（100 μg / mL）：准确称取0. 439 3 g 预先在110 ℃烘干至恒重的基准磷酸二氢钾溶于水中，移入1 L 容量瓶中，用蒸馏水稀释至刻度，摇匀。

磷标准工作溶液（10 μg / mL）：吸取磷标准贮备溶液25.00 mL，移入250 mL 容量瓶中，用蒸馏水稀释至标线，摇匀。

用时现配。

2. 标准曲线的绘制准确移取1ML=10ug的磷标准工作溶液0、0.5、 1 、2、 4 、8 、10 、15 、20mL于50 mL 比色管中（本部门手测时标定0、1、2、4、8已可到达使用范围），依次加入1 mL1.5% 硫代硫酸钠溶液、20ML磷混合显色剂、5mL 3%抗坏血酸溶液，（每加一种试剂需充分摇匀）用水定容至刻度，摇匀，20分钟后于710nm处测定吸光度A，并绘制标准曲线。

可知磷在0-200 μg /50 mL 范围内呈线性关系。

求出曲线质量体积所对应的磷含量ug。

3.样品处理及实验方法准确称取称取灼烧后的灰分样0.05g灰样，放入100mL 烧杯中，加入5mL 盐酸盖表面皿低温加热（140℃）10分钟，加入硝酸10 mL，待氧化氮逸出后，加2 mL 1：1硫酸，继续加热至冒三氧化硫白烟后3分钟后取下冷却，用约20 mL 水冲洗表皿及杯壁，加热，使可溶性盐类溶解（此时溶液呈浑浊状态），冷后用中速滤纸过滤至50 mL容量瓶中，定容摇匀，取10ml溶液至50ML容量瓶中，加入1 mL1.5% 硫代硫酸钠溶液、20 mL磷混合显色剂、5mL 3%抗坏血酸溶液，（每加一种试剂需充分摇匀）用水定容至刻度摇匀（同时用清水制空白参比液），20分钟后于710nm处比色。

FHZDZDQHX0068 地球化学调查样品磷的测定磷锑钼蓝光度法F-HZ-DZ-DQHX-0068地球化学调查样品—磷的测定—磷锑钼蓝光度法1 范围本方法适用于水系沉积物、土壤等地球化学勘查样品中磷量的测定。

测定范围：质量百分数为0.01%~0.2%磷。

2 原理试样以氢氧化钾和氢氧化钠熔融，水浸取，分取部分清液，在硫酸介质中，磷钼酸与锑生成三元杂多酸，加入还原剂，可在室温下迅速形成磷钼蓝络合物，供以进行光度法测定。

3 试剂3.1 氢氧化钾。

3.2 氢氧化钠。

3.3 无水乙醇。

3.4 硫酸(1+1)。

3.5 硫酸(1+2)。

3.6 空白溶液，3g氢氧化钠和1g氢氧化钾溶于100mL水中。

3.7 酒石酸锑钾溶液，称取0.449g酒石酸锑钾溶于水中，稀释至100mL，摇匀。

3.8 混合还原剂，4g无水亚硫酸钠和0.4g硫代硫酸钠溶于100mL水中，摇匀。

3.9 混合显色剂，50mL硫酸(4mol/L)、30mL抗坏血酸溶液(30g/L)、15mL钼酸铵溶液(80g/L)、5mL酒石酸锑钾溶液(3.7)混合备用。

3.10 磷标准溶液3.10.1 准确称取4.3936g磷酸二氢钾(KH2PO4)(预先经110℃烘干2h)，用水溶解，移入1000mL 容量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀。

此溶液1mL含1mg磷。

3.10.2 吸取10.0mL磷标准溶液(1mg/mL)于1000mL容量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀。

此溶液1mL含10µg磷。

4 仪器分光光度计。

5 试样的制备试样应粉碎至粒度小于74µm，在室温下自然风干，待用。

6 操作步骤6.1 空白试验随同试样分析步骤进行双份空白试验。

所用试剂须取自同一瓶试剂。

6.2 称样量称取0.5g试样，精确至0.0001g。

6.3 试样的测定称取0.5000g试样置于热解石墨坩埚中，加入1g氢氧化钾和3g氢氧化钠，于高温炉中从低温升至600℃熔融10min~15min，取出冷却。

铋磷钼蓝光度法和锑磷钼蓝光度法测定磷量实施细则1适用范围本细则适用于碳钢、低合金钢、合金钢中磷量的测定。

测定范围：0.005%^ 0.100%。

2方法依据GB/T 223.59-2008钢铁及合金磷含量的测定铋磷钼蓝分光光度法和锑磷钼蓝分光光度法3 一般要求3.1设备仪器1）分析天平：最大称量100g,感量0.1mg。

2）可见分光光度计。

3.2环境条件1）称样室：温度为20芳C，防潮、无腐蚀、无尘、无风、无振动。

2）分析室：温度为15-35E，通风良好、无尘。

3）比色室：温度为15-35C，无腐蚀、无尘、无电磁干扰、无振动。

4）溶样室：加热、通风设施齐全、完好。

3.3样品要求按GB/T 20066-2006方法取样，外观呈金属光泽，干净、干燥、无氧化皮、无油污和其他杂质的钢屑。

3.4试验要求1）试验用水必须为氯离子检验合格的蒸馏水，试剂为分析纯和优级纯。

2）在无特殊规定的情况下，溶液均指水溶液，酸未指明浓度时均为浓溶液。

由固体试剂配制的溶液以百分浓度（％）表示：称取一定量的固体试剂溶于溶剂中，然后再用溶剂稀释至100毫升；由液体试剂配制的水溶液，均为其浓溶液的体积加水的体积，用“ +表示。

3）容量瓶、移液管应进行校正。

4）比对试验：选带1-2份同类型的标准样品与试样一起操作。

4检测方法4.1方法一1试剂1.1氢氟酸；1.2高氯酸；1.3盐酸；1.4 硫酸：1+11.5盐酸-硝酸混合酸：2+1;1.6氢溴酸-盐酸混合酸。

1.7抗坏血酸溶液20g/L，用时现配；1.8钼酸铵溶液30g/L ；1.9亚硝酸钠溶液100g/L，1.10硝酸铋溶液10g/L :称取10 g硝酸铋置于200 mL烧杯中，加25 mL硝酸，加水溶解后煮沸驱尽氮氧化物，冷却至室温，移入1000 mL容量瓶中，用水稀释至刻度，混匀。

2设备仪器及辅助工具的准备按设备仪器操作、维护规程对分光光度计、天平等设备进行检查调试。

3分析步骤3.1试样量：当磷含量在0.005%-0.050%寸称取0.50g试样当磷含量在0.050%-0.10%时称取0.10 g试样3.2测定3.2.1将试样置于150mL烧杯中。

FNCPLSDM00027 稻米中磷的测定 分光光度法F-NCP-LS-DM-00027稻米－磷的测定－分光光度法1 适用范围本方法适用于各类食品中磷含量的测定。

本方法最低检出限为2µ g。

2 原理食物中的有机物经酸氧化，使磷在酸性条件下与钼酸铵结合生成磷钼酸铵。

此化合物经对苯二酚．亚硫酸钠还原成蓝色化合物 — 钼蓝。

用分光光度计在波长660nm处测定钼蓝的吸光值，以定量分析磷含量。

3 试剂本实验用水均需用蒸馏水或去离子水。

试剂纯度均为分析纯。

3.1 硫酸：比重1.84。

3.2 钼酸铵溶液：称取5g钼酸铵[(NH4)6M O7O24·4H2O]用15%硫酸稀释至100ml。

3.3 对苯二酚溶液：称取0.5 g对苯二酚于100 ml水中，使其溶解，并加入一滴浓硫酸（减缓氧化作用）。

3.4 亚硫酸钠溶液：称取20 g亚硫酸钠于100 ml水中，使其溶解。

此溶液最好于实验前临时配制，否则可使钼蓝溶液发生混浊。

3.5 500 mg/L磷标准储备液（100 ug/ml）；3.6 10ug/ml磷标准使用液：准确吸取5ml磷标准储备液，置于250 ml容量瓶中，加水稀释至刻度，混匀。

4 仪器设备4.1 分光光度计4.2 玻璃器皿：25 ml、100ml容量瓶；1ml、2ml、5ml、10ml移液管4.3 微波消化炉5 试样制备6 操作步骤6.1 预试验6.2 空白试验不加样品于微波消化炉中消化，定容至25 ml。

准确吸取测定液 2 ml，置于中25 ml 容量瓶中，依次加入2 ml钼酸溶液摇匀，静置几秒钟，加入1 ml亚硫酸钠溶液，1ml对苯二酚溶液摇匀。

加水至刻度，混匀。

静置0.5h以后，在分光光度计660nm波长处测定吸光度。

6.3 样品测定称取各类食物的均匀干样0.1- 0.5g 于微波消化炉中消化，定容至25 ml。

准确吸取样品测定液2 ml，置于中25 ml 容量瓶中，依次加入2 ml 钼酸溶液摇匀，静置几秒钟，加入1 ml 亚硫酸钠溶液，1ml 对苯二酚溶液摇匀。

食品中磷测定方法的改进摘要：文章对分光光度法测定食品中磷含量进行改进，根据实验特点，样品经湿法消化后，磷在酸性条件下与钼酸铵结合生成磷钼酸铵，磷钼酸铵被抗坏血酸还原成蓝色化合物——钼蓝，该化合物最大吸收波长为660nm，相关系数r=0.9999，回收率96.8%-100.4%，该方法测定结果与国标的测定结果比较无显著性统计学差别，重现性好，灵敏度高，操作简单方便，大大提高了工作效率，适用于食品中磷的测定。

标签：钼蓝;磷;测定方法;改进磷是人体内重要的元素之一，对人体生命活动有着十分重要的作用，人体内缺乏对磷的摄取会引起骨骼和牙齿发育不正常，但过多摄入磷会引起多动症，引起肾功能障碍，因而准确测定食品中磷的含量显得尤为重要。

而现行国标方法GB/T5009.87-2003，在实际样品测定时钼酸铵试剂的配制，还原剂的选择以及标准曲线的线性关系存在不足、故对该方法进行改进，结果较为准确，同时避免了有毒试剂对苯二酚对试验人员的危害及对环境的污染。

1 材料与方法1.1 仪器紫外分光光度计（PE Lambda25）、分析天平、可调电炉1.2 试剂（1）硫酸。

（2）高氯酸-硝酸消化液：1+4混合液。

（3）15%硫酸溶液（体积分数）。

（4）钼酸铵溶液：称取5g钼酸铵，用15%硫酸稀释至100mL。

（5）抗坏血酸溶液：称取5g抗坏血酸，用水溶解并稀释至100 mL[1]。

（6）1g/L磷标准储备液：上海计量研究院购买。

（7）磷标准使用液：吸取1.00mL磷标准储备液，置于100mL容量瓶中，用水稀释至刻度。

该溶液每毫升相当于10μg磷。

实验室所用玻璃器皿，均用（1+4）硝酸浸泡过夜，用水反复冲洗，最后用去离子水冲洗干净。

1.3 测定（1）样品处理：称取各类食物的均匀干试样0.1g-0.5g或湿样2g-5g于100mL 凯式烧瓶中，加入3mL硫酸、3mL高氯酸-硝酸消化液，置于消化炉上。

瓶中液体初为棕黑色，待溶液变成无色或微带黄色清亮液体时，即消化完全将溶液放冷，加20mL水，赶酸。

、工作原理在酸性条件下，正磷酸盐与钼酸铵、酒石酸锑氧钾反应，生成酸木杂多酸，被还原剂抗坏酸还原，则变成蓝色配合物，通常称钼蓝。

二、水样预处理取25.0ml 混匀水样于50ml 具塞刻度管中，加过硫酸钾溶液4ml ，加塞后管口包一小块纱布并用线扎紧，以免加热时玻璃塞冲出。

将具塞刻度管放在大烧杯中，置于高压蒸汽消毒2器中加热，待锅内压力达 1.1kgf/cm 时，调节电炉温度使保持此压力30min 后，停止加热，待压力表指针降至零后，取出放冷。

试剂空白和标准溶液系列也经同样的消解操作。

三、方法适用范围本方法最低检出浓度为0.01mg/L （吸光度A=0.01时所对应的浓度）；测定上限为0.06mg/L。

可适用于测定地表水、生活污水及化工、磷肥、机加工金属表面磷化处理、农药、钢铁、焦化等行业的工业废水中的正磷酸盐。

四、仪器1 、分光光度计2、50ml （磨口）具塞刻度管。

五、试剂1 、1+1 硫酸。

2、10%抗坏血酸溶液溶解10g抗坏血酸于水中，并稀释至100ml。

该溶液贮存在棕色玻璃瓶中，在约4C可稳定几周。

如颜色变黄，则弃去重配。

3、钼酸盐溶液溶解13g钼酸铵［（NH?）6Mo7O24 • 4H于OjOOml水中。

溶解0.35g 酒石酸锑氧钾［K（SbO）C?H?O6 • ?H?O］OOml 水中。

在不断搅拌下，将钼酸铵溶液徐徐加到300ml1+1硫酸中，加酒石酸锑氧钾溶液平且混合均匀，贮存在棕色的玻璃瓶中约4C保存，至少稳定两个月。

4、浊度-色度补偿液混合两份体积的1+1 硫酸和一份体积的1 0％抗坏血酸溶液。

此溶液当天配制。

5、磷酸盐贮备溶液将优级纯磷酸二氢钾（KH?PO）于110C干燥2h，在干燥器中放冷，称取0.2197g溶于水中，移入1000mlml容量瓶中。

加1+1硫酸5ml，用水稀释至标线。

此溶液每毫升含50.00 □磷（以P计）。

6、磷酸盐标准溶液吸取10.00ml磷酸贮备液于250ml容量瓶，用水稀释至标线，此溶液每毫升含2.00 □磷，临用时现配。

甘肃科技纵横2009年（第38卷）第3期磷钼蓝分光光度法测定食品中磷酸盐含量测量不确定度评定孙建云，王洁，李拥军（甘肃省疾病预防控制中心，兰州，730070）摘要：目的：对磷钼蓝分光光度法测定食品中磷酸盐含量进行不确定度评定分析，得出该方法的扩展不确定度。

方法：采用磷钼蓝分光光度法测定食品中磷酸盐的含量，根据实验原理、实际操作过程和步骤，通过建立合适的数学模型，对该方法的不确定度进行了全面、合理的分析，评定和合成。

结果：给出了采用该方法测定食品中磷酸盐含量的扩展不确定度。

结论：评定过程简明清晰，不重不漏，具有一定的实用性。

关键词：不确定度磷钼蓝分光度光法食品中磷酸盐1前言磷是人体中含量较多的元素之一，是骨骼和牙齿的重要构成材料，磷还对于人体的生理功能有很重要的作用。

如：促成骨骼和牙齿的钙化，保持体内ATP 代谢的平衡，参与体内的酸碱平衡调节等。

如果人体缺乏对磷元素的摄取，就有可能引起红细胞、白细胞、血小板异常和软骨病；但过多的摄入磷，将引起高磷血症，使血液中血钙降低，导致骨质疏松[1]。

由于磷对人体有着如此不可低估的作用，因而准确测定食品样品中磷就含量显得尤为重要。

由于各种因素的影响，检测数据与被测量的理论真值之间存在一定的误差，但由于误差在一贯使用过程中存在误用，其本身定义也比较模糊，不够准确，并且理论真值又一般无法得到，从而在有些情况下用误差来表示实验结果的好坏就显得不够方便和科学；测量不确定度合理地赋予被测量之值的分散性，是与测量结果相联系的重要参数，也是能够定量说明测量质量好坏的一个参数[1]。

通过对某一方法的不确定度的分析和评定，就会发现在哪些操作步骤可对检测结果有较为重要的影响，从而可以在操作过程中引起注意，可以大大提高检测结果的准确性。

因此，在实验条件允许的情况下，实验技术人员在给出测量结果时，应最好同时提供测量结果的不确定度；特别是当检测结果恰好与限值十分接近时，实验技术人员所提供的测量结果的不确定度将对样品是否合格的判定起着关键性作用。

铋磷钼蓝光度法和锑磷钼蓝光度法测定磷量实施细则1适用范围本细则适用于碳钢、低合金钢、合金钢中磷量的测定。

测定范围：0.005%～0.100%。

2方法依据GB/T 223.59-2008钢铁及合金磷含量的测定铋磷钼蓝分光光度法和锑磷钼蓝分光光度法3一般要求3.1设备仪器1）分析天平：最大称量100g，感量0.1mg。

2）可见分光光度计。

3.2环境条件1）称样室：温度为20±5℃，防潮、无腐蚀、无尘、无风、无振动。

2）分析室：温度为15-35℃，通风良好、无尘。

3）比色室：温度为15-35℃，无腐蚀、无尘、无电磁干扰、无振动。

4）溶样室：加热、通风设施齐全、完好。

3.3样品要求按GB/T 20066-2006方法取样，外观呈金属光泽，干净、干燥、无氧化皮、无油污和其他杂质的钢屑。

3.4试验要求1）试验用水必须为氯离子检验合格的蒸馏水，试剂为分析纯和优级纯。

2）在无特殊规定的情况下，溶液均指水溶液，酸未指明浓度时均为浓溶液。

由固体试剂配制的溶液以百分浓度（%）表示：称取一定量的固体试剂溶于溶剂中，然后再用溶剂稀释至100毫升；由液体试剂配制的水溶液，均为其浓溶液的体积加水的体积，用“+”表示。

3）容量瓶、移液管应进行校正。

4）比对试验：选带1-2份同类型的标准样品与试样一起操作。

4检测方法4.1方法一1试剂1.1氢氟酸；1.2高氯酸；1.3盐酸；1.4硫酸：1+11.5盐酸-硝酸混合酸：2+1；1.6氢溴酸-盐酸混合酸。

1.7抗坏血酸溶液20g/L，用时现配；1.8钼酸铵溶液30g/L；1.9亚硝酸钠溶液100g/L，1.10硝酸铋溶液10g/L：称取10 g硝酸铋置于200 mL烧杯中，加25 mL硝酸，加水溶解后煮沸驱尽氮氧化物，冷却至室温，移入1000 mL容量瓶中，用水稀释至刻度，混匀。

2设备仪器及辅助工具的准备按设备仪器操作、维护规程对分光光度计、天平等设备进行检查调试。

3分析步骤3.1试样量：当磷含量在0.005%-0.050%时称取0.50g试样当磷含量在0.050%-0.10%时称取0.10 g试样3.2测定3.2.1将试样置于150mL烧杯中。

钼锑抗法测定磷含量实验原理用钼锑抗分光光度法测定磷。

在一定酸度和锑离子存在的情况下，磷酸根与钼酸铵形成锑磷钼混合杂多酸，它在常温下可迅速被抗坏血酸还原为钼蓝，在650nm 波长下测定。

实验的适宜酸度为0.28～0.38mol •L -1H 2SO 4，适宜温度为20～60℃，显色时间为30～60min ，可稳定24h ，含磷5×10-6～2×10-4%范围内符合线性关系。

仪器和用具10支25mL 比色管；0.5mL 、1mL 、5mL 、10mL 吸量管；分光光度计；移液管、容量瓶等；材料和试剂过硫酸钾1+1硫酸：浓硫酸与蒸馏水的体积比为1:1混匀 抗坏血酸溶液：100g/L （10%）钼酸盐溶液:13g 钼酸铵((NH 4)6Mo 7O 24·4H 2O )溶于100ml 蒸馏水，0.35g 酒石酸锑钾（KSbC 4H 4O 7·21H 2O ）溶于100ml 蒸馏水。

在不断搅拌的情况下把钼酸铵徐徐加到300ml 1+1硫酸中，加酒石酸锑钾溶液混匀。

磷酸盐储备溶液：110℃干燥2h 的磷酸二氢钾0.2197g 溶于水，移入1000ml 容量瓶中，加5mL 1+1硫酸定容至1000mL 。

此时浓度为50μg/mL磷酸盐标准溶液：吸取10mL 磷酸盐储备液至250mL 容量瓶中，定容至250mL 。

此时浓度为2μg/mL实验步骤1、 标准曲线的绘制取7支25mL 比色管，分别加入磷酸盐标准溶液 ：0ml 、0.5mL 、1.0mL 、3.0mL 、5.0mL 、10.0mL 、15.0mL ，加水定容至刻度。

此时系列标准液浓度为：0、0.04、0.08、0.24、0.4、0.8、1.2μg/mL 。

2、 消解（将磷转变为正磷酸盐）在上述比色管中加入0.04g 过硫酸钾，旋紧盖子，置于消解器内120℃消解30min ，取出冷却。

3、 显色测量在比色管中加入1mL抗坏血酸溶液，混匀静置30s，加2mL钼酸盐溶液充分混匀，静置15min。

钼蓝法测定粮食中磷化物的原理哎呀，今天咱们来聊聊一个挺有意思的话题——钼蓝法测定粮食中磷化物的原理。

说实话，听上去是不是有点高大上？这个东西就像是在做饭，虽然过程复杂，但最后的成品可是一道美味！咱们都知道，粮食是咱们生活中不可或缺的东西，对吧？可是，粮食里边可不能有那些害人的磷化物，特别是一些贼猫腻的化学物质，得让它们见光死！钼蓝法就像是粮食里的侦探，专门来查这些“坏蛋”。

咱们得知道啥是磷化物。

简单来说，磷化物是一种含磷的化合物，通常用来防治害虫。

但是，万一粮食里含有过量的磷化物，那可就麻烦大了，吃了它可真是得不偿失。

咱们的健康可是第一位的，所以，这个钼蓝法就派上了用场。

这种方法用起来简单，但却能准确找到粮食里的磷化物，真是个聪明的家伙。

钼蓝法的核心就是利用钼的化学特性。

想象一下，钼就像是个喜欢变色的小chameleon，它能和磷化物反应，形成一种漂亮的蓝色复合物。

这蓝色的东西可不是随便的颜色，颜色的深浅跟粮食里的磷化物含量可有直接关系，越深的蓝色就表示含量越高。

就像咱们的心情一样，越开心颜色越鲜艳，哎，真是形象！在实验室里，操作起来也不算复杂。

得准备好要检测的粮食样品，把它们弄成细粉，像磨咖啡那样。

然后，用酸性溶液把样品中的磷化物溶解出来，这个过程就像是在给粮食洗澡，洗去那些“坏蛋”。

加入钼酸铵溶液，啊，听上去是不是有点高科技？然后，慢慢地等待反应发生。

瞧，那个蓝色的复合物就出现啦！每一步都像是在解谜，充满了乐趣。

检测完之后，咱们得通过比色法来判断结果。

这就像是参加一个时尚秀，得看哪种颜色最抢眼。

用分光光度计来测量蓝色的深浅，最后得出一个数字，告诉我们粮食里的磷化物含量。

这过程就像打麻将，一路高歌，最终决定胜负的关键就在这一刻。

在这个过程中，有些小技巧也特别重要。

比如，温度和酸碱度会影响反应的结果。

想想看，如果你做饭时不控制好火候，那做出来的菜能好吃吗？所以，在检测的时候，控制这些条件就显得尤为重要。