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高中生物《基因工程》练习题(含答案解析)XXX《基因工程》练题题号得分一一、单选题（本大题共20小题，共20.0分）1.如图为DNA分子的某一片段，其中①②③分别表示某种酶的作用部位，则相应的酶依次为（）二总分A.解旋酶、限制酶、DNA连接酶C.限制酶、DNA连接酶、解旋酶B.限制酶、解旋酶、DNA连接酶D.DNA连接酶、限制酶、解旋酶2.下列有关基因工程技术的叙述，正确的是（）A.重组DNA技术所用的工具酶是限制酶、连接酶和运载体B.所有的限制酶都只能识别同一种特定的核苷酸序列C.选用细菌为重组质粒受体细胞是因为质粒易进入细菌细胞且繁殖快D.只要目的基因进入受体细胞就能成功实现表达3.如图为基因表达载体的模式图。
以下有关基因工程的说法错误的是（）A.基因工程的核心步骤是基因表达载体的构建B.任何基因表达载体的构建都是一样的，没有差别C.图中启动子和终止子分歧与起始暗码子和终止暗码子D.抗生素抗性基因的作用是作为标记基因，用于鉴别受体细胞中是否导入了载体4.一些细菌能借助限制性核酸内切酶抵御外来入侵者，而其自身的基因组DNA经预先修饰能躲避限定酶的降解。
以下在动物体内发生的过程当中，与上述细菌行为相似的是（）A.巨噬细胞内溶酶体杀灭病原体B.T细胞受抗原刺激分泌淋巴因子C.组织液中抗体与抗原的特异性结合D.疫苗诱导机体发生对病原体的免疫5.某目的基因两侧的DNA序列所含的限制性核酸内切酶位点如图所示，最好应选用下列哪种质粒作为载体（）XXX.C.D.6.下图是研究人员使用供体生物DNA中无限增殖调控基因制备单克隆抗体的思路流程。
以下相关叙述精确的是（）A.酶a、酶b作用位点分别为氢键和磷酸二酯键B.Ⅰ是经免疫的记忆细胞与骨髓瘤细胞融合的杂交瘤细胞C.筛选出既能无限增殖又能产生专一抗体的Ⅱ必须通过分子检测D.上述制备单克隆抗体的方法涉及转基因技术和动物细胞核移植技术7.下列关于基因工程技术的说法，正确的是（）A.切割质粒的限制酶均只能特异性地识别3-6个核苷酸序列B.PCR反应中两种引物的碱基间应互补以保证与模板链的正常结合C.载体质粒通常采用抗生素抗性基因作为标记基因D.目的基因必须位于重组质粒的启动子和终止子之间才能进行复制8.在其他条件具备的情况下，在试管中进入物质X和物质Z，可得到相应产物Y．下列叙述正确的是（）A.若X是DNA，Y是RNA，则Z是逆转录酶B.若X是DNA，Y是mRNA，则Z是脱氧核苷酸C.若X是RNA，Y是DNA，则Z是限制性内切酶D.若X是mRNA，Y是核糖体上合成的大分子，则Z是氨基酸9.下图透露表现的是三种黏性末端，以下说法精确的是A.甲、乙、丙黏性末端是由两种限制酶作用产生的B.若甲中的G处发生突变，限制酶可能无法识别该切割位点C.乙中的酶切位点在A与G之间D.目前常用的运载体有质粒、噬菌体和动植物病毒等几类原核生物10.如图是利用基因工程技术生产可使用疫苗的部分过程，其中PstⅠ、SmaⅠ、EcoRⅠ、ApaⅠ为四种限制性核酸内切酶。
基因工程高考题训练1.2011浙江理综将ada(腺苷酸脱氨酶基因)通过质粒pET28b导入大肠杆菌并成功表达腺苷酸脱氨酶。
叙述正确的是A. 每个大肠杆菌细胞至少含一个重组质粒B. 每个重组质粒至少含一个限制性核酸内切酶识别位点C. 每个限制性核酸内切酶识别位点至少插入一个adaD. 每个插入的ada至少表达一个腺苷酸脱氨酶分子2.2012江苏下列关于转基因生物安全性叙述，错误的是（）A. 种植转基因作物应与传统农业种植区隔离B. 转基因作物被动物食用后，目的基因会转入动物体细胞中C. 种植转基因植物有可能因基因扩散而影响野生植物的遗传多样性D. 转基因植物的目的基因可能转入根际微生物3. 2013江苏下列关于转基因生物安全性的叙述中,错误的是（）A我国已经对转基因食品和转基因农产品强制实施了产品标识制度B国际上大多数国家都在转基因食品标签上警示性注明可能的危害C开展风险评估，预警和风险管理是保障转基因生物安全的前提D目前对转基因生物安全性的争论主要集中在食用安全性和环境安全性上4.2011四川，北极比目鱼中有抗冻基因,其编码的抗冻蛋白具有11个氨基酸的重复序列，该序列重复次数越多，抗冻能力越强。
下图是获取转基因抗冻番茄植株的过程示意图，有关叙述正确的是（）A过程①获取的目的基因，可用于基因工程和比目鱼基因组测序B多个抗冻基因编码区依次相连成能表达的新基因，不能得到抗冻性增强的抗冻蛋白C过程②构成的重组质粒缺乏标记基因，需要转入农杆菌才能进行筛选D应用DNA探针技术，可以检测转基因抗冻番茄植株中目的基因的存在及其完全表达5. 2009安徽，2008年诺贝尔化学奖授予了“发现和发展了水母绿色荧光蛋白”的三位科学。
将绿色荧光蛋白基因的片段与目的基因连接起来组成一个融合基因，再将该融合基因转入真核生物细胞内，表达出的蛋白质就会带有绿色荧光。
绿色荧光在该研究中的主要作用是（）A 追踪目的基因在细胞内的复制过程B追踪目的基因插入到染色体上的位置C追踪目的基因编码的蛋白质在细胞内的分布D追踪目的基因编码的蛋白质的空间分布\ 一．2011安徽，9分。
高考生物专题复习《综合PCR的基因工程问题》真题练习含答案一、选择题1．(2024·厦门高三质检)如图表示PCR 过程中某个阶段反应体系的情况，①②③④表示相关物质，L、R 表示方向。
下列叙述正确的是()A．②链从L到R的方向为3′→5′，①②链均可作为子链合成的模板B．PCR 过程需要通过解旋酶断开氢键，且为边解旋边复制C．以1个DNA为模板经3次循环需消耗8个引物③D．物质③的5′端添加了某序列，至少需经2次循环才可获得该序列的双链产物2．(2024·重庆高三质检)不对称PCR是利用不等量的一对引物来产生大量单链DNA(ssDNA)的方法，如图所示。
不对称PCR中加入的一对引物中含量较少的被称为限制性引物，含量较多的被称为非限制性引物，两者的比例通常为1∶100，PCR反应最初的若干次循环中，其扩增产物主要是双链DNA(dsDNA)，但当限制性引物消耗完后，就会产生大量的ssDNA。
下列相关说法错误的是()A．用不对称PCR方法扩增目的基因时，不需要知道基因的全部序列B．进行最初若干次循环的目的是增加模板DNA的量C．最后大量获得的ssDNA与图中乙链的碱基序列一致D．因为双链DNA和单链DNA的分子量大小不同，可通过电泳方法将其分离3．(2024·无锡高三模拟)重叠延伸PCR可实现定点基因诱变，其操作过程如图所示(凸起处代表突变位点)。
下列说法正确的是()A．过程①需要把两对引物同时加入一个扩增体系以提高扩增效率B．过程①需要2轮PCR才能得到图中所示PCR产物C．过程②的产物都可以完成延伸过程D．若过程④得到16个突变基因则需要消耗15个通用引物RP24．反向PCR是一种通过已知序列设计引物对未知序列(图中L、R)进行扩增的技术，其过程如图所示。
下列相关叙述不正确的是()A．过程①用同一种限制酶对未知序列两端进行切割B．过程②需要使用DNA连接酶，形成磷酸二酯键C．过程③PCR体系需要添加耐高温的DNA聚合酶和解旋酶D．该技术可检测T－DNA整合到植物染色体DNA的位置5．IKK激酶参与动物体内免疫细胞的分化。
专题1测评(时间:60分钟,满分:100分)一、选择题(共25小题,每小题2分,共50分)1.下列有关基因工程的叙述,正确的是( )A.重组DNA技术所用的工具酶是限制酶、连接酶和载体B.全部的限制酶都只能识别同一种特定的核苷酸序列C.只要是细菌中的质粒都可以干脆作为基因工程中的载体D.载体必需具备的条件之一是有一个至多个限制酶切割位点,以便与外源基因进行连接;不同的限制酶识别不同的核苷酸序列;自然质粒大多不符合要求,须要进行改造。
2.基因工程技术也称DNA重组技术,其实施必需具备的4个条件是( )A.工具酶、目的基因、载体、受体细胞B.重组DNA、RNA聚合酶、限制性核酸内切酶、DNA连接酶C.模板DNA、信使RNA、质粒、受体细胞D.目的基因、限制性核酸内切酶、载体、受体细胞,把一种生物的个别基因(目的基因)复制出来,加以修饰改造,然后放到另一种生物的细胞(受体细胞)里,定向地改造生物的遗传性状。
基因操作的工具酶是限制性核酸内切酶和DNA连接酶,基因进入受体细胞的运输工具是载体。
3.水母发光蛋白由236个氨基酸构成,现已将确定这种蛋白质的基因作为生物转基因的标记基因。
在转基因技术中,这种蛋白质的作用是( )A.促使目的基因导入受体细胞中B.促使目的基因在受体细胞中复制C.使目的基因简单被检测出来D.使目的基因简单胜利表达,该基因为标记基因,其作用是使目的基因简单被检测出来。
4.图1表示某重组质粒的构建过程,质粒P0具有四环素抗性基因(Tet r)和氨苄青霉素抗性基因(Amp r),并且含有限制性核酸内切酶Eco RⅤ的酶切位点。
为筛选出含有重组质粒P1的菌落,采纳含有不同抗生素的平板进行筛选,得到甲、乙、丙三类菌落,三类菌落形态相同,其生长状况如图2。
下列叙述正确的是( )A.甲类菌落可能同时导入了P0和P1质粒B.乙类菌落扩大培育后可用于生产C.丙类菌落可能导入了含反向连接目的基因的质粒D.P0质粒中Amp r是标记基因,Tet r不是标记基因:甲类菌落既抗氨苄青霉素,又抗四环素,可能同时转入了P0和P1质粒,也可能只转入了P0质粒,A项正确;乙类菌落不抗四环素,但抗氨苄青霉素,即转入了P1质粒,但还须要进一步的鉴定,才能扩大培育,用于生产,B项错误;丙类菌落既不抗四环素,也不抗氨苄青霉素,不含质粒,C项错误;P0质粒中Amp r和Tet r均为标记基因,D项错误。
高考生物专题复习《基因工程》一、单选题1．（2023·山东青岛·高三期末）自然界中很少出现蓝色的花，天然蓝色花产生的主要原因是花瓣细胞液泡中花青素在碱性条件下显蓝色。
我国科学家利用链霉菌的靛蓝合成酶基因（idgS）及其激活基因（sfp）构建基因表达载体（如下图），通过农杆菌转化法导入白玫瑰中，在细胞质基质中形成稳定显色的靛蓝。
下列叙述错误的是（）A．上述获得蓝色玫瑰的方案中需要转入能调控液泡pH的基因B．将idgS基因插入Ti质粒时使用的限制酶是SpeI和SacIC．sfp和idgS基因具有各自的启动子，前者调控后者的表达D．农杆菌可将Ti质粒上的T-DNA整合到白玫瑰染色体DNA上【答案】A【详解】A、分析题意，用农杆菌转化法将链霉菌的靛蓝合成酶基因（idgS）及其激活基因（sfp）导入白玫瑰后，在细胞质基质中形成稳定显色的靛蓝，所以无需转入能调控pH的基因，A错误；B、分析题图可知，将idgS基因插入Ti质粒时可用SpeI和SacI以避免产生的黏性末端环化，增加构建成功的概率，B正确；C、分析题图可知，sfp和idgS基因具有各自的启动子，sfp可激活idgS的表达，C正确；D、将目的基因导入植物细胞可用农杆菌转化法，故农杆菌可将Ti质粒上的T—DNA整合到白玫瑰染色体DNA上，D正确。
故选A。
2．（2023春·江苏徐州·高二统考期中）土壤农杆菌侵染植物细胞时，Ti质粒上的T-DNA片段转入植物的基因组。
利用农杆菌以Ti质粒作为载体进行转基因，下列相关叙述正确的是（）A．T-DNA片段有利于介导外源DNA整合到植物的染色体DNA上B．用Ca2+处理农杆菌，以利于其侵染植物细胞C．Ti质粒是一种环状DNA分子，属于细菌的拟核DNAD．目的基因应插入T-DNA片段外，以防止破坏T-DNA【答案】A【详解】A、Ti质粒上的T-DNA片段能转入植物的基因组中，因此T-DNA片段利于介导外源DNA整合到植物的染色体，A正确；B、农杆菌转化法中不需要用Ca2+处理农杆菌，应直接利用土壤农杆菌感染植物细胞，B错误；C、Ti质粒是一种环状DNA分子，是存在于细菌细胞质中的DNA，C错误；D、在农杆菌转化法中，需要将目的基因插入到T﹣DNA片段上，D错误。
专题22基因工程专题过关检测（一）一、选择题（每小题只有一个选项符合题目要求）1.下列关于凝胶电泳实验操作,叙述错误的是( )A.应根据缓冲液pH的不同确定加样孔是靠近正极端还是负极端B.接通电源后电泳一段时间,离加样孔越近的DNA分子越小C.紫外灯照射下,凝胶上条带的荧光强度与DNA含量呈正相关D.通过观察指示剂在凝胶中迁移的位置来判断何时停止电泳答案 B2.DNA琼脂糖凝胶电泳是一种分离、纯化或分析PCR扩增后的待检DNA片段的技术。
下列关于核酸片段的扩增及电泳鉴定的相关叙述,正确的是( )A.mRNA也是核酸,因此可直接用PCR扩增仪扩增B.PCR的缓冲液中一般要添加ATP,以激活耐高温的DNA聚合酶C.带电量相同的情况下,相对分子质量比较大的DNA片段距离加样孔越近D.琼脂糖凝胶电泳中的电泳缓冲液中含指示剂,其可以在紫外灯下被检测出来答案 C3.图1、2中标注了相关限制酶的酶切位点(甲、乙、丙为引物)。
下列关于培育转基因大肠杆菌的叙述错误的是( )A.若通过PCR获取该目的基因,应该选用引物甲和引物丙B.图中质粒和目的基因构建表达载体,应选用BclⅠ和Hind Ⅲ剪切C.若将基因表达载体导入受体细胞中,需选用Ca2+转化法D.在受体细胞中,氨苄青霉素抗性基因和目的基因可同时表达答案 D4.某一质粒如图所示,Amp r表示氨苄青霉素抗性基因,Tet r表示四环素抗性基因。
有人将此质粒用BamHⅠ酶切后,与用BamHⅠ酶切获得的目的基因混合,加入DNA连接酶进行连接反应,用得到的混合物直接转化后得到多种大肠杆菌,并利用培养基乙和丙筛选出导入重组质粒的大肠杆菌。
下列叙述错误的是( )注:影印接种指用灭菌后的“印章”在培养基中轻按一下,将乙中菌落按相同位置接种到培养基丙A.如图所示的质粒中还应含有复制原点和终止子等结构B.将经转化处理后的大肠杆菌菌液接种至培养基乙使用的是稀释涂布平板法C.配制培养基乙时应加入氨苄青霉素D.培养基丙中生长的菌落即为导入重组质粒的大肠杆菌答案 D5.20世纪60年代末美国微生物学家哈密尔顿·史密斯发现第一种限制性内切核酸酶,获得了开启DNA宝藏的钥匙,目前已发现的限制酶超过了4 000种,极大地推动了对DNA 分子的研究和操作。
（生物科技行业）生物专题基因工程综合测试 (人教版选修 )选修 3 专题一基因工程综合测试题一、选择题：此题包含20 小题，每题 2 分，共 40 分。
每题只有一个选项最切合题意。
1 ．在基因工程中，科学家所用的“剪刀”、“针线”和“运载体”分别是指()A. 大肠杆菌病毒、质粒、DNA 连结酶B.噬菌体、质粒、DNA 连结酶C.DNA 限制酶、 RNA 连结酶、质粒D.DNA限制酶、DNA连结酶、质粒2 ．人们常采纳的细菌质粒分子常常带有一个抗菌素抗性基因，该抗性基因的主要作用是()A. 提升受体细胞在自然环境中的耐药性B.有益于对目的基因能否导入进行检测C.增添质粒分子的分子量D.便于与外源基因连结3.有关基因工程的表达正确的选项是（）A. 限制性内切酶只在获取目的基因时才用B.重组质粒的形成在细胞内达成C.质粒都可作运载体D.蛋白质的构造可为合成目的基因供给资料4 ．以下对于各样酶作用的表达，不正确的选项是()A ． DNA 连结酶能使不一样脱氧核苷酸的磷酸与脱氧核糖连结B．RNA 聚合酶能与基因的特定位点联合，催化遗传信息的转录C．一种 DNA 限制酶能辨别多种核苷酸序列，切割出多种目的基因D．胰蛋白酶能作用于离体的动物组织，使其分别成单个细胞5．运用现代生物技术，将苏云金芽孢杆菌的抗虫基因整合到棉花细胞中，为检测实验能否成功，最方便的方法是检测棉花植株能否有()A 、抗虫基因B、抗虫基因产物C、新的细胞核 D 、相应性状６．以下有关基因工程中限制内切酶的描绘，错误的选项是()A ．一种限制性内切酶只好辨别一种特定的脱氧核苷酸序列B．限制性内切酶的活性受温度的影响C．限制性内切酶能辨别和切割RNAD ．限制性内切酶可从原核生物中提取７．利用外源基因在受体细胞中表达，可生产人类所需要的产品。
以下各项中能说明目的基因达成了在受体细胞中表达的是()A ．棉花二倍体细胞中检测到细菌的抗虫基因B．大肠杆菌中检测到人胰岛素基因及其mRNA C．山羊乳腺细胞中检测到人生长激素DNA 序列 D．酵母菌细胞中提取到人扰乱素蛋白８．已知某种限制性内切酶在一线性DNA 分子上有 3 个酶切位点，如图中箭头所指，假如该线性 DNA 分子在 3 个酶切位点上都被该酶切断，则会产生 a 、 b 、 c、 d 四种不一样长度的DNA 片段。
高中基因工程试题及答案一、选择题1. 基因工程是指：A. 基因的自然选择B. 基因的人工选择C. 基因的人工重组D. 基因的自然重组答案：C2. 基因工程中常用的载体是：A. 质粒B. 病毒C. 染色体D. 线粒体答案：A3. 基因枪法属于哪种基因转移技术？A. 化学法B. 物理法C. 生物法D. 机械法答案：B4. 以下哪个不是基因工程的步骤？A. 目的基因的获取B. 目的基因的克隆C. 目的基因的表达D. 目的基因的自然选择答案：D5. 基因工程在医学领域的应用不包括：A. 基因治疗B. 基因检测C. 基因编辑D. 基因克隆答案：D二、填空题6. 基因工程的核心技术是________。
答案：重组DNA技术7. 基因工程中常用的受体细胞有________和________。
答案：大肠杆菌、酵母菌8. 基因工程在农业上的应用包括________和________。
答案：转基因作物、基因改良9. 基因工程在环境保护中的应用包括________和________。
答案：生物修复、污染物降解10. 基因工程在工业生产中的应用包括________和________。
答案：生物催化剂、生物制药三、简答题11. 简述基因工程的基本原理。
答案：基因工程的基本原理是利用分子生物学技术，将目的基因从一种生物体中提取出来，然后通过重组DNA技术将其插入到另一种生物体的基因组中，使其在新的宿主细胞中表达，从而获得具有特定性状的生物体或生产特定的生物产品。
12. 基因工程在医学领域有哪些应用？答案：基因工程在医学领域的应用包括基因治疗，通过将正常基因导入患者体内以治疗遗传性疾病；基因检测，用于疾病诊断和风险评估；基因编辑，通过修改基因序列来治疗疾病；以及生产生物药物，如胰岛素、干扰素等。
四、论述题13. 论述基因工程的伦理问题及其解决途径。
答案：基因工程的伦理问题主要包括对人类基因组的修改可能带来的未知风险、基因歧视、生物多样性的减少等。
高考生物《基因工程》真题练习含答案1．[2024·山东卷]关于“DNA的粗提取与鉴定”实验，下列说法正确的是()A．整个提取过程中可以不使用离心机B．研磨液在4 ℃冰箱中放置几分钟后，应充分摇匀再倒入烧杯中C．鉴定过程中DNA双螺旋结构不发生改变D．仅设置一个对照组不能排除二苯胺加热后可能变蓝的干扰答案：A解析：研磨后，可以将研磨液过滤到烧杯中，在4 ℃冰箱中放置几分钟后，再取上清液，可以不使用离心机，A正确，B错误。
鉴定过程中的沸水浴加热可使DNA双螺旋结构发生改变，C错误。
该实验中，为排除二苯胺加热后可能变蓝对实验结果造成干扰，可设置加二苯胺不加DNA的对照组，D错误。
2．[2023·新课标卷]某同学拟用限制酶(酶1、酶2、酶3和酶4)、DNA连接酶为工具，将目的基因(两端含相应限制酶的识别序列和切割位点)和质粒进行切割、连接，以构建重组表达载体。
限制酶的切割位点如图所示。
下列重组表达载体构建方案合理且效率最高的是()A．质粒和目的基因都用酶3切割，用E.coli DNA连接酶连接B．质粒用酶3切割、目的基因用酶1切割，用T4 DNA连接酶连接C．质粒和目的基因都用酶1和酶2切割，用T4 DNA连接酶连接D．质粒和目的基因都用酶2和酶4切割，用E.coli DNA连接酶连接答案：C解析：只用一种限制酶切割质粒和目的基因，会使质粒和目的基因发生自身环化或者使目的基因在质粒中反向连接，A错误；用酶1切割目的基因，产生的是黏性末端，用酶3切割质粒，产生的是平末端，无法连接，B错误；质粒和目的基因都用酶1和酶2切割后，可使用T4 DNA连接酶连接，使目的基因定向插到质粒中，C正确；酶2和酶4切割后产生的黏性末端相同，易导致目的基因和质粒自身环化或者使目的基因在质粒中反向连接，并且用酶4切割会破坏标记基因，D错误。
3.[2023·浙江6月]某研究小组利用转基因技术，将绿色荧光蛋白基因(GFP)整合到野生型小鼠Gata3基因一端，如图甲所示。
基因工程测试题（附解析）一、基础题点练1．(2019·徐州模拟)已知限制性内切酶Xma Ⅰ和Sma Ⅰ的识别序列分别为C CCGGG 和CCC GGG。
有关这两种酶及应用的叙述，错误的是()A．这两种酶作用的底物都是双链DNAB．DNA 中出现这两种酶识别序列的几率不同C．Xma Ⅰ切割DNA 形成的黏性末端是—GGCCD．使用这两种酶时需注意控制反应温度、时间等解析：选B 限制酶作用的底物是双链DNA 分子；这两种限制酶作用的核苷酸序列相同，所以这两种识别序列在DNA 中出现的的几率相同；根据碱基互补配对原则，CCCGGG 的互补链是GGGCCC，并根据Xma Ⅰ的切割位点可知，切割后的黏性末端是—CCGG；温度能影响酶的活性，所以使用酶时需要注意控制反应温度和时间等。
2．如图表示的是三种黏性末端，下列说法正确的是( ) ↓↓A．图中所示黏性末端是由同种限制酶切割形成B．若图甲中的G 碱基处发生突变，限制酶可能无法识别该切割位点C．图中所示黏性末端是限制酶断开氢键形成D．目前常用的运载体有质粒、噬菌体和动植物病毒等几类原核生物GAATTC 解析：选B 产生甲黏性末端的限制酶的识别序列为CTTAAG =====，产生乙黏性末端的限制酶CAATTG CTTAAG 的识别序列为GTTAAC =====，产生丙黏性末端的限制酶的识别序列为GAATTC =====，可见甲、乙、丙黏性末端是由3种限制酶作用产生的；限制酶具有专一性，能够识别双链DNA 分子的某种特定核苷酸序列，如果甲中的G 发生突变，限制酶可能无法识别该切割位点；图中所示黏性末端是限制酶断开磷酸二酯键形成的；质粒是环状DNA 分子，噬菌体和动植物病毒都没有细胞结构，它们都不属于原核生物。
3．下列关于蛋白质工程的叙述，错误的是()A．蛋白质工程的基础是基因工程B．蛋白质工程遵循的原理包括中心法则C．蛋白质工程是在分子水平上对蛋白质分子直接进行操作，定向改变分子的结构D．蛋白质工程能产生出自然界中不曾存在过的新型蛋白质分子解析：选C 蛋白质工程是通过基因修饰或基因合成对现有蛋白质进行改造，或合成新的蛋白质，故蛋白质工程的基础是基因工程；蛋白质工程遵循的原理包括中心法则；蛋白质工程是通过改造基因来实现对蛋白质分子的改造的；蛋白质工程能产生出自然界中不曾存在过的新型蛋白质分子。
基因工程综合测试-刷真题1 用XhoⅠ和SalⅠ两种限制性核酸内切酶分别处理同一DNA片段，酶切位点及酶切位点及酶切产物分离结果如图。
以下叙述不正确的是（D）A.图1中两种酶识别的核苷酸序列不同B.图2中酶切产物可用于构建重组DNAC.泳道①中是用SalⅠ处理得到的酶切产物D.图中被酶切的DNA片段是单链DNA2 博耶（H．Boyer）和科恩（S．Coben）将非洲爪蟾核糖体蛋白基因与质粒重组后导入大肠杆菌细胞中进行了表达。
请回答下列问题：（1）该项研究利用了基因工程的原理和技术，基因工程的原理是__ _。
其中非洲爪蟾核糖体蛋白基因是_ _。
该研究除证明了质粒可以作为载体外，还证明了_ __（答出两点即可）。
（2）将非洲爪蟾核糖体蛋白基因与质粒重组需要借助_ __酶的作用，然后用__ _处理大肠杆菌细胞，在一定温度的缓冲液中促进重组质粒被细胞吸收。
也可以将重组质粒与噬菌体的蛋白质外壳组装，形成重组噬菌体，再通过侵染的方法将重组的噬菌体DNA导入宿主细胞。
在细菌、心肌细胞、叶肉细胞中，可作为重组噬菌体宿主细胞的是___。
（3）真核生物基因（目的基因）在大肠杆菌细胞内表达时，表达出的蛋白质可能会被降解。
为防止蛋白质被降解，在实验中应选用___ 缺陷的大肠杆菌作为受体细胞。
答案：（1）基因重组目的基因体外重组的质粒可以进入受体细胞真核生物基因可在原核细胞中表达（2）DNA连接酶钙离子细菌（3）蛋白酶（蛋白酶基因）3 某种荧光蛋白（GFP）在紫外光或蓝光激发下会发出绿色荧光，这一特性可用于检测细胞中目的基因的表达。
某科研团队将某种病毒的外壳蛋白（L1）基因连接在GFP基因的5′末端，获得了L1-GFP融合基因（简称为甲）作目的基因，并将其插入质粒PO，构建了真核表达载体P1，其部分结构和酶切位点的示意图如图，图中E1～E4四种限制酶产生的黏性末端各不相同。
回答下列问题：（1）据图推断，该团队在将甲插入质粒P0时，使用了两种限制酶，这两种酶是_ __。
使用这两种酶进行酶切是为了保证__ _的完整性，启动子能与__ _特异性结合驱动转录开始。
（2）将P1转入体外培养的牛皮肤细胞后，若在该细胞中观察到了绿色荧光，则说明L1基因在牛的皮肤细胞中完成了__ _和_ __过程。
（3）为了获得含有甲的牛，该团队需要做的工作包括：将能够产生绿色荧光细胞的__ _移入牛的__ _中、体外培养、胚胎移植等。
（4）为了检测甲是否存在于克隆牛的不同组织细胞中，某同学用PCR方法进行鉴定。
在鉴定时应分别以该牛不同组织细胞中的__ _（填“mRNA”“总RNA”或“核DNA”）作为PCR模板。
答案：（1）E1和E4甲RNA聚合酶（2）转录翻译（3）细胞核去核卵母细胞（4）核DNA4 甲型流感病毒为RNA病毒，易引起流感大规模流行。
我国科学家在2017年发明了一种制备该病毒活疫苗的新方法，主要环节如下。
（1）改造病毒的部分基因，使其失去在正常宿主细胞内的增殖能力。
以病毒RNA为模板，逆转录成对应DNA后，利用________技术扩增，并将其中某些基因（不包括表面抗原基因）内个别编码氨基酸的序列替换成编码终止密码子的序列。
与改造前的基因相比，改造后的基因表达时不能合成完整长度的________，因此不能产生子代病毒。
将该改造基因、表面抗原等其他基因分别构建重组质粒，并保存。
（2）构建适合改造病毒增殖的转基因宿主细胞。
设计合成一种特殊tRNA的基因，其产物的反密码子能与（1）中的终止密码子配对结合，并可携带一个非天然氨基酸(Uaa)。
将该基因与________连接后导入宿主细胞。
提取宿主细胞的________进行分子杂交鉴定，筛选获得成功表达上述tRNA的转基因宿主细胞。
（3）利用转基因宿主细胞制备疫苗。
将（1）中的重组质粒导入（2）中的转基因宿主细胞，并在补加（）的培养基中进行培养，则该宿主细胞能利用上述特殊tRNA，翻译出改造病毒基因的完整蛋白，产生大量子代病毒，用于制备疫苗。
特殊tRNA基因转录时，识别其启动子的酶是（）（单选）。
（4）上述子代病毒不能在正常宿主细胞中增殖，没有致病性，因此不经灭活或减毒即可制成疫苗。
与不具侵染性的流感病毒灭活疫苗相比，该病毒活疫苗的优势之一是可引起________免疫，增强免疫保护效果。
答案：（1）PCR多肽（或蛋白质）（2）载体总RNA(3)非天然氨基酸(Uaa)D(4)细胞5 为生产具有特定性能的α-淀粉酶，研究人员从某种海洋细菌中克隆了α-淀粉酶基因（1656个碱基对），利用基因工程大量制备α-淀粉酶，实验流程见右图。
请回答下列问题：（1）利用PCR技术扩增α-淀粉酶基因前，需先获得细菌的__ _。
（2）为了便于扩增的DNA片段与表达载体连接，需在引物的__ _端加上限制性酶切位点，且常在两条引物上设计加入不同的限制性酶切位点，主要目的是___ 。
（3）进行扩增时，反应的温度和时间需根据具体情况进行设定，下列选项中__ _的设定引物有关，_ __的设定与扩增片段的长度有关。
（填序号）①变性温度②退火温度③延伸温度④变性时间⑤退火时间⑥延伸时间（4）下图表示筛选获得的工程菌中编码α-淀粉酶的mRNA的部分碱基序列：图中虚线框内mRNA片段包含___个密码子，如虚线框后的序列未知，预测虚线框后的第一个密码子最多有___种。
（5）获得工程菌表达的α-淀粉酶后，为探究影响酶活性的因素，以浓度为1%的可溶性淀粉为底物测定酶活性，缓冲液50mmol/L Na2HPO4-KH2PO450mmol/L Tris-HCl50mmol/L Gly-NaOHpH 6.0 6.57.07.57.58.08.59.09.09.510.010.5酶相对活性%25.440.249.863.270.195.599.585.368.163.741.520.8根据上述实验结果，初步判断该α-淀粉酶活性最高的条件为_ __。
答案：（1）基因组DNA（2）5′使DNA片段能定向插入表达载体，减少自连（3）②⑥（4）813（5）pH为8.5，50mmol/L Tris-HCl6 甜蛋白是一种高甜度的特殊蛋白质。
为了改善黄瓜的品质，科学家采用农杆菌转化法将一种甜蛋白基因成功导入黄瓜细胞，得到了转基因植株。
回答下列问题：（1）用农杆菌感染时，应优先选用黄瓜___（填“受伤的”或“完好的”）叶片与含重组质粒的农杆菌共培养，选用这种叶片的理由是_ __。
（2）若在转基因黄瓜中检测到这种甜蛋白，则表明该重组质粒中__ _已转移到植物细胞中且能够表达；用该转基因黄瓜的某一植株与一株非转基因植株杂交，发现子代中含甜蛋白个体数与不含甜蛋白个体数之比为1：1，则说明甜蛋白基因已经整合到__ _（填“核基因组”“线粒体基因组”或“叶绿体基因组”）中。
（3）假设某种转基因作物因为受到病毒感染而减产，若要以该转基因作物为材料获得脱毒苗，应选用__ _作为外植体进行组织培养。
（4）通常，基因工程操作主要有4个步骤，即目的基因获取、重组表达载体的构建、将目的基因导入受体细胞、目的基因的检测与鉴定。
因此，基因工程的含义可概括为_ __。
答案：（1）受伤的叶片伤口处的细胞释放出大量酚类物质，可吸引农杆菌移向这些细胞（2）甜蛋白基因核基因组（3）茎尖（4）按照人们的愿望进行设计，并通过体外重组和转基因等技术，赋予生物新的遗传特性，创造出符合人们需要的新生物类型7 真核生物基因中通常有内含子，而原核生物基因中没有，原核生物没有真核生物所具有的切除内含子对应的RNA序列的机制。
已知在人体中基因A（有内含子）可以表达出某种特定蛋白（简称蛋白A）。
回答下列问题：（1）某同学从人的基因组文库中获得了基因A，以大肠杆菌作为受体细胞却未得到蛋白A，其原因是__ __。
（2）若用家蚕作为表达基因A的受体，在噬菌体和昆虫病毒两种载体中，不选用__ __作为载体，其原因是___ _。
（3）若要检测基因A是否翻译出蛋白A，可用的检测物质是__ __（填“蛋白A的基因”或“蛋白A的抗体”）。
（4）艾弗里等人的肺炎双球菌转化实验为证明DNA是遗传物质做出了重要贡献，也可以说是基因工程的先导，如果说他们的工作为基因工程理论的建立提供了启示，那么，这一启示是__ __。
1. 【答案】基因A有内含子。
在大肠杆菌中，其初始转录产物中与内含子对应的RNA序列不能被切除，无法表达出蛋白A 2. 【答案】噬菌体；噬菌体的宿主是细菌，而不是家蚕 3. 【答案】蛋白A的抗体4. 【答案】DNA可以从一种生物个体转移到另一种生物个体8 几丁质是许多真菌细胞壁的重要成分，几丁质酶可催化几丁质水解。
通过基因工程将几丁质酶基因转入植物体内，可增强其抗真菌病的能力。
回答下列问题：（1）在进行基因工程操作时，若要从植物体中提取几丁质酶的mRNA，常选用嫩叶而不选用老叶作为实验材料，原因是__ __。
提取RNA时，提取液中需添加RNA酶抑制剂，其目的是_ ___。
（2）以mRNA为材料可以获得cDNA，其原理是__ __。
（3）若要使目的基因在受体细胞中表达，需要通过质粒载体而不能直接将目的基因导入受体细胞，原因是__ __（答出两点即可）。
（4）当几丁质酶基因和质粒载体连接时，DNA连接酶催化形成的化学键是_ ___。
（5）若获得的转基因植株（几丁质酶基因已经整合到植物的基因组中）抗真菌病的能力没有提高，根据中心法则分析，其可能的原因是___ _。
1. 【答案】嫩叶中几丁质酶转录的mRNA较多；防止提取的mRNA被RNA酶分解2. 【答案】mRNA根据碱基互补配对原则逆转录为cDNA3. 【答案】质粒载体中有启动子、终止子，便于目的基因的表达；质粒中有标记基因便于筛选；质粒中含有复制原点等4. 【答案】磷酸二酯键5. 【答案】几丁质酶基因没有转录或转录的mRNA没有翻译9 基因工程又称为DNA重组技术，回答相关问题：（1）在基因工程中，获取目的基因主要有两大途径，即___和从___中分离．（2）利用某植物的成熟叶片为材料，同时构建cDNA文库和基因组文库，两个文库相比，cDNA文库中含有的基因数目比基因组文库中的___．（3）在基因表达载体中，启动子是___聚合酶识别并结合的部位．若采用原核生物作为基因表达载体的受体细胞，最常用的原核生物是___．答案：（1）人工合成生物材料（2）少（3）RNA大肠杆菌10 金属硫蛋白（MT）是一类广泛存在的金属结合蛋白，某研究小组计划通过多聚酶链式反应（PCR）扩增获得目的基因，构建转基因工程菌，用于重金属废水的净化处理．PCR扩增过程示意图如图，请回答下列问题：（1）从高表达MT蛋白的生物组织中提取mRNA，通过__ _获得__ _用于PCR扩增．（2）设计一对与MT基因两端序列互补配对的引物（引物1和引物2），为方便构建重组质粒，在引物中需要增加适当的_ __位点．设计引物时需要避免引物之间形成__ _，而造成引物自连．（3）图中步骤1代表__ _，步骤2代表退火，步骤3代表延伸，这三个步骤组成一轮循环．（4）PCR扩增时，退火温度的设定是成败的关键．退火温度过高会破坏__ _的碱基配对．退火温度的设定与引物长度、碱基组成有关，长度相同但_ __的引物需要设定更高的退火温度．（5）如果PCR反应得不到任何扩增产物，则可以采取的改进措施有__ _（填序号：①升高退火温度②降低退火温度③重新设计引物）．答案：（1）逆转录cDNA（2）限制性核酸内切酶碱基互补配对（3）变性（4）引物与模板GC含量高（5）②③11 某一质粒载体如图所示，外源DNA插入到Amp r或Tet r中会导致相应的基因失活（Amp r表示氨苄青霉素抗性基因，Tet r表示四环素抗性基因）．有人将此质粒载体用BamH I酶切后，与用BamH I酶切获得的目的基因混合，加入DNA连接酶进行连接反应，用得到的混合物直接转化大肠杆菌，结果大肠杆菌有的未被转化，有的被转化．被转化的大肠杆菌有三种，分别是含有环状目的基因、含有质粒载体、含有插入了目的基因的重组质粒的大肠杆菌．回答下列问题：（1）质粒载体作为基因工程的工具，应具备的基本条件有___ （答出两点即可）．而作为基因表达载体，除满足上述基本条件外，还需具有启动子和终止子．（2）如果用含有氨苄青霉素的培养基进行筛选，在上述四种大肠杆菌细胞中，未被转化的和仅含有环状目的基因的细胞是不能区分的，其原因是二者均不含有氨苄青霉素抗性基因，在该培养基上均不生长；并且含有质粒载体和__ _细胞也是不能区分的，其原因是__ _．在上述筛选的基础上，若要筛选含有插入了目的基因的重组质粒的大肠杆菌的单菌落，还需使用含有_ __的固体培养基．（3）基因工程中，某些噬菌体经改造后可以作为载体，其DNA复制所需的原料来自于__ _．答案：（1）能自我复制、具有标记基因（2）含有插入了目的基因的重组质粒（或重组质粒）二者均含有氨苄青霉素抗性基因，在该培养基上均能生长四环素（3）受体细胞12。
