玻璃器皿的清洗和灭菌知识分享

实验五常用玻璃器皿的清洗、包扎及灭菌技术一、实验目的1.熟悉微生物实验常用玻璃器皿的名称、规格及配套使用物品；2.掌握实验室常用玻璃器皿的清洗和包扎方法；3.了解干热灭菌、蒸汽灭菌原理，掌握玻璃器皿干热灭菌及高压蒸汽灭菌操作技术。

二、实验原理（一）微生物常用器皿、物品微生物实验常用玻璃器皿的名称、规格及配套使用物品介绍，见表2-1。

表2-1微生物实验常用玻璃器皿的名称和规格名称常用规格及配套使用物品烧杯50mL，100mL，250mL，500mL，1000mL，2000mL，3000mL，5000mL配套烧杯刷：大号，中号，小号三角瓶100mL，250mL，500mL，1000mL，2000mL，3000mL配套三角瓶刷：大号，中号，小号容量瓶无色：25mL，50mL，100mL，250mL，500mL，1000mL，2000mL棕色：25mL，50mL，100mL，250mL，500mL，1000mL，2000mL量筒5mL，10mL，25mL，50mL，100mL，250mL，500mL，1000mL，2000mL移液管1mL（分度0.01mL），2mL（分度0.02mL），5mL（分度0.05mL），10mL（分度0.1mL），20mL（分度0.1mL），50mL（分度0.5mL）配套洗耳球：大号，中号，小号培养皿35mm，75mm，90mm，120mm，150mm配套封口膜：12*12mm，16*16mm 酒精灯150mL配套：火柴漏斗60mL，80mL配套滤纸、漏斗架定性滤纸：7cm，9cm，11cm，12.5cm，15cm 定量滤纸：7cm，9cm，11cm，12.5cm，15cm滴定管酸式滴定管：50mL碱式滴定管：50mL 配套滴定台、蝴蝶夹滴瓶（小口瓶）无色：30mL，60mL，120mL 棕色：30mL，60mL，120mL广口瓶无色：125mL，250mL，500mL，1000mL，2000mL棕色：125mL，250mL，500mL，1000mL，2000mL试管10*100mm，12*100mm，15*100mm，15*150mm，18*180mm，20*200mm 配套试管刷：大号，中号，小号配套试管架：12.5mm，15.5mm，18.5mm，20.5mm载玻片25*75mm，30*60mm，100*100mm，500*500mm，900*600mm盖玻片18*18mm，20*20mm，22*22mm，24*24mm，24*32mm，24*50mm温度计0-100℃，0-200℃，0-300℃坩埚30mL，50mL配套坩埚钳研钵80mm，100mm，120mm，150mm（二）常用玻璃器皿用途：1.烧杯：用于盛装、转移、配制、加热培养基及试剂。

玻璃器皿的清洗包扎干热灭菌及常见培养基配置湿热灭菌玻璃器皿的清洗、包扎和干热灭菌一、目的要求掌握玻璃器皿的清洗、包扎及干热灭菌的操作方法。

二、实验材料玻璃器皿、烘箱、牛皮纸、纱布、纱绳三、操作步骤(一)清洗方法根据实验目的、器皿的种类、所盛放的物品、洗涤剂的类别和沾污程度等的不同而有所不同。

1. 新玻璃器皿的洗涤方法新购置的玻璃器皿含游离碱较多，应在酸溶液内先浸泡数小时，酸溶液一般用2%的盐酸或洗涤液，浸泡后用自来水冲洗干净。

2. 使用过的玻璃器皿的洗涤方法(1)试管、培养皿、三角烧瓶、烧杯等可用瓶刷或海绵沾上肥皂或洗衣粉或去污粉等洗涤剂刷洗，然后用自来水充分冲洗干净。

但是，洗衣粉和去污粉较难冲洗干净，常在器壁上附有次以上充分冲洗，或可用稀盐酸摇洗一次，再用水冲洗。

一层微小粒子，故要用水多次甚至10若内壁的水是均匀分布成一薄层，表示油垢完全洗净，若挂有水珠，则还需用洗涤液浸泡数小时，然后再用自来水充分冲洗。

(2) 装有固体培养基的器皿应先将其刮去，然后洗涤。

带菌的器皿在洗涤前先浸在2%煤酚皂溶液(来苏尔)或0.25%新洁尔灭消毒液内24小时或煮沸半小时，再用上法洗涤 (3)载玻片与盖玻片用过的载玻片与盖玻片如滴有香柏油，要先用皱纹纸擦去或浸在二甲苯内摇晃几次，使油垢溶解，再在肥皂水中煮沸5—10 min，用软布或脱脂棉花擦试，立即用自来水冲洗。

然后在稀洗涤液中浸泡0.5—2 h，自来水冲去洗涤液，最后用蒸馏水换洗数次，待干后浸于95%酒精中保存备用。

3. 洗涤液的配制与使用(1)洗涤液的配制洗涤液分浓溶液与稀溶液两种，配方如下:浓溶液重铬酸钠或重铬酸钾(工业用) 50g自来水 150mL浓硫酸(工业用) 800mL稀溶液重铬酸钠或重铬酸钾(工业用) 50g自来水 850mL浓硫酸(工业用) 100mL配法都是将重铬酸钠或重铬酸钾先溶解于自来水中，可慢慢加温溶解，冷却后徐徐加入浓硫酸，边加边搅动。

实验五玻璃器皿的清洗、凶扎及灭菌实验五玻璃器皿的清洗、凶扎及灭菌一、目的要求1、掌握微生物实验室常用玻璃器皿的清洗及包扎方法。

2、掌握干热灭菌和高压蒸汽灭菌的操作方法。

二、实验材料根据实验需要确定三、基本原理为确保实验顺利地进行，要求把实验所用玻璃器皿清洗干净，为保持灭菌后的无菌状态，需要对培养皿、吸管等进行包扎，对试管和三角瓶等加塞棉塞。

这些工作看起来很普通简单，但如操作不当或不按操作规定去做，则会影响实验结果，甚至会导致实验的挫败。

灭菌是指杀死一定环境中的所有微生物，微生物实验室常用的灭菌方法包括直接灼烧、恒温干燥箱灭菌、高压蒸汽灭菌、间歇灭菌、煮沸灭菌等方法。

这些方法的基本原理是通过加热使微生物体内蛋白质凝固变性，从而达到杀菌的目的。

四、方法与步骤1、器皿洗涤的注意事项和方法（1）不能有腐蚀作用的化学试剂，也不能使用比玻璃硬度大的物品来擦试玻璃器皿；新的玻璃器皿应用2%的盐酸溶液浸泡数小时，用水充分洗干净。

（2）用过的器皿应立即洗涤。

（3）强酸、强碱、琼脂等能腐蚀、阻塞管道的物质不能直接倒在洗涤槽内，必须倒在废物缺内。

（4）含有琼脂培养基的器皿，可先将培养基刮去，或用水蒸煮，待琼脂融化后趁热倒出，然后用清水洗涤。

凡遇有传染性材的器皿，应经高压蒸汽灭菌再进行清洗。

（5）一般的器皿都可用去污粉、肥皂或配成5%的热肥皂水来清洗。

油脂很重的器皿应先将油脂擦去。

粘有煤膏、焦油及树脂一类物质，可用浓硫酸或40%氢氧化钠或用洗涤液浸泡；沾有蜡或油漆物，可加热使之融熔后揩去，或用有机溶剂（苯、二甲苯、汽油、丙酮、松节油等）揩去。

（6）载玻片或盖玻片，先擦去油垢，再放入5%肥皂水中煮分钟，立即用清水冲洗，以后放在稀的洗液中浸泡2小时，再用清水冲洗干净，最后用蒸馏水冲洗，干后浸于95%酒精中保存备用。

（7）洗涤后的器皿应达到玻璃壁能被水均匀湿润而无条纹和水珠。

2、器皿包扎要灭菌后的器皿仍能保持无菌状态，需在灭菌前进行包扎。

玻璃器皿的清洗方法及注意事项玻璃器皿以其透明、亮丽的特点，成为现代家庭不可或缺的厨房用具。

然而，随着使用时间的增长，玻璃器皿上会积累灰尘、油渍等污垢，如果不及时清洗，不仅会影响其外观，还会影响食品的卫生安全。

为了保持玻璃器皿的清洁度和美观度，以下是一些关于玻璃器皿清洗方法及注意事项的建议。

一、清洗方法：1.温水清洗：首先，将玻璃器皿放入温水中，用洗涤剂和海绵轻轻擦拭玻璃表面，特别是有顽固污渍的地方。

然后，用清水冲洗掉洗涤剂。

2.混合物清洗：制作一种清洁剂，可以将白醋和小苏打混合在一起。

然后，在玻璃器皿上涂抹这个混合物，用海绵或软刷轻轻刷洗。

最后用清水冲洗干净。

3.苏打粉清洗：在玻璃器皿中加入适量的热水，然后加入一勺苏打粉，搅拌均匀。

将玻璃器皿浸泡在混合液中约30分钟，然后轻轻擦洗并用清水冲洗干净。

4.柠檬汁清洗：将柠檬切成片状，然后将它们放入玻璃器皿中。

在上面加入适量的盐，用柠檬片擦拭器皿表面，再用清水冲洗干净。

5.涂抹酒精：用酒精浸湿海绵或软布，然后用它来擦拭玻璃器皿的表面。

酒精具有良好的清洁能力，可以去除顽固的污渍。

二、注意事项：1.尽量避免使用硬物：在清洗过程中，尽量避免使用硬物来刷洗玻璃器皿。

因为硬物会划伤玻璃表面，导致玻璃器皿破裂的风险增加。

2.避免超高温差：刚刚使用完的玻璃器皿不要立即用冷水冲洗，尤其是在高温状态下。

超高温差会导致玻璃器皿破裂的风险。

最好等其自然冷却一段时间后再清洗。

3.慎用硷性物品：玻璃器皿在附着有油渍或难以清洗的污渍时，可以使用硷性清洁剂，如小苏打，但要注意使用过多或使用时间过长可能导致器皿变色。

4.玻璃器皿破损不宜使用：如果发现玻璃器皿有破损、裂纹或者其他缺陷，应立即停止使用，避免破裂时对身体安全造成危险。

5.定期更换：玻璃器皿使用一段时间后会出现磨损、暗淡等情况，此时应考虑更换新的器皿，以确保食品的健康与安全。

6.用纸巾擦拭：清洗完后，用干净的纸巾或布蘸取少量酒精擦拭玻璃器皿的表面，可以去除残留水渍，使器皿更加干净透明。

玻璃器皿的灭菌方法
玻璃器皿在实验室和医疗环境中使用时，需要进行有效的灭菌，以确保其表面无菌，防止细菌、病毒或其他微生物的污染。

以下是一些常见的玻璃器皿的灭菌方法：
1.高温干热灭菌：
•将玻璃器皿放入高温干热灭菌器中，在高温条件下进行灭菌。

这种方法适用于耐高温的玻璃器皿，如培养皿、试管等。

常
见的温度和时间条件为160摄氏度，2小时。

2.湿热灭菌（蒸汽灭菌）：
•使用蒸汽灭菌器（也称为高压蒸汽灭菌器或压力蒸气灭菌器）对玻璃器皿进行灭菌。

通常在121摄氏度和15磅/平方英寸
的条件下进行，持续15-20分钟。

3.紫外线辐射灭菌：
•使用紫外线灭菌箱或紫外线灯对玻璃器皿进行紫外线辐射灭菌。

这种方法对表面进行灭菌，但不适用于密闭容器内部。

注
意要避免直接暴露于紫外线，以防伤害皮肤和眼睛。

4.化学消毒剂：
•使用化学消毒剂对玻璃器皿进行浸泡或喷洒。

例如，醇类（如乙醇）、过氧化氢、次氯酸钠等消毒剂可以用于玻璃器皿的表
面消毒。

注意选择适当的浓度和接触时间，以确保有效的消毒。

5.微波消毒：
•对一些特定类型的实验器皿，如微波透明的塑料器皿，可
以使用微波消毒方法。

注意遵循器皿制造商提供的指导，以避免
器皿破裂或变形。

在选择灭菌方法时，需要考虑器皿的类型、用途以及所需的灭菌效果。

此外，遵循相关实验室和医疗机构的操作规程和灭菌指导是十分重要的。

实验室玻璃器皿的清洗方法实验室中使用的玻璃器皿在长期使用过程中会积累各种污垢，如残留的试剂、沉淀物、污渍等。

为了保持器皿的清洁并确保实验结果的准确性，需要定期对玻璃器皿进行清洗。

本文将介绍五种常见的玻璃器皿清洗方法：物理清洗法、化学清洗法、电化学清洗法、加热清洗法和低温清洗法。

一、物理清洗法物理清洗法主要通过机械或物理作用清除玻璃器皿表面的污垢。

这种方法通常包括以下步骤：1. 刷洗：使用软毛刷或尼龙刷轻轻刷洗玻璃器皿的内外表面，以去除残留的沉淀物和污渍。

注意不要使用硬毛刷，以免刮伤玻璃表面。

2. 冲洗：使用流动水冲洗玻璃器皿，确保将刷洗掉的污垢全部冲走。

对于一些较难清洗的部位，可以使用注射器或洗耳球吹气，以便彻底冲洗干净。

3. 擦干：将玻璃器皿放置在干净的毛巾或纸巾上，轻轻擦拭，确保表面无水痕残留。

二、化学清洗法化学清洗法利用化学试剂与玻璃器皿表面的污渍发生反应，从而达到清除污垢的目的。

以下是一些常见的化学清洗剂及其用途：1. 酸类：如硝酸、硫酸等，可用于清除金属离子和氧化物污渍。

2. 碱类：如氢氧化钠、氢氧化钾等，可用于清除油脂和蛋白质污渍。

3. 有机溶剂：如甲醇、乙醇等，可用于溶解一些有机污渍。

使用化学清洗剂时需注意以下几点：- 根据污渍类型选择合适的清洗剂，并遵循安全操作规程。

- 将清洗剂稀释后使用，以免对玻璃器皿造成腐蚀。

- 使用完毕后，用大量清水冲洗干净，避免残留物对实验结果造成影响。

三、电化学清洗法电化学清洗法利用电化学反应清除玻璃器皿表面的污垢。

这种方法通常需要将玻璃器皿作为电解池的一个电极，通过施加电压进行电解处理。

电化学清洗法的优点在于对一些顽固污渍有较好的清除效果，同时具有环保性。

但需要注意的是，玻璃器皿在使用电化学清洗法后可能需要进行额外的物理清洗，以确保表面无残留物。

四、加热清洗法加热清洗法通过加热玻璃器皿使污渍分解或挥发，从而达到清除污垢的目的。

加热清洗法适用于一些高温下稳定的玻璃器皿，如烧杯、烧瓶等。

.1、玻璃器皿的清洗和灭菌答：(一) 新购的玻璃器皿1、先用热肥皂水刷洗，流水冲净。

2、再浸泡于１～２％的盐酸中数小时，最后用流水冲净。

(二) 用过的玻璃器皿1、含油脂器材的清洗（1）单独高压灭菌；（2）趁热倒去污物；（3）倒放在铺有吸水纸的篮子上，置100 ℃烘箱中烤0.5h;（4）再用5%的碳酸氢钠水煮两次，再用肥皂水刷洗干净。

2、含菌试管的清洗高压灭菌后，肥皂水刷洗干净，烘干或晾干备用3、含菌平皿的灭菌（1）底盖分开放，放入桶中，高压灭菌；（2）趁热倒去污物；（3）肥皂水刷洗干净，烘干或晾干备用。

4、含菌吸管的清洗（1）把含菌吸管投入3%的来苏尔液内浸泡30min以上杀菌；（2）用肥皂水洗涤一次；（3）最后用清水冲洗干净即可。

5、载玻片及盖玻片的清洗（1）将载玻片及盖玻片分别浸入5 %的来苏尔液内浸泡过夜，取出水洗干净；（2）盖片用软布擦干即可；（3）染色用的载玻片要放入肥皂水中煮沸10min，再用肥皂水刷洗干净，最后用95%的酒精浸泡片刻，晾干备用。

2、大型高压蒸汽杀菌锅的基本操作方法答：（1）放干消毒锅内的剩余水，加入纯净水至最高水位；（2）放入物品，关上消毒锅门；冷凝阀开1圈；消毒钮顺时针拨至“关”；（3）选择所需的杀菌压力0.07、0.11或0.14Mpa后；开启电源；（4）当温度达到100℃左右时就可将消毒钮顺时针拨至“消毒”及冷凝阀关至刚好有冷凝水和蒸气冒出为止；（5）当消毒室温度达到所需温度时开始计时，到时间后关闸。

3、手提式高压蒸汽灭菌锅的使用方法（1）关好排水阀门放入清水至标度为止。

（2）将要灭菌的物品用牛皮纸盖好后放入灭菌锅中，关上器盖。

（3）通电加温，同时打开排气活门，排尽锅内的空气，再关闭活门。

（4）当达到所需温度时开始计时，并在此温度下保持所需的时间（5）稍微打开一点排气阀门，使锅内蒸气缓慢排除。

（6）当压力表指针降到零、锅内蒸气完全排尽时，立即打开锅盖取出物品。

培养用品的清洗和消毒灭菌一．清洗1.玻璃器皿一般用毛刷和洗涤剂进行清洗，以去除器皿的杂质。

要注意两点：一是洗刷时不宜用力过猛，二是不能留有死角，特别要注意瓶角度等部位的洗涤。

洗刷后用蒸馏水冲洗三次，去离子水冲洗一次。

晾干2.胶塞盖子等杂物细胞培养中所用的橡胶制品主要是瓶塞。

新购置的瓶塞带有大量滑石粉及杂质，应先用自来水冲洗，再做常规处理，常规清洗方法是：每次用后立即置入水中浸泡，然后用2% NaOH 或洗衣粉煮沸10-20分钟，以除掉培养中的蛋白质。

自来水冲洗后，再用1%稀盐酸浸泡30分钟或蒸馏水冲洗后再煮沸10-20分钟，晾干备用。

3、塑料制品的清洗塑料自制品现多是采用无毒并已经特殊处理的包装，打开包装即可用，多为一次性物品。

必要时用2% NaOH浸泡过夜，用自来水充分冲洗，再用5%盐酸溶液浸泡30分钟，最后用自来水和蒸馏水冲洗干净，晾干备用。

二．将清洗干净的物品放入烤箱中烤干三．泡酸泡碱1.玻璃器皿玻璃器皿一般用由浓硫酸，重铬酸钾及蒸馏水配制而成的清洁液浸泡。

清洁液配制时应注意安全，须穿戴耐酸手套和围裙，并要保护好面部及身体裸露部分。

配制过程中可使重铬酸钾溶于水中，然后慢慢加浓硫酸。

并不停的用玻璃棒搅拌，使产生的热量挥发，配制过程中可使重铬酸钾溶于水中，然后慢慢加浓硫酸。

并不停的用玻璃棒搅拌，使产生的热量挥发，配制溶液应选择塑料制品。

配成后清洁液一般为棕红色。

泡酸时应将器皿轻轻放入，避免灼伤；还应是器皿内全部充满清洁液不留气泡；一般浸泡过夜。

2.胶塞盖子等清洗后将用品放入1mo/LNaOH中浸泡6-7h.四．灭菌.取出上述处理过的物品，清洗，然后进行灭菌高压蒸汽灭菌：一般物品（布类金属器皿玻璃器皿）消毒要求为15磅20分钟，一些常规使用液体消毒要10磅15分钟，橡胶用品为10磅10分钟。

高雅灭菌注意以下几点：物品不宜放得太满，物品之间要留有空隙以免影响高压蒸汽流通。

消毒过程中，操作者不能离开工作岗位，要定时检查压力及安全，防止消毒及表皮意外事件发生。